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刺梨酵素的制备及功能性研究

刺梨酵素的制备及功能性研究

作者：魏建敏贵州大学

学位级别：硕士

刺梨(Rosa roxburghii Tratt)作为药食同源的植物,富含多种生物活性成分,具有很高的营养价值和药用价值。目前,刺梨产品的加工多以刺梨原汁为原料,而在刺梨原汁生产中产生的刺梨果渣得不到充分利用,造成刺梨资源浪费。本研究以刺梨果渣... 详细信息

刺梨(Rosa roxburghii Tratt)作为药食同源的植物,富含多种生物活性成分,具有很高的营养价值和药用价值。目前,刺梨产品的加工多以刺梨原汁为原料,而在刺梨原汁生产中产生的刺梨果渣得不到充分利用,造成刺梨资源浪费。本研究以刺梨果渣、刺梨原汁为原料制备刺梨酵素,对刺梨果渣酶解工艺、刺梨酵素发酵工艺进行优化,测定分析刺梨酵素发酵前后挥发性成分组成变化,并通过测定相关理化指标对刺梨酵素进行品质分析,同时对刺梨酵素的抗氧化、降血糖能力进行研究,以期得到具有一定保健功效的刺梨酵素产品,为刺梨酵素的工业化生产提供理论依据和数据支撑。研究的主要结论如下:1.刺梨果渣酶解工艺研究。确定干果渣的复水时间为10 min。通过单因素试验、响应面优化试验得出刺梨果渣最佳酶解条件为:酶的种类为果浆酶、酶解时间180 min、酶解温度47.0℃、酶解p H 5.0、酶添加量1.5%、料液比1:2.1。在此条件下,酶解率为23.16%。2.刺梨果渣酵素发酵工艺研究。在单因素试验的基础上进行工艺优化,得到刺梨果渣酵素最佳工艺条件。酵母菌发酵阶段:以CECA酵母进行发酵,发酵时间24.5 h、糖添加量5%、发酵温度24.7℃、酵母菌接种量0.21%,在此条件下,刺梨果渣酵素发酵物料的SOD活性为267.64 U/g,酵母菌活菌数为1.41×10CFU/g;乳酸菌发酵阶段:发酵时间16 h,乳酸菌接种量2%,发酵温度35℃,在此条件下,刺梨果渣酵素发酵物料的SOD活性为275.24 U/g,乳酸菌活菌数为1.97×10CFU/g。3.刺梨原汁酵素发酵工艺研究。在单因素试验的基础上进行正交试验,确定刺梨原汁酵素最佳发酵工艺条件。酵母菌发酵阶段:以SY酵母菌进行发酵,酵母菌接种量0.3%,发酵时间16 h,糖添加量5%,发酵温度27℃,在此条件下,制备的刺梨原汁酵素的SOD活性为7294.41 U/m L,酵母菌活菌数为1.46×10CFU/m L;乳酸菌发酵阶段:发酵时间32 h,发酵温度36℃,乳酸菌接种量2.5%,在此条件下,制备的刺梨原汁酵素的SOD活性为7709.89 U/m L,乳酸菌活菌数为1.50×10CFU/m L。4.刺梨酵素发酵前后挥发性成分分析。通过顶空固相微萃取与气质联用技术测定刺梨酵素发酵前后挥发性成分变化,刺梨果渣发酵前共检测出挥发性成分97种,其主要挥发性成分为醛酮类(33.74%)、酸类(18.68%)和醇类(14.36%);发酵后共检测出挥发性成分100种,其主要挥发性成分为醇类(21.83%)、酯类(10.5%)、酸类(7.83%)。刺梨原汁发酵前共检测出挥发性成分78种,其主要挥发性成分为醛酮类(26.09%)、酯类(17.97%)和酚类(10.5%);发酵后共检测出挥发性成分84种,其主要挥发性成分为醇类(65.16%)、酯类(18.57%)、酸类(7.7%)。两种刺梨原料经酵素发酵后其挥发性成分的数量都有所增加,主要种类也发生了变化,刺梨果渣的挥发性成分在发酵前和发酵后均比刺梨原汁丰富。发酵前,刺梨果渣和刺梨原汁共有成分有37种,分别占各自总挥发性成分的38.14%、60.26%,发酵后共有成分有46种,分别占各自总挥发性成分的47.42%、58.97%。通过主成分分析可知,不同刺梨原料制备的刺梨酵素具有挥发性成分组成相似的特点。5.刺梨酵素品质分析。通过测定各理化指标对刺梨酵素进行品质分析,刺梨果渣酵素液的有机酸、游离氨基酸、多糖、γ-氨基丁酸含量和乳酸菌活菌数高于刺梨原汁酵素液,p H、多酚、黄酮、SOD活性、总酸含量低于刺梨原汁酵素液;刺梨果渣酵素冻干粉的有机酸、游离氨基酸、多糖、γ-氨基丁酸含量高于刺梨原汁酵素冻干粉,多酚、黄酮、SOD活性、总酸含量和乳酸菌活菌数低于刺梨原汁酵素冻干粉。各酵素均满足T/CBFIA 08003-2017食用植物酵素标准中特征性理化指标的要求。所制备的刺梨酵素具有刺梨独特的风味及发酵香,酸味柔和,无明显外来杂质,与未发酵前相比,除多糖含量降低外,其余指标均呈不同幅度的增加。6.刺梨酵素体外抗氧化能力、降血糖能力研究。抗氧化能力方面,刺梨酵素对自由基有较强的清除作用和较强的铁还原力,刺梨原汁酵素的抗氧化能力强于刺梨果渣酵素,刺梨果渣酵素液、刺梨原汁酵素液、刺梨果渣酵素冻干粉、刺梨原汁酵素冻干粉在各自试验梯度里的DPPH自由基清除率分别为:93.28%、94.48%、90.53%、91.46%;ABTS自由基清除率分别为:98.10%、96.66%、96.76%、99.55%;羟基自由基清除率分别为:73.32%、97.5%、81.05%、93.28%;铁还原力吸光值分别为:1.31、0.91、0.81、1.62。通过相关性分析可知,多酚、黄酮是刺梨酵素的主要抗氧化物质。降血

