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热休克蛋白70—2基因沉默诱导大鼠精原细胞凋亡及其机制

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中华实验外科杂志 2010年第6期27卷 810-812页

作者：马建鸿李世文罗仪武汉大学中南医院泌尿外科 430071

目的探讨热休克蛋白（HSP）70-2基因沉默对精原细胞的影响及其机制.方法构建HSP70-2特异的短发夹RNA（shRNA）质粒载体,并转染大鼠精原细胞;应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HSP70-2 mRNA表达,Western blot检测HSP70-2、Cyclin... 详细信息

目的探讨热休克蛋白（HSP）70-2基因沉默对精原细胞的影响及其机制.方法构建HSP70-2特异的短发夹RNA（shRNA）质粒载体,并转染大鼠精原细胞;应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HSP70-2 mRNA表达,Western blot检测HSP70-2、Cyclin DI、bcl-2和box蛋白表达,应用流式细胞术分析细胞周期和凋亡.结果 HSP70-2基因沉默组的HSP70-2蛋白表达量为0.93±0.13,明显低于阴性对照组1.31±0.10（P〈0.01）;流式细胞术检测结果显示,与转染Scrambled的阴性对照组比较,转染pGenesil-1-HSP70-2重组质粒组的PC3细胞在G1期出现明显细胞周期阻滞和细胞凋亡,G1期阻滞细胞比例为（80.09±2.37）%,凋亡率为（7.44±2.41）%,而阴性对照组分别为（61.85±2.31）%和（1.09±0.57）%（P〈0.05）.与阴性对照组比较,转染后细胞bcl-2、Cyclin D1表达水平显著降低,而bax表达水平升高.结论 HSP70-2基因沉默能诱导精原细胞凋亡,其机制可能是通过Cyclin D1蛋白调节细胞周期并通过上调box蛋白表达促进细胞凋亡.

关键词：热休克蛋白70 精原细胞 RNA干扰脱噬作用

热休克蛋白70-2基因沉默对大鼠精子附睾成熟的影响

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中华实验外科杂志 2009年第10期26卷 1369-1370页

作者：马建鸿李世文罗仪武汉大学中南医院泌尿外科 430071

目的观察热休克蛋白（ttsp）70-2基因沉默对大鼠附睾中精子成熟的影响。方法构建HSPT0-2特异的短发夹RNA（shRNA）质粒载体，注人大鼠附睾中，1周后处死大鼠，无菌切取附睾，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测附睾中HSP70—2mRN... 详细信息

目的观察热休克蛋白（ttsp）70-2基因沉默对大鼠附睾中精子成熟的影响。方法构建HSPT0-2特异的短发夹RNA（shRNA）质粒载体，注人大鼠附睾中，1周后处死大鼠，无菌切取附睾，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测附睾中HSP70—2mRNA表达，Western blot观察HSP70．2蛋白表达，应用苏木素．伊红（HE）染色检测附睾管内精子密度。结果空白对照组HSP70—2蛋白表达量为1．31±0．10，附睾管内成熟精子密度为（63．46±14．43）％。基因沉默组HSP70-2蛋白表达量为0．93±0．13，附睾管内成熟精子密度为（31．51±10．67）％，与对照组比较均显著减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HSP70—2基因沉默影响附睾中精子成熟。

关键词：热休克蛋白70 RNA干扰附睾精子

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性发育异常患者SRY基因的检测与分析

中华国际医学杂志 2001年第6期1卷 574-575页

作者：马建鸿张元珍等武汉大学中南医院妇产科，中国武汉430071

性别发育异常直接影响患者的身心健康,长期以来一直是医学遗传学、优生学研究的重点,而人类Y染色体上性别决定基因(sex-determining region gene on Y,SRY)的发现则使性发育异常的病因学研究取得了重大突破.我们对3例典型患者进行了SRY... 详细信息

性别发育异常直接影响患者的身心健康,长期以来一直是医学遗传学、优生学研究的重点,而人类Y染色体上性别决定基因(sex-determining region gene on Y,SRY)的发现则使性发育异常的病因学研究取得了重大突破.我们对3例典型患者进行了SRY基因序列的检测,结合染色体核型分析、组织病理学检查,明确其性分化异常类型,并分析可能的性发育异常病因,为临床的诊断与治疗提供参考.

