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抑制食源性致病菌脂肽的分离鉴定及生物学特性分析

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食品与发酵工业 2022年第6期48卷 195-203页

作者：丁飞鸿耿云龙樊士德彭双双邹曦赵宜峰陈腾高兆建徐州工程学院食品与生物工程学院江苏徐州221018 长江桂柳食品睢宁有限公司江苏徐州221000

从传统香肠中分离拮抗芽孢杆菌菌株,并对菌株所产脂肽进行分离纯化和抗菌特性分析。采取平板对峙法筛选产生抗菌脂肽的芽孢杆菌菌株。抗菌脂肽采用有机溶剂萃取、Sephadex LH-20柱层析、半制备反向高效液相色谱(reverse-phase high perf... 详细信息

从传统香肠中分离拮抗芽孢杆菌菌株,并对菌株所产脂肽进行分离纯化和抗菌特性分析。采取平板对峙法筛选产生抗菌脂肽的芽孢杆菌菌株。抗菌脂肽采用有机溶剂萃取、Sephadex LH-20柱层析、半制备反向高效液相色谱(reverse-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离纯化,傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)扫描、薄层层析(thin-layer chromatography,TLC)-生物自显影鉴定,扫描电镜分析脂肽抗菌机理。分离筛选到1株产广谱抗菌脂肽的菌株,鉴定为短小芽孢杆菌(命名为XZK-18)。菌株XZK-18发酵8 h开始合成脂肽,24 h产量达到最大。TLC初步鉴定抑菌活性成分为脂肽,且主要由脂肽家族中的表面活性素(surfactin)及少量伊枯草菌素(iturin)组成,TLC-生物自显影检测到表面活性素对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有显著抑菌活性。FT-IR进一步证实抑菌活性成分为脂肽。扫描电镜结果表明,纯化的脂肽通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性、使细胞壁穿孔、增大细胞膜通透性杀灭大肠杆菌。抗菌脂肽有广谱抑菌活性,对革兰氏阳性菌如蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌和单核增生李斯特菌有显著抑菌活性,对革兰氏阴性菌如铜绿假单胞菌、大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌和福氏志贺氏菌也有一定抑菌作用,对所试真菌无抑菌活性。脂肽在110℃以下保温30 min稳定性好,在pH 3~11下处理10 d抑菌活性保持稳定。以上特性表明菌株XZK-18合成的脂肽在食品生产与加工中有作为天然食品防腐剂的潜力。

关键词：短小芽孢杆菌脂肽抗菌作用稳定性

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低醇菠萝果酒酿造工艺的研究

中国酿造 2005年第11期24卷 16-19页

作者：高兆建江苏徐州工程学院江苏徐州221008

用发酵法生产低醇优质菠萝果酒,对4种果酒专用的酿酒酵母进行了对比试验,确定选用最适合菠萝酒酿造的酵母菌株Y19;同时对影响菠萝果酒品质的重要工艺参数进行了探讨,确定菠萝果酒酿造最佳含糖量为20%,主发酵温度20℃,发酵时间7d,添加偏... 详细信息

用发酵法生产低醇优质菠萝果酒,对4种果酒专用的酿酒酵母进行了对比试验,确定选用最适合菠萝酒酿造的酵母菌株Y19;同时对影响菠萝果酒品质的重要工艺参数进行了探讨,确定菠萝果酒酿造最佳含糖量为20%,主发酵温度20℃,发酵时间7d,添加偏重亚硫酸钾110mg/L。经过成分调配、澄清、陈酿等工艺得到酒精含量为10%(v/v),糖含量为45g/L的优质、低醇甜型菠萝果酒。

关键词：菠萝酿造果酒低醇

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菠萝果酒发酵的工艺

食品与生物技术学报 2006年第3期25卷 98-103页

作者：高兆建徐州工程学院食品工程系江苏徐州221008

以菠萝全汁为原料,对菠萝果酒的加工工艺及影响菠萝果酒品质的关键性工艺参数进行了研究.按照0.025%的比例向压榨后的果汁中添加果胶酶,并保温40 ℃作用2 h后,采用正交试验法优化发酵条件,结果显示：采用一次加糖法将糖质量浓度调至每10... 详细信息

以菠萝全汁为原料,对菠萝果酒的加工工艺及影响菠萝果酒品质的关键性工艺参数进行了研究.按照0.025%的比例向压榨后的果汁中添加果胶酶,并保温40 ℃作用2 h后,采用正交试验法优化发酵条件,结果显示：采用一次加糖法将糖质量浓度调至每100 mL 20 g,添加柠檬酸至pH 3.6、添加偏重亚硫酸钾至质量浓度110 mg/L、主发酵温度22 ℃,发酵7 d;后发酵温度16 ℃,发酵10 d;10 ℃陈酿2～3个月.采用明胶-丹宁复合澄清剂澄清处理,最后75 ℃,15 min杀菌后,得到果香浓郁、色泽金黄、澄清透明的优质菠萝果酒.