关键词：刺梨果渣刺梨原汁酵素挥发性成分功能性研究

同步放化疗治疗食管癌术后局部淋巴结转移的临床疗效分析

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实用肿瘤杂志 2013年第6期28卷 601-604页

作者：王新强魏建敏青州市人民医院放疗科山东青州262500

目的探讨放疗同时给予多西紫杉醇联合顺铂化疗治疗食管癌术后局部淋巴结转移患者的疗效。方法食管癌术后淋巴结复发转移患者51例,其皮下及浅表淋巴结转移均经穿刺组织细胞学证实。给予三维适形放射治疗,分次剂量1.8~2.0 Gy/次,5次/周总... 详细信息

目的探讨放疗同时给予多西紫杉醇联合顺铂化疗治疗食管癌术后局部淋巴结转移患者的疗效。方法食管癌术后淋巴结复发转移患者51例,其皮下及浅表淋巴结转移均经穿刺组织细胞学证实。给予三维适形放射治疗,分次剂量1.8~2.0 Gy/次,5次/周总剂量60~64 Gy,中位剂量62 Gy。放疗开始后1周内给予第1周期化疗,多西紫杉醇75 mg/m2,静脉滴注,第1天;顺铂75 mg/m2,静脉滴注,分4天,第2-5天,每3周为1疗程。放疗期间按化疗周期常规进行,放疗结束后根据肿瘤消退情况继续给予上述方案化疗2~4周期。结果 CR 14例(27.5%),PR 28例(54.9%),SD 9例(17.6%),总有效率(CR+PR)82.4%;中位无进展生存期为8.6月,中位生存期为13月(4-43月)。全组患者1、2、3年总生存率分别为51.0%、18.6%、6.2%。不良反应主要表现为骨髓抑制和消化道反应,其次为放射性肺炎和放射性食管炎。结论多西紫杉醇加顺铂化疗配合放疗治疗食管癌术后局部淋巴结转移,有效控制区域外淋巴结转移病变,提高局部区域淋巴结的控制率并延长生存期,不良反应基本可以耐受,值得临床推广。

关键词：食管肿瘤外科学食管肿瘤药物疗法食管肿瘤放射疗法紫杉酚治疗应用顺铂治疗应用淋巴转移治疗结果存活率

CK20mRNA和hTERTmRNA表达与胃癌患者外周血微转移的研究

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中国肿瘤临床 2008年第22期35卷 1286-1289页

作者：刘新兰陈萍魏建敏宁夏医学院附属医院肿瘤内科银川市750004

目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法:采用RT-PCR技术检测40例胃癌患者、19例胃良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA定性和半... 详细信息

目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为判断外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法:采用RT-PCR技术检测40例胃癌患者、19例胃良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA和hTERT mRNA定性和半定量表达。结果:1)CK20 mRNA和hTERT mRNA在胃癌患者中阳性率分别为52.50%(21/40)和65.00%(26/40),相对系数分别为0.81±0.17和0.78±0.17;在胃良性病变患者阳性率均为5.26%(1/19),相对系数分别为0.12和0.11;在健康体检者中均为0。胃癌患者与胃良性病变患者、健康体检者相比,两项指标均有统计学差异(P<0.01)。2)CK20 mRNA、hTERT mRNA阳性率和相对系数与临床分期、淋巴结转移、远处转移均有关(P<0.05),阳性者生存率低于阴性者(P<0.05)。3)CK20 mRNA、hTERT mRNA与CEA、CA199表达呈正相关(P<0.05),其阳性率高于CA199(P<0.05)。结论:胃癌患者外周血中存在CK20 mRNA和hTERT mRNA表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示两项指标能预测外周血微转移和判断预后,其诊断外周血微转移优于CA199。

