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中国矫形外科杂志 2013年第6期21卷 582-586页

作者：高健伟魏开斌泰山医学院研究生部山东泰安271000 山东省泰安市中心医院骨一科 271000

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是一种十分严重的综合性损伤，病情恢复十分困难。对病人的身心健康造成严重伤害，已成为新的影响人类生命质量的重要原因之一。

关键词：人脐带间充质干细胞脊髓损伤进展

人脐带间充质干细胞蛛网膜下腔移植治疗脊髓损伤的实验研究

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人脐带间充质干细胞蛛网膜下腔移植治疗脊髓损伤的实验研究

作者：高健伟泰山医学院

学位级别：硕士

第一部分人脐带间充质干细胞的培养、鉴定、冻存复苏和脊髓损伤模型的建立目的 1.探讨人脐带间充质干细胞原代培养方法和鉴定等，观察其生物学特性。 2.探讨干细胞爬片培养，GDNF和BDNF荧光表达。 3.探讨大鼠损伤脊髓模型的正确建立。... 详细信息

第一部分人脐带间充质干细胞的培养、鉴定、冻存复苏和脊髓损伤模型的建立目的 1.探讨人脐带间充质干细胞原代培养方法和鉴定等，观察其生物学特性。 2.探讨干细胞爬片培养，GDNF和BDNF荧光表达。 3.探讨大鼠损伤脊髓模型的正确建立。方法 1.原代细胞培养和流式鉴定 1.1获得足月、健康剖腹产产妇的新鲜、无菌的新生儿脐带，提取人脐带华尔通胶或叫沃顿胶（Whartoncs jelly，WJ），行组织贴壁法，应用DMEM/F12进行体外原代培养和传代培养，并对其分离、纯化和鉴定。 1.2将脐带华尔通胶剪成约1mm×1mm×1mm大小，行组织贴壁法放置于6孔培养板中，随后把培养板放在37°C温箱中1.5小时进行贴壁。组织贴壁后取出将预制不锈钢网（1mm×1mm大小框径）置于组织块上方，加入DMEM/F12进行培养，观察不锈钢网在培养过程中对细胞数量的影响。 1.3采用流式细胞仪检测鉴别CD24、CD34、CD44、CD90在干细胞表面的表达。 1.4细胞的冻存和复苏遵循慢冻速融的原则（4℃冰箱30min→-20℃冰箱冷冻室30min→－80℃低温冰箱过夜→-194℃液氮保存。）。细胞培养传代至2代时严格按照步骤原则进行细胞的冻存，储存于液氮中;移植时将其取出复苏，培养传代至第4代细胞进行标记移植。 2.人脐带间充质干细胞爬片培养，GDNF和BDNF荧光表达 3.脊髓损伤模型的建立 3.1Wistar大鼠脊髓损伤模型的建立参照Wamil等制作方法，按落体致伤原理制成一撞击装置，撞击体头端3mm，长度3.5cm，撞击体重量8g，下落高度2cm，撞击体致伤的冲击力8g×3.5cm×2cm。大鼠称重250g左右,10%水合氯醛0.7ml/100g的剂量行腹腔内注射麻醉，将大鼠四肢固定于自制的固定板上。