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白菜miR158的表达及其在花粉发育中的功能鉴定

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白菜miR158的表达及其在花粉发育中的功能鉴定

作者：马智明浙江大学

学位级别：硕士

植物microRNA (miRNA)是一种植物内源产生的非编码RNA,通过对其靶基因表达进行转录后负调控,从而参与植物的生长发育过程。花粉发育是种子植物有性生殖的一个重要环节。有报道多个niRNA 可能参与花粉发育过程。在前期的研究中,本实验室... 详细信息

植物microRNA (miRNA)是一种植物内源产生的非编码RNA,通过对其靶基因表达进行转录后负调控,从而参与植物的生长发育过程。花粉发育是种子植物有性生殖的一个重要环节。有报道多个niRNA 可能参与花粉发育过程。在前期的研究中,本实验室以一对隐性基因控制的白菜核不育两用系'Bcajh97-01A/B'为材料,对花粉发育相关miRNA进行了高通量测序,鉴定到miR158在不育株和可育株中差异表达明显,并发现过表达白菜mi 158可引起花粉发育异常。在本文中,我们继续对白菜mi158在花粉发育过程中的功能进行研究。首先克隆了白菜miR158的两个前体基因及其靶基因Bra027656,随后利用qRT-PCR和启动子-GUS报告系统分析了白菜miR158两个前体基因的时空表达模式,最后通过观察过表达和抑制表达白菜miR158引起的转基因植株表型差异,对白菜miR158及其靶基因的功能和可能的作用模式进行了初步的研究。获得的主要结果和结论如下：(1)以预测得出的白菜miR158的两个前体发卡序列为依据设计引物,克隆获得白菜miR158的两个前体基因。这两个前体基因分别位于5号和8号染色体,其转录产物能够形成稳定的二级结构,同时在niRNA 和 miRNA*区域高度保守,这符合miRNA的进化特征,也暗示了miRl58功能的保守性。共线性分析结果表明这两个前体基因所在的基因组区域能够对应到拟南芥miR158a所在的区域,系原始的Ath-miR158a伴随芸薹属基因组三倍化后保留的产物,因此我们将其分别命名为Bra-miR158a1 和 Bra-miR158a2。(2)利用RACE技术分析明确了白菜miR158的靶基因Bra027656的5’和3’cDNA序列,并据此设计引物克隆获得该基因。其DNA序列全长2175 bp,由两个外显子和一个内含子组成,ORF全长2046 bp,编码一个由682个氨基酸组成的PPR (pentatricopeptide repeat)蛋白。通过BLAST搜索,发现Bra027656氨基酸序列与萝卜的细胞质雄性不育系育性恢复相关PPR-B蛋白氨基酸序列高度相似。这暗示了Bra027656可能与PPR-B具有相同的作用模式。(3) qRT-PCR分析结果表明pre-Bra-miR158a1 和 pre-Bra-miR158a2的表达存在时空差异。虽然两者均在花序中有较高的表达量,但前者的相对表达量高于后者,尤其是在第三级花蕾时期(单核花粉粒时期),启动子-GUS报告系统分析Bra-miR158a1 和 Bra-miR158a2的启动子活性也获得了相似的结果。据此,我们认为白菜miR158可能在花粉发育的单核花粉粒至双核花粉粒时期发挥作用,而且pre-Bra-miR 158a1对miRl58的合成起主效作用。通过序列比对,发现pre-Bra-miR158a1 和 pre-Bra-miR158a2启动子序列存在较大的差异,推测两者差异的时空表达模式可能是由启动子序列的差异引起。(4)构建抑制表达Bra-miR158载体,连同前期已构建好的过表达Bra-miR158载体转化‘油青四九’菜心。通过对获得的转基因植株进行细胞学和形态学观察,发现过表达Bra-mi R158转基因植株药室中约25%的花粉丧失活力,无活力花粉的异常发育始于单核小孢子时期,花粉内含物降解,花粉皱缩或空泡化。结合Bra-miR158的时空表达模式,这说明白菜miR158对花粉的形成具有重要作用。然而,抑制表达Bra-miR158转基因植株生长发育并未出现异常,这说明存在白菜miRl58靶因的下游基因对靶基因的缺失不敏感或者不产生任何反应的可能。我们推测白菜miR158的靶基因可能通过作用于小孢子线粒体内某些重要的代谢途径基因而参与花粉发育,这些基因的异常表达会引起小孢子内含物的代谢发生紊乱,导致内含物降解,进而间接影响花粉内壁物质的合成,导致花粉皱缩、塌陷或空泡化。

