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平贝母PCR-核酸试纸条快速检测方法的建立和评价

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药学学报 2024年第6期59卷 1773-1778页

作者：马玉贺商聪慧马秋贺李涛刘悦潘蓓珍高丽君李明成夏薇曲永梅北华大学医学技术学院吉林吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林吉林132013

本研究针对平贝母的ITS2序列设计特异性鉴别引物,优化反应体系及条件,构建PCR-核酸试纸条实现可视化检测平贝母。通过分子克隆及测序技术,构建平贝母DNA阳性对照品,制定质量标准。对建立的方法进行性能评价,检测其灵敏度、特异性和重复... 详细信息

本研究针对平贝母的ITS2序列设计特异性鉴别引物,优化反应体系及条件,构建PCR-核酸试纸条实现可视化检测平贝母。通过分子克隆及测序技术,构建平贝母DNA阳性对照品,制定质量标准。对建立的方法进行性能评价,检测其灵敏度、特异性和重复性,对市售样品进行真伪鉴定。结果显示,基于ITS2序列可对平贝母及其混伪品进行区分。正品平贝母PCR产物滴定于试纸条上显示T、C线两条带,伪品与阴性对照只显示C线一条带,与琼脂糖凝胶电泳结果吻合。特异性为100%,PCR-核酸试纸条灵敏度可达0.1 ng·μL^(-1),高于凝胶电泳检测10倍。16个平贝母市售样品中11个合格,5个不合格。综上,本研究建立的平贝母PCR-核酸试纸条检测方法特异、快速、精准、可视化,可为平贝母检测提供新的技术思路。

关键词：平贝母分子克隆 ITS2序列核酸试纸条可视化

基于酶促恒温扩增技术快速鉴别天麻真伪检测方法的建立与应用

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药物分析杂志 2024年第4期44卷 729-736页

作者：马秋贺马玉贺李涛刘悦柴金军徐子强刘昂高丽君夏薇李明成曲永梅北华大学医学技术学院吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林132013

目的:基于酶促恒温扩增(enzymatic recombinase amplification, ERA)技术建立一种可快速定性鉴别道地药材天麻真伪的方法。方法:遵循ERA引物设计原则,应用Oligo 7.0软件根据天麻及其常见伪品的ITS2基因组序列,筛选优化天麻ERA特异性引物... 详细信息

目的:基于酶促恒温扩增(enzymatic recombinase amplification, ERA)技术建立一种可快速定性鉴别道地药材天麻真伪的方法。方法:遵循ERA引物设计原则,应用Oligo 7.0软件根据天麻及其常见伪品的ITS2基因组序列,筛选优化天麻ERA特异性引物,应用Primer Premier 5.0软件设计天麻特异性PCR鉴别引物,通过对ERA、PCR反应体系的优化,最终确定ERA最佳反应时间为17 min,最适反应温度为40℃;PCR最优退火温度为57℃,循环为32次,对所建立的方法进行灵敏度、特异性验证,并选取中药市场市售天麻样品进行检测。结果:所设计的天麻ERA鉴别引物与其常见伪品间无交叉反应,特异性良好;重复性结果显示,3次重复性检测结果一致,未出现假阳性与假阴性;该方法对天麻基因组DNA的灵敏度为1 pg·μL^(-1),比传统PCR灵敏性高;ERA技术能够用于天麻市售样品的快速鉴定,且检测结果与PCR方法相同。结论:所建立的检测方法操作简单、快速,具有较高的特异性和灵敏度,为道地药材天麻的真伪鉴别提供了一种新手段。

关键词：酶促恒温扩增聚合酶链式反应天麻定性真伪鉴定快速检测

天麻PCR‑层析试纸条快速可视化检测方法的建立与评价

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上海中医药杂志 2024年第3期58卷 79-85页

作者：马秋贺马玉贺刘悦李涛刘昂徐子强柴金军王艳茹高丽君夏薇李明成曲永梅北华大学医学技术学院吉林吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林吉林132013

