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自体口腔黏膜上皮细胞培养眼表重建的实验研究

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中国实用眼科杂志 2009年第8期27卷 888-893页

作者：李冰杨锦魏彤心山西省眼科医院太原030002

目的将自体培养的口腔黏膜上皮植片移植于重度碱烧伤后角膜缘功能完全缺乏的动物眼表，分期观察上皮恢复情况及其新生血管的生长情况。方法建立单眼重度碱烧伤模型．，随机分为对照组（不行移植）、单纯羊膜移植组、自体培养的口腔黏膜... 详细信息

目的将自体培养的口腔黏膜上皮植片移植于重度碱烧伤后角膜缘功能完全缺乏的动物眼表，分期观察上皮恢复情况及其新生血管的生长情况。方法建立单眼重度碱烧伤模型．，随机分为对照组（不行移植）、单纯羊膜移植组、自体培养的口腔黏膜细胞移植组。术后每日在裂隙灯下观察角膜上皮染色、角膜混浊度以及新生血管生长情况并进行评分；测定角膜新生血管（CNV）长度，计算CNV面积；测量角膜微血管数量；检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达；利用印迹细胞技术观察角膜上皮重建情况。结果口腔黏膜上皮细胞移植组总评分、CNV面积、微血管计数、VEGF阳性表达量均最少。印迹细胞检查：口腔黏膜细胞移植组角膜上皮未发现杯状细胞。结论利用体外培养的自体口腔黏膜上皮细胞进行移植，可减少角膜新生血管的形成，其抑制新生血管的作用优于单纯羊膜移植抑制新生血管的作用。

关键词：口腔黏膜上皮自体移植碱烧伤角膜新生血管眼表重建

诱导性调节T细胞的体外扩增及其对小鼠角膜移植免疫排斥的抑制作用

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中华实验眼科杂志 2015年第10期33卷 896-901页

作者：魏彤心李光玲郭旭明山西省眼科医院太原030002 太原市中心医院眼科 030009

背景研究表明,CD4＋CD25＋自然调节性T细胞（nTregs）在维持外周免疫耐受及自身免疫平衡中起到重要作用,而体外诱导和扩增的诱导性调节性T细胞（iTregs）可通过过继转移的方式抑制器官移植的免疫排斥反应.目前iTregs的诱导方法仍在不... 详细信息

背景研究表明,CD4＋CD25＋自然调节性T细胞（nTregs）在维持外周免疫耐受及自身免疫平衡中起到重要作用,而体外诱导和扩增的诱导性调节性T细胞（iTregs）可通过过继转移的方式抑制器官移植的免疫排斥反应.目前iTregs的诱导方法仍在不断优化,且其对角膜移植的作用尚不明确.目的研究iTregs的体外诱导和扩增方法,及其在体内对免疫排斥反应的抑制作用和在体外对效应T细胞（Teffs）增生的抑制作用.方法从C57B L/6小鼠股骨骨髓组织中提取和培养骨髓来源树突状细胞（BMDCs）;取BALB/c小鼠脾脏,磁珠分选CD4＋ CD25＋T细胞和CD4＋ CD25-T细胞,将CD4＋ CD25-T细胞分为阴性对照组（单纯CD4＋CD25-T细胞）、CD3/28抗体珠组（CD4＋ CD25-T细胞＋抗鼠CD3/28抗体珠）、2.5 ng/ml转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导组和10.0 ng/ml TGF-β1诱导组.在不同质量浓度TGF-β1和抗CD3/CD28抗体珠（细胞和抗体珠比例为1：1）条件下诱导iTregs的生成,并使用抗CD3/CD28抗体珠（细胞和抗体珠比例为1：2）、白细胞介素-2（IL-2）和TGF-β1体外扩增iTregs.采用流式细胞仪检测Tregs各表面因子的表达,采用混合淋巴细胞反应分析体外扩增iTregs对Teffs的抑制能力.建立同种异体小鼠角膜移植模型（C57BL/6→BALB/c）,并将模型分为nTregs注射组、iTregs注射组和PBS组;根据分组经小鼠对侧眼球后静脉丛分别注射0.1 ml nTregs、体外扩增iTregs悬液和PBS,观察注射后3个组小鼠植片情况.结果阴性对照组、CD3/28抗体珠组、2.5 ng/ml TGF-β1诱导组和10.0 ng/ml TGF-β1诱导组中CD4＋CD25-T细胞表达CD4＋ CD25＋T细胞的比例分别为（6±3）％、（91±4）％、（91±3）％和（86±6）％,其中CD3/28抗体珠组、2.5 ng/ml TGF-β1诱导组和10.0 ng/mlTGF-β1诱导组CD4＋CD25＋T细胞比例明显高于阴性对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.CD3/28抗体珠组、2.5 ng/ml TGF-β1和10.0 ng/ml TGF-β1诱导组Foxp3＋T细胞比例分别为（1.18±0.20）％、（8.70±1.80）％和（21.80±3.36）％,其中2.5 ng/ml TGF-β1诱导组和10.0 ng/ml TGF-β1诱导组Foxp3＋T细胞比例明显高于CD3/28抗体珠组,且10.0 ng/ml TGF-β1诱导组Foxp3＋T细胞比例明显高于2.5 ng/ml TGF-β1诱导组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.体外扩增iTregs中CD69＋T细胞比例明显低于nTregs,PD-1＋、Foxp3＋和CD25＋T细胞比例均明显高于nTregs,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.在1：1、1：2、1：4、1：8和1：16Tregs/Teffs比例条件下,iTregs与Teffs混合培养后Teffs的增生能力明显低于nTregs与Teffs混合培养组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.iTregs注射组角膜植片存活时间为4周,永久耐受者占50％,而nTreg组小鼠角膜植片的存活时间为3周,永久耐受者占17％,2个组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 TGF-β1可诱导CD4＋ CD25-T细胞生成iTregs并高表达Foxp3,体外扩增iTregs较nTregs具有更强的抑制淋巴细胞增生能力,从而抑制角膜移植排斥反应的发生.

