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病原体宏基因组高通量测序医院实验室本地化之路:现状和挑战

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中华检验医学杂志 2022年第2期45卷 100-104页

作者：韩东升马筱玲吴文娟浙江大学医学院附属第一医院检验科杭州310000 中国科技大学附属第一医院检验科合肥230001 同济大学附属东方医院南院检验科上海200123

病原体宏基因组高通量测序(mNGS)检测流程高度复杂,对环境、设备和人员技术能力要求高。如何在本地化有序发展、规范管理及合理使用mNGS技术,是从业者必须审慎对待的科学课题。本文对mNGS医院实验室本地化系统的建立模式,检测系统的分... 详细信息

病原体宏基因组高通量测序(mNGS)检测流程高度复杂,对环境、设备和人员技术能力要求高。如何在本地化有序发展、规范管理及合理使用mNGS技术,是从业者必须审慎对待的科学课题。本文对mNGS医院实验室本地化系统的建立模式,检测系统的分析性能确认,来自生物因子、检测流程、生物信息学分析及信息传输的风险管理,以及适用于临床的病原体数据库、生物信息学分析人才和诊断报告的需求等几个层面的问题进行了思考和讨论,以促进mNGS在医院内规范应用和健康发展。

关键词：宏基因组病原体高通量测序技术

《WS/T 807-2022临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证》解读

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中华检验医学杂志 2023年第6期46卷 532-536页

作者：王晓娟马筱玲吴文娟北京大学人民医院检验科北京100044 中国科技大学附属第一医院检验科合肥230001 同济大学附属东方医院南院检验科上海200123

中华人民共和国卫生行业标准《WS/T 807-2022临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证》已于2022年11月2日发布,2023年5月1日起实施。该卫生行业标准(推荐标准)是制定和实施微生物检验程序性能验证方案的依据和实验室质量管理的准... 详细信息

中华人民共和国卫生行业标准《WS/T 807-2022临床微生物培养、鉴定和药敏检测系统的性能验证》已于2022年11月2日发布,2023年5月1日起实施。该卫生行业标准(推荐标准)是制定和实施微生物检验程序性能验证方案的依据和实验室质量管理的准则,其目的是促进临床微生物检验领域的性能验证更加规范化和同质化。本文就卫生行业标准立项背景、编写情况、主要内容和实施难点及意义等进行解读和分析,以帮助临床微生物实验人员更充分地理解和执行卫生行业标准的相关规定,促进行业标准化和学科发展。

关键词：微生物学检测性能标准

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抗菌药物敏感性试验执行标准解读

临床检验杂志 2012年第10期30卷 776-778页

作者：马筱玲安徽医科大学附属省立医院检验科合肥230001

抗菌药物敏感性试验(药敏试验)在个体化治疗和经验治疗方面具有重要作用。规范药敏试验操作方法,减少试验误差,为临床提供准确的检验报告非常重要。目前我国多数临床实验室根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)的"抗菌药物敏感性试验执... 详细信息

抗菌药物敏感性试验(药敏试验)在个体化治疗和经验治疗方面具有重要作用。规范药敏试验操作方法,减少试验误差,为临床提供准确的检验报告非常重要。目前我国多数临床实验室根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)的"抗菌药物敏感性试验执行标准"进行药敏试验。本文对该标准中的重点内容进行解读,以便检验界同道能更好地理解和应用。

关键词：抗菌药物敏感性试验标准方法报告

《2015年CLSI药敏试验执行标准主要更新》

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《2015年CLSI药敏试验执行标准主要更新》

宏基因组二代测序技术在临床病原学诊断中的应用

中华医学会第十二次全国临床微生物学术年会暨第十一次全球...

作者：马筱玲安徽省立医院

抗菌药物治疗效果主要取决于感染部位药物浓度超过病原菌MIC的剂量和(或)时间。药敏试验执行标准不断更新的目的是为了能够更加精确的预测抗菌药物体内治疗效果,指导抗菌药物合理应用。主要包括:概念改变、折点改变、方法改变和药物适...

