检索结果-南通市图书馆

水稻酵母双杂交文库构建及PID2胞内结构域互作蛋白的筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2022年第12期20卷 3931-3937页

作者：孙一丁杨奕刘畅媛马继琼许明辉云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业农村部西南作物基因资源与种质创制重点实验室昆明650223 云南农业大学植保学院昆明650201

为了进一步挖掘水稻PID2胞内互作蛋白质,阐明Pid2介导的稻瘟病抗性机制。本研究利用SMART技术,构建了受稻瘟病诱导后不同时间段的含抗性基因Pid2水稻材料的cDNA文库;通过PCR扩增获得PID2胞内结构域编码片段Pid2-JM,构建了诱饵表达载体pG... 详细信息

为了进一步挖掘水稻PID2胞内互作蛋白质,阐明Pid2介导的稻瘟病抗性机制。本研究利用SMART技术,构建了受稻瘟病诱导后不同时间段的含抗性基因Pid2水稻材料的cDNA文库;通过PCR扩增获得PID2胞内结构域编码片段Pid2-JM,构建了诱饵表达载体pGBK-Pid2-JM,并进一步利用酵母双杂交技术筛选Pid2-JM的互作蛋白。结果表明,构建的cDNA酵母文库细胞密度为9.0×10;Cells/mL,文库插入片段在500~2000 bp之间,重组率为100%,诱饵载体无自激活活性;利用诱饵载体经筛选文库后,新发现一个能与Pid2-JM互作的U-box类E3泛素连接酶PBP1,经回转试验验证了PBP1与Pid2-JM可在烟草细胞内互作。综上,本研究成功构建了稻瘟病诱导下的水稻酵母双杂交文库,并筛选到一个能与PID2胞内结构域互作的U-box类E3泛素连接酶,该结果为进一步揭示水稻抗稻瘟病信号转导机制提供参考。

关键词：稻瘟病酵母双杂交 Pid2 互作蛋白 E3泛素化连接酶

水稻化感抗(耐)稗草相关转录因子OsMYB57的靶蛋白筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方农业学报 2022年第1期53卷 29-37页

作者：张翠马继琼杨奕许明辉孙一丁郭怡卿云南农业大学植物保护学院昆明650201 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所昆明650205

【目的】揭示水稻化感抗(耐)稗草的转录调控机制,为遗传修饰改良水稻化感性状做铺垫,也为杂草的防控提供新途径。【方法】利用SMART技术,通过同源重组方式,在Y2H菌株中构建水稻受稗草胁迫的酵母cDNA文库;利用限制性内切酶BamHⅠ和NdeⅠ... 详细信息

【目的】揭示水稻化感抗(耐)稗草的转录调控机制,为遗传修饰改良水稻化感性状做铺垫,也为杂草的防控提供新途径。【方法】利用SMART技术,通过同源重组方式,在Y2H菌株中构建水稻受稗草胁迫的酵母cDNA文库;利用限制性内切酶BamHⅠ和NdeⅠ构建OsMYB57 C端缺失的pGBK-OsMYB57诱饵载体,按照Yeastmaker^(TM) Yeast TransformationSystem 2操作检测诱饵自激活活性;用酵母双杂交技术筛选OsMYB57互作蛋白,将所得互作蛋白的编码序列构建至pGAD载体,并与诱饵载体共转化Y2HGold菌株验证蛋白互作,再以BiFC技术进一步验证蛋白间的互作。【结果】酵母cDNA文库库容量为1.36×10^(7) CFU/mL,插入片段在250~2000 bp,平均长度大于1000 bp,重组率为100%,库容量大且质量良好;筛选出4个有注释的互作蛋白,分别是16号RZFP34、50号4HTR、51号BM1PD和74号GTP1;回转验证及BiFC结果显示RZFP34、4HTR、BMIPD、GTP1与OsMYB57在植物细胞中相互作用,其中RZFP34是一个E3亚型泛素连接酶,在植物中响应非生物逆境胁迫应答,且水稻OsRZFP34基因启动子区含有与水稻化感调控有关的水杨酸和茉莉酸等激素响应及MYB转录因子结合域相关元件。【结论】RZFP34通过与OsMYB57互作参与水稻化感转录调控而发挥作用。

关键词：水稻稗草互作化感抗(耐)性 OsMYB57 酵母双杂交

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

烤烟与晒烟品种同工酶差异初探

种子 1999年第3期18卷 6-7页

作者：许明辉孙雁马继琼云南农业大学农学院昆明650201

对来源中国、美国等国家的烤烟品种、晒烟品种9种同工酶进行了聚丙烯胺凝胶电泳分析。结果表明：品种间表现多态性的5种同工酶中，烤烟品种成熟期腰叶乳酸脱氢酶，花蕾中的过氧化物酶分别比晒烟品种多一条带，成为烤烟区别晒烟品种的同... 详细信息

