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动物源化改型单链抗体的设计、表达及杀虫活性

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农药学学报 2024年

作者：仲建锋高美静卢莉娜张志勇江苏省食品质量安全重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地农业农村部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所

抗独特型抗体制备技术是开发新型抗虫蛋白资源的一项创新策略。为设计构造以基因工程抗体为基础的杀虫蛋白资源，制备了对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性的猪、牛源改型单链抗体（single chain variable fragment，scFv）。通过... 详细信息

抗独特型抗体制备技术是开发新型抗虫蛋白资源的一项创新策略。为设计构造以基因工程抗体为基础的杀虫蛋白资源，制备了对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性的猪、牛源改型单链抗体（single chain variable fragment，scFv）。通过NCBI数据库搜索猪、牛源抗体重、轻链可变区的8个骨架区，在其中植入人源抗独特型scFv 3E1的6个互补决定区，并进行人工合成及替换成噬菌体展示表达载体pIT2；利用间接竞争ELISA对动物源化改型scFv进行分型鉴定；利用表面等离子共振（Surface plasmon resonance，SPR）技术分析动物源改型scFv与小菜蛾刷状缘膜囊泡（brush border membrane vesicles，BBMV）的结合能力；采用浸叶法测定动物源改型scFv对小菜蛾的生物活性。结果显示，通过替换表达载体获得了猪源swine-3E1-pIT2质粒和牛源bovine-3E1-pIT2质粒。swine-pIT2和bovine-pIT2表达上清液对Cry1B与其pAb结合的抑制率分别为44.3%和43.0%，模拟抗原Cry1B的某些结构功能，发现两者均属于β型抗独特型scFv。SPR分析发现，swine-pIT2、bovine-pIT2与小菜蛾BBMV的结合能力分别为209.48和195.31 RU。生物活性测定结果显示，改造后的swine-pIT2和bovine-pIT2对小菜蛾幼虫具有杀虫活性，LD50分别为5.90×107和6.22×107CFU/mL，均低于亲本3E1的6.86×107CFU/mL；并且改造后2种材料的毒力回归方程的斜率分别为1.50和1.48，也高于3E1的。综上，动物源化swine-pIT2和bovine-pIT2改型scFv属β型抗独特型scFv，能够与小菜蛾的BBMV结合，并具有杀虫活性，为新型生物农药蛋白资源挖掘提供了新的思路。

关键词： Bt毒素改型抗体杀虫活性表面等离子共振小菜蛾

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面向嵌入式平台的手势轨迹识别

传感器与微系统 2024年第9期43卷 161-164,168页

作者：王绎茗高美凤江南大学物联网工程学院江苏无锡214122

针对大部分嵌入式平台计算能力较弱、无法实时运行基于神经网络的应用程序的情况,提出了一种基于Anchor-Free轻量化卷积神经网络(CNN)的手势交互方法。该方法缓解了Anchor-Based检测的弊端,通过神经网络实时检测人体手部,并利用动态时... 详细信息

针对大部分嵌入式平台计算能力较弱、无法实时运行基于神经网络的应用程序的情况,提出了一种基于Anchor-Free轻量化卷积神经网络(CNN)的手势交互方法。该方法缓解了Anchor-Based检测的弊端,通过神经网络实时检测人体手部,并利用动态时间规整(DTW)算法对手势轨迹进行分类。神经网络参数量仅有0.22 M,在自建手部检测数据集上的平均精度均值(mAP)交并比(IoU)=0.50︰0.95可以达到68%。在RK3568嵌入式平台上,每帧推理和后处理时间仅有31 ms,轨迹分类耗时仅有43 ms,CPU使用率仅有34%,满足实时性要求。

关键词：轻量化卷积神经网络无锚框目标检测手势分类嵌入式系统

SIRT1/FoxO1信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

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中华麻醉学杂志 2024年第2期44卷 182-186页

作者：高美娜王磊丁彦玲保定市第一中心医院麻醉科保定071000

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠80只,6~8周龄,体质量230~280 g,采用随机数字表法分为4组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(CI... 详细信息

