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磁珠固定化酶和LC-MS/MS筛选鉴定虎杖中的胰脂肪酶抑制剂

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天然产物研究与开发 2017年第2期29卷 198-205,216页

作者：陈廷贵魏煜如张立伟化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学分子科学研究所太原030006

肥胖严重危害着人类的健康,各种减肥药物和替代疗法正在不断研发之中。本文首先结合单因素实验,利用响应面分析法,优化了羧基磁珠固定化胰脂肪酶合成条件,对其结构、稳定性、专一性及重复性进行了验证,然后通过该固定化酶筛选出了天然... 详细信息

肥胖严重危害着人类的健康,各种减肥药物和替代疗法正在不断研发之中。本文首先结合单因素实验,利用响应面分析法,优化了羧基磁珠固定化胰脂肪酶合成条件,对其结构、稳定性、专一性及重复性进行了验证,然后通过该固定化酶筛选出了天然植物虎杖中的胰脂肪酶抑制剂,最后通过分子模拟对不同抑制类型抑制剂结合位置进行了预测。结果表明:缓冲液p H值7.48、PL浓度20.32 mg/m L、温度35.40℃为最佳合成条件,胰脂肪酶成功固定于羧基磁珠之上,且储存2周后酶活仍保持80%以上,可特异性筛选出阳性抑制剂,重复利用五次后酶活仍保持50%以上。从虎杖醇提水沉物中共筛选出6个胰脂肪酶抑制剂,经LC-MS/MS鉴定和混合标准品确认,共鉴定出4个胰脂肪酶抑制剂,其IC50值和抑制类型分别为大黄素(72.3±2.4μg/m L,非竞争性抑制)、白藜芦醇(195.5±3.6μg/m L,混合型抑制)、大黄素甲醚(168.8±3.4μg/m L,反竞争性抑制)和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖(234.3±5.2μg/m L,非竞争性抑制),其中白藜芦醇、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖是新发现的胰脂肪酶抑制剂。分子模拟预测出不同抑制类型抑制剂分别结合于胰脂肪酶的两个位置。

关键词：虎杖肥胖胰脂肪酶抑制剂磁珠固定化酶

夏枯草中胰脂肪酶抑制剂的筛选、鉴定与活性评价

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中国中药杂志 2018年第23期43卷 4665-4671页

作者：陈廷贵李利亚魏煜如张立伟山西大学分子科学研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室

该实验首先采用羧基磁珠固定化胰脂肪酶筛选出夏枯草中可能的胰脂肪酶抑制剂,然后通过LC-MS/MS鉴定,标准品比对确认,最后采用对硝基苯酚法测定抑酶活性及抑制类型。结果:从夏枯草中共筛选出4个胰脂肪酶抑制剂,并经过了LC-MS/MS鉴定和混... 详细信息

该实验首先采用羧基磁珠固定化胰脂肪酶筛选出夏枯草中可能的胰脂肪酶抑制剂,然后通过LC-MS/MS鉴定,标准品比对确认,最后采用对硝基苯酚法测定抑酶活性及抑制类型。结果:从夏枯草中共筛选出4个胰脂肪酶抑制剂,并经过了LC-MS/MS鉴定和混合对照品确认,其IC50和抑制类型分别为咖啡酸[(252.3±3.6) mg·L^-1,反竞争性抑制]、芦丁[(91.2±1.6) mg·L^-1,竞争性抑制]、橙皮苷[(31.5±4.4) mg·L^-1,竞争性抑制]、熊果酸[(41.3±2.2) mg·L^-1,竞争性抑制]。4抑制剂抑制类型与抑酶活性与其分子空间大小、疏水性和氢键数目,特别是与PL三联体形成氢键数目相关。

关键词：夏枯草固定化酶 LC-MS/MS 胰脂肪酶抑制剂

嵌入式SMP环境下的TCP/IP协议栈并行优化研究与实现

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嵌入式SMP环境下的TCP/IP协议栈并行优化研究与实现

作者：魏煜康北京邮电大学

学位级别：硕士

改性TiO_(2)在光电协同下处理偶氮染料废水的研究进展

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供水技术 2024年第2期18卷 12-18页

作者：班福忱魏煜沈阳建筑大学市政与环境工程学院沈阳110168

偶氮染料(AZO)是一类难被生物降解的水溶性高分子有机物,近些年来,由于良好的染色性能被广泛应用于印染等相关行业,但AZO废水一旦排入自然水体将会造成重大的环境污染问题。本文主要介绍了不同类型的改性TiO_(2)对AOZ废水的处理效果并... 详细信息