关键词： CD4+T淋巴细胞/细胞学调节性T细胞/药物作用角膜移植/治疗免疫耐受动物模型小鼠

人自体角膜缘干细胞体外培养羊膜植片移植治疗严重角膜烧伤三例

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眼科研究 2010年第5期28卷 393-394页

作者：李冰魏彤心史静华山西省眼科医院角膜病科太原030002

本课题组先前的研究已成功对人自体角膜缘干细胞进行了离体培养[1],现将培养第14天生长良好的羊膜植片用于3例严重角膜烧伤患者,报告如下。

关键词：自体角膜缘干细胞细胞体外培养角膜烧伤羊膜植片移植治疗离体培养烧伤患者课题组

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载药羊膜移植治疗感染性角膜溃疡的实验研究

中华实验眼科杂志 2013年第5期31卷 434-439页

作者：李京李冰魏彤心康玉国山西省眼科医院角膜病科太原030002

背景应用羊膜移植术治疗角膜溃疡的方法在临床上已广泛开展,但目前国内有关将羊膜作为药物载体治疗感染性眼表疾病的研究较少见. 目的探讨载药羊膜在治疗眼表感染性疾病中的缓释性能并评价其疗效.方法利用体外抑菌实验比较羊膜浸泡... 详细信息

背景应用羊膜移植术治疗角膜溃疡的方法在临床上已广泛开展,但目前国内有关将羊膜作为药物载体治疗感染性眼表疾病的研究较少见. 目的探讨载药羊膜在治疗眼表感染性疾病中的缓释性能并评价其疗效.方法利用体外抑菌实验比较羊膜浸泡不同质量浓度（5、20、30 g/L）的左氧氟沙星不同时间（5、15、30、60 min）后平均抑菌环直径的改变.利用角膜基质层接种法将浊度为0.7麦氏单位的金黄色葡萄球菌菌悬液0.1ml自角膜近中央处注入角膜基质层,形成直径4.0～6.0 mm的混浊区,建立20只家兔单眼感染性角膜溃疡模型,采用随机数字表法将动物模型随机分为单纯羊膜移植联合点药组和载药羊膜移植组,每组各10只,两组家兔造模后24 h分别行单纯羊膜移植术或载药羊膜移植术.单纯羊膜移植联合点药组术后用质量分数0.5％左氧氟沙星滴眼液点眼,每日3次,分别于点眼后0.5、1.0、2.0、3.5、5.5h抽取房水0.1ml,载药羊膜移植组于术后1、3、7、10、14、21d抽取房水0.1ml,用高效液相色谱分析法检测各时间点兔眼房水中左氧氟沙星的质量浓度.各组大鼠在裂隙灯显微镜下观察角膜病变情况及角膜溃疡的面积变化,按照改进的McNeill角膜病变程度分级法对角膜病变进行评分,并于术后4周行兔眼角膜组织病理学检查.结果左氧氟沙星体外抑菌实验表明,平均抑菌环直径随药物质量浓度的增加而增大,相同质量浓度左氧氟沙星浸泡15 min的羊膜与浸泡5 min相比抑菌环直径增大,差异均有统计学意义（P＜0.01）,但与浸泡30 min、60 min的羊膜相比差异均无统计学意义（P＞0.05）.单纯羊膜移植联合点药组术后房水中左氧氟沙星质量浓度随时间的延长而逐渐降低,0.5h为（0.873 ±0.264） mg/L,5.5h为（0.106±0.027） mg/L;载药羊膜移植组术后1、3、7d房水中左氧氟沙星质量浓度仍高于单纯羊膜移植联合点药组点药后0.5h,差异均有统计学意义（均P=0.00）.