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转RIPs基因甜菜后代分子检测与抗丛根病性鉴定

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转RIPs基因甜菜后代分子检测与抗丛根病性鉴定

作者：马靖靖内蒙古农业大学

学位级别：硕士

甜菜是我国北方重要的经济作物,也是世界上重要的糖料作物。在甜菜生产中受到诸多病害的危害,其产量和品质受到严重的影响。甜菜坏死黄脉病毒侵染甜菜后产生丛根症状（Rhizomania），并导致田菜产质量大幅下降。在对甜菜病害的防治方法... 详细信息

甜菜是我国北方重要的经济作物,也是世界上重要的糖料作物。在甜菜生产中受到诸多病害的危害,其产量和品质受到严重的影响。甜菜坏死黄脉病毒侵染甜菜后产生丛根症状（Rhizomania），并导致田菜产质量大幅下降。在对甜菜病害的防治方法中,选育优良抗病品种是最有效而根本的途径。核糖体失活蛋白（RIPS）是对病毒、真菌、细菌等都具有抗性的一类可以抑制病原生长增殖的蛋白质。本实验在本课题组已获得转RIPs基因甜菜基础上,采用PCR、RT-PCR方法对第一代和第二代转RIPs基因甜菜进行外源基因整合和转录水平的分子鉴定,以揭示转RIPs基因甜菜的遗传稳定性。将分子鉴定结果为阳性的转基因植株种植在丛根病病圃中,进行体内丛根病病原——坏死黄脉病毒Western blot检测、形态、产质量鉴定以及生理特性的研究,以阐明转RIPs基因甜菜的抗丛根病性,为甜菜抗病分子育种创建新材料。实验取得的结果如下： 1利用PCR技术对转基因甜菜第一代和第二代植株进行检测,筛选出具有目的基因的植株,初步证明RIPs基因已经整合到甜菜基因组DNA上,转RIPs基因甜菜具有较好的遗传稳定性。利用RT-PCR检测RIPs基因表达量,表明该基因能够在转录水平表达。研究结果为甜菜抗病分子育种提供新材料。 2将转RIPs基因甜菜分别种植于无病地与丛根病地上,以野生型甜菜为对照,在形态、产量、品质方面进行对比。结果表明,无病地上,转基因甜菜形态正常,转RIPs基因甜菜平均单株重低于野生型甜菜,平均含糖率高于野生型甜菜;在丛根病地上,野生型甜菜叶片黄化,根发育受阻,根小,表现出感病症状,而转基因甜菜形态无异常,表现出抗病性。转RIPs基因甜菜的平均单株重高于野生型,平均含糖率较野生型的低。 3BNYVV Western blot检测结果表明转基因甜菜块根中病毒含量显著低于野生型甜菜,RIPs基因的转入可抑制BNYVV的繁殖,从而提高了甜菜的抗丛根病性。 4对转基因甜菜植株进行光合作用、氮代谢、防御酶系等生长和抗病相关生理指标的研究发现,在丛根病地上,表现出转RIPs基因甜菜植株的叶绿素含量、可溶性糖含量、SPAD值、几丁质酶与β-1,3-葡聚糖酶活性和多酚氧化酶活性都高于野生型植株的抗病生理特性。

关键词：转RIPs基因甜菜丛根病 PCR RT-PCR Western blot 生理特性

SDF-1和LGR5在结肠癌中的表达与临床病理关系

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SDF-1和LGR5在结肠癌中的表达与临床病理关系

作者：马靖靖安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5和基质细胞衍生因子-1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学染色SP法检测80例结肠癌和20例正常结肠组织中LGR5和SDF-1的表达情况,并分析比较与结肠癌... 详细信息