关键词：菠萝酒菠萝发酵工艺

源自泡菜的植物乳杆菌产新型广谱抑菌细菌素的特性分析

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食品科学 2021年第10期42卷 171-177页

作者：高兆建黄亮浩丁飞鸿赵宜峰陈腾徐州工程学院食品与生物工程学院江苏徐州221018 长江桂柳食品睢宁有限公司江苏徐州221000

筛选对食源性致病菌和腐败菌有特异性抑制作用的产细菌素乳酸菌菌株,并研究细菌素的特性,为其在食品防腐中的应用提供参考。从分离自泡菜的112株乳酸菌中反复筛选得到1株产细菌素(BacH32)菌株(Hlh32),经鉴定菌株Hlh32为植物乳杆菌(Lacto... 详细信息

筛选对食源性致病菌和腐败菌有特异性抑制作用的产细菌素乳酸菌菌株,并研究细菌素的特性,为其在食品防腐中的应用提供参考。从分离自泡菜的112株乳酸菌中反复筛选得到1株产细菌素(BacH32)菌株(Hlh32),经鉴定菌株Hlh32为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),其在35℃MRS培养基中发酵至稳定期即18~24 h达到最大BacH32产量(对金黄色葡萄球菌的抑菌活性达到1 850 AU/mL)。通过硫酸铵盐析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-15凝胶过滤层析、制备型高效液相色谱等方法进行纯化。Trinice十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳结果显示BacH32分子质量为6.7 kDa,与文献报道的植物乳杆菌细菌素分子质量有显著差异。细菌素BacH32对蛋白酶敏感,而脂肪酶、α-淀粉酶和β-淀粉酶对其无影响,表明BacH32为蛋白质。BacH32在pH 2~9的环境下孵育4 h,在37、60、80、100℃保持30 min或121℃保持15 min仍能保持较好抑菌活性。细菌素BacH32对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有广谱抑菌活性,对真菌也有一定的抑菌活性。向培养至对数初期的金黄色葡萄球菌中添加BacH32,菌体生长完全受到抑制。以上特性表明植物乳杆菌Hlh32合成的细菌素BacH32有潜力作为天然食品防腐剂在食品中使用。

关键词：植物乳杆菌细菌素纯化抑菌作用

基于学科竞赛的大学生实践创新能力培养与教学模式探索

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大学（教学与教育） 2023年第5期 147-151页

作者：高兆建彭双双王先凤王启源陈腾徐州工程学院食品与生物工程学院江苏徐州221018 徐州工程学院团委江苏徐州221018 徐州工程学院材料与化学工程学院江苏徐州221018

针对大学生创新意识不足、实践创新能力不强等问题,文章以科技竞赛为载体,探索出“学科竞赛—科研训练—实践教学”相结合的教学模式。通过优化学科竞赛特色的课程体系、建立科学有效的学科竞赛运行管理机制、构建学科竞赛与实践教学一... 详细信息

针对大学生创新意识不足、实践创新能力不强等问题,文章以科技竞赛为载体,探索出“学科竞赛—科研训练—实践教学”相结合的教学模式。通过优化学科竞赛特色的课程体系、建立科学有效的学科竞赛运行管理机制、构建学科竞赛与实践教学一体化的实践教学新模式等手段,激发学生学习兴趣,提高教学水平,增强工科院校大学生实践创新能力。

关键词：学科竞赛教师科研实践创新能力

基于学科竞赛的大学生实践创新能力培养与教学模式探索

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大学 2023年第14期 147-151页

作者：高兆建彭双双王先凤王启源陈腾徐州工程学院食品与生物工程学院徐州工程学院团委徐州工程学院材料与化学工程学院

针对大学生创新意识不足、实践创新能力不强等问题，文章以科技竞赛为载体，探索出“学科竞赛—科研训练—实践教学”相结合的教学模式。通过优化学科竞赛特色的课程体系、建立科学有效的学科竞赛运行管理机制、构建学科竞赛与实践教学... 详细信息

针对大学生创新意识不足、实践创新能力不强等问题，文章以科技竞赛为载体，探索出“学科竞赛—科研训练—实践教学”相结合的教学模式。通过优化学科竞赛特色的课程体系、建立科学有效的学科竞赛运行管理机制、构建学科竞赛与实践教学一体化的实践教学新模式等手段，激发学生学习兴趣，提高教学水平，增强工科院校大学生实践创新能力。

关键词：学科竞赛教师科研实践创新能力

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富锗木耳对小鼠肠道菌群的影响

食品工业科技 2013年第2期34卷 346-348,352页

作者：陈宏伟朱蕴兰高兆建张城徐州工程学院江苏徐州221111 江苏省食品资源开发与质量安全重点实验室江苏徐州221111 江苏省食品生物加工工程技术研究中心江苏徐州221111

