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角质细胞生长因子2对细胞生长、移行及创伤愈合的作用

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生物化学与生物物理进展 2009年第7期36卷 854-862页

作者：陈霞胡炜魏万贵沈雁陈燕杨胜利龚毅中国科学院上海生命科学研究院上海200233 中国科学院研究生院北京100049

角质细胞生长因子2(KGF-2)是成纤维细胞生长因子超家族的一员,由间质细胞合成并分泌,能特异促进上皮细胞增殖、分化与迁移,对脊椎动物多种组织和器官的发育起重要调控作用.通过PCR从人的肾组织cDNA文库中克隆分离获得了KGF-2的cDNA,表... 详细信息

角质细胞生长因子2(KGF-2)是成纤维细胞生长因子超家族的一员,由间质细胞合成并分泌,能特异促进上皮细胞增殖、分化与迁移,对脊椎动物多种组织和器官的发育起重要调控作用.通过PCR从人的肾组织cDNA文库中克隆分离获得了KGF-2的cDNA,表明该因子在成人肾中有表达.采用大肠杆菌表达并纯化重组蛋白用于生物学功能研究的结果显示:KGF-2在体外不仅能够促进角质细胞的生长和增殖,而且对其凋亡具有抑制作用,还对细胞的移行具有影响.在动物实验中,KGF-2能促进皮肤切除产生的伤口愈合,提示该蛋白质可以作为创伤治疗或辅助用药的候选分子.

关键词：角质细胞生长因子2 细胞生长细胞凋亡细胞移行伤口愈合治疗应用

动物源性食品中α-玉米赤霉醇残留检测方法的研究

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中华预防医学杂志 2007年第4期41卷 317-320页

作者：白云峰顾鸣魏万贵王莉朱坚龚毅中国科学院上海伍佰豪生物工程有限公司 200233 上海出入境检验检疫局食品检验中心

α-玉米赤霉醇（α-zearalanol，α-ZER）又名右环十四酮酚，是玉米赤霉菌在生长过程中产生的次生代谢产物玉米赤霉烯酮的还原产物。作为外源性激素，低浓度的α-ZER可促进蛋白质的合成，曾作为促生长剂广泛使用。但家畜饲养中使用α-ZE... 详细信息

α-玉米赤霉醇（α-zearalanol，α-ZER）又名右环十四酮酚，是玉米赤霉菌在生长过程中产生的次生代谢产物玉米赤霉烯酮的还原产物。作为外源性激素，低浓度的α-ZER可促进蛋白质的合成，曾作为促生长剂广泛使用。但家畜饲养中使用α-ZER，可在动物肝、肾等组织中积累，同样药物残留可以随着食物链进入人体或通过动物的排泄物污染环境，对人体健康和自然环境产生危害与长远影响。

关键词： α-玉米赤霉醇动物源性食品残留检测次生代谢产物玉米赤霉烯酮生长过程促生长剂污染环境

实验室职业卫生环境对人体的影响及其防护措施

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上海劳动保护技术 1990年第5期 18-19页

作者：魏万贵

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科技系统职工伤亡事故特点及预防

上海劳动保护技术 1990年第2期 14-17页

作者：魏万贵

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高敏感薄层平板抗菌肽活性检测

农业生物技术学报 1995年第2期 19-24页

作者：夏明明徐上李伟魏万贵屈贤铭贾士荣中国农业科学院生物技术研究中心中国科学院上海生物工程研究中心上海医科大学眼耳鼻喉医院

本文对迄今通用的平皿琼脂糖孔穴扩散法进行了改进，使检测敏感性提高２．２～３．８倍，抗菌肽含量为０．１μｇ时即可观察到有明显的抑菌圈，薄层平板法不仅可保证琼脂糖厚度均匀一致，从而提高检测结果的稳定性，而且可由原来的半定... 详细信息

本文对迄今通用的平皿琼脂糖孔穴扩散法进行了改进，使检测敏感性提高２．２～３．８倍，抗菌肽含量为０．１μｇ时即可观察到有明显的抑菌圈，薄层平板法不仅可保证琼脂糖厚度均匀一致，从而提高检测结果的稳定性，而且可由原来的半定量发展为定量测定。此法可广泛应用农业、医药，对各种抗菌物质作微量测定及对不同抗菌物质的抑菌活性进行比较。

关键词：沉菌肽抑菌活性薄层平板琼脂糖孔穴扩散法

抗α-玉米赤霉醇单克隆抗体的研制及初步应用

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 68-71页

作者：魏万贵王莉白云峰龚毅顾鸣朱坚韩伟关嵘中国科学院上海伍佰豪生物工程有限公司上海200233 上海出入境检验检疫局食检中心上海200135

目的:制备抗α-玉米赤霉醇(α-ZER)的单克隆抗体(mAb),建立对动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的检测方法。方法:结合O-羧甲基羟胺法和EDC法制备α-ZER-BSA偶联物,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb。用夹心ELISA测定mAbIg亚类;... 详细信息

目的:制备抗α-玉米赤霉醇(α-ZER)的单克隆抗体(mAb),建立对动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的检测方法。方法:结合O-羧甲基羟胺法和EDC法制备α-ZER-BSA偶联物,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb。用夹心ELISA测定mAbIg亚类;按Beatty法计算亲和常数;间接ELISA法测定效价;用直接竞争ELISA检测mAb与α-ZER的同系物、己烯雌酚、19-去甲睾酮、链霉素及氯霉素等的交叉反应;绘制α-ZER标准品竞争抑制曲线,检定抗体的灵敏度。用该抗体建立的直接竞争ELISA对37份动物肝组织样品进行检测,并与HPLC检测结果比较。结果:紫外线扫描证明,α-ZER-BSA偶联成功。实验获得8株可稳定分泌抗α-ZERmAb杂交瘤细胞株,其中1株(4E5)分泌的mAb效价较高,为5.142×107,其Ig亚型为IgG1。该mAb能特异识别α-ZER及其同系物,而与其它常用兽药无交叉反应。建立了α-ZER直接竞争ELISA,从HPLC确认为阴性的37份样品中,筛出8份阳性样品。结论:利用mAb建立的直接竞争ELISA检测方法,适合动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的快速筛选。