关键词：性发育异常 SRY基因检测 Y染色体性别决定基因多聚酶链式反应

母体血浆中白细胞介素11 DNA甲基化和蛋白水平的检测及其临床意义

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武汉大学学报（医学版） 2010年第6期31卷 792-795页

作者：马建鸿张元珍祝成亮周春王燕陈红李家福武汉大学中南医院妇产科湖北武汉430071 武汉大学人民医院检验科湖北武汉430060

目的:检测孕妇血浆中甲基化白细胞介素11DNA(M-IL-11)和非甲基化IL-11DNA(U-IL-11)的表达水平及IL-11蛋白的含量,探讨其在临床中的应用价值。方法:选择早、中、晚期妊娠孕妇各60例,以非妊娠期妇女60例为阴性对照组。提取血浆中的游离DNA... 详细信息

目的:检测孕妇血浆中甲基化白细胞介素11DNA(M-IL-11)和非甲基化IL-11DNA(U-IL-11)的表达水平及IL-11蛋白的含量,探讨其在临床中的应用价值。方法:选择早、中、晚期妊娠孕妇各60例,以非妊娠期妇女60例为阴性对照组。提取血浆中的游离DNA,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测各组血浆标本中M-IL-11和U-IL-11的表达水平,并采用ELISA的方法检测IL-11的水平,对妊娠组和对照组样本均数进行统计学分析。结果:非妊娠妇女血浆中未检测到U-IL-11,妊娠早期、中期、晚期及非妊娠妇女M-IL-11DNA浓度无显著性差异(P>0.05),而中期、晚期妊娠妇女U-IL-11的水平明显高于早期妊娠妇女(P<0.05)。IL-11水平在孕妇组显著升高,且随着孕周时间延长,其含量不断升高。结论:M-IL-11不是妊娠特异性标志物,U-IL-11可作为妊娠特异性标志物,IL-11的检测有助于扩大非创伤性产前诊断的临床应用范围。

关键词：甲基化IL-11 DNA 非甲基化IL-11 DNA 甲基化特异性PCR

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非侵入性产前诊断方法的研究进展

国外医学（妇幼保健分册） 2001年第4期12卷 157-159页

作者：马建鸿张元珍胡伦颖王燕武汉大学中南医院妇产科 430071

非侵入性产前诊断方法包括超声检查、母体血清标记物筛查、母体外周血中胎儿细胞的富集和分析、母体外周血中游离胎儿DNA的提取和分析等。各类技术近年来发展很快。

关键词：产前诊断胎儿有核红细胞游离胎儿DNA

基于网络教学平台的形成性评价在妇产科临床教学中的应用

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中国高等医学教育 2021年第3期 91-92页

作者：王芳高毓张元珍刘娟马建鸿武汉大学中南医院湖北武汉430071

目的:探讨基于网络教学平台的形成性评价在妇产科临床教学中的应用效果。方法:选取在武汉大学中南医院进行妇产科临床实习的2014级“5+3”临床医学专业60名学生为研究对象,随机分为实验组和对照组,每组30人。妇产科临床教学中,实验组采... 详细信息

目的:探讨基于网络教学平台的形成性评价在妇产科临床教学中的应用效果。方法:选取在武汉大学中南医院进行妇产科临床实习的2014级“5+3”临床医学专业60名学生为研究对象,随机分为实验组和对照组,每组30人。妇产科临床教学中,实验组采用基于网络教学平台的形成性评价,对照组采用终结性评价。教学结束后,通过出科考试和问卷调查形式对两组教学效果进行评估。结果:实验组学生出科考试成绩明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。问卷调查结果显示,实验组学生对妇产科临床教学的评价明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:基于网络教学平台的形成性评价有助于提高学生的实习成绩,提高教学质量。