通过荧光定量PCR方法,测定了喂饲富锗木耳菌丝体小鼠肠道内大肠杆菌和乳酸杆菌的16srDNA数量,探讨了富锗木耳菌丝体对小鼠肠道菌群的影响。实验结果表明,喂饲富锗木耳菌丝体小鼠肠道内大肠杆菌数量未见明显变化(p>0.05),乳酸杆菌数量显... 详细信息

通过荧光定量PCR方法,测定了喂饲富锗木耳菌丝体小鼠肠道内大肠杆菌和乳酸杆菌的16srDNA数量,探讨了富锗木耳菌丝体对小鼠肠道菌群的影响。实验结果表明,喂饲富锗木耳菌丝体小鼠肠道内大肠杆菌数量未见明显变化(p>0.05),乳酸杆菌数量显著增加(p<0.01),富锗木耳对肠道菌大肠杆菌无明显的调节作用,对乳酸杆菌的生长繁殖有促进作用。

关键词：木耳锗肠道菌群 16S rDNA 荧光定量PCR

筛选自泡菜的发酵乳杆菌细菌素纯化及抑菌特性分析

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食品工业科技 2021年第3期42卷 201-207,283页

作者：高兆建张艳秋宋玉林赵宜峰徐州工程学院食品与生物工程学院江苏徐州221018 长江桂柳食品睢宁有限公司江苏徐州221000

从中国传统发酵蔬菜中筛选鉴定对食源性致病菌有广谱抗性的细菌素(命名为BLF52)产生菌株并对细菌素分离纯化和抑菌特性分析。分子筛凝胶过滤层析和半制备高效液相色谱(RP-HPLC)纯化细菌素并用Tricine-SDS-PAGE法测定其分子量。筛选得到... 详细信息

从中国传统发酵蔬菜中筛选鉴定对食源性致病菌有广谱抗性的细菌素(命名为BLF52)产生菌株并对细菌素分离纯化和抑菌特性分析。分子筛凝胶过滤层析和半制备高效液相色谱(RP-HPLC)纯化细菌素并用Tricine-SDS-PAGE法测定其分子量。筛选得到产细菌素的发酵乳杆菌(Lactobacilus fermentum)CH-16。MRS培养基中34℃发酵至稳定期前期即24~30 h对S.aureus抑制活性最大(875 AU/mL)。BLF52纯化至单一组分,分子量5.6 kDa,40~80℃(30 min)、pH2.0~7.0(2 h)有良好稳定性。胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K处理后,抑菌活性完全丧失,α-淀粉酶对其无影响,表明BLF52有典型的细菌素特性。BLF52对食源性腐败菌和致病菌如单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌和副溶血性弧菌均有抑制活性,通过杀菌模式抑制培养中的S.aureus生长。细菌素BLF52有潜力开发为适合酸性或中性食品使用的食品防腐剂。

关键词：细菌素发酵乳杆菌分离纯化抑菌特性

响应曲面优化余甘子多酚的亚临界水萃取工艺及其抗氧化性研究

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中国食品添加剂 2017年第9期28卷 75-81页

作者：唐仕荣宋慧高兆建黄莹徐州工程学院食品(生物)工程学院徐州221018 徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室徐州221018

以余甘子干果粉为原料,研究亚临界水萃取余甘子多酚的工艺条件及其抗氧化活性。通过单因素试验探讨了亚临界水萃取余甘子多酚工艺中萃取温度、萃取时间、萃取压力和液料比等因素对多酚提取率的影响,利用响应曲面分析法优化提取工艺。最... 详细信息

以余甘子干果粉为原料,研究亚临界水萃取余甘子多酚的工艺条件及其抗氧化活性。通过单因素试验探讨了亚临界水萃取余甘子多酚工艺中萃取温度、萃取时间、萃取压力和液料比等因素对多酚提取率的影响,利用响应曲面分析法优化提取工艺。最佳优化工艺参数:余甘子干果粉碎过40目筛,纯水80m L,液料比47∶1,亚临界萃取温度212℃,提取11min,余甘子多酚平均提取率17.08%,实测值与预测值符合良好。高效液相分析表明,亚临界水萃取样品中没食子酸提取率达3.284%,远高于溶剂回流提取。体外抗氧化活性研究表明,亚临界水萃取余甘子多酚具有一定清除DPPH自由基和羟基自由基的能力,其IC50值分别为7.05μg/m L和54.35μg/m L,小于TBHQ和溶剂回流提取样品。体现了亚临界水萃取具有较好的选择性、快速、高效、环境友好等优点。

关键词：亚临界水萃取余甘子多酚响应曲面抗氧化性