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白细胞碎裂性血管炎患者不同部位MMPs和IL-37表达及临床意义

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白细胞碎裂性血管炎患者不同部位MMPs和IL-37表达及临床意义

作者：高方铭广州医科大学

学位级别：硕士

【研究背景】血管炎是指原发于血管内皮及其周围的炎症或坏死的一组疾病的总称,其组织病理学变化可表现为血管内皮细胞肿胀、核尘、血管壁纤维素样变性、坏死、甚至肉芽肿性改变等,血管周围浸润的细胞可为嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、... 详细信息

【研究背景】血管炎是指原发于血管内皮及其周围的炎症或坏死的一组疾病的总称,其组织病理学变化可表现为血管内皮细胞肿胀、核尘、血管壁纤维素样变性、坏死、甚至肉芽肿性改变等,血管周围浸润的细胞可为嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和组织细胞等。血管炎的分类较复杂,至今尚无统一标准,目前临床上根据累及血管管径的大小或按照浸润细胞的不同类型对血管炎进行分类。白细胞碎裂性血管炎(LCV)是皮肤科最常见的一组血管炎类疾病,包括临床常见的过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)、变应性血管炎(allergic vasculitis,ACV)、荨麻疹性血管炎(urticarial vasculitis,UV)等。LCV的常见诱因包括药物、感染、食物、甚至系统性疾病等,其发病机制复杂,涉及抗原、抗体、补体、内皮细胞、炎症细胞及各种炎症因子等多种因素。目前,多数研究认为LCV与III型变态反应有关,免疫复合物-补体-中性粒细胞这三者之间连锁反应是免疫复合物型血管炎发病机制的核心环节,另有研究表明,抗中性粒细胞浆抗体(ANCA)可能参与了LCV发病过程。近年来,关于LCV的研究更多地集中在循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC)及补体在血管基底膜沉积激发的组织病理过程,其他发病因素如参与血管壁间质代谢的基质金属蛋白酶及新型细胞因子IL-37等在LCV发病中是否有意义、如何参与病理过程尚少见公开报道。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)是一类含锌、钙离子且结构与功能相近的内肽酶超家族,能降解细胞外基质和维持胞外基质平衡。基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase TIMPs)可以与活化的MMPs按照1:1比例配对形成TIMPs-MMPs复合物,从而拮抗MMPs对底物的降解。目前国内外对血管炎与MMPs关系的研究主要集中在大或中等血管炎,并证实MMPs及TIMPs在大或中等血管的炎症发生发展中起重要作用,而对小血管的炎症、尤其是LCV与MMPs的相关报道甚少。根据MMPs作用底物及结构不同,MMPs分为六类:(1)胶原酶类:主要包括MMP-1、MMP-8、MMP-13三种。(2)明胶酶类:主要包括MMP-2、MMP-9。(3)间质容解素:主要包括MMP-3、MMP-10。(4)基质溶解因子:包括MMP-7、MMP-26。(5)膜型基质金属蛋白酶(MT-MMPs):MMP-14MP-17、MMP-24、MMP-25。(6)其他类型MMPs:MMP-12、MMP-19MP-21、MMP-27等,其中,MMP-9(明胶酶B)和MMP-3(间质溶解素-1)两者均可降解血管基底膜所特有的IV胶原,在已发现的4种TIMP中,TIMP-1可拮抗所有种类的MMPs,而且对MMP-9、MMP-3表现出较高的亲和力。LCV的组织病理表现中可见多种炎症细胞侵润、血管壁纤维素样坏死及核碎裂等,推测MMP-9、MMP-3、TIMP-1等参与了LCV疾病的发生发展。IL-37是近年新发现的IL-1家族成员,作为一种新型抗炎细胞因子,IL-37在免疫应答和炎症反应中起着抑制多种促炎症细胞因子的作用,已被证实在系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、化学诱导的结肠炎及肝损伤中起防御作用,IL-37与血管炎的关系以及在LCV的发病中的作用尚未见报道。【目的】本研究以LCV患者及其皮损组织病理蜡块为研究对象,通过测定LCV患者不同样本(血清、尿液、皮损)中MMP-9、MMP-3、TIMP-1和IL-37的表达水平,探讨急性期LCV患者MMP-9、MMP-3、TIMP-1及IL-37的表达是否相关及如何相关,分析前述指标在LCV的诊断及病情随访中作用,并为进一步探讨LCV的发病机理提供依据。【方法】1.研究对象:包括现症病例和既往确诊的LCV患者的组织病理蜡块。(1)现症病例为2016年3月—2017年1月间广州市皮肤病防治所门诊或住院的LCV患者,包括过敏性紫癜(HSP)、变应性血管炎(ACV)、荨麻疹性血管炎(UV)三种常见LCV,诊断标准参照美国Chapel Hill会议(CHCC)2012年制定标准,共30例,其中男13例,女17例,平均年龄(35.0±3.45)岁;正常对照组10例,其中男4例,女6例,平均年龄(38.4±3.68)岁。(2)蜡块组织选自2011年1月-2016年10月间我院病理科保存经临床和病理确诊的LCV石蜡包埋组织62例,变应性血管炎24例,过敏性紫癜18例,荨麻疹性血管炎20例。2、标本采集:初诊时采集血清、尿液、组织块标本备检。复诊标本在治疗3周后采集。3、检测方法及指标:(1)利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清、尿样中MMP-9、MMP-3、TIMP-1和IL-37蛋白表达水平;(2)