关键词：白菜花粉发育 miRNA 靶基因 miR158 表达功能

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安钢炼铁系统12年之回顾

钢铁 1999年第8期34卷 1-4页

作者：马智明姚桐安阳钢铁集团有限责任公司

介绍了安阳钢铁公司炼铁系统１２年来坚持以炼铁为中心，运用系统优化的思想，以科技为先导，强化管理，强化操作。

关键词：炼铁系统高炉炼铁

汇丰环球公司基层员工离职问题的原因分析及对策思考

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汇丰环球公司基层员工离职问题的原因分析及对策思考

作者：马智明广东外语外贸大学

学位级别：硕士

服务外包企业中,基层员工是业务处理的关键,也是人员流失的重灾区。本文所研究的汇丰环球公司就是一家存在严重基层员工离职问题的服务外包企业。企业在近年的发展中,一直受到严重的离职损耗影响,运营质量和效率均出现下降,成本上升,影... 详细信息

服务外包企业中,基层员工是业务处理的关键,也是人员流失的重灾区。本文所研究的汇丰环球公司就是一家存在严重基层员工离职问题的服务外包企业。企业在近年的发展中,一直受到严重的离职损耗影响,运营质量和效率均出现下降,成本上升,影响企业发展。基于组织行为学,管理学和人力资源管理理论,作者以汇丰环球公司基层员工离职原因以及解决对策作为研究对象,深入企业调查获得员工普查结果资料,走访人力资源总裁了解企业相关政策,对基层员工进行离职原因问卷调查,研究发现导致基层员工持续离职的主要原因为薪酬制度不合理,基层员工缺乏职业发展机会以及员工工作压力大。针对离职原因,本文提出通过提升薪酬竞争力,优化员工职业发展规划,加强企业招聘管理工作,以及促进企业人性化管理作为留住基层员工的对策。研究过程中,主要采取了文献研究法,调查法,个案研究法,实证分析法和演绎法相结合的研究方法。本文创新之处在于理论应用实践。通过对汇丰环球公司基层员工离职问题的分析与研究,结合相关理论和服务外包企业的特点,以保留员工为目的,作者提出了相应的解决对策。这是相关理论在实践中的检验与推广,为其他行业或企业解决员工离职问题提供很好的参考依据。

关键词：基层员工离职率原因对策思考

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回转体边界层的高频声辐射

声学学报 2000年第4期25卷 313-318页

作者：李福新马林马智明西北工业大学航海工程学院西安710072 海军航空工程学院青岛266001

已就回转体边界层声辐射的机理作了分析，并对回转体边界层的辐射声压谱进行了估算。结果表明，回转体边界层声辐射由转捩区和湍流边界层的声辐射组成；在低频段，转换区的声辐射将占主导地位，而在高频段，则湍流边界层的声辐射起主要... 详细信息

已就回转体边界层声辐射的机理作了分析，并对回转体边界层的辐射声压谱进行了估算。结果表明，回转体边界层声辐射由转捩区和湍流边界层的声辐射组成；在低频段，转换区的声辐射将占主导地位，而在高频段，则湍流边界层的声辐射起主要作用。采用本文的方法所得的理论值与实测值之间的一致性较好。