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠80只,6~8周龄,体质量230~280 g,采用随机数字表法分为4组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(CIR组)、三叶苷+脑缺血再灌注组(T组)和三叶苷+脑缺血再灌注+SIRT1/FoxO1信号通路抑制剂EX527组(E组)。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。T组和E组大鼠于缺血前3 d时开始灌胃给予三叶苷15 mg/kg,2次/d,连续3 d;E组大鼠每次灌胃前腹腔注射EX527 5 mg/kg。于再灌注24 h时采用改良Longa评分评估神经功能,随后处死大鼠取全脑组织,采用TTC染色确定脑梗死体积,流式细胞术检测海马神经元凋亡率和ROS水平,Western blot法检测SIRT1及乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)表达,ELISA法检测SOD和MDA含量,HE染色后光镜下观察海马CA1区病理学结果。结果与S组比较,CIR组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、ROS和MDA水平升高,SOD含量降低,SIRT1表达下调,Ac-FOXO1表达上调(P<0.05);与CIR组比较,T组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、ROS和MDA水平降低,SOD含量升高,SIRT1表达上调,Ac-FOXO1表达下调(P<0.05);与T组比较,E组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、ROS和MDA水平升高,SOD含量降低,SIRT1表达下调,Ac-FOXO1表达上调(P<0.05)。结论三叶苷可能通过激活SIRT1/FoxO1信号通路,抑制海马氧化应激反应和神经元凋亡,减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。

关键词：类黄酮物质再灌注损伤脑抗衰老酶1 叉头框蛋白O1

宿主因子NPSR调节伪狂犬病病毒感染能力的研究

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华南农业大学学报 2024年第4期45卷 457-468页

作者：罗欣欣郑虎高美娟杨化强华南农业大学动物科学学院/国家生猪种业工程技术中心广东广州510642

[目的]伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)属甲型疱疹病毒科,是一种嗜神经性病毒,通过接触传播感染造成神经和呼吸系统疾病。猪是PRV的自然宿主,PRV的感染和流行对养猪业造成巨大经济损失。PRV侵染宿主中枢神经系统后,引发神经肽S(Ne... 详细信息

[目的]伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)属甲型疱疹病毒科,是一种嗜神经性病毒,通过接触传播感染造成神经和呼吸系统疾病。猪是PRV的自然宿主,PRV的感染和流行对养猪业造成巨大经济损失。PRV侵染宿主中枢神经系统后,引发神经肽S(Neuropeptide S,NPS)系统表达水平的改变。NPS是一种神经肽物质,作为神经内分泌系统的关键成员在中枢神经系统中广泛分布,与慢性疾病相关联,NPS通过神经肽S受体(Neuropeptide S receptor,NPSR)介导多样化的生理功能,在机体内以NPS/NPSR系统形式共同参与神经内分泌-免疫网络调节。本研究探讨了NPS/NPSR系统在PRV感染宿主细胞中的作用,以期待开发新的抗PRV靶点。[方法]通过CRISPR/Cas9构建NPS和NPSR敲除的PK15细胞系,利用qPCR、免疫荧光、Western blot、免疫共沉淀(CO-IP)等方法检测感染PRV病毒后细胞系的抗病毒能力及NPSR与病毒表面糖蛋白的结合能力。[结果]NPSR敲除能减弱PRV对PK15细胞的感染能力,而NPS基因敲除增强了PRV对PK15细胞的感染能力。NPSR敲除细胞在PRV吸附过程中能减少病毒的侵入量,因此NPSR是潜在的PRV入侵受体。CO-IP试验证明,NPSR与病毒包膜蛋白gB和gD存在相互作用。[结论]NPSR通过与病毒表面糖蛋白结合促进PRV感染,NPSR可能是PRV感染神经系统的受体因子之一。NPSR敲除能显著抑制PRV对PK15细胞的感染。NPSR可为开发PRV防控药物和治疗策略提供新的研究靶点。

关键词：神经肽S受体伪狂犬病病毒病毒受体宿主病毒相互作用

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“六学三导”生态课堂在数学教学中的开展

中国培训 2016年第8期 161-161页

作者：高美智山东省青岛崂山区晓望小学

所谓的"六学三导"生态课堂中的"六学"是指学生的"预习学—尝试学—合作学—展示学—实践学—拓展学"六种学习方式;"三导"是指教师"激趣导航、引领导法、运用导练"。该模式是生态课堂的一种有效方式,也是有效贯彻落实学生学习主体地位的... 详细信息

所谓的"六学三导"生态课堂中的"六学"是指学生的"预习学—尝试学—合作学—展示学—实践学—拓展学"六种学习方式;"三导"是指教师"激趣导航、引领导法、运用导练"。该模式是生态课堂的一种有效方式,也是有效贯彻落实学生学习主体地位的有效模式之一。所以,在素质教育思想的影响下,教师要认真学习该模式的核心思想,要通过有效的将"六学三导"与小学数学与结合在一起进行论述,以确保学生在先学后教,多学少教的过程中养成良好的学习习惯,进而,为学生数学学习能力的提高做好保障工作。