行手术区域碘伏消毒，依次切开暴露脊髓，安装自制打击器，定位T10脊髓上方，按预定方案行脊髓打击伤。所有大鼠脊髓打击模型造模操作及结果均一致，B组、C组、D组、E组术后即刻进行BBB评分均为0.00±0.00，同时观察大鼠神智意识、精神状态、心率、呼吸和四肢活动灵活性，同时观察注射后有无异常不良反应。 3.2收集干细胞观察干细胞融合达80%-90%时0.25%胰酶-EDTA消化，离心1000转5分钟，重新加入培养基，显微镜下进行细胞计数，控制在1×106个/ml的浓度，收集备用移植。结果 1.脐带华尔通胶（Whartoncs jelly，WJ）组织贴壁法，DMEM/F12体外原代培养7天可见细胞游出，放射状生长，呈菱形或条索状，细胞扁长饱满，集落增殖明显，培养到20天左右可达90%以上融合，细胞最为旺盛;连续细胞传代增殖较快，2-3天细胞融合达90%以上，继续行细胞传代。 2.使用不锈钢网贴壁培养，细胞游出明显加快，干细胞数量明显增加，细胞增殖传代时间缩短;对其细胞形态变化无影响。 3.流式细胞仪检测干细胞高表达CD44、CD90;不表达或低表达CD24、CD34。 4.严格按照遵循慢冻速融的原则（4℃冰箱30min→-20℃冰箱冷冻室30min→-80℃低温冰箱过夜→-194℃液氮保存。）进行细胞的冻存和复苏;复苏后干细胞形态结构、生长状况、增殖情况等与冻存前一致。 ***和GDNF免疫荧光染色在人脐带间充质干细胞中的表达结果显示整个细胞都有明显表达，同个区域分布均匀一致，以胞浆表达最为明显;呈现绿色时，细胞核不明显;呈现棕褐色表达时，细胞核明显可见。 6.参照Wamil等制作方法，落体致伤原理制成一撞击装置;按照大鼠脊髓打击造模成功的标准：脊髓打击损伤后可见大鼠后肢及躯体回缩弓背抽动、甩尾，随后弛缓性瘫痪，后肢肌肉完全松弛，B组、C组、D组、E组术后即刻进行BBB评分均为0.00±0.00，说明造模成功。 7.造模成功后立即行DMEM/F12和第4代人脐带间充质干细胞注射，分别对B组、C组、D组、E组移植后对大鼠进行神智意识、精神状态、心率、呼吸和四肢活动灵活性等各项指标检查未见异常，注射后未见不良反应。结论 1.采用带不锈钢网组织贴壁法，可以获得大量充足的间充质干细胞，可进一步增加细胞数量，提高分离纯化和流式鉴定的特异性。 2.在-194℃保存的细胞复苏后同样可以得到形态良好的干细胞。 3.人脐带间充质干细胞可明显表达BDNF和GDNF。 4.自制打击器打击大鼠脊髓可成功制造大鼠脊髓损伤模型，进行下一步实验。第二部分人脐带间充质干细胞蛛网膜下腔移植治疗脊髓损伤的疗效观察目的探讨蛛网膜下腔移植对损伤脊髓的疗效观察。方法 1.随机分组：A组为假手术组：大鼠常规手术进行脊髓暴露，不进行打击损伤，不做任何的移植。B组为单纯DMEM/F12脊髓内局部移植组：大鼠急性脊髓损伤打击模型造模成功后，止血使视野清晰，在距离T10

