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品种和饲养模式对鸡肉风味性状及其候选基因mRNA表达水平的影响

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农业生物技术学报 2014年第8期22卷 1018-1026页

作者：张会丰高广亮王海威谢友慧李辉王启贵东北农业大学动物科学技术学院/农业部鸡遗传育种重点实验室/黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室重庆市畜牧科学院

肌苷酸(inosine monophosphate acid,IMP)和肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)是重要的肉质性状指标。为探讨品种和饲养模式对鸡(Gallus gallus)肉质风味的影响,本研究以散养和笼养的城口山地鸡、大宁河鸡和青脚麻鸡为研究群体,采用高效... 详细信息

肌苷酸(inosine monophosphate acid,IMP)和肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)是重要的肉质性状指标。为探讨品种和饲养模式对鸡(Gallus gallus)肉质风味的影响,本研究以散养和笼养的城口山地鸡、大宁河鸡和青脚麻鸡为研究群体,采用高效液相色谱仪和索氏浸提法测定鸡胸肌IMP和IMF含量,利用荧光定量PCR方法检测5个IMP候选基因和9个IMF候选基因mRNA的表达量情况。结果显示,从总体上看,城口山地鸡IMP含量高于大宁河鸡和青脚麻鸡,散养鸡IMP含量高于笼养鸡;城口山地鸡IMF含量低于大宁河鸡和青脚麻鸡,散养鸡IMF含量低于笼养鸡。IMP候选基因氨基咪唑氨甲酰核苷酸转甲酰基酶(aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide transformylase/IMPcyclohydrolase,PURH)和腺苷-磷酸脱氨酶(adenosine monophosphate deaminase1,AMPD1)基因,IMF候选基因心脏型脂肪酸结合蛋白基因(heart fatty acid binding protein,H-FABP)、瘦素受体(leptin receptor,LEPR)、脂肪酸转运蛋白1基因(fatty acid transport protein 1,FATP1)和解偶联蛋白3基因(uncoupling protein 3,UCP3)胸肌组织表达量分别与胸肌IMP含量和IMF含量存在相关性。本研究结果表明,品种和饲养模式均显著影响IMP和IMF含量及其候选基因的mRNA表达,且候选基因的表达水平与IMP和IMF含量有着密切的关系。本研究结果为优质肉鸡的选育提供了一定的理论基础。

关键词：品种饲养模式候选基因肌苷酸肌内脂肪

鹅不同繁殖时期GnRH和GnIH基因表达和激素浓度变化分析

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畜牧兽医学报 2016年第8期47卷 1720-1726页

作者：张克山胡彦竞科韩笑哲高广亮钟航王启贵重庆市畜牧科学院重庆402460 重庆市肉鹅遗传改良工程技术研究中心重庆402460 西南大学重庆402460

旨在研究GnRH和GnIH基因和激素在鹅繁殖过程中的重要作用,本研究以产蛋性能差异显著的四川白鹅和溆浦鹅为试验材料,利用Real-time RCR方法检测产蛋前期、产蛋期和休产期两种鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中GnRH和GnIH mRNA的表达量;利用... 详细信息

旨在研究GnRH和GnIH基因和激素在鹅繁殖过程中的重要作用,本研究以产蛋性能差异显著的四川白鹅和溆浦鹅为试验材料,利用Real-time RCR方法检测产蛋前期、产蛋期和休产期两种鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中GnRH和GnIH mRNA的表达量;利用放射性免疫和酶联免疫吸附测定法测定血清中的GnRH和GnIH激素变化情况。结果表明:GnRH和GnIH基因在四川白鹅和溆浦鹅的下丘脑、垂体和卵巢组织中均有表达;产蛋前期和产蛋高峰期的下丘脑和卵巢组织中,四川白鹅的GnRH mRNA表达量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于溆浦鹅,在产蛋高峰期和休产期四川白鹅GnRH激素浓度也极显著(P<0.01)或显著高于(P<0.05)溆浦鹅,在高峰期和休产期四川白鹅GnRH血清浓度分别为51.13和51.10pg·mL-1,溆浦鹅分别为49.52和49.94pg·mL-1;GnIH在两种鹅的变化比较一致,仅在产蛋高峰期,四川白鹅下丘脑组织中GnIH mRNA表达水平极显著低于(P<0.01)溆浦鹅,而两种鹅之间的GnIH激素在各个时期均无显著差异。这提示随着繁殖阶段的改变,在调控两种鹅产蛋性能的作用过程中GnRH可能较GnIH发挥着更为重要的作用,为进一步研究鹅繁殖分子机制奠定基础。

关键词：四川白鹅溆浦鹅 GnRH基因 GnIH基因生殖激素

GnIH基因多态性与鹅产蛋和体组成性状的关联分析

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华北农学报 2021年第5期36卷 204-210页

作者：高广亮张克山许国洋赵献芝陈主平周莉王启贵重庆市畜牧科学院重庆402460 重庆市肉鹅遗传改良工程技术研究中心重庆402460 重庆市綦江区动物疫病预防控制中心重庆401420