目的通过聚合酶链式反应(PCR)与层析试纸条结合的方法,实现天麻快速可视化真伪鉴别,并对其检测效果进行评价。方法采用一步法提取天麻及其伪品基因组DNA,应用NCBI数据库设计天麻特异性引物。采用DNA分子克隆技术制备天麻阳性质粒,作为... 详细信息

目的通过聚合酶链式反应(PCR)与层析试纸条结合的方法,实现天麻快速可视化真伪鉴别,并对其检测效果进行评价。方法采用一步法提取天麻及其伪品基因组DNA,应用NCBI数据库设计天麻特异性引物。采用DNA分子克隆技术制备天麻阳性质粒,作为天麻阳性对照品。建立PCR-层析试纸条法鉴定天麻真伪,摸索最优实验条件,并进行方法学评价。结果①样品DNA提取的纯度符合要求,最优的PCR反应引物浓度为1μmol/L,循环为29次。②分子克隆的天麻阳性质粒序列与天麻DNA分子标记特异性指纹区片段序列同源性为98%,可作为天麻PCR-层析试纸条法的阳性对照品。③PCR-层析试纸条法的方法学评价结果显示:天麻对照药材在试纸条上出现两个条带,伪品和阴性对照品出现1个条带,与琼脂糖凝胶电泳法结果一致,特异性良好;PCR-层析试纸条法较琼脂糖凝胶电泳法的灵敏度高100倍,天麻DNA浓度为10-1 mg/L时,试纸条仍有模糊条带;在第3、6、9、12个月采用PCR-层析试纸条法进行检测,检测结果与预期一致,稳定性良好;混合样品验证显示,PCR-层析试纸条法的最低检测限为10%,而琼脂糖凝胶电泳法的最低检测限为50%。④采用PCR-层析试纸条法对15份市售天麻样品进行检测,鉴别出3个伪品,与琼脂糖凝胶电泳法结果一致。结论所构建的PCR-层析试纸条检测方法特异性强、灵敏度高、操作简便快速,可在短时间内实现鉴定结果的可视化,检测结果准确、稳定,为道地药材天麻的真伪鉴别提供了新方法。

关键词：天麻聚合酶链式反应试纸条分子克隆可视化鉴定中药研究

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针灸视域下的神经—免疫调节

中国科学基金 2024年第3期 446-453页

作者：宿杨帅马秋富中国中医科学院针灸研究所西湖大学生命科学与生物医学浙江省实验室/浙江省结构生物学研究重点实验室/浙江省生长调控和转化研究重点实验室及生命科学学院浙江西湖高等研究院

针灸作为中国传统医学体系中独具特色的诊疗技法，通过体表特定区域的物理刺激，调动神经、内分泌和免疫等多系统应答，促进机体自稳态修复。针灸对生物体机能多层次的调控特点，蕴含着其原创性的生命科学价值，有待于深入探究和阐明。... 详细信息

针灸作为中国传统医学体系中独具特色的诊疗技法，通过体表特定区域的物理刺激，调动神经、内分泌和免疫等多系统应答，促进机体自稳态修复。针灸对生物体机能多层次的调控特点，蕴含着其原创性的生命科学价值，有待于深入探究和阐明。本文结合“神经—免疫”交互作用的研究背景，在梳理针灸引发“躯体—自主神经”反射调节规律的基础上，总结了针灸不同穴位通过“迷走—肾上腺”轴或“交感—脾脏”轴改善系统性炎症的作用环路，明确了针灸“神经—免疫”调节的效应规律和影响因素。并指出：针灸刺激体表“纵横”位域引起相对特异的自主神经活动，是其发挥区域性或全身性免疫调控的关键。现阶段，针灸的“神经—免疫”调控虽已取得瞩目进展，但该领域的基础研究和应用推广仍处于“萌芽”阶段，倡议通过有组织、有目的的多学科交叉合作，继续完善针灸“精准”干预实现“神经—免疫”调控的系统生物学内涵，加快推进相关科研成果转化和针灸装备研发，不断拓展针灸在改善人体内脏功能和免疫—炎性反应中的应用价值。