关键词：人脐带干细胞流式鉴定脊髓损伤模型制作蛛网膜下腔移植排斥反应免疫组化和荧光神经修复

基于高频注入法的永磁同步电机转子位置估计误差的分析

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基于高频注入法的永磁同步电机转子位置估计误差的分析

作者：高健伟山东大学

学位级别：硕士

在高性能交流调速系统中,永磁同步电机因其高效率高功率密度等特点被广泛应用。永磁同步电机的运行需要转子位置信息,通常采用机械位置传感器来提供转子位置信号。为了降低成本、减小体积,同时通过消除与传感器及相关连线连接来提高系... 详细信息

在高性能交流调速系统中,永磁同步电机因其高效率高功率密度等特点被广泛应用。永磁同步电机的运行需要转子位置信息,通常采用机械位置传感器来提供转子位置信号。为了降低成本、减小体积,同时通过消除与传感器及相关连线连接来提高系统的可靠性,近二十年来,无位置传感器控制技术已成为国内外学者致力研究的课题,高频信号注入法因其可以在包括零速在内的较宽转速范围内实现位置估计,并且具有位置估计精度对电机参数不敏感等优点,日益受到关注。首先,本文阐述了旋转高频电压信号注入法和脉动高频电压信号注入法实现转子位置检测的原理,构建了永磁同步电机的数学模型,进而对相关的高频电流响应公式做了必要的推导与进一步整理。其次,分析了定子电阻对旋转和脉动两种高频电压注入法的影响,将定子电阻和转速ωr考虑在内,经推导得到了考虑定子电阻时两种高频电压注入法下的高频电流响应稳态表达式,并进一步导出了由定子电阻引起的稳态位置估计误差表达式。得到的结论是：旋转高频电压注入时定子电阻对转子位置估算有影响;而对于脉动高频电压注入法,在忽略速度电动势的条件下定子电阻对转子位置估算没有影响。然后,在计及定子电阻影响的高频电流表达式基础上,对高频注入法中滤波器对转子位置估计误差的影响进行了深入的理论分析,推导得出了考虑滤波器频率特性时旋转电压注入和脉动电压注入的转子位置估计误差表达式。结果表明：旋转高频电压注入中,考虑滤波器影响后转子位置估计误差由定子电阻引起的相位误差和滤波器产生的相位误差两部分组成,其中滤波器引起的误差取决于滤波器在频率为(ωc-2ωr)时的相位滞后角,与电机参数无关;脉动高频电压注入中,转子位置估计误差取决于滤波器在频率为(ωc+ωr)和(ωc-ωr)时相位滞后角的差,同时还和电机参数有关,对Lq/Ld比值较小的电机,如果没有有效地补偿,在转速较高时脉动高频电压注入可能无法跟踪转子位置。根据两种方法提取转子位置误差信号ε的方法不同,分别给出了位置估计误差的补偿方法。为了讨论速度电动势对高频电压注入法的影响,推导得出了同时考虑速度电动势和定子电阻时两种高频电压注入法的高频电流响应稳态表达式,进而得到了由速度电动势引起的稳态位置估计误差表达式。得到的结论是：旋转高频电压注入时,速度电动势对转子位置估算的影响很小,可以忽略;脉动高频电压注入时,估算误差与电机的凸极比有关,Lq/Ld值较低时,位置估算误差会随着转速增加而显著增大。最后,为了验证理论分析的正确性,用MATLAB/Simulink分别构建了基于旋转和脉动高频电压信号注入法的永磁同步电机转子位置估算的仿真模型,对具有不同凸极比的电机进行了一系列仿真研究,仿真结果验证了理论分析的正确性。

关键词：永磁同步电机高频信号注入法转子位置估算误差速度电动势滤波器

精准医学时代的晚期非小细胞肺癌内科治疗进展

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医学研究生学报 2017年第11期30卷 1121-1127页

作者：宋勇高健伟南京大学医学院附属金陵医院(南京军区南京总医院)呼吸内科南京210002

非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌最常见的组织学类型,约占肺癌总数的85%,并可进一步分为腺癌、鳞状细胞癌等。随着肺癌精准治疗时代的到来,NSCLC又被分为驱动基因阳性和驱动基因阴性2种类型。目前对于驱动基因阴性的NSCLC患者,铂类为基础的... 详细信息

非小细胞肺癌(NSCLC)是肺癌最常见的组织学类型,约占肺癌总数的85%,并可进一步分为腺癌、鳞状细胞癌等。随着肺癌精准治疗时代的到来,NSCLC又被分为驱动基因阳性和驱动基因阴性2种类型。目前对于驱动基因阴性的NSCLC患者,铂类为基础的化疗方案仍是治疗的基准;抗血管药物也逐渐成为肺癌治疗的重要手段。而对于驱动基因阳性的NSCLC患者,除标准的1代EGFR-TKI、ALK-TKI等药物外,目前已经发展出第2、3代药物用于一线或耐药后的治疗。针对免疫检查点的抑制剂成为NSCLC治疗的新方向。文中总结了近年来晚期NSCLC化疗、抗血管治疗、靶向治疗、免疫治疗领域的新进展。

关键词：非小细胞肺癌化疗靶向治疗抗血管治疗免疫疗法

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四川凉山州9种野生蘑菇的重金属含量

应用与环境生物学报 2006年第3期12卷 348-351页

作者：张丹高健伟郑有良李登煜中国科学院/水利部成都山地灾害与环境研究所成都610041 四川农业大学农学院四川雅安625014

报道了采集于四川凉山州9种野生蘑菇及相关土壤的重金属Cd、Ph、Zn、Hg和As的含量．结果表明，供试土壤均未检出Hg，3个采集地除会理林家山土壤样品有Cd的检出，另外两个样地土壤未检出Cd．土壤中Ph、Zn和As在干土中的含量分别为52．806... 详细信息