关键词：胃癌外周血微转移 RT—PCR CK20 mRNA hTERT mRNA

中空纤维酶膜反应器制取麦芽低聚糖过程中酶反应稳定性的研究

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 1997年第S1期23卷 71-75页

作者：李昊李志达郭养浩魏建敏吴红京福州大学生物与食品科学工程系天津纺织工学院膜分离工程研究所中国科学院福建物质结构研究所

采用聚砜中空纤维酶膜反应器，以α－淀粉酶和异淀粉酶双酶协同作用酶解木薯淀粉制取麦芽低聚糖，在酶膜反应系统的连续操作过程中，对酶反应的稳定性进行了动力学研究，分别建立了在酶反应过程中的不同底物浓度和不同温度情况下，产物... 详细信息

采用聚砜中空纤维酶膜反应器，以α－淀粉酶和异淀粉酶双酶协同作用酶解木薯淀粉制取麦芽低聚糖，在酶膜反应系统的连续操作过程中，对酶反应的稳定性进行了动力学研究，分别建立了在酶反应过程中的不同底物浓度和不同温度情况下，产物浓度随时间变化的动力学模型．研究了异淀粉酶活力变化情况．

关键词：麦芽低聚糖 α-淀粉酶异淀粉酶中空纤维酶膜反应器动力学模型

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红茶果醋发酵工艺优化

现代食品科技 2021年第6期37卷 89-97页

作者：魏建敏陈燕陈莉卢红梅贵州省发酵工程与生物制药重点实验室贵州大学酿酒与食品工程学院贵州贵阳550025

为确定红茶果醋的最佳工艺参数,本试验以红茶、石榴为原料,接种酵母菌、醋酸菌进行发酵。在单因素实验的基础上,以茶果汁比、酵母菌接种量、加糖量为因素进行酒精发酵阶段的正交实验,以初始酒精度、醋酸菌接种量、发酵温度为因素进行醋... 详细信息

为确定红茶果醋的最佳工艺参数,本试验以红茶、石榴为原料,接种酵母菌、醋酸菌进行发酵。在单因素实验的基础上,以茶果汁比、酵母菌接种量、加糖量为因素进行酒精发酵阶段的正交实验,以初始酒精度、醋酸菌接种量、发酵温度为因素进行醋酸发酵阶段的正交实验。结果表明:优化后的最佳工艺条件为:酒精发酵阶段,微波浸提4 min,茶水比5:100,茶果汁比1:5,酵母菌接种量0.2%,加糖量16 g/100 mL;醋酸发酵阶段,装瓶量30%,初始酒精度7%vol,醋酸菌接种量12%,30℃发酵。在此条件下,发酵的红茶果醋总酸含量为6.48 g/100 mL、茶多酚含量为397.85 mg/L,富含16种氨基酸,总含量为5.93 mg/mL,其中必需氨基酸占总含量的38.45%,其色泽明亮、香气协和、风味独特,理化及卫生指标符合国家相关标准。本研究结果可为红茶果醋的开发和工业化生产提供理论依据。

关键词：茶果醋红茶石榴酒精发酵醋酸发酵

中空纤维酶膜反应器制取麦芽低聚糖的工艺研究

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中国粮油学报 1998年第5期13卷 49-52页

作者：李昊李志达魏建敏唐根源吴红京福州大学生物与食品科学工程系天津纺织工学院膜分离工程研究所中科院福建物质结构研究所

采用聚砜中空纤维酶膜反应器，运用α－淀粉酶和异淀粉酶双酶协同作用酶解淀粉制取麦芽低聚糖的酶膜反应连续化工艺研究。通过对酶膜反应系统的稳态连续操作过程，确定双酶的补加量及反应所要求的温度和糖化补酶时间，确定补料补水关系... 详细信息

采用聚砜中空纤维酶膜反应器，运用α－淀粉酶和异淀粉酶双酶协同作用酶解淀粉制取麦芽低聚糖的酶膜反应连续化工艺研究。通过对酶膜反应系统的稳态连续操作过程，确定双酶的补加量及反应所要求的温度和糖化补酶时间，确定补料补水关系式，产品质量Ｍ３～６含量达到７０％以上。试验表明酶膜反应连续化新工艺大大节省酶用量及缩短反应周期，提高生产能力。

