检索结果-南通市图书馆

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

重组人β-干扰素的表达、纯化与鉴定

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第11期35卷 1035-1039页

作者：余奇文李宁丽聂红马安伦席波龚毅张冬青大连金威基因技术有限公司上海第二医科大学上海市免疫学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物工程研究中心上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025 大连116001 上海200233

经 1 5L发酵罐制备重组人β 干扰素 (recombinanthumanIFN β,rhIFN β)。以免疫亲和层析方法纯化发酵液中rhIFN β并与蓝谱亲和层析纯化法比较 ,探索快速高效纯化rhIFN β的方法。以ELISA测定rhIFN β含量及经免疫亲和层析纯化的rhIFN... 详细信息

经 1 5L发酵罐制备重组人β 干扰素 (recombinanthumanIFN β,rhIFN β)。以免疫亲和层析方法纯化发酵液中rhIFN β并与蓝谱亲和层析纯化法比较 ,探索快速高效纯化rhIFN β的方法。以ELISA测定rhIFN β含量及经免疫亲和层析纯化的rhIFN β中鼠IgG残留量 ;以PAGE法鉴定rhIFN β的分子量 ;以CPEI法测定rhIFN β的生物活性。取 2L发酵液经免疫亲和层析纯化后 ,得到 3.0 3mgrhIFN β ;经蓝谱亲和层析纯化后 ,得到2 .6 5mg ;分子量为 2 2kD ;沉淀带灰度值分别为 96 .2 %和 95 .1 % ;CPEI比活性分别为 1 .4 3× 1 0 7IU/mg和 1 .6 3× 1 0 7IU/mg ;经免疫亲和层析后纯化物中鼠IgG残留量小于 5 0 μg/L。实验结果表明 ,所采用的免疫亲和层析和蓝谱亲和层析均可快速高效地从酵母菌发酵上清液中分离纯化rhIFN β基因产物

关键词：重组人β-干扰素亲和层析酵母菌酶联免疫吸附试验细胞病变抑制

人卵巢癌细胞HLA分子与其相关基因表达的研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2003年第1期19卷 41-44页

作者：葛海良张笑人王颖马安伦张惠珍王树军周光炎上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

目的:探讨人卵巢癌细胞中HLA分子及其相关基因的表达与IFN-γ诱导HLA分子表达的相互关系。方法:采用Westernblot、免疫组化和流式细胞术,检测卵巢癌细胞中HLA分子表达,以RT-PCR技术,分析卵巢癌细胞TAP、LMP和MHC Ⅱ类分子反式激活蛋白(C... 详细信息

目的:探讨人卵巢癌细胞中HLA分子及其相关基因的表达与IFN-γ诱导HLA分子表达的相互关系。方法:采用Westernblot、免疫组化和流式细胞术,检测卵巢癌细胞中HLA分子表达,以RT-PCR技术,分析卵巢癌细胞TAP、LMP和MHC Ⅱ类分子反式激活蛋白(CIITA)基因表达。结果:被检测的11株卵巢癌细胞中,HLA-Ⅰ类分子异常的表达率达为45％。而HLA-I类分子表达的异常与TAP1、TAP2、LMP2和LMP7 4种基因表达的异常有关。卵巢癌细胞或其他肿瘤细胞HLA-Ⅱ类分子的表达与CIITA基因的表达一致。组成性或诱导性表达CIITA基因的肿瘤细胞,经IFN-γ作用后,其HLA-Ⅰ、-Ⅱ类分子的表达增强;而诱导后仍不表达CIITA基因的肿瘤细胞,其HLA分子的表达无增强作用。结论:卵巢癌细胞中TAP和LMP基因表达的缺陷,是引起HLA-I类分子表达异常的重要因素,提示CIITA基因参与了调控肿瘤细胞HLA-Ⅰ、-Ⅱ类分子的表达。

关键词：人卵巢癌细胞 HLA分子相关基因表达

子宫内膜异位症患者γδ^+T细胞及NK细胞的功能分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2001年第6期17卷 540-541页

作者：马安伦葛海良王树军张冬青余奇文徐红林其德上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025 上海第二医科大学附属仁济医院妇产科

目的分析子宫内膜异位症患者中γδ+T细胞和天然杀伤细胞(NK)功能的变化,以及探讨患者腹腔液对正常人γδ+T细胞和自然杀伤细胞(NK)功能的影响。方法采用免疫荧光细胞检测及细胞毒活性检测法,分析22例子宫内膜异位症患者外周血、腹腔液... 详细信息

目的分析子宫内膜异位症患者中γδ+T细胞和天然杀伤细胞(NK)功能的变化,以及探讨患者腹腔液对正常人γδ+T细胞和自然杀伤细胞(NK)功能的影响。方法采用免疫荧光细胞检测及细胞毒活性检测法,分析22例子宫内膜异位症患者外周血、腹腔液中γδ+T细胞及NK细胞的表型与功能。结果子宫内膜异位症(疾病组)患者外周血、腹腔液中CD56+细胞与正常对照组相比较无明显差异,而疾病组腹腔液中γδ+T细胞的百分率高于其外周血和正常对照组。疾病组腹腔液中的γδ+T细胞及NK细胞的功能低于外周血及正常对照组。疾病组的腹腔液对正常人外周血γδ+T细胞及NK细胞的功能具有负调节作用。结论子宫内膜异位症患者的γδ+T细胞及NK细胞的功能低下,处于被抑制状态,提示患者的腹腔液中,可能存在γδ+T细胞及NK细胞的功能抑制因子。