报道了采集于四川凉山州9种野生蘑菇及相关土壤的重金属Cd、Ph、Zn、Hg和As的含量．结果表明，供试土壤均未检出Hg，3个采集地除会理林家山土壤样品有Cd的检出，另外两个样地土壤未检出Cd．土壤中Ph、Zn和As在干土中的含量分别为52．8064～274．7310mg／kg、18．7475～164．5858mg／kg和3．9709～10．7499mg／kg．野生蘑菇对Cd和Hg具有很强的积累能力，在土壤中没有Cd和Hg检出的情况下，蘑菇中均测出了Cd和Hg，Cd含量高达28．3836mg／kg出现在梭孢环柄菇（Lepita ventriosospora），Hg含量最高为0．8607mg／kg出现在大白菇（Russula delica）．在土壤受Ph污染的情况下，大白菇子实体积累Ph的能力最强，含量为115．9290mg／kg．本次蘑菇样品Zn的含量不高．蘑菇对As的积累与土壤中As含量高低有关，最高含量为喇叭陀螺菌（Gomphus floccosus），为4．0035mg／kg．表明蘑菇对重金属的积累具有种特异性，与环境土壤重金属含量有关．基于蘑菇对重金属的强积累能力，可考虑作为净化重金属污染环境的特种生物．

关键词：凉山州野生蘑菇重金属

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胰腺癌的精准分期及临床价值

中华肝胆外科杂志 2018年第2期24卷 139-144页

作者：邱翔宇高健伟王新波南京大学医学院附属金陵医院解放军南京总医院普通外科 210002

胰腺癌是恶性程度最高的肿瘤之一，发病率在我国呈逐年上升的趋势。针对胰腺癌的治疗已进人多学科综合治疗时代。为选择最佳治疗方式，实现尽可能改善患者预后的目的，寻找更精准的胰腺癌临床分期方法势在必行。胰腺癌主要的临床分期方... 详细信息

胰腺癌是恶性程度最高的肿瘤之一，发病率在我国呈逐年上升的趋势。针对胰腺癌的治疗已进人多学科综合治疗时代。为选择最佳治疗方式，实现尽可能改善患者预后的目的，寻找更精准的胰腺癌临床分期方法势在必行。胰腺癌主要的临床分期方法，除了传统的TNM分期，还有肿瘤组织病理学分期（G）、术后切缘分期（M）。此外，还需考虑是否有淋巴管侵犯（L）、血管侵犯（V）、神经侵犯（P）。这些分期方法联合起来又被美国国立综合癌症网（NCCN）制定的指南推荐为一种新的分期方案，即综合（GTNMLVP）分期。除此之外还有边界可切除状态分期、胰腺外科规范化分期、基因学分期等。本文就胰腺癌精准分期及其临床价值进行综述。

关键词：胰腺癌分期边界可切除状态综合(GTNMLVP)分期胰腺外科规范化分期基因学分期

国内胸腰椎压缩性骨折内固定术后断钉的原因及处理

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中国矫形外科杂志 2006年第22期14卷 1727-1728页

作者：高健伟郭红燕朱大成解放军第88医院全军骨科中心泰安市271000 解放军第88医院神经内科泰安市271000

经椎弓根系统内固定在临床上已广泛应用,但随之也出现了一些并发症,远期并发症中最常见于断钉,相关文献报道为7.1%－23.3%不等。目前不管哪种椎弓根系统内固定,几乎都存在断钉断棒现象,对骨折愈合产生不利影响。[第一段]

关键词：骨折内固定术后断钉胸腰椎压缩性椎弓根系统远期并发症国内骨折愈合

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胸椎管内肿瘤2例误诊报告

中国矫形外科杂志 2006年第9期14卷 702-702,i0004页

作者：高健伟朱大成孟新吴修辉解放军第88医院骨科泰安271000 平阴县人民医院骨科 250400 莱芜市中医院骨科 271100

例1,患者,男性,46岁。因双下肢无力,行走不便8个月余入院。曾因上腹部疼痛就诊院外多家医院,按胆囊炎、胃炎应用药物针对胃炎、胆囊炎的治疗后未见疗效,应用止痛药物可暂时缓解。近来病人症状逐渐加重,就诊本院。入院查体:脊柱无侧弯畸... 详细信息