关键词：基质金属蛋白酶白细胞碎裂性血管炎基质金属蛋白酶抑制因子白介素-37

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棘层松解角化不良性表皮痣1例

临床皮肤科杂志 2018年第11期47卷 738-739页

作者：高方铭叶兴东广州市皮肤病防治所广州医科大学皮肤病研究所广东广州510095

1病历摘要患者男，55岁。因右足背外侧缘皮损进行性发展30余年，加重伴裂口疼痛2周，于2016年7月来我院就诊。患者30余年前无明显诱因右足背外侧缘出现少量粟粒大、棘突状、淡黄色密集丘疹，无明显不适，未诊治。自行外用润肤软膏，多... 详细信息

1病历摘要患者男，55岁。因右足背外侧缘皮损进行性发展30余年，加重伴裂口疼痛2周，于2016年7月来我院就诊。患者30余年前无明显诱因右足背外侧缘出现少量粟粒大、棘突状、淡黄色密集丘疹，无明显不适，未诊治。自行外用润肤软膏，多年来皮损缓慢增多，均为密集的角化性丘疹且沿足背外侧缘线状分布。

关键词：表皮痣棘层松解角化不良

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计算机网络安全防ARP攻击的对策

信息与电脑 2016年第14期28卷 192-193页

作者：高方铭广东京奥信息科技有限公司广东佛山528200

现在计算机网络走进千家万户,在日常生活中,人们越来越离不开计算机。但是,在计算机带给人们方便快捷的同时,也带来了相应的安全问题,计算机安全逐渐得到人们的重视。笔者主要对ARP攻击进行分析,并且详细讨论了如何更加有效地预防ARP攻击。

关键词： ARP攻击网络安全计算机

巢式-实时PCR检测梅毒初诊患者不同样本中梅毒螺旋体靶DNA

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中华皮肤科杂志 2017年第5期50卷 346-350页

作者：叶兴东高方铭曹文苓林宏达任泽舫广州市皮肤病防治所 510095 中山大学公共卫生学院

目的探讨巢式-实时PCR（NR？PCR）检测初诊梅毒患者不同样本中梅毒螺旋体（Tp）靶DNA的可行性及应用前景。方法以Tp polA为靶基因，用NR？PCR检测梅毒患者初诊时皮损拭子、血清、全血、脑脊液、末梢耳垂血等样本中的靶DNA，用统计软件... 详细信息