目的:探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5和基质细胞衍生因子-1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学染色SP法检测80例结肠癌和20例正常结肠组织中LGR5和SDF-1的表达情况,并分析比较与结肠癌患者临床分期、病理分级、远处转移等方面的关系,探讨其临床意义。结果:1.G蛋白偶联受体5的表达及与结肠癌各临床病理因素的关系①LGR5在术后证实为切缘阴性的癌旁5cm结肠组织中和结肠癌组织中表达的阳性率分别为5.00%(1/20)和55.00%(44/80)。两者阳性率比较差异有统计学意义(PⅡC期组(65.30%)的阳性率较≤Ⅱc期组(38.70%)的显著升高(P0.05)。②LGR5表达的阳性率与结肠癌患者的年龄大小,性别无关,差别无统计学意义。(P>0.05,P>0.05)。2.基质细胞衍生因子-1的表达及与结肠癌各临床病理因素的关系①SDF-1在术后证实为切缘阴性的癌旁5cm结肠组织中和结肠癌组织中表达的阳性率分别为15.00%(3/20)、61.25%(49/80)。结肠癌组的阳性率明显增加(PⅡC期组的阳性率(73.47%)较临床TNM与Dukes分期≤ⅡC期组(41.93%)明显增加(P0.05,P>0.05)。***5和SDF-1二者在结肠癌组织中表达的相关性在结肠癌组织中随着LGR5表达的增强,SDF-1表达的阳性率递增。二者呈轻度正相关(R=0.260,χ2=5.43,0.01

关键词：结肠癌 G 蛋白偶联受体 5 基质细胞衍生因子-1 免疫组织化学

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促炎性反应脂肪因子内脂素在胆石病中的表达

中国实用外科杂志 2011年第S2期31卷 51-53页

作者：张杰褚亮马靖靖郭安河刘群蚌埠医学院第二附属医院普外一区安徽蚌埠233040 蚌埠医学院第二附属医院病理科安徽蚌埠233040 蚌埠医学院第二附属医院检验中心安徽蚌埠233040

目的探讨血清内脂素在胆石病中是否发生异常表达。方法采用酶联免疫吸附法分别对79例胆固醇结石、71例胆色素结石病人和223例健康对照组人群的血清内脂素水平进行测定。胆石的化学构成分析由术后病理确定。结果与健康对照组相比,胆固醇... 详细信息

目的探讨血清内脂素在胆石病中是否发生异常表达。方法采用酶联免疫吸附法分别对79例胆固醇结石、71例胆色素结石病人和223例健康对照组人群的血清内脂素水平进行测定。胆石的化学构成分析由术后病理确定。结果与健康对照组相比,胆固醇和胆色素结石病病人血清内脂素水平明显增高。增高的内脂素水平与胆固醇和胆色素结石的形成有关。胆固醇结石病人及健康对照组的血清内脂素水平与白细胞数呈明显正相关,且对于体重指数≥25的胆固醇结石病人,其正相关性显著高于体重指数<25的病人。结论胆石病与血清内脂素水平变化相关。胆石病中血清内脂素促炎性效应值得进一步研究。

关键词：内脂素胆石脂肪因子胆固醇色素肥胖

PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值

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中国老年学杂志 2015年第18期35卷 5175-5176页

作者：马靖靖刘付宝安徽医科大学安徽合肥230000

目的探讨PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值。方法选取80例健康对照者为对照组,80例结直肠癌患者为观察组,应用流式细胞术检测结肠黏膜组织PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白的表达。比较各组PTEN、Kindlin-2和D... 详细信息

目的探讨PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值。方法选取80例健康对照者为对照组,80例结直肠癌患者为观察组,应用流式细胞术检测结肠黏膜组织PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白的表达。比较各组PTEN、Kindlin-2和DcR3表达情况及其与结直肠癌患者不同临床特征的关系,PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白表达量与患者生存的关系。结果相比于对照组,观察组PTEN蛋白表达量明显下降(P<0.05);观察组Kindlin-2蛋白表达量明显上升(P<0.05);观察组DcR3蛋白表达量明显上升(P<0.05)。PTEN、Kindlin-2和DcR3的表达与结直肠癌的淋巴结转移、Dukes分期及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达密切相关(P<0.05)。结直肠癌患者PTEN(χ2=12.23,P=0.031),Kindlin-2(χ2=7.23,P=0.042)与DcR3(χ2=14.35,P=0.021)与生存密切相关,PTEN蛋白表达阴性、Kindlin-2蛋白表达阳性、DcR3蛋白表达阳性的患者预后较差。结论结直肠癌中PTEN、Kindlin-2和DcR3异常表达对肿瘤的进展有重要意义,联合检测三者表达可能有助于预后判断。

关键词：结直肠癌 PTEN Kindlin-2 DcR3

多学科协作教学模式在甲状腺肿瘤临床实习教学中的应用

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科教导刊 2022年第31期 73-75页

作者：马靖靖张磊王晓丹刘飞蚌埠医学院第二附属医院肿瘤外科安徽蚌埠233000

目的:探讨多学科协作教学模式在甲状腺肿瘤临床实习教学中的应用价值。方法:选取2020年10月-2021年4月前来蚌埠医学院第二附属医院甲状腺外科实习的60名医学生为研究对象。采用双盲随机的方法,将其分为对照组和观察组各30例。对照组采... 详细信息