载药羊膜移植组家兔用药后1、2、4周角膜病变评分分别为1.7±0.6、1.3±0.5和0.2±0.4,明显低于单纯羊膜移植联合点药组的2.2±0.8、2.0±0.6和1.5±0.8,差异均有统计学意义（F分组=9.49,P=0.01；F时间=22.96,P=0.01）.术后1周载药羊膜移植组角膜溃疡面积明显小于单纯羊膜移植联合点药组,差异有统计学意义[（1.6±0.6）mm2 vs.（3.2±0.8）mm2,t=3.98,P=0.00].组织病理学检查显示,单纯羊膜移植联合点药组术后4周角膜各层排列不规则,出现1～2层新生鳞状上皮,基质层结构紊乱,可见较多炎性细胞浸润及残留血管腔；载药羊膜移植组术后4周角膜有4～5层新生鳞状上皮,排列整齐,仅见少量炎性细胞浸润及残留血管腔.结论左氧氟沙星载药羊膜移植至角膜后具有一定的药物缓释性能,可以提高房水中的有效药物质量浓度,对金黄色葡萄球菌感染性角膜溃疡的疗效优于点眼的用药方式.

关键词：缓释羊膜载药角膜溃疡左氧氟沙星眼表重建

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干燥综合征患者活体角膜组织学变化的研究

中国实用眼科杂志 2008年第11期26卷 1186-1189页

作者：李冰魏彤心赵炬伟山西省眼科医院角膜病科太原030002

目的应用共焦激光角膜显微镜观察干燥综合征（Sjogrensyndrome，SS）患者角膜上皮及上皮基底层下神经的组织学改变。方法用共焦激光角膜显微镜对22例干燥综合征患者进行检查，同时选择年龄与性别与之相匹配的15名正常人作对照，并对两... 详细信息

目的应用共焦激光角膜显微镜观察干燥综合征（Sjogrensyndrome，SS）患者角膜上皮及上皮基底层下神经的组织学改变。方法用共焦激光角膜显微镜对22例干燥综合征患者进行检查，同时选择年龄与性别与之相匹配的15名正常人作对照，并对两组人员行角膜敏感度检查。结果（1）SS组与正常人对照组比较角膜敏感度下降（P=0．000）。（2）两组间角膜上皮基底细胞密度的变化无统计学意义（P〉0．05）。（3）关于角膜上皮基底层下神经纤维的改变：SS组神经数量比正常对照组增加（P=0．000）；神经密度比正常对照组增加（P=0．046）；神经弯曲度比正常对照组增加（P=0．001）；神经分支数也比正常对照组增加（P=0．040）。（4）神经弯曲度与角膜敏感度呈负相关（r=-0．304，P=0．029）。结论SS患者的角膜上皮、上皮基底层下神经纤维以及角膜敏感度均发生了一系列改变。

关键词：干燥综合征共焦激光角膜显微镜活体角膜

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人角膜缘干细胞的体外培养及鉴定

眼科研究 2010年第5期28卷 432-435页

作者：魏彤心李冰史静华山西省眼科医院角膜病科太原030002

目的探讨人自体角膜缘干细胞(LSCs)体外培养及鉴定的方法。方法将供体新鲜人角膜缘组织在制备的含20%胎牛血清DMEM/F12培养基的羊膜载体上应用组织块培养法进行体外培养,对培养获得的LSCs用苏木精-伊红染色在倒置显微镜下进行形态学观察... 详细信息