为研究促性腺激素抑制激素基因(GnIH)的系列特征,以及其SNP多态性位点对四川白鹅产蛋和体组成等性状的影响,克隆了GnIH基因DNA序列,并与哺乳动物和其他禽类进行生物信息学分析;该基因DNA序列比对到鹅参考基因组序列筛选SNP位点,随后采用... 详细信息

为研究促性腺激素抑制激素基因(GnIH)的系列特征,以及其SNP多态性位点对四川白鹅产蛋和体组成等性状的影响,克隆了GnIH基因DNA序列,并与哺乳动物和其他禽类进行生物信息学分析;该基因DNA序列比对到鹅参考基因组序列筛选SNP位点,随后采用Sanger方法直接测序PCR产物的方法,检测四川白鹅群体(208个体)中该基因序列,该序列包含3个外显子和2个内含子,CDS区长522 bp,173个氨基酸的前体蛋白GnIH氨基酸序。通过多重比对分析后,统计该基因在四川白鹅群体中SNP位点的基因型及其频率,进而与鹅产蛋和体组成等11个重要经济性状进行关联分析。获得了3735 bp的GnIH基因DNA序列,遗传进化分析显示,四川白鹅GnIH基因与绿头鸭的序列相似度最高(99%);序列比对到鹅参考基因组序列发现该基存在26个SNP位点;SNP位点基因型频率与性状关联分析结果表明:该基因11个SNP位点(g.811T>C、g.1892T>C、g.1320G>A、g.1809G>T、g.2164C>G、g.1708A>G、g.2164C>G、g.1809G>T、g.1892T>C、g.1929C>A和g.2164C>G)与初产蛋质量、体斜长、颈长、胸宽和胫围等性状显著或极显著相关(P0.05)。四川白鹅GnIH基因序列与绿头鸭亲缘关系最相近;本研究克隆的3735 bp的DNA序列中存在26个SNP位点,其中11个SNP位点可作为四川白鹅初产蛋质量、体斜长、颈长、胸宽和胫围等经济性状的潜在的分子标记之一。

关键词：鹅 GnIH基因 SNPs 产蛋性状体组成性状分子标记辅助选择

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水性3C1B涂装工艺成功案例分析

汽车制造业 2015年第10期 66-68页

作者：谢智勇马力章军高广亮付云观中国汽车工业工程有限公司

虽然水性3C1B工艺在汽车车身涂装中已得到了大力推广，但在实际操作过程中工艺材料和喷涂设备匹配性还存在着一定的风险和不确定性。本文通过对实际项目中的成功应用案例进行分析，阐述了其工艺要点、施工风险、相关优势及效果。

关键词：案例分析涂装工艺水性施工风险车身涂装不确定性喷涂设备工艺材料

基于酵母表面展示的山羊γ-干扰素重组富硒酵母构建及活性分析

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农业生物技术学报 2022年第3期30卷 562-569页

作者：许国洋郑华高广亮余远迪戴茜茜牟豪杨柳杨睿重庆市畜牧科学院重庆市兽用生物制品工程技术研究中心重庆市三峡职业学院

γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)是一种Ⅱ型干扰素，可以抵抗病毒在机体的感染复制，在畜禽养殖业中具有潜在应用价值，目前关于山羊(Capra hircus)γ-干扰素(goat interferon-γ, CapIFN-γ)的真核表达少有报道。本研究旨在对酵母(Sa... 详细信息

γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)是一种Ⅱ型干扰素，可以抵抗病毒在机体的感染复制，在畜禽养殖业中具有潜在应用价值，目前关于山羊(Capra hircus)γ-干扰素(goat interferon-γ, CapIFN-γ)的真核表达少有报道。本研究旨在对酵母(Saccharomyces)表面展示系统进行富硒改造，并构建表面展示CapIFN-γ的重组富硒酵母，同时对其进行活性分析。依据酿酒酵母(S. cerevisiae) EBY100生长曲线及富硒特性，筛选亚硒酸钠的最适浓度，对酿酒酵母进行富硒改造。人工合成编码山羊γ-干扰素的成熟肽基因，构建重组质粒pYD1-CapIFN-γ，电击转化富硒酵母，将鉴定正确的重组菌株接种于含2%半乳糖的YNB-CAA液体培养基中诱导表达，并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光实验(indirect immunofluorescence assay, IFA)分析，同时，利用细胞病变抑制法分析重组山羊γ-干扰素对羊痘病毒(Goatpox virus, GPV)增殖的影响。结果显示，亚硒酸钠最适终浓度为60μg/mL。SDS-PAGE和Western blot鉴定均显示在约25 kD位置出现目的蛋白条带，IFA鉴定显示重组富硒酵母出现绿色荧光信号，且重组蛋白能够抑制羊痘病毒在羊肾细胞中的增殖。本研究成功对酵母表面展示系统进行了富硒改造，并获得了CapIFN-γ重组富硒酵母，为山羊γ-干扰素抗病毒作用的深入研究及新型酵母饲料添加剂的开发提供参考，也为山羊绿色健康养殖及疫病防控提供技术保障。