目的:探讨多学科协作教学模式在甲状腺肿瘤临床实习教学中的应用价值。方法:选取2020年10月-2021年4月前来蚌埠医学院第二附属医院甲状腺外科实习的60名医学生为研究对象。采用双盲随机的方法,将其分为对照组和观察组各30例。对照组采用传统授课,以讲解为基准学习知识(LBL);观察组采用多学科协作(MDT)教学方案,比较两组的临床操作能力分数和基础知识考核分数、学生教学满意度、综合能力。结果:观察组的操作能力分数和基础知识考核分数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组教学满意率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组满意度、理解能力水平、自学能力水平以及学习兴趣得分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:学科协作教学模式应用于甲状腺肿瘤临床实习教学,可提升医学生的实践操作能力、提高教学满意度,该模式值得进一步推广。

关键词：多学科协作教学模式甲状腺肿瘤实习教学临床操作能力

ER、Her-2、Ki-67在原发灶和复发灶中表达差异观察

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临床和实验医学杂志 2022年第7期21卷 758-761页

作者：安赵王晓丹刘飞马靖靖金功圣蚌埠医学院第二附属医院肿瘤外科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科安徽蚌埠233004

目的研究雌激素受体(ER)、人表皮生长因子受体-2(Her-2)、细胞核增殖抗原(Ki-67)在原发灶和复发灶中的表达差异。方法回顾性选择2017年3月至2021年3月蚌埠医学院第二附属医院收治的82例局部复发乳腺癌患者作为研究对象。使用免疫组织化... 详细信息

目的研究雌激素受体(ER)、人表皮生长因子受体-2(Her-2)、细胞核增殖抗原(Ki-67)在原发灶和复发灶中的表达差异。方法回顾性选择2017年3月至2021年3月蚌埠医学院第二附属医院收治的82例局部复发乳腺癌患者作为研究对象。使用免疫组织化学法和荧光原位杂交技术(FISH)检测患者原发灶和复发灶中ER、Her-2、Ki-67表达。观察ER、Her-2、Ki-67在原发灶、复发灶中的表达。结果乳腺癌患者原发灶中ER、Her-2、阳性表达率分别为54.88%、24.39%,复发灶中ER、Her-2阳性表达率分别为51.22%、19.51%,两种病灶中ER、Her-2阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);原发灶和复发灶中Ki-67高表达率分别为52.44%、71.95%,复发灶中Ki-67高表达比率较原发灶高,差异有统计学意义(P0.05);临床分期为Ⅲ或Ⅳ期的患者ER表达不一致率较高(P<0.05)。结论局部复发乳腺癌患者的原发灶和复发灶中ER、Her-2、Ki-67的表达存在较高的一致性,但仍含有部分患者的表达存在一定差异,临床有必要同时检测患者的原发灶和复发灶,可能有助于临床治疗方案的选择。

关键词：乳腺癌雌激素受体人表皮生长因子受体-2 Ki-67蛋白预后

甜菜生育过程中锌素含量变化规律及其吸收性能研究

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内蒙古农业大学学报（自然科学版） 2014年第5期35卷 17-23页

作者：邵世勤邵科马靖靖张少英内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010018 内蒙古农业大学甜菜生理研究所呼和浩特010018

以6个甜菜品种为材料，在田间试验条件下，研究了不同生育期甜菜锌素含量变化、积累量及其分配、吸收性能和需求量，以其揭示甜菜体内锌素变化规律和为合理施锌提供科学依据。结果表明：1）甜菜植株中锌素含量在不同生育期有所变化和差... 详细信息