关键词：针灸自主神经神经—免疫迷走神经交感神经

基于ISM-MICMAC模型的生鲜电商发展影响因素分析

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商业经济研究 2024年第3期 102-105页

作者：马秋艳郑州升达经贸管理学院河南郑州451191

生鲜电商发展面临同质化竞争严重、供应链能力薄弱和管理能力低下等多种困境,系统深入解析生鲜电商发展的影响因素具有重要理论和实践意义。本文采用扎根理论梳理出影响生鲜电商发展的因素,结合ISM-MICMAC模型,系统总结影响生鲜电商发... 详细信息

生鲜电商发展面临同质化竞争严重、供应链能力薄弱和管理能力低下等多种困境,系统深入解析生鲜电商发展的影响因素具有重要理论和实践意义。本文采用扎根理论梳理出影响生鲜电商发展的因素,结合ISM-MICMAC模型,系统总结影响生鲜电商发展的本质、深层、过渡、表层因素,阐明了生鲜电商发展影响因素的层次结构及各因素间的相互作用机理。结论如下:影响生鲜电商发展的因素共包含5个层次15个因子,顾客感知价值和政策支持是本质因素,具有高依赖度、低驱动力的特征;宣传营销、产品品质、品牌形象、社群活动、物流效率、销售渠道6项过渡因素,与表层和深层的多个因素存在影响关系;配套设施、运营管理能力、供应链能力3项表层因素两两相互影响,且对平台竞争力产生直接影响。

关键词：电商直播互动质量沉浸体验消费者购买意愿

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从思维方式看孟、荀王霸思想的殊与同

孔子研究 2024年第1期 22-31,157页

作者：马秋丽山东大学马克思主义学院山东大学国家治理研究院山东威海264209

孟、荀王霸思想的殊与同,可以通过思维方式上的二分思维和三分思维得以彰显。孟子坚信仁者无敌,提倡仁政王道,贬黜霸道,是一种价值立场鲜明的王霸二分的思维方式。荀子提倡礼治,在王、霸、危亡的三分思维的框架中呈现自己的王霸兼用思... 详细信息

孟、荀王霸思想的殊与同,可以通过思维方式上的二分思维和三分思维得以彰显。孟子坚信仁者无敌,提倡仁政王道,贬黜霸道,是一种价值立场鲜明的王霸二分的思维方式。荀子提倡礼治,在王、霸、危亡的三分思维的框架中呈现自己的王霸兼用思想。孟、荀王霸思想的分殊主要体现在以下方面:其一,在“是”与“应当”的问题域,孟子重视王道与霸道历史事实中蕴含的价值导向,主要是从价值立论;荀子更注重王道与霸道的历史事实,也体现了一种价值选择。其二,在王霸之别的判定上,孟子的王霸之别是本质上的差异;荀子的王霸之别主要是程度上的不同。其三,在对王霸的态度和定位上,二者都推崇王道,都将王道视为最高追求;对霸道的定位,体现了孟、荀二分思维与三分思维的主要差异。孟子尊王黜霸,主要是批判霸道;荀子以“信”界定霸道,并在危亡之道的反衬中,认同与接受霸道。在荀子的三分思维中,霸道作为王道的候补,地位明显提升。总之,孟、荀王霸之辨的二分思维与三分思维,既是基于二者的学说特色,也是对不同时代问题的思想回应。

关键词：王霸之辨事实与价值二分思维与三分思维孟子与荀子

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何为底层形式?