抗菌药物治疗效果主要取决于感染部位药物浓度超过病原菌MIC的剂量和(或)时间。药敏试验执行标准不断更新的目的是为了能够更加精确的预测抗菌药物体内治疗效果,指导抗菌药物合理应用。主要包括:概念改变、折点改变、方法改变和药物适应症及使用方法改变等几个方面。2015年CLSI药敏试验执行标准的主要更新为:(1)引入流行病学cutoff值Epidemiological Cutoff Value(ECV)的

关键词：

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临床检验杂志 2021年第1期39卷 1-5页

作者：戴媛媛马筱玲中国科学技术大学附属第一医院检验科合肥230000

感染性疾病是威胁人类生命健康的主要疾病,病原学诊断是感染性疾病诊治的关键环节。近年来,宏基因组二代测序技术(mNGS)迅速发展。与传统病原学检测技术相比,mNGS能无偏倚性直接分析出标本中的病原体谱、丰度和分布情况,改变传统病原学... 详细信息

感染性疾病是威胁人类生命健康的主要疾病,病原学诊断是感染性疾病诊治的关键环节。近年来,宏基因组二代测序技术(mNGS)迅速发展。与传统病原学检测技术相比,mNGS能无偏倚性直接分析出标本中的病原体谱、丰度和分布情况,改变传统病原学诊断模式,具有良好的应用前景。该文对mNGS在病原体检测、感染性疾病诊断、检测影响因素和结果判读等方面进行评述,并对存在问题和未来发展进行总结,以期促进mNGS技术合理应用。

关键词：宏基因组二代测序技术临床病原学诊断临床微生物学感染性疾病

抗环瓜氨酸肽抗体抗角蛋白抗体抗核周因子自制质量控制品的制备及评价

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中华风湿病学杂志 2020年第11期24卷 731-735页

作者：黄蓉陈素峰马筱玲安徽医科大学安徽省立医院检验科合肥230001 浙江省玉环市人民医院检验科 317600 浙江省人民医院检验科杭州310014

目的探讨实验室抗CCP、AKA、APF这3种自身抗体自制质控品的制备及评价,为其他自身抗体自制质控品的制备提供参考。方法将阳性血清和体检健康人群的阴性血清按比例进行混合,调制成所需浓度的混合血清,再进行56℃加热30 min灭活,离心过滤... 详细信息

目的探讨实验室抗CCP、AKA、APF这3种自身抗体自制质控品的制备及评价,为其他自身抗体自制质控品的制备提供参考。方法将阳性血清和体检健康人群的阴性血清按比例进行混合,调制成所需浓度的混合血清,再进行56℃加热30 min灭活,离心过滤后分装,置-20℃以下冰箱保存。检测20瓶质控品以及连续检测20次同瓶质控品计算变异系数(CV)值来测定混合血清的瓶间差。37℃水浴储存条件下每天检测10次求出偏差,来判断37℃条件下的稳定性。-20℃冷冻储存,每周检测1次,求出每月CV值,来判断长期稳定性。结果37℃条件下,在长达8 d的时间中,抗CCP抗体的偏倚都小于±20%的偏倚要求,AKA、APF的结果都在上下一个滴度的可接受范围内。在瓶间差测试中,抗CCP抗体的CV瓶间为3.2%,远<20%的瓶间差要求,而AKA、APF的瓶间差可视为0。在-20℃长期稳定性实验中,累计9个月的检测结果,抗CCP抗体总CV为10.6%,<20%的要求,AKA、APF结果都在上下一个滴度的可接受范围内。所有阴性质控品的检测结果均为阴性。结论抗CCP、AKA、APF这3种抗体自制混合血清质控品的性能良好,且该方法简单,可操作性强,适用于各级医院和实验室,也为其他自身抗体室内质控品的制备提供参考。

关键词：关节炎,类风湿自身抗体质量控制品

LukS-PV通过下调HDAC3抑制肝癌细胞增殖

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安徽医科大学学报 2020年第6期55卷 926-931页