目的探讨巢式-实时PCR（NR？PCR）检测初诊梅毒患者不同样本中梅毒螺旋体（Tp）靶DNA的可行性及应用前景。方法以Tp polA为靶基因，用NR？PCR检测梅毒患者初诊时皮损拭子、血清、全血、脑脊液、末梢耳垂血等样本中的靶DNA，用统计软件SPSS.13分析结果。结果 NR？PCR检测Tp polA靶DNA的极限为2个Tp/ml，总体阳性率为71.7%，检测不同类样本的阳性率从高到低依次为：耳垂血92.0% 〉脑脊液90.2% 〉拭子74.3% 〉血清66.9% 〉全血64.2%。NR-PCR结果与血清学检查结果的一致性为76.0%（152/200）。进一步分析显示：一期、二期梅毒拭子DNA阳性率（63.2%比 87.5%）差异无统计学意义（χ2 = 2.62，P 〉 0.05）；血清样本中，二期梅毒DNA阳性率高于一期梅毒（χ2 = 3.6，P = 0.06）；全血样本中，二期梅毒DNA阳性率高于其他各类型梅毒；神经梅毒耳垂末梢血阳性率与脑脊液比较，P = 0.06。隐性梅毒血清（RPR）滴度 ≥ 1∶8组的Tp DNA阳性率高于RPR ≤ 1∶4组。结论 NR？PCR方法检测梅毒患者不同样本中Tp DNA是可行的，不同类型梅毒、不同类型样本以及其血清RPR滴度水平都影响Tp DNA阳性率。

关键词：梅毒苍白密螺旋体临床实验室技术实时聚合酶链反应巢式聚合酶链反应

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广州花都区孕产妇梅毒感染率及危险因素分析

中国艾滋病性病 2016年第5期22卷 365-368页

作者：叶兴东伍军平张金陶戴向农高方铭广州市皮肤病防治所广州510095 广州市花都区妇幼保健院广州510800

目的调查广州市花都区孕妇梅毒感染率,并分析其危险因素,为孕妇梅毒控制工作提供借鉴。方法2012年10月至2014年9月期间,在花都区医疗机构登记进行孕期保健的孕妇及住院分娩的产妇进行梅毒检测,汇总梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）... 详细信息

目的调查广州市花都区孕妇梅毒感染率,并分析其危险因素,为孕妇梅毒控制工作提供借鉴。方法2012年10月至2014年9月期间,在花都区医疗机构登记进行孕期保健的孕妇及住院分娩的产妇进行梅毒检测,汇总梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）阳性的全部孕产妇的个案资料,计算梅毒感染率。同时通过非匹配病例对照研究分析感染梅毒的危险因素。结果广州市花都区孕产妇梅毒感染率为0.42%。多因素Logistic回归分析显示,感染梅毒的危险因素包括：农村孕妇[比值比（OR）=2.42,95%可信区间（CI）：1.07~5.48]、失业或待业（OR=5.69,95%CI：2.31~14.00）、中专及以下学历（OR=10.50,95%CI：2.28~48.47）、异常妊娠史（OR=2.68,95%CI：1.05~6.85）、配偶性病史（OR=44.46,95%CI：10.87~181.80）、无定期产检（OR=6.83,95%CI：2.55~18.33）、初次性行为年龄在20岁之前（OR=4.31,95%CI：1.81~10.26）、不洁性接触史、使用安全套频率不足25%（OR=5.23,95%CI：2.06~13.28）等8个因素。结论广州市花都区孕产妇梅毒感染危险因素复杂,应针对这些因素采取有效的干预措施,控制孕妇梅毒流行。

关键词：孕产妇梅毒危险因素患病率流行

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误诊5年的阴囊汗孔角化症一例

误诊5年的阴囊汗孔角化症一例

2016全国中西医结合皮肤性病学术年会

作者：高方铭戴向农田歆叶兴东广州医科大学皮肤病研究所&广州市皮肤病防治所

汗孔角化症是一种少见的、遗传性、慢性进行性角化不全性皮肤病,主要好发于面、颈、四肢等外露部位,临床表现以边缘角化过度、中央稍萎缩的环形斑块多见。但发生于阴囊的汗孔角化症少见报道,笔者诊治一例发生的阴囊、并误诊5年的汗孔角...