目的探讨人自体角膜缘干细胞(LSCs)体外培养及鉴定的方法。方法将供体新鲜人角膜缘组织在制备的含20%胎牛血清DMEM/F12培养基的羊膜载体上应用组织块培养法进行体外培养,对培养获得的LSCs用苏木精-伊红染色在倒置显微镜下进行形态学观察,用免疫荧光技术鉴定培养的LSCs细胞。结果组织块静置2h后贴壁良好,3～4d细胞从组织块边缘萌出,7～10d细胞出现生长高峰,12～14d形成良好的细胞单层。细胞形态呈多边形、圆形、卵圆形和梭形。第14天时行间接免疫荧光染色,可见大量细胞表达p63,呈细胞质的绿色荧光;少量细胞表达AE5,呈细胞质的绿色荧光和细胞核的红色荧光。结论组织块培养法体外培养的人LSCs具有与正常人LSCs相一致的生物学特性。

关键词：角膜缘干细胞羊膜体外培养

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哈尔滨市政府网络舆情管理路径研究

哈尔滨市政府网络舆情管理路径研究

作者：魏彤昱哈尔滨商业大学

学位级别：硕士

近几年随着互联网的普及,我们早已进入信息化社会,网络自媒体的快速发展为大众了解时事新闻热点提供了便利,同时也为人民群众自由发表言论提供了新渠道新平台,网络自媒体成为了网络舆情的放大镜,但在人们提高话语权的同时也存在着新媒... 详细信息

近几年随着互联网的普及,我们早已进入信息化社会,网络自媒体的快速发展为大众了解时事新闻热点提供了便利,同时也为人民群众自由发表言论提供了新渠道新平台,网络自媒体成为了网络舆情的放大镜,但在人们提高话语权的同时也存在着新媒体传播速度快,政府不能及时引导网络舆情,网络舆论传播范围广、互动性强等问题,所以易于造成网络舆情。且在“十四五”规划和未来“二十大”国家发展战略中,我国需要更加重视网络舆情管理和国家战略传播。随着信息化时代的深入发展,网络信息技术已经成为重要的影响力渠道,对国家形象和国际地位有着重要的影响,我国应该加强网络舆情监测与管理能力,积极应对国际舆情挑战,提升国家在国际舆论场上的话语权和影响力。大数据时代的到来,哈尔滨市政府在网络舆情管理上迎来了前所未有的革新机遇,得益于大数据的海量资源、创新思维和高效治理策略。然而,这股信息洪流的急剧膨胀同时也考验着其应对与处理的能力。基于以上背景,在阐述网络舆情以及网络舆情管理的内涵同时,以危机管理理论、公共治理理论、舆情传播理论、网络治理理论为基础,运用文献研究法、调查分析法、以及比较分析法为论文的研究做准备。对哈尔滨市政府网络舆情管理进行了详细的分析,结合问卷调查收集到的数据,总结出哈尔滨市政府网络舆情管理的现状,研究分析出网络舆情法制监管力度较弱、网络舆情信息发布不够及时、政府网络舆情应对不够到位、政府舆情管理能力不够高效是当前哈尔滨市政府网络舆情管理中存在的主要问题,并探析出网络管理法规不够完善、信息公开机制不够健全、舆情应对机制不够完善、政府工作意识不够到位是上述问题产生的根本原因。通过借鉴德国、加拿大、美国等国家地区与北京市、上海市、深圳市等地区的成功经验,为哈尔滨市政府网络舆情管理路径提供了参考。最后论文提出完善哈尔滨市政府网络舆情管理的网络舆情法制监管机制、健全网络舆情信息公开机制、健全网络舆情应对机制以及加强政府应对网络舆情管理能力的网络舆情管理建议,希望为哈尔滨市政府进行网络舆情管理提供有益参考。

关键词：网络舆情网络舆情管理政府舆情管理

基于视觉传感的GMAW熔滴过渡图像处理研究

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基于视觉传感的GMAW熔滴过渡图像处理研究

作者：魏彤彤太原科技大学

学位级别：硕士

智能化焊接是未来焊接领域的发展趋势。借助视觉传感技术,能够实现对焊接过程的可视化实时监控,是实现焊接智能化的重要手段之一。熔化极气体保护焊（GMAW）是当今工业生产中最为广泛的焊接方法,其熔滴过渡行为会直接影响焊接效率、成... 详细信息