当代语言学 2024年第2期26卷 246-258页

作者：马秋武王平北京语言大学语言科学院复旦大学外文学院

底层形式是生成音系学的重要理论概念,也是其语法操作的重要环节。生成音系学的底层形式不是结构主义音位学的“音位”,国内很多学者常常把“音位”当成生成音系学的底层形式。不仅如此,还常常把国外一些学者所使用的汉语“底层元辅音... 详细信息

底层形式是生成音系学的重要理论概念,也是其语法操作的重要环节。生成音系学的底层形式不是结构主义音位学的“音位”,国内很多学者常常把“音位”当成生成音系学的底层形式。不仅如此,还常常把国外一些学者所使用的汉语“底层元辅音”改成“音位”。本文将从结构主义音位学的“音位”谈起,具体阐释“音位”与“底层形式”的区别,指出“底层形式”并不是表层一定出现的形式。不充分赋值理论是对底层形式的特征赋值,不是确定底层形式的选择因素。把两种不充分赋值理论用作底层形式的选择上并不恰当。所以,我们在做生成音系学的分析时一定要注意不要把结构主义语言学的概念和做法纳入其中,应分开彼此,说清关系,搞清楚理论的来龙去脉。

关键词：底层形式生成音系学音位结构主义音位学

快速鉴定鹿茸真伪及其种属检测试剂的试验研究

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药物分析杂志 2023年第8期43卷 1435-1445页

作者：徐宁马玉贺马秋贺艾金霞母润红高丽君夏薇北华大学医学技术学院吉林132013 北华大学基础医学院吉林132013

目的:建立1种双重PCR检测体系,根据琼脂糖凝胶电泳目的条带位置及数量快速鉴定花鹿茸、马鹿茸及常见伪品驯鹿茸。方法:采用碱变性法提取鹿茸样品基因组DNA,以鹿科动物Cytb和COI基因为靶序列,应用Primer 3.0,根据SNP位点设计特异性鉴别引... 详细信息

目的:建立1种双重PCR检测体系,根据琼脂糖凝胶电泳目的条带位置及数量快速鉴定花鹿茸、马鹿茸及常见伪品驯鹿茸。方法:采用碱变性法提取鹿茸样品基因组DNA,以鹿科动物Cytb和COI基因为靶序列,应用Primer 3.0,根据SNP位点设计特异性鉴别引物(Cy-1、COI-1),并摸索及优化PCR反应体系及条件,同时,采用克隆及测序验证检测结果的准确性。结果:建立的双重PCR扩增体系显示,花鹿茸在电泳图谱408 bp及146 bp处可见2条扩增条带,马鹿茸则在146 bp处见1条目的条带,而伪品鹿茸则无扩增条带,与质粒克隆测序验证的结果一致。且市售鹿茸样品的检测结果与鉴定结果相吻合。结论:本试验自主构建的双重PCR检测体系简便、迅速,检测试剂结果准确,稳定性良好,在分子水平实现一步法鉴定花鹿茸、马鹿茸及其常见伪品,具有较大实用价值。

关键词：花鹿茸马鹿茸双重聚合酶链式反应位点特异性检测试剂

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川剧文化大数据可视分析

计算机辅助设计与图形学学报 2024年

作者：马秋梅江兴涛曾琦峰陈超四川省大数据可视化分析工程技术实验室四川轻化工大学计算机科学与工程学院

川剧作为巴蜀文化的典型代表，蕴含丰富的历史特色与艺术价值，但在可视化领域的相关研究较少. 为了增加受众对川剧文化的理解，从历史起源、艺术特色和发展传承3个方面出发，基于6个可视化模块，构建了一个川剧文化大数据可视分... 详细信息

川剧作为巴蜀文化的典型代表，蕴含丰富的历史特色与艺术价值，但在可视化领域的相关研究较少. 为了增加受众对川剧文化的理解，从历史起源、艺术特色和发展传承3个方面出发，基于6个可视化模块，构建了一个川剧文化大数据可视分析系统. 首先根据需求分析明确数据来源及特征，并设定可视化任务; 然后采用文本、层次、时空和多维可视化技术设计川剧数据的可视化呈现方案，结合视图联动等交互技术实现多维度数据的关联与分析. 系统以川剧的形成、脸谱特征变化和剧目题材发展为案例，深入分析了川剧的发展脉络与传承现状，可有效帮助用户更好地了解川剧文化，也为今后其他领域的文化大数据研究提供一定的参考.

关键词：川剧文化可视分析文本可视化数据可视化