关键词：六学三导小学数学《走进花果山10以内的加减法》

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转换与更新:以新旧天津证券交易所为中心

中国经济史研究 2024年第3期 159-170页

作者：孙建国王亚杰高美红河南大学开封475004 复旦大学经济学院上海200433 上海财经大学经济学院上海200433

1948年设立的天津证券交易所,在股票上市、交易规范、信用管理等方面,建立了一系列制度。国民政府财政部和工商部共同派员组建天津证券交易所监理员办公处,监管市场交易活动;明确票据管理制度,规范证券交易;强化证券交易经纪人监管,加... 详细信息

1948年设立的天津证券交易所,在股票上市、交易规范、信用管理等方面,建立了一系列制度。国民政府财政部和工商部共同派员组建天津证券交易所监理员办公处,监管市场交易活动;明确票据管理制度,规范证券交易;强化证券交易经纪人监管,加强信用管理。随着解放天津步伐的加快,加之物价飞涨、货币制度混乱,天津证券交易所失去了存在的基础,最后退出市场。1949年6月1日中国共产党在接收天津证券交易所公股资产和留用部分工作人员的基础上,组建了新的天津市证券交易所。新证券交易所在股票上市方面沿用申请核准制,仍然注重经纪人信用管理,严禁场外交易和投机操纵,但是采用国营公办形式,设立中国人民银行驻天津市证券交易所办事处,建立了一套以中国人民银行天津分行为责任主体的监管机制,引导游资支持解放区经济发展。1950年全国金融联席会议之后,兴办投资公司、建立长期资金市场、促进工商业繁荣发展,成为新中国金融政策变革的重要内容。天津市证券交易所适时改归天津市投资公司主办,天津市投资公司证券交易服务部采取实买实卖方法,取消经纪人制度,促进债券市场规范,服务实体经济发展。新的天津市证券交易所是新中国第一家证券交易所。

关键词：城市接管天津证券交易所信用管理红色金融

美食类节目创新策略研究——以《人气美食》为例

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影视制作 2024年第7期30卷 25-27页

作者：高美上海广播电视台

本文以上海电视台美食资讯类节目《人气美食》为例,详细介绍此类电视节目如何紧跟时代背景和观众需求变化进行内容创新,并总结节目的续航经验及对行业的借鉴意义。

关键词：美食类节目时代性创新

节目模式的“常青”之道——以《厨艺大师》为例

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中国广播影视 2024年第14期 93-95页

作者：高美上海广播电视台

《厨艺大师》是全球最成功的美食类节目模式，自1990年诞生以来已在世界各地制作了82个本土改编版。这一模式长盛不衰的原因在于其在创意上充分考虑了观众的审美和情感需求，将强规则驱动下的竞技模式结构率先引入美食题材，让观众能够... 详细信息

《厨艺大师》是全球最成功的美食类节目模式，自1990年诞生以来已在世界各地制作了82个本土改编版。这一模式长盛不衰的原因在于其在创意上充分考虑了观众的审美和情感需求，将强规则驱动下的竞技模式结构率先引入美食题材，让观众能够伴随参赛者见证他们奋力筑梦、实现自我价值的过程。该模式也通过全球创作者分享大会、衍生节目开发、跨界合作等方式保持了节目IP的自我革新，在拓展节目价值链的过程中保持了对观众的影响力和吸引力。

关键词：美食类节目模式创新IP

深度学习视角下英语听说课程思政教学设计与实施——以“From craft to art”为例

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校园英语 2024年第22期 16-18页

作者：高美上海南湖职业技术学院

本文聚焦职业院校英语听说课程思政教学设计，在深度学习视角下，基于深度学习内涵、兼容性框架和能力框架，从教学实践中的真实问题出发，系统化进行教学设计，达到教学目标和思政教育目标精准化、学习任务结构化、学习评价动态多元化... 详细信息

本文聚焦职业院校英语听说课程思政教学设计，在深度学习视角下，基于深度学习内涵、兼容性框架和能力框架，从教学实践中的真实问题出发，系统化进行教学设计，达到教学目标和思政教育目标精准化、学习任务结构化、学习评价动态多元化、学习情境职业化和学习过程可视化，有机协调英语听说教学与课程思政，实现价值塑造、语言习得和能力培养相统一，最终达到提升学生学习质量的目的。

关键词：深度学习课程思政教学设计与实施