关键词：网络教学平台形成性评价临床教学妇产科学

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唐氏综合征的快速诊断

唐氏综合征的快速诊断

第五次全国中青年检验医学学术会议

作者：郑芳周新孙小波彭剑虹马建鸿武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学中南医院妇产科

目的探索唐氏综合征的快速诊断方法。方法采用细胞遗传学分析技术对35例唐氏综合征患者（包括4例羊水标本和31例外周血标本）进行核型分析。同时采用荧光定量PCR技术对35例唐氏综合征患者和409例正常对照（含39例羊水标本和370例外周血...

目的探索唐氏综合征的快速诊断方法。方法采用细胞遗传学分析技术对35例唐氏综合征患者（包括4例羊水标本和31例外周血标本）进行核型分析。同时采用荧光定量PCR技术对35例唐氏综合征患者和409例正常对照（含39例羊水标本和370例外周血标本）21号染色体上的D21S11位点进行PCR扩增检测。将唐氏综合征患者的荧光定量PCR检测结果与细胞遗传学分析结果进行比较。结果 35例唐氏综合征患者经细胞核型分析证实,其中嵌合体4例（含1例羊水标本）。正常对照组杂合子个体D21S11位点两个等位基因扩增产物峰面积比值正常参考范围0．69-1．59,而病例组12例标本显示两个等位基因的扩增产物荧光强度的比值在2左右,在正常参考范围外。19例病人标本扩增产物显示三条不同的D21S11位点等位基因带,其扩增产物荧光强度的比值约为1:1:1。4例嵌合体标本,荧光定量PCR检测结果和正常对照无法区分。在正常对照组和病例组中分别发现了17 种和11种等位基因型,在409例正常对照中343例是杂合子,杂合率为83．86％,在正常对照组和病例组中D21S11位点基因频率的分布无显著性差异,但在不同种族之间该位点基因频率的分布有显著性差异。结论荧光定量PCR技术具备快速,仅需要微量的扩增起始材料的特点,可以用于唐氏综合征的快速产前诊断。

关键词：

来源： cnki会议评论

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从母血浆提取胎儿DNA行产前诊断的研究

武汉大学学报（医学版） 2003年第2期24卷 192-194页

作者：王萍张元珍王燕胡伦颖马建鸿武汉大学中南医院妇产科武汉430071

目的 :从孕妇血浆中提取胎儿DNA ,寻找一种非创伤性产前诊断的新方法。方法 :采用煮沸法从血浆中提取DNA ,结合巢式聚合酶链反应技术对 4 0例 10～ 4 0孕周的孕妇血浆中的胎儿DNA进行特异性扩增 ,扩增的基因为Y染色体的重复序列 (DYZ1)... 详细信息

目的 :从孕妇血浆中提取胎儿DNA ,寻找一种非创伤性产前诊断的新方法。方法 :采用煮沸法从血浆中提取DNA ,结合巢式聚合酶链反应技术对 4 0例 10～ 4 0孕周的孕妇血浆中的胎儿DNA进行特异性扩增 ,扩增的基因为Y染色体的重复序列 (DYZ1)基因 ,扩增片段大小为 10 2bp。结果 :30例孕育男性胎儿孕妇中有 2 6例血浆中出现DYZ1基因扩增带。 10例孕育女性胎儿孕妇血浆中 ,仅 1例出现假阳性结果。结论 :采用巢式聚合酶链技术在不同的孕期检测母体血浆中的胎儿DNA均有较高的灵敏度和特异性 ,作为一种非创伤性产前诊断的方法应用于临床具有可行性。

关键词：产前诊断聚合酶链反应胎儿DNA

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唐氏综合征的快速诊断

唐氏综合征的快速诊断