例1,患者,男性,46岁。因双下肢无力,行走不便8个月余入院。曾因上腹部疼痛就诊院外多家医院,按胆囊炎、胃炎应用药物针对胃炎、胆囊炎的治疗后未见疗效,应用止痛药物可暂时缓解。近来病人症状逐渐加重,就诊本院。入院查体:脊柱无侧弯畸形,双下肢跛行,需人搀扶;T7、8棘突间隙轻压痛及叩击痛;双下肢肌力减弱,3级,肌张力高。皮肤感觉自脐以下减退。腹壁反射及提睾反射减弱。双髌阵挛及踝阵挛阳性。双膝腱及跟腱反射活跃,双巴氏征阳性。行胸段MRI检查示:T7、8椎体水平髓外硬膜内占位,考虑神经源性肿瘤。[第一段]

关键词：胸椎管内肿瘤误诊报告双下肢无力腱反射活跃神经源性肿瘤入院查体肌力减弱腹壁反射上腹部疼痛 MRI检查

溶液中多种金属离子共存对毛木耳生物吸附能力的影响

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生态环境 2008年第5期17卷 1822-1827页

作者：张丹高健伟马培何海江中国科学院水利部成都山地灾害与环境研究所四川成都610041 中国科学院地理研究所北京100101 中国科学院研究生院北京100081

用毛木耳(Auricularia polytricha)菌丝体的死细胞作为生物吸附剂吸附溶液中的Cd2+、Cu2+和Pb2+。用原子吸收分光光度计测定吸附前后溶液金属离子的变化,研究了溶液中两种离子共存对毛木耳吸附能力的影响。结果表明:溶液中Pb2+的存在抑... 详细信息

用毛木耳(Auricularia polytricha)菌丝体的死细胞作为生物吸附剂吸附溶液中的Cd2+、Cu2+和Pb2+。用原子吸收分光光度计测定吸附前后溶液金属离子的变化,研究了溶液中两种离子共存对毛木耳吸附能力的影响。结果表明:溶液中Pb2+的存在抑制了毛木耳对Cd2+的吸附,是负向干扰;Cd2+的存在促进了毛木耳对Pb2+的吸附,是正向干扰;Cu2+的存在促进了毛木耳对Pb2+的吸附,是正向干扰;Pb2+的存在抑制了毛木耳对Cu2+的吸附,是负向干扰;Cd2+对Cu2+的影响作用不如Cu2+对Cd2+的影响明显。实验结果为毛木耳作为重金属污染废水的处理材料提供理论依据。

关键词：镉离子铅离子铜离子共存毛木耳菌丝体生物吸附

介绍一种自主研发的治疗腰椎滑脱的新型复位系统

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中国矫形外科杂志 2007年第23期15卷 1785-1788页

作者：朱大成张强陈君生国华高健伟解放军第88医院全军骨科中心山东泰安271000 解放军第306医院全军脊柱外科中心北京100000

[目的]评价运用作者自主研发的滑脱复位系统治疗峡部不连性腰椎滑脱症治疗效果,改变手术操作顺序,对神经根彻底减压提高治疗效果。[方法]对62例腰椎峡部不连性滑脱病人采用本系统加SRS治疗回顾和分析,并按复位效果、症状改善、椎间植骨... 详细信息

[目的]评价运用作者自主研发的滑脱复位系统治疗峡部不连性腰椎滑脱症治疗效果,改变手术操作顺序,对神经根彻底减压提高治疗效果。[方法]对62例腰椎峡部不连性滑脱病人采用本系统加SRS治疗回顾和分析,并按复位效果、症状改善、椎间植骨融合,内固定材料牢固情况进行疗效评价。[结果]术后经1-6年（平均2年5个月）随访,根据NaKai评分标准优43例,良16例,可3例,无症状加重病例。无内固定松动断裂发生。[结论]新型滑脱复位系统加SRS治疗峡部不连性腰椎滑脱症效果更为切实可靠,尤其对患有骨质疏松以及腰椎滑脱严重的病人能达到很好的复位及固定效果,更容易直视下打入椎弓根钉,可防止对神经的误伤、节约了手术时间并可减少术中出血,手术操作方法简便,效果满意。

关键词：滑脱提拉复位系统,SRS 腰椎滑脱症植骨融合