智能化焊接是未来焊接领域的发展趋势。借助视觉传感技术,能够实现对焊接过程的可视化实时监控,是实现焊接智能化的重要手段之一。熔化极气体保护焊（GMAW）是当今工业生产中最为广泛的焊接方法,其熔滴过渡行为会直接影响焊接效率、成形质量和焊缝性能。采用高速摄影与图像处理技术对熔滴过渡图像进行快速识别并准确提取特征,对于推进高效自动化和智能化焊接具有重要意义。本文介绍了高速摄影系统和图像处理方法。在高速摄影系统方面,对不同部分选用不同类型装置的优势与不足做了比较和总结;在图像处理方面,根据具体情况,综合对比并择优选用了多种方法,对具体熔滴过渡图像进行了一系列优化处理并采用最小外接矩形法和改进的椭球-球体转换法提取所需信息。搭建了焊接试验系统和光学成像系统,用高速摄像机拍摄并选取了一部分GMAW熔滴过渡图像,采用设计好的图像处理流程对其进行优化操作以精确提取熔滴尺寸,进而观察焊接参数与熔滴尺寸间的关系。结果表明:adapthisteq函数、中值滤波、Canny算子、形态学开运算、最小二乘拟合法较适用于熔滴图像的前期优化处理,最小外接矩形法和改进的椭球-球体转换法有助于自动精确地提取熔滴尺寸。在CO2气体保护焊短路过渡中,熔滴尺寸与焊接电流成反比;与电弧电压成正比;随着焊丝伸长量的增加,熔滴尺寸先减小后增大;在允许的范围内,焊接速度几乎不影响熔滴尺寸;在MIG焊中,随着焊接电流的增大,依次出现了短路过渡、大滴过渡、射滴过渡和射流过渡四种形式,熔滴尺寸逐渐减小,过渡频率逐渐增大。

关键词： GMAW 熔滴过渡高速摄影图像处理边缘检测熔滴尺寸

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重复胃一例

中华外科杂志 2001年第6期39卷 439-439页

作者：王斌生张乃珍鲍民生吴文广魏彤心山西省荣军医院外科太原030031 山西省人民医院病理科山西医科大学第一医院普外科

患者女性，32岁。无明显诱因渐出现进食后上腹部憋胀不适，伴有胸骨后烧灼感及呃逆1年余。在当地医院就诊，上消化道钡餐造影显示：胃体部大弯侧有一约5 cm×4 cm大小、边缘完整光滑的局限性充盈缺损，局部粘膜无明显破坏，胃窦部粘膜... 详细信息

患者女性，32岁。无明显诱因渐出现进食后上腹部憋胀不适，伴有胸骨后烧灼感及呃逆1年余。在当地医院就诊，上消化道钡餐造影显示：胃体部大弯侧有一约5 cm×4 cm大小、边缘完整光滑的局限性充盈缺损，局部粘膜无明显破坏，胃窦部粘膜粗大但尚规则。患者于2001年1月在山西医科大学第二医院行胃镜及病理检查显示胃底充血水肿，散在点状出血，胃体光滑，充血水肿，胃角光滑规整，未见肿物。患者于2001年1月13日在全麻下施行剖腹探查术，术中可见胃大弯侧后壁有一约8 cm×5 cm×4 cm大小肿物，囊性，其表面胃浆膜层完整延续，颜色未见特殊改变，与周围组织无粘连。沿囊肿基底部切开胃浆膜层，可见囊肿位于浆膜与肌层间，完整切除之，系一完整独立、密闭囊肿，残余浆肌层间断缝合后再加强浆肌层包埋缝合一层。切开离体囊肿可见腔内为蛋黄色粘稠样液体，送常规镜检提示外观血样、不透明、有凝块，李凡他试验(+)，细胞因凝固无法计数，可见大量脂肪滴类物质，未见特殊改变。其囊壁未见明显水肿等炎性改变，内衬一层粘膜。术后病理检查可见囊肿壁结构与胃壁一样，有完整粘膜层、肌层及浆膜层。病理诊断重复胃。

关键词：重复胃病例报告胃腔消化道溃疡