对来源中国、美国等国家的烤烟品种、晒烟品种9种同工酶进行了聚丙烯胺凝胶电泳分析。结果表明：品种间表现多态性的5种同工酶中，烤烟品种成熟期腰叶乳酸脱氢酶，花蕾中的过氧化物酶分别比晒烟品种多一条带，成为烤烟区别晒烟品种的同工酶标记，这些标记可应用于烤烟和晒烟的杂交后代单株类型鉴定。

关键词：烤烟晒烟同工酶遗传差异品种

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

稻瘟病抗性对根际土壤微生物多样性的影响

生态科学 2022年第6期41卷 130-138页

作者：张翠孙一丁马继琼杨奕郭怡卿李进斌许明辉云南省农业生物技术重点实验室农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室昆明650205 云南农业大学植保学院昆明650201 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所昆明650205 云南省农业科学院农业环境资源研究所昆明650205

为了解稻瘟病抗性与根际土壤微生物之间的关系,在云南宜良大田条件下对6个稻瘟病单基因系Piz、Pib、Pikh、Pi19、Pi3、Pita和受体“丽江新团黑谷”(LTH)进行了诱发鉴定,利用ITS1和16SrDNA高通量测序技术对土壤根际真菌的ITS1序列以及细... 详细信息

为了解稻瘟病抗性与根际土壤微生物之间的关系,在云南宜良大田条件下对6个稻瘟病单基因系Piz、Pib、Pikh、Pi19、Pi3、Pita和受体“丽江新团黑谷”(LTH)进行了诱发鉴定,利用ITS1和16SrDNA高通量测序技术对土壤根际真菌的ITS1序列以及细菌16S rDNA区片段进行了分析。结果显示单基因系Piz、Pib、Pikh表现抗病, Pi19、Pi3、Pita和LTH表现感病;子囊菌门(Ascomycota)是真菌的优势门(73.41%),变形菌门(Proteobacteria)是细菌的优势门(32.48%),7个土样在主要微生物种类组成上相似;抗、感单基因系根际土壤真菌在罗兹菌门(Rozellomycota)(分别为7.69%和14.66%, LTH为5.59%)及其下属的罗兹菌种(Rozellomycota_sp)(分别为6.97%和13.99%, LTH为5.59%)和担子菌门(Basidiomycota)的伞菌纲(Agaricomycetes)(分别为1.2%和0.7%,LTH为1.7%)及伞菌目(Agaricale)(分别为1.1%和0.5%,LTH为1.6%)上存在显著性差异(P<0.05);细菌在变形菌门(Proteobacteria)的γ-变形菌纲未鉴定的目上存在显著性差异(P<0.05),相对平均丰度分别为10.02%和11.65%,受体LTH为8.55%,表明水稻抗性对根际土壤微生物丰度有影响。结果为探究稻瘟病的抗病机理和生物防治提供了线索。

关键词：稻瘟病单基因系土壤真菌土壤细菌 ITS1 16S rDNA

云南地方稻种抗稻瘟病基因Pi-d3序列变异分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国水稻科学 2016年第1期30卷 17-26页

作者：杨奕孙一丁马继琼王炎炎许明辉云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/云南省农业生物技术重点实验室/农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室昆明650223

对来自云南的80份地方稻种抗稻瘟病基因Pi-d3编码区序列进行了PCR扩增并测序分析。结果表明,与地谷相比,80份云南地方稻种的Pi-d3编码区序列(全长2775bp)存在39个变异位点,平均变异率为1.41%。所有材料可以归为37种单倍型,频率较高的单... 详细信息

对来自云南的80份地方稻种抗稻瘟病基因Pi-d3编码区序列进行了PCR扩增并测序分析。结果表明,与地谷相比,80份云南地方稻种的Pi-d3编码区序列(全长2775bp)存在39个变异位点,平均变异率为1.41%。所有材料可以归为37种单倍型,频率较高的单倍型是H8(28.8%)、H4(11.3%)、H23(5.0%),其他单倍型频率较低,显示了云南地方稻种Pid3基因变异丰富,单倍型类型多,但频率较低。37种单倍型中存在28个氨基酸差异位点,共编码33种蛋白,其中18种单倍型共计32份材料(包括12份籼稻品种)出现了假基因,假基因化的频率较高,可能是粳稻Pi-d3假基因化向籼稻渗透。除已发现的737位氨基酸假基因位点外,新发现32和467两个假基因位点。Pi-d3基因在籼稻、粳稻亚种,水稻、陆稻,黏稻、糯稻的单倍型类型及频率两方面均存在差异,表明亚种间或生态型间发生了一定的遗传分化。37种单倍型在云南的地理分布呈大分散、小聚居的特点,普洱、版纳、临沧的单倍型种类最丰富,并以之为中心向外扩展,单倍型种类随之减少。