偶氮染料(AZO)是一类难被生物降解的水溶性高分子有机物,近些年来,由于良好的染色性能被广泛应用于印染等相关行业,但AZO废水一旦排入自然水体将会造成重大的环境污染问题。本文主要介绍了不同类型的改性TiO_(2)对AOZ废水的处理效果并分析了作用原理,对比分析了单一TiO_(2)与改性TiO_(2)的优缺点,积极探索改性TiO_(2)催化剂的催化机理,解析金属和非金属掺杂在其中的具体作用,为今后更加精准地控制掺杂金属或者非金属比例、提高催化剂效率提供科学依据和技术支持。

关键词：光电催化偶氮染料印染废水改性TiO_(2) 掺杂

吉非替尼与TRAIL协同诱导A549人肺腺癌细胞系凋亡的作用研究

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临床医学进展 2024年第1期14卷 1476-1482页

作者：程广东魏煜程青岛大学附属医院胸外科山东青岛

目的:本论文旨在探讨吉非替尼与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL (TNF-Related Apoptosis Inducing Ligand)的协同抗人肺癌作用并阐明两者协同的机制。方法:实验采用人A549肺癌细胞。实验分为对照组、吉非替尼处理组、TRAIL处理组及... 详细信息

目的:本论文旨在探讨吉非替尼与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL (TNF-Related Apoptosis Inducing Ligand)的协同抗人肺癌作用并阐明两者协同的机制。方法:实验采用人A549肺癌细胞。实验分为对照组、吉非替尼处理组、TRAIL处理组及吉非替尼和TRAIL共同处理组。分别采用MTT实验,流式细胞术,Western-blot检测吉非替尼和TRAIL对A549细胞的存活、凋亡以及凋亡相关蛋白等方面的影响。结果:吉非替尼和TRAIL共同处理组的细胞存活率相较于空白对照组和各单独处理组均有显著变化。流式细胞术检测结果显示:对照组诱导的A549细胞凋亡比率分别为2.7%,15 μM吉非替尼单独处理组诱导的凋亡率为8.5%,100 ng/ml TRAIL单独处理组诱导的凋亡率为17.5%,而两者共同处理组诱导的凋亡比例为69.8%。相较与对照组或各单独处理组都有显著升高(P < 0.01)。Western-blot实验结果表明:吉非替尼和TRAIL显著诱导凋亡相关蛋白的水解。结论:吉非替尼和TRAIL可协同抑制肺癌细胞存活,促进细胞凋亡。

关键词：吉非替尼肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体肺癌细胞凋亡协同作用

小直径泥水平衡盾构机承压富水软土地层弃壳接收施工方法研究与应用

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建设机械技术与管理 2024年第3期37卷 82-84页

作者：魏煜佼权懋威中煤第三建设(集团)有限责任公司安徽合肥230000

随着天津地铁盾构施工的里程不断增加,盾构正向着更深、更长的线路发展。由于天津地区属于软土地层,土质松软,地下水丰富且流动性大,盾构埋深的不断增大使得盾构在接收过程中风险不断增加,极易引起盾构在接收或拆除过程中涌水涌砂风险,... 详细信息

随着天津地铁盾构施工的里程不断增加,盾构正向着更深、更长的线路发展。由于天津地区属于软土地层,土质松软,地下水丰富且流动性大,盾构埋深的不断增大使得盾构在接收过程中风险不断增加,极易引起盾构在接收或拆除过程中涌水涌砂风险,给周边环境及人民出行带来巨大安全隐患,目前在天津常用的有水泥土系盾构接收、冻结法盾构接收、明洞法及钢套筒法盾构接收等方法,但是在众多方案应用,都无法100%避免盾构与洞圈间漏水风险。为了能够控制施工风险,保证地面道路、建(构)筑物及各类管线的安全,研究一种用于小直径盾构弃壳接收施工方法,可有效解决盾构接收涌水涌砂风险大的施工难题,下面以天津地铁10号线一期工程穿越海河隧道工程为例,进行详细阐述。

关键词：小直径泥水盾构弃壳接收明洞

地衣素合成酶关键模块LchAD蛋白的性质和功能研究

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生物技术通报 2024年第3期40卷 322-332页

作者：杨伟杰杨周林朱浩东魏煜刘君刘训四川轻化工大学生物工程学院宜宾644000 酿酒生物技术及应用四川省重点实验室宜宾644000

【目的】地衣素(lichenysin)作为一种脂肽类物质,对白酒风味形成有促进作用。为研究地衣素合成酶中硫酯酶模块LchAD蛋白的性质和功能,采用传统分离纯化方法从酿酒大曲样品中,筛选产地衣素的芽孢杆菌菌株。【方法】采用质谱串联的方式检... 详细信息