关键词：麦芽低聚糖 α-淀粉酶中空纤维酶膜反应器

Ang-2在大肠癌中的表达及其与病理和临床特征的关系

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天津医药 2012年第3期40卷 281-283页

作者：马志兰刘新兰魏建敏陈萍宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学附属医院青州市人民医院

目的:研究血管生成素2(Ang-2)蛋白在大肠癌组织中的表达及其与病理和临床特征的关系。方法:应用免疫组化法检测54例大肠癌组织、18例癌旁正常组织及20例大肠良性病变组织中Ang-2的表达情况。结果:Ang-2在大肠癌组织、癌旁正常组织及大... 详细信息

目的:研究血管生成素2(Ang-2)蛋白在大肠癌组织中的表达及其与病理和临床特征的关系。方法:应用免疫组化法检测54例大肠癌组织、18例癌旁正常组织及20例大肠良性病变组织中Ang-2的表达情况。结果:Ang-2在大肠癌组织、癌旁正常组织及大肠良性病变组织中的阳性表达率分别为77.78%、27.78%和30.00%;癌组织与癌旁正常组织、良性病变组织相比,阳性表达率差异均有统计学意义(P0.05)。结论:Ang-2蛋白高表达可能在大肠癌的发生、发展、侵袭和转移中发挥重要的作用。

关键词：肠肿瘤大肠血管生成素2 免疫组织化学病理学,临床统计学,非参数

中空纤维酶膜反应器制取异麦芽低聚糖的新工艺

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中国粮油学报 1998年第6期13卷 23-27页

作者：李志达黄志通朱秋享魏建敏吴红京福州大学生物与食品科学工程系中科院福建物质结构研究所

采用聚砜中空纤维酶膜反应器连续化工艺流程，以转葡萄糖苷酶和真菌淀粉酶双酶协同作用于麦芽低聚糖转苷制取异麦芽低聚糖。通过对酶膜反应系统稳态操作，确定转苷酶膜反应停留时间，双酶补加量范围及反应温度，试验结果表明：酶膜反应... 详细信息

采用聚砜中空纤维酶膜反应器连续化工艺流程，以转葡萄糖苷酶和真菌淀粉酶双酶协同作用于麦芽低聚糖转苷制取异麦芽低聚糖。通过对酶膜反应系统稳态操作，确定转苷酶膜反应停留时间，双酶补加量范围及反应温度，试验结果表明：酶膜反应器连续化生产工艺，大大缩短反应周期，提高生产能力，又节省酶用量，同时显著改善了产品的质量，分枝性低聚糖含量达６４％

关键词：异麦芽低聚糖真菌淀粉酶酶膜反应器转苷酶

Ang-2、Tie-2和VEGFR-2表达在大肠癌血管生成和预后中的作用

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南方医科大学学报 2012年第11期32卷 1658-1662页

作者：刘新兰李亦功魏建敏赵艳娇宁夏医科大学总院肿瘤内科宁夏银川750004 宁夏医科大学总院胃肠外科宁夏银川750004 宁夏医科大学总院临床学院肿瘤学系宁夏银川750004

目的检测大肠癌组织中Ang-2、Tie-2和VEGFR-2的表达水平,探讨3者在大肠癌发生、复发转移、预后及血管生成中的调节作用。方法采用免疫组SP方法,检测118例大肠癌组织中、40例癌旁组织及40例肠道良性疾病组织中Ang-2、Tie-2及VEGFR-2的表... 详细信息

目的检测大肠癌组织中Ang-2、Tie-2和VEGFR-2的表达水平,探讨3者在大肠癌发生、复发转移、预后及血管生成中的调节作用。方法采用免疫组SP方法,检测118例大肠癌组织中、40例癌旁组织及40例肠道良性疾病组织中Ang-2、Tie-2及VEGFR-2的表达及CD34标记的微血管(MVD)进行检测,分析它们与大肠癌血管生成的关系。结果大肠癌组织中Ang-2、Tie-2及VEGFR-2在的阳性表达率分别为74.58%、69.49%和61.02%明显高于癌旁组织中的25.00%、17.50%和17.50%及大肠良性病变组织中的35.00%、32.50%和32.50%;(P值均0.05);根治术后5年内复发转移者和未复发转移者Ang-2、Tie-2和VEGFR-2的表达差异均有统计学意义(P<0.05),阴性表达者5年生存率明显高于阳性表达者(P<0.05)。结论 Ang-2、Tie-2和VEGFR-2在大肠癌血管生成过程中发挥重要作用,其高表达与大肠癌的发生、复发转移和预后有关。

关键词：大肠癌血管生成素-2 血管生成素受体-2 血管内皮细胞生长因子受体-2 微血管密度