关键词：云南地方稻种稻瘟病 Pi-d3基因单核苷酸多态性

烟草品种间同工酶遗传距离与杂种优势关系的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 1999年第2期7卷 117-122页

作者：许明辉马继琼刘广田 100094 中国农业大学植物育种系!北京南京农业大学农业部作物细胞遗传重点开放实验室!南京 210095

对烟草品种9种同工酶进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，苹果酸酶（苗期叶部1个位点，花蕾1个位点）、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（苗期叶部2个位点）、乳酸脱氢酶（大田旺长期叶1个位点）、过氧化物酶（旺长期叶部6个位点，花蕾4个位点）、酯... 详细信息

对烟草品种9种同工酶进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，苹果酸酶（苗期叶部1个位点，花蕾1个位点）、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（苗期叶部2个位点）、乳酸脱氢酶（大田旺长期叶1个位点）、过氧化物酶（旺长期叶部6个位点，花蕾4个位点）、酯酶（现蕾期叶部1个位点，花蕾1个位点）5个酶的17个位点品种间存在多态性，而淀粉酶、乙醇脱氢酶、酸性磷酸酶、苹果酸脱氢酶品种间无差异。据5种同工酶17个多态性位点计算的遗传距离对品种进行分类，各群基本由来源国家相同的品种构成。同工酶遗传距离与产量杂优无相关关系，但群间品种杂交比群内品种杂交更易获得杂优，可用同工酶遗传距离构建品种杂种优势群。

关键词：烟草同工酶遗传距离

利用组织培养成芋技术快速构建魔芋杂交品系的探索

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

西南农业学报 2016年第6期29卷 1398-1403页

作者：马继琼尹桂芳孙道旺杨奕王玲云南省农业生物技术重点实验室/农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室/云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南昆明650223

魔芋杂交种子休眠期长和种芋繁殖慢等特性,一粒杂交种子衍生为一个品系至少需3~4年,选育周期长成为杂交育种的主要障碍。本研究选取曲靖花魔芋异株人工授粉约1个月左右的幼嫩杂交种子,诱导愈伤组织和不定芽,获得了试管微型芋。研究表明... 详细信息

魔芋杂交种子休眠期长和种芋繁殖慢等特性,一粒杂交种子衍生为一个品系至少需3~4年,选育周期长成为杂交育种的主要障碍。本研究选取曲靖花魔芋异株人工授粉约1个月左右的幼嫩杂交种子,诱导愈伤组织和不定芽,获得了试管微型芋。研究表明：剥去绿色的外层果皮及叠生木栓组织后具有活性的杂交种子（块茎原始体）是诱导愈伤组织的最佳外植体;适宜诱导愈伤组织培养基是MS＋6BA 1.5 mg/L＋NAA 0.4 mg/L＋白糖3.0%,诱导率达100%;适宜诱导不定芽培养基是MS＋6BA 0.8 mg/L＋NAA 0.4 mg/L＋白糖3.0%,分化率达63%;适宜诱导试管微型芋培养基是1/2MS＋NAA 1.0 mg/L＋PP3330.4 mg/L＋白糖5.0%,诱导率为93%,培养35 d左右,收获试管芋平均1~3 g。本研究对幼嫩杂交种子组织培养和试管微型芋的培养技术进行了初探,1年内即可构建单粒杂交种子衍生的品系,为品系比较和选择提供了材料,为加速魔芋杂交育种进程提供了一项关键技术。

关键词：魔芋杂交种子组织培养试管微型芋

贵州地方水稻品种抗稻瘟病基因Pita功能区段序列变异分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分子植物育种 2018年第13期16卷 4129-4137页

作者：杨奕马继琼孙一丁许明辉云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南省农业生物技术重点实验室农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室昆明650223

为了揭示贵州水稻地方品种Pita基因序列变异类型和地理分布特点,以贵州省收集到的91份地方水稻品种为供试材料,设计抗稻瘟病Pita基因特异引物对Pita基因第二编码区功能位点区段进行PCR扩增及测序分析。研究表明,91份贵州地方水稻均持有... 详细信息