汗孔角化症是一种少见的、遗传性、慢性进行性角化不全性皮肤病,主要好发于面、颈、四肢等外露部位,临床表现以边缘角化过度、中央稍萎缩的环形斑块多见。但发生于阴囊的汗孔角化症少见报道,笔者诊治一例发生的阴囊、并误诊5年的汗孔角化症。

关键词：

来源： cnki会议评论

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阴囊汗孔角化症误诊1例

皮肤性病诊疗学杂志 2016年第1期23卷 45-47页

作者：高方铭戴向农田歆叶兴东广州市皮肤病防治所广东广州510095

汗孔角化症是一种少见的、遗传性、慢性进行性角化不全性皮肤病,主要好发于面、颈、四肢等外露部位,临床表现以边缘角化过度、中央稍萎缩的环形斑块多见。但发生于阴囊的汗孔角化症少见报道,本文报告1例发生于阴囊、并误诊5年的汗孔角... 详细信息

汗孔角化症是一种少见的、遗传性、慢性进行性角化不全性皮肤病,主要好发于面、颈、四肢等外露部位,临床表现以边缘角化过度、中央稍萎缩的环形斑块多见。但发生于阴囊的汗孔角化症少见报道,本文报告1例发生于阴囊、并误诊5年的汗孔角化症。

关键词：阴囊汗孔角化症误诊

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基质金属蛋白酶与皮肤病的研究进展

国际皮肤性病学杂志 2017年第1期43卷 43-46页

作者：高方铭潘乔林叶兴东广州市皮肤病防治所皮肤科 510095

基质金属蛋白酶是一类结构上高度同源的锌离子依赖内肽酶超家族，已经发现24个成员，依据作用底物不同，分属于6个亚组，主要由角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞、中性粒细胞以及巨噬细胞等分泌。基质金属蛋白酶参与了多个信号通路... 详细信息

基质金属蛋白酶是一类结构上高度同源的锌离子依赖内肽酶超家族，已经发现24个成员，依据作用底物不同，分属于6个亚组，主要由角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞、中性粒细胞以及巨噬细胞等分泌。基质金属蛋白酶参与了多个信号通路，而与细胞分化、增殖、炎症密切相关，在细胞外基质降解、伤口愈合、组织重建方面发挥作用，参与多种皮肤病致病机制或创伤修复过程。深入了解基质金属蛋白酶在相关皮肤病的研究进展，有助于进一步探讨这些皮肤病的发病机制，甚至为治疗提供新的靶点。

关键词：皮肤疾病治疗应用瘢痕溃疡基质金属蛋白酶类信号通路

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天疱疮发病机制的研究进展

国际皮肤性病学杂志 2017年第5期43卷 301-304页

作者：潘乔林张怡高方铭叶兴东广州市皮肤病防治所广州医科大学皮肤病研究所皮肤科 510095

天疱疮是自身免疫引起表皮棘层细胞松解导致的慢性复发性表皮内大疱性皮肤病，典型表现为红斑基础上的疱壁松弛性水疱、糜烂、尼氏征阳性。依据天疱疮的临床表现，分为寻常型、增殖型、落叶型和红斑型天疱疮。天疱疮主要的发病机制是患... 详细信息

天疱疮是自身免疫引起表皮棘层细胞松解导致的慢性复发性表皮内大疱性皮肤病，典型表现为红斑基础上的疱壁松弛性水疱、糜烂、尼氏征阳性。依据天疱疮的临床表现，分为寻常型、增殖型、落叶型和红斑型天疱疮。天疱疮主要的发病机制是患者存在针对角质形成细胞桥粒芯（糖）蛋白的自身抗体，但棘层松解的详细机制尚不清。近年来，随着对蛋白组学、免疫学和分子生物学技术的发展以及天疱疮发病机制研究的不断深入，发现天疱疮的发病机制中除传统的桥粒芯（糖）蛋白自身抗体外，非桥粒芯（糖）蛋白抗体因素也参与了棘层松解的形成，为天疱疮提供了新的潜在治疗靶位。

关键词：天疱疮桥粒桥粒芯糖蛋白质类基质金属蛋白酶类 HSP27热休克蛋白质类