关键词：回转体边界层高频声辐射声压变

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重视“学法”的培养真正使学生学会学习

清华大学教育研究 2000年第3期21卷 152-153页

作者：马智明张作前海军航空工程学院青岛分院基础部

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基于改进YOLOv3的人数统计方法研究

基于改进YOLOv3的人数统计方法研究

作者：马智明华南理工大学

学位级别：硕士

随着城市化的推进,人员流动越来越频繁。对人群活动进行分析统计是在景点、校园、工作场所、交通枢纽等现实场景的迫切需求。从图像中识别出人物并进行统计,是实现这一需求的经济便捷手段。目标检测识别是计算机视觉技术领域的重要课题... 详细信息

随着城市化的推进,人员流动越来越频繁。对人群活动进行分析统计是在景点、校园、工作场所、交通枢纽等现实场景的迫切需求。从图像中识别出人物并进行统计,是实现这一需求的经济便捷手段。目标检测识别是计算机视觉技术领域的重要课题。现有的算法、解决方案在人数统计这个任务上存在着统计不够准确、使用门槛过高等问题。针对这些问题,本文提出一个用于人数统计的卷积神经网络模型PCS-YOLOv3（简称PCS）,PCS对YOLOv3这个目标检测模型进行了改进,根据人数统计任务的特点,在原有神经网络结构上增加了三条捷径,从而增强了原有模型中层数较深的不均衡分支获得残差网络特征的能力,以此构造了一个专为人数统计而构建的卷积神经网络模型。为了使这个模型在人数统计上有更准确的效果,本文提出了用3D引擎渲染生成训练样本方法,并以此作为数据集对神经网络进行训练。实验测试表明,PCS模型在人数统计任务上比YOLOv3等目标检测模型更加准确,神经网络结构的修改和3D生成训练样本两个优化方法都对结果产生了增益。本文使用Flask网络框架技术,通过调用训练好的神经网络模型,实现了人数统计的API和前端网页,使得这套方法更容易使用。

关键词：人数统计目标检测卷积神经网络 YOLOv3

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主成分分析法在故障诊断中的应用

数理统计与管理 2000年第6期19卷 39-40,44页

作者：马智明阳宪惠海军航空工程学院青岛分院，青岛 266041 清华大学自动化系，北京 100084

本文简单地介绍了用主成分分析法进行故障诊断的依据和方法。

关键词：主成分分析特征方向故障诊断过程监控

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PLSR模型的回归效果分析

数理统计与管理 2000年第3期19卷 44-48页

作者：马智明阳宪惠海军航空工程学院青岛266041 清华大学北京100084

本文简单地介绍了多元线性回归、主元回归、部分最小二乘回归模型 ,用实例对三种方法的回归性能进行比较 ,并指出在消除多重共线性、回归系数估计精度及预测精度等方面。

关键词： PLSR模型回归分析多元线性回归主元回归

动植物microRNA的起源、合成及作用模式

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中国细胞生物学学报 2016年第7期38卷 857-863页

作者：马智明曹家树浙江大学蔬菜研究所细胞与分子生物学实验室杭州310058

micro RNA（mi RNA）是一种真核生物内源产生的长度约为20~23个核苷酸的非编码小分子RNA,作为一种调控因子广泛存在于动物和植物中。虽然动植物mi RNA均是通过对靶基因进行转录后负调控从而参与动植物的生长发育过程,但动植物mi RNA起... 详细信息

micro RNA（mi RNA）是一种真核生物内源产生的长度约为20~23个核苷酸的非编码小分子RNA,作为一种调控因子广泛存在于动物和植物中。虽然动植物mi RNA均是通过对靶基因进行转录后负调控从而参与动植物的生长发育过程,但动植物mi RNA起源方式和合成途径却不尽相同,其对靶基因调控的作用模式也存在很大差异。该文就动植物mi RNA在起源、合成及作用模式上的异同点作一综述,为深入认识动植物mi RNA提供理论依据。

关键词： mi RNA 起源合成调控