为了揭示贵州水稻地方品种Pita基因序列变异类型和地理分布特点,以贵州省收集到的91份地方水稻品种为供试材料,设计抗稻瘟病Pita基因特异引物对Pita基因第二编码区功能位点区段进行PCR扩增及测序分析。研究表明,91份贵州地方水稻均持有抗稻瘟病Pita基因,DNA序列存在6个变异位点,氨基酸序列存在4个变异位点,归为7种DNA单倍型和5种蛋白型,其中Pita-H1(63.74%)、Pita-H2(18.68%)的频率较高,是贵州的优势单倍型,其他单倍型频率较低。携带Pita抗性基因(编码区第2 752位功能位点碱基为G)的品种仅6个,占供试材料的6.59%,且与越南抗性品种Tetep序列一致。Pita抗性基因在贵州省广泛分布不平衡,且频率较低。本研究为挖掘和利用贵州地方稻种的抗稻瘟病基因资源提供了参考。

关键词：地方水稻品种稻瘟病Pita基因测序分析

复合肥配施生物炭对冬小麦-夏谷产量和品质的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复合肥配施生物炭对冬小麦-夏谷产量和品质的影响

作者：马继钰河北科技师范学院

学位级别：硕士

化肥配施生物炭可以有效提高作物的化肥利用效率和籽粒品质。为了揭示冀东地区冬小麦-夏谷轮作模式下生物炭与复合肥配施最佳施用量,本试验采用裂区设计,生物炭为主区（B）:设0 kg/hm（B1）、7500 kg/hm（B2）、15000 kg/hm（B3）3个处... 详细信息

化肥配施生物炭可以有效提高作物的化肥利用效率和籽粒品质。为了揭示冀东地区冬小麦-夏谷轮作模式下生物炭与复合肥配施最佳施用量,本试验采用裂区设计,生物炭为主区（B）:设0 kg/hm（B1）、7500 kg/hm（B2）、15000 kg/hm（B3）3个处理水平,复合肥为副区（F）:设0 kg/hm（F1）、225 kg/hm（F2）、450 kg/hm（F3）、675 kg/hm（F4）4个处理水平,研究复合肥和生物炭对冬小麦和夏谷的农艺性状、产量及产量构成因素、籽粒品质等的影响,最终筛选出适宜的施肥组合,旨在为冀东地区冬小麦-夏谷轮作模式下减肥增效、稳产优质栽培提供理论依据。主要研究结果如下:1.复合肥配施适宜生物炭施用量可以提高冬小麦和夏谷干物质积累量。冬小麦和夏谷的成熟期全株干物质积累量均分别在F2和F3处理下随生物炭的增加呈先升高后下降趋势,均在B2F3处理下最高,显著高于B1F4处理,分别增加3.34%和27.62%。2.复合肥配施适宜生物炭施用量可以提高冬小麦和夏谷产量和产量构成因素。冬小麦和夏谷的穗数在F2和F3处理下及产量在F3处理下随生物炭的增加呈先升高后下降趋势;二者的穗数和产量均在B2F3处理下达到最大值,较B1F4处理分别增加9.28%、2.77%和5.67%、20.83%;冬小麦的穗数和夏谷的产量均在B2F3处理下显著高于B1F4处理;复合肥配施生物炭较不配施相比,对穗粒数和千粒重无显著影响。3.复合肥配施适宜生物炭施用量可以不同程度提高冬小麦和夏谷籽粒品质。对不同处理下冬小麦和夏谷的籽粒品质进行研究发现,粗脂肪、支链淀粉、总淀粉和Fe含量在F2-F4处理下随生物炭的增加呈先上升后降低的趋势,均在B2F4处理下达到最大值,较B1F4处理分别增加26.77%、3.98%、4.39%、15.00%和15.14%、4.23%、4.57%、22.65%,氨基酸总含量分别在B2F2和B3F2处理下最高,分别是11.72%和5.10%。4.复合肥配施适宜生物炭施用量可以提高冬小麦和夏谷氮磷钾素积累量。冬小麦和夏谷全株的氮磷钾素积累量及吸收效率在F1-F4处理下均随生物炭的增加呈先上升后降低的趋势;夏谷全株的氮、钾积累量和冬小麦全株的磷积累量均在B2F3处理最高,显著高于B1F4处理,分别增加11.29%、36.04%和13.94%。5.复合肥配施生物炭能够提高土壤理化性质。相同复合肥处理下,冬小麦和夏谷收获后土壤的有机质、全氮、碱解氮和速效磷含量随生物炭的增加而增加,均在B3F4处理下达到最大值。6.综合分析冬小麦-夏谷轮作栽培模式下不同施肥处理下的作物农艺性状、产量、品质、氮磷钾积累、土壤养分等的影响,推荐冀东地区冬小麦-夏谷轮作栽培模式下减肥增效、稳产优质的施肥水平为450 kg/hm复合肥配施7500kg/hm生物炭。

关键词：冬小麦夏谷复合肥生物炭产量品质土壤养分