关键词：玉米赤霉醇单克隆抗体竞争性ELISA 交叉反应

兔子宫内膜染色质蛋白与雌二醇受体的结合作用

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1983年第6期 52-58页

作者：程伊洪王还珠魏万贵中国科学院上海生物化学研究所

本文应用亲和层析技术,使兔子宫内膜染色质蛋白偶联于琼脂糖Sepharose 4B,并证明分离的兔子宫内膜染色质蛋白组分C与雌二醇受体复合物有高亲和力的结合作用。先分离纯化的核,然后用2M NaCl提取染色质蛋白,并对25mM磷酸缓冲液透析,得到... 详细信息

本文应用亲和层析技术,使兔子宫内膜染色质蛋白偶联于琼脂糖Sepharose 4B,并证明分离的兔子宫内膜染色质蛋白组分C与雌二醇受体复合物有高亲和力的结合作用。先分离纯化的核,然后用2M NaCl提取染色质蛋白,并对25mM磷酸缓冲液透析,得到可溶的组分A和不溶的组分B,后者再用0.1NHCl抽提,得到酸可溶的组分C。将各组分偶联于琼脂糖凝胶,测定与雌二醇受体复合物的结合量。结果表明组分C的结合活力最大,故本文主要对它的结合特性进行了研究。固定化组分C的主要结合特性是:(1)与雌二醇受体复合物有高亲和力的结合作用,其解离常数K=2.20×10M,(2)其结合活力对离子浓度是敏感的,当增加离子浓度时则减弱,(3)与雌二醇受体复合物的结合作用能被过量的R·DES复合物有效地抑制,(4)对25℃温育活化的雌二醇受体复合物有较大的结合量,(5)经胰蛋白酶处理后即失去结合活力,但不受DNase I和RNase的影响,提示在其结合作用中没有核酸参与。

关键词：染色质复合物偶联固定化宫内膜雌二醇雌激素蛋白受体兔子

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兔子宫内膜细胞核与雌二醇受体的结合作用

中华生殖与避孕杂志 1985年第1期 29-33页

作者：程伊洪王还珠魏万贵中国科学院上海生物化学研究所

从兔子宫内膜分离和纯化细胞核,并在离体条件下观察雌二醇受体复合物与核结合作用的条件。核结合作用的适宜条件是在0℃和生理盐浓度,此时受体复合物和核表现稳定。胞液受体经25℃预温活化后能有效地与核进行结合作用,并增加与核的结合... 详细信息

从兔子宫内膜分离和纯化细胞核,并在离体条件下观察雌二醇受体复合物与核结合作用的条件。核结合作用的适宜条件是在0℃和生理盐浓度,此时受体复合物和核表现稳定。胞液受体经25℃预温活化后能有效地与核进行结合作用,并增加与核的结合量。不同盐浓度对核结合作用有明显的影响。当KCl浓度逐步增加时,受体的结合量递减,这可能反映它们之间主要以离子键形式相互作用。在生理盐浓度条件下受体与核在0℃的结合作用表现饱和现象,随着加入受体量的增加显示两个坪区。Scatchard作图分析,表明核中存在多于一种的受体结合位点。一类数量较少(3,800位点/核),其结合亲和力较高,K值为3.4×10M;另一类数量较多(48,400位点/核),其结合亲和力相对地较低,K值为1.49×10M。

关键词： Estradiol-receptor complex Nuclear binding Rabbit endometrium in Vitro.

酶联免疫法检测动物组织中磺胺嘧啶残留方法的建立

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检验检疫科学 2004年第1期14卷 9-11页

作者：关嵘顾鸣魏万贵吴中勤龚毅上海出入境检验检疫局食检中心中科院上海生物工程中心

为了建立具有我国自主知识产权的快速检测农兽药残留的试剂以及相关的试剂盒 ,利用已有的科研资源 ,建立了快速检测磺胺嘧啶残留的酶联免疫检测法和试剂盒 ,其实验结果为 :除磺胺嘧啶外 ,与其他异构嘧啶类的交叉反应率约 10 % ,与克伦... 详细信息

为了建立具有我国自主知识产权的快速检测农兽药残留的试剂以及相关的试剂盒 ,利用已有的科研资源 ,建立了快速检测磺胺嘧啶残留的酶联免疫检测法和试剂盒 ,其实验结果为 :除磺胺嘧啶外 ,与其他异构嘧啶类的交叉反应率约 10 % ,与克伦特罗、氯霉素、四环素等其他药物无交叉反应 ,方法的特异性较好 ;方法的灵敏度为0 .3ng/ml,定量直线范围为 0 .1- 8.1ng/ml;样品经预处理 ,其检测时间约需 5h ;方法的回收率约 6 0 %以上 ;方法标准工作曲线的重复性试验的相关系数r2 =0 .92。同时 ,检测 10份农兽药残留监控鸡肝样品 ,测定结果与理化方法HPLC结果有一定的趋同性。

关键词：酶联免疫法检测动物组织磺胺嘧啶药物残留食品安全饲料添加剂