【目的】地衣素(lichenysin)作为一种脂肽类物质,对白酒风味形成有促进作用。为研究地衣素合成酶中硫酯酶模块LchAD蛋白的性质和功能,采用传统分离纯化方法从酿酒大曲样品中,筛选产地衣素的芽孢杆菌菌株。【方法】采用质谱串联的方式检测发酵产物,通过形态学、生理生化实验和构建系统发育树,分析菌株的种属关系。以筛选出的菌株基因组DNA为模板克隆LchAD基因,在大肠杆菌中异源表达LchAD蛋白并用镍柱纯化。利用在线软件对LchAD蛋白进行生物信息学分析,探究LchAD蛋白的性质和功能。【结果】在大曲中筛选获得的菌株YC7为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),其发酵产物中含有地衣素A(D或G)的同系物,表明菌株YC7为地衣素产生菌。LchAD蛋白的可溶性表达研究发现,在温度为20℃,IPTG终浓度为100μg/mL条件下可诱导LchAD蛋白异源表达,并形成可溶性蛋白,其分子量约为27.62 kD。镍柱纯化结果显示,在咪唑浓度为250 mmol/L时,可获得较高纯度的LchAD蛋白。生物信息学分析结果表明,LchAD蛋白为稳定的亲水性蛋白,无信号肽,理论等电点(pI)为7.23,含有一个GrsT保守结构域。LchAD蛋白的二级结构包含43.5%的α-螺旋,13.82%的β-折叠,5.69%的β-转角,其三级结构与表面活性素合成酶的硫脂酶模块相似。【结论】筛选得到的地衣芽孢杆菌YC7菌株可产地衣素,其LchAD基因编码的蛋白为27.62 kD的亲水性蛋白,异源表达获得可溶性LchAD蛋白,该蛋白可能与合成表面活性素的硫酯酶模块功能相似。

关键词： LchAD蛋白地衣素地衣芽孢杆菌质谱检测可溶性表达生物信息学

漂浮植被作用下水流纵向流速的垂向分布及离散特性研究

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中国农村水利水电 2024年第8期 18-24页

作者：魏煜星郝瑞霞任宸剑韩丽娟太原理工大学水利科学与工程学院山西太原030024

为探究漂浮植被影响下明渠水流流速及纵向离散系数的沿程变化特性,采用Fluent软件中的k-ε模型进行三维数值模拟并与水槽试验结果进行对比分析,在模型验证合理的基础上,对漂浮植被不同根系下探深度及覆盖率下水流纵向时均流速的垂向分... 详细信息

为探究漂浮植被影响下明渠水流流速及纵向离散系数的沿程变化特性,采用Fluent软件中的k-ε模型进行三维数值模拟并与水槽试验结果进行对比分析,在模型验证合理的基础上,对漂浮植被不同根系下探深度及覆盖率下水流纵向时均流速的垂向分布特性进行研究,并基于改进的分区模型分析了含漂浮植被明渠的纵向离散系数。结果表明:漂浮植被水流垂向上可分为含植被水流层、无植被水流层与近河床层。纵向流速最大值出现在无植被水流层,其大小与植被下探深度及覆盖率呈正相关。含植被水流层的纵向流速随植被根系下探深度和覆盖率的增加而减小,无植被水流层及近河床层的纵向流速随着下探深度和覆盖率的增大而增大,且植被覆盖率及下探深度越大含植被水流层与无植被水流层的流速差异越大。纵向离散系数沿程表现出先增大后减小的趋势,在植被区中下游离散最为剧烈,且与植被下探深度和覆盖率呈正相关。

关键词：漂浮植被纵向时均流速纵向离散系数根系下探深度植被覆盖率

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风电机组机舱内环境湿热及高加速试验研究

风能 2024年第7期 58-64页

作者：黎相昊厉旭旺魏煜锋明阳智慧能源集团股份有限公司

高湿高热环境,容易导致风电设备发生老化、腐蚀或故障。肖远航等1的研究表明,经湿热老化后的风电叶片碳玻复合材料的纤维和树脂界面会发生严重破坏,且随着湿热老化时间增加,材料力学性能也会下降。詹耀2介绍了南方湿热环境下的风电场,...

高湿高热环境,容易导致风电设备发生老化、腐蚀或故障。肖远航等1的研究表明,经湿热老化后的风电叶片碳玻复合材料的纤维和树脂界面会发生严重破坏,且随着湿热老化时间增加,材料力学性能也会下降。詹耀2介绍了南方湿热环境下的风电场,金属在环境相对湿度超过其临界湿度时,表面会吸附一层电解液膜,使化学腐蚀变成电化学腐蚀,大大增加腐蚀速度。李丰田3介绍了风电箱变短路来源之一为内外腔存在温差,即便在相对湿度低于50%时箱体内壁也可能产生凝露,从而导致绝缘能力下降发生短路。

关键词：