以6个甜菜品种为材料，在田间试验条件下，研究了不同生育期甜菜锌素含量变化、积累量及其分配、吸收性能和需求量，以其揭示甜菜体内锌素变化规律和为合理施锌提供科学依据。结果表明：1）甜菜植株中锌素含量在不同生育期有所变化和差异，含量最多的时期在苗期（5月22日），其含量分别为植株中52．69mg／kg、叶丛中54．41me,／kg、块根中38．86mg／kg，到收获期分别降为14．63mg／kg、21．04mg／kg和13．09mg／kg；2）锌素在植株中积累量随生育进程由少到多，到收获期每株甜菜积累量平均为6．29mg／株；其分配特点是：叶丛快速生长期以前，锌素分配在叶丛中多于块根，从块根及糖分增长期到收获期块根中的分配量多于叶丛；3）甜菜对锌素吸收性能最强的时期在苗期至叶丛快速生长期，每天每株甜菜吸收锌素0．073mg，其次在叶丛快速生长期至块根及糖分增长期（O．072mg／株·d），这两个时期占生育期总吸收性能的62．50％；4）甜菜需锌素量为5．61g/吨甜菜（品种间为5．08～5．92g），需锌素量为32．82mg／公斤糖（品种间为30．81—33．85mg）。

关键词：甜菜锌素含量积累量吸收性能需求量

SDF-1和LGR5在结肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系

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中国老年学杂志 2015年第5期35卷 1243-1244页

作者：马靖靖刘付宝冯振中蚌埠医学院第二附属医院普外二科安徽蚌埠233000 安徽医科大学第一附属医院蚌埠医学院第一附属医院病理科

目的探讨结肠癌组织中基质细胞衍生因子(SDF)-1和富含亮氨酸重复序列的G蛋白耦联受体(LGR)5在人结肠癌中的表达情况及其与结肠癌发生、发展及预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测SDF-1及LGR5在结肠癌组织标本80例以及癌旁正常结肠... 详细信息

目的探讨结肠癌组织中基质细胞衍生因子(SDF)-1和富含亮氨酸重复序列的G蛋白耦联受体(LGR)5在人结肠癌中的表达情况及其与结肠癌发生、发展及预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测SDF-1及LGR5在结肠癌组织标本80例以及癌旁正常结肠组织标本20例中的表达水平,分析其与临床病理因素之间的关系。结果结肠癌组织中SDF-1和LGR5阳性表达率分别为61.25%(49/80)、55.00%(44/80),SDF-1以及LGR5在癌旁正常组织中的阳性率分别为15.00%(3/20)和5.00%(1/20),两者存在显著差异。SDF-1的表达与肿瘤分化程度、TNM分期以及远处转移相关(P0.05)。LGR5在结肠癌组织中的阳性表达与TNM分期以及远处转移相关(P0.05)。结论 SDF-1、LGR5在结肠癌发生、发展过程中起到促进的作用,有可能作为结肠癌早期筛查和后期靶向治疗的肿瘤分子标志物,同时可能为结肠癌患者的治疗开辟新的途径。

关键词： SDF-1 LGR-5 结肠癌

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华南与东南亚钨锡成矿作用对比

大地构造与成矿学 2024年

作者：洪涛马靖吴琪张璋广东省地球动力作用与地质灾害重点实验室中山大学地球科学与工程学院南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海) 自然资源部信息中心

钨锡是重要的战略性关键矿产,也是我国传统的优势矿产资源。本文对我国重要的华南钨锡产区以及全球知名的东南亚锡成矿带进行了系统的总结与梳理,分析表明:(1)与钨矿化有关的岩浆岩多为陆壳重熔S型花岗岩;与锡矿床相关的岩浆岩可为S型、... 详细信息

钨锡是重要的战略性关键矿产,也是我国传统的优势矿产资源。本文对我国重要的华南钨锡产区以及全球知名的东南亚锡成矿带进行了系统的总结与梳理,分析表明:(1)与钨矿化有关的岩浆岩多为陆壳重熔S型花岗岩;与锡矿床相关的岩浆岩可为S型、I型和A型花岗岩等,其所处位置壳幔相互作用强烈;(2)华南与东南亚地区的钨锡成矿作用可能主体受控于特提斯构造带的演化,在华南地区形成了160～150 Ma、150～140 Ma、100～80 Ma的锡成矿峰期, 160～150 Ma钨成矿峰期,并且呈现“钨多锡少、东钨西锡”的时空分布格局;而东南亚地区只有80 Ma的锡成矿峰期,并没有大规模的钨成矿作用;(3)对比两个成矿产区发现:构造背景、沉积物特征(东南亚地区缺少钨的矿源层)和岩浆活动与性质(氧逸度等)等方面的影响因素,以及W与Sn元素不同的地球化学性质,可能控制了华南与东南亚地区钨锡时空分布的差异性。

关键词：钨锡华南与东南亚成矿作用特提斯构造演化