作者：汪自然马凡丁篷生马筱玲安徽医科大学附属省立医院检验科合肥230001

目的研究金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分(LukS-PV)对肝癌(HCC)细胞增殖的影响并初步探究其机制。方法不同浓度(0.25、0.5、0.75、1μmol/L)的LukS-PV处理肝癌HepG2和Huh7细胞后,利用CCK-8法评估各组细胞增殖能力。泛乙酰化抗体检测LukS... 详细信息

目的研究金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分(LukS-PV)对肝癌(HCC)细胞增殖的影响并初步探究其机制。方法不同浓度(0.25、0.5、0.75、1μmol/L)的LukS-PV处理肝癌HepG2和Huh7细胞后,利用CCK-8法评估各组细胞增殖能力。泛乙酰化抗体检测LukS-PV作用后总体乙酰化水平的改变,定量蛋白组学检测LukS-PV作用HepG2细胞后蛋白表达谱的改变。利用TCGA数据库分析组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在HCC中的表达情况及预后相关性。使用RT-PCR和Western blot验证不同浓度LukS-PV作用HepG2和Huh7细胞后HDAC3 mRNA和蛋白水平的改变。使用特异性SiRNA敲低HDAC3后检测HCC细胞增殖能力的变化。结果 LukS-PV可以降低HCC细胞的增殖能力且呈时间依赖性和浓度依赖性。LukS-PV可以增加HepG2细胞的乙酰化水平,定量蛋白组学结果显示LukS-PV作用HepG2细胞后HDAC3表达下调。TCGA数据分析表明HCC组织中HDAC3 mRNA表达水平高于正常组织,高表达HDAC3的患者生存期低于低表达患者。LukS-PV在HepG2和Huh7细胞株中可以下调HDAC3的mRNA和蛋白水平。敲低HDAC3后可以降低HCC细胞HepG2和Huh7细胞的增殖能力。结论 LukS-PV可能通过下调HDAC3的表达抑制HCC细胞的增殖,为HCC的精准靶向治疗提供了新的研究思路。

关键词：杀白细胞素肝细胞癌组蛋白去乙酰化酶3

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细菌学检验结果评价及临床应用

细菌学检验结果评价及临床应用

中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床...

作者：马筱玲安徽省立医院检验科

人体与外界相通的器官是指呼吸道、消化道和泌尿生殖道等相应部位的器官,这些部位的共同特点是有正常菌群寄生。寄生的正常菌群一方面可能会污染标本,造成假阳性;另一方面,也可能会是真正的感染菌。因此,对这些器官感染标本的细菌学检...

人体与外界相通的器官是指呼吸道、消化道和泌尿生殖道等相应部位的器官,这些部位的共同特点是有正常菌群寄生。寄生的正常菌群一方面可能会污染标本,造成假阳性;另一方面,也可能会是真正的感染菌。因此,对这些器官感染标本的细菌学检验结果进行合理评价非常必要。1、下呼吸道感染标本:诊断下呼吸道感染最常用的方法是痰培养。影响痰培养结果的因素有:标本的采集及运送、标本处理方法和结果的判断等。本专题拟讨论的问题:(1)痰培养的临床应用价值;(2)痰涂片的时机、方法及应用;(3)哪些情况下需要做细菌鉴定和药敏。

关键词：

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抗生素相关性腹泻的研究进展

临床检验杂志 2012年第6期30卷 456-458页

作者：尹美玲马筱玲周文静蚌埠医学院安徽蚌埠233000 安徽省立医院检验科合肥230001

近年来,抗菌药物的广泛应用和新型艰难梭菌菌株的出现,使抗生素相关性腹泻(antibiotic-associate diarrhea,AAD)的发生率在世界各地呈上升趋势,引起了人们的高度重视。本文对AAD的发病机制、检测方法的研究进展进行综述。

关键词：抗生素相关性腹泻艰难梭菌菌群失调