关键词：山羊γ-干扰素(CapIFN-γ) 富硒酵母表面展示系统羊痘病毒细胞病变抑制

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复杂断块底水油藏含水上升规律

大庆石油地质与开发 2017年第3期36卷 56-59页

作者：田中敬赵隆顺高广亮刘道杰王九理孙彦春中国石油冀东油田分公司勘探开发研究院河北唐山063004 中国石油冀东油田分公司开发处河北唐山063004

渤海湾盆地南堡凹陷发育带有隔夹层的复杂断块底水油藏。底水油藏油水界面处隔夹层控制着底水锥进速度及单井水淹时间,如何利用隔层控制油藏含水上升速度对延长单井见水时间及提高油藏水驱开发效果至关重要。在精细刻画油藏隔夹层分布... 详细信息

渤海湾盆地南堡凹陷发育带有隔夹层的复杂断块底水油藏。底水油藏油水界面处隔夹层控制着底水锥进速度及单井水淹时间,如何利用隔层控制油藏含水上升速度对延长单井见水时间及提高油藏水驱开发效果至关重要。在精细刻画油藏隔夹层分布模式的基础上,利用修正的底水油藏见水时间公式,研究了隔夹层对油藏含水上升的变化规律。最终确定油井隔层半径为150 m时,既可以有效传导底水能量,又能够延长油井见水时间,此时计算油井见水时间为2 a;南堡凹陷堡古2油藏应用针对性的控水稳油对策,取得了较好开发效果。

关键词：复杂断块油藏底水油藏见水时间隔层

鸡转录因子C/EBPα、KLF2、KLF3、KLF7、PPARα对L-FABP启动子活性的影响

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中国畜牧杂志 2014年第17期50卷 13-17页

作者：贺綦史洪岩王海霞高广亮王启贵李辉东北农业大学动物科学技术学院农业部鸡遗传育种重点实验室黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室黑龙江哈尔滨150030 重庆市畜牧科学院重庆402460

L-FABP是脂肪酸结合蛋白家族重要的成员。研究发现L-FABP在不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸、胆固醇、胆汁酸等转运过程中扮演重要角色。目前,对哺乳动物L-FABP的活性调控机制的研究已经取得了一定进展,但在禽类上的相关报道还比较少见。为探... 详细信息

L-FABP是脂肪酸结合蛋白家族重要的成员。研究发现L-FABP在不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸、胆固醇、胆汁酸等转运过程中扮演重要角色。目前,对哺乳动物L-FABP的活性调控机制的研究已经取得了一定进展,但在禽类上的相关报道还比较少见。为探讨鸡L-FABP基因的表达调控机制,本研究利用报告基因方法在人肝癌细胞系(HEGP2)中研究C/EBPα、KLF2、KLF3、KLF7、PPARα基因对鸡L-FABP基因启动子活性的影响。结果表明:C/EBPα显著抑制了鸡L-FABP基因的表达,KLF2、KLF3、KLF7、PPARα基因显著促进了L-FABP基因的表达,这些结果为深入研究鸡L-FABP基因表达调控机制奠定了基础。

关键词： L-FABP基因启动子活性分析鸡

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冀东南堡凹陷非常规油气资源潜力研究

海洋石油 2014年第4期34卷 16-21页

作者：袁立新毕永斌张梅高广亮李福堂中国石油冀东油田勘探开发研究院河北唐山063004

利用地球化学、岩石矿物、测井及录井等资料系统研究冀东南堡凹陷非常规油气资源,认为南堡凹陷火山岩、泥页岩厚度大、有机质丰度高、类型好、成熟度分布范围广,具备形成油气藏的物质基础;南堡凹陷火成岩气孔或裂缝发育、泥页岩裂缝发育... 详细信息

利用地球化学、岩石矿物、测井及录井等资料系统研究冀东南堡凹陷非常规油气资源,认为南堡凹陷火山岩、泥页岩厚度大、有机质丰度高、类型好、成熟度分布范围广,具备形成油气藏的物质基础;南堡凹陷火成岩气孔或裂缝发育、泥页岩裂缝发育,均具有一定的储集性能,同时有利于油气的开采。通过对火山岩、泥页岩进行试油试采,在沙河街组火山岩中试气获得了日产16×10~4m^3的高产天然气流,在沙三段泥页岩进行压裂投产,初期日产液30m^3,目前日产液5m^3,日产油2t,已累计产油500t。研究结果表明南堡凹陷非常规油气藏具有良好的勘探开发潜力,展示了良好的勘探开发前景。

关键词：南堡凹陷火山岩泥页岩潜力

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汽车涂装VOCs产生及排放分析

汽车工艺与材料 2019年第6期 47-51,58页

作者：李翠娜高广亮韩守习李鹏中国汽车工业工程有限公司天津300113 中汽(天津)系统工程有限公司天津300113

结合涂装全过程,分工段介绍了VOCs的来源、产生及排放途径,根据物料衡算给出了不同涂装工艺单位产品面积VOCs的产生和排放水平,为涂装VOCs的防治提供参考。

关键词：涂装工艺溶剂型漆水性漆高固体份挥发性有机物