关键词：子宫内膜异位症 γδ+T细胞自然杀伤细胞免疫功能

IFN、IL-4、IL-12及IL-12P40在子宫内膜异位症的变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海第二医科大学学报 2003年第2期23卷 134-136页

作者：陈鸣刘建华马安伦张冬青聂红徐红上海第二医科大学第九人民医院妇产科上海200011 上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海第二医科大学仁济医院妇产科

目的探讨盆腔内子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者IFN、IL-4、IL-12、以及IL-12P40细胞因子平衡与EM发病的相关性。方法用半定量PCR法和ELISA酶联免疫检测20例EM患者的血及腹腔中的IFN、IL-4、IL-12及IL-12P40细胞因子,并与无子... 详细信息

目的探讨盆腔内子宫内膜异位症(endometriosis,EM)患者IFN、IL-4、IL-12、以及IL-12P40细胞因子平衡与EM发病的相关性。方法用半定量PCR法和ELISA酶联免疫检测20例EM患者的血及腹腔中的IFN、IL-4、IL-12及IL-12P40细胞因子,并与无子宫内膜异位症患者相比较,以观察上述指标在EM患者血及腹腔液中的变化。结果 ***患者血清和腹腔液中IL-12浓度分别为(66.38±12.6)pg/ml和(77.76±14.6)pg/ml,显著低于无EM对照组(84.97±13.7)pg/ml和(106.92±10.7)pg/ml(P均0.05);其腹腔液中含量为(79.76±12.6)pg/ml,显著高于对照组(40.54±10.0)pg/ml(P<0.05),并与EM的严重程度呈负相关。***组IL-4/IFN-γ比值0.328显著高于对照组(0.07)。结论 EM患者体内IL-12含量降低,IL-12P40含量增高,这可能与EM的发生密切相关的NK细胞功能下降有关。EM患者外周血单核淋巴细胞中IL-4细胞因子升高,在Th1/Th2细胞因子平衡网络中出现Th2细胞的偏移并占优势。

关键词： INF IL-4 IL-12 IL-12P40 子宫内膜异位症

口服MBP诱导免疫耐受预防实验性变态反应性脑脊髓炎的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国免疫学杂志 2003年第7期19卷 473-474,478页

作者：余奇文张冬青柏峻马安伦李宁丽张继英聂红上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

目的 :探讨口服耐受对实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)的预防作用。方法 :给予健康Lewis大鼠口服MBP抗原诱导免疫耐受 ,随后以MBP +CFA于足底免疫 ,检测口服耐受对实验大鼠EAE发病的预防作用及对MBP特异性淋转率、细胞因子和抗MBP抗体... 详细信息

目的 :探讨口服耐受对实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)的预防作用。方法 :给予健康Lewis大鼠口服MBP抗原诱导免疫耐受 ,随后以MBP +CFA于足底免疫 ,检测口服耐受对实验大鼠EAE发病的预防作用及对MBP特异性淋转率、细胞因子和抗MBP抗体等免疫功能的变化情况。结果 :致病组EAE发病率为 91 7% ,MBP特异性淋转率、IFN γ与TNF α含量升高 ,IL 10降低 ;口服耐受组EAE发病率为 2 1 4 % ,MBP特异性淋转率、IFN γ、TNF α回复至正常 ,IL 10含量低于正常。MBP抗体水平两组均比正常对照组高。结论 :口服耐受可降低宿主自身免疫反应性 ,减低EAE的发病率。

关键词： MBP 诱导免疫耐受预防实验性变态反应性脑脊髓炎研究

人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2003年第1期19卷 20-22页

作者：李宁丽聂红余奇文柏峻马安伦张继英沈佰华王利张冬青上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

目的:在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,扩增Fas配体cDNA,克隆人PCR2.1载体。测序验证后,克隆人带有组氨酸盒的表达载体pQE-31,在大肠杆菌中表达,经亲和层析柱纯化后,用SDS... 详细信息

目的:在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,扩增Fas配体cDNA,克隆人PCR2.1载体。测序验证后,克隆人带有组氨酸盒的表达载体pQE-31,在大肠杆菌中表达,经亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果:表达的融合蛋白为人Fas配体,其相对分子质量(Mr)为40 000。经透析复性后,具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用。用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清,以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性FasL的含量,结果与进口试剂盒的灵敏性相似。结论:获得人Fas配体蛋白,并制备出抗FasL抗血清,为进一步研制抗FasL单克隆抗体,深入研究FasL的应用提供了材料。

关键词：细胞凋亡人Fas配体蛋白大肠杆菌融合表达应用

人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验动物学报 2001年第3期9卷 134-138页

作者：葛海良冯荻马安伦张惠珍王颖袁明蔡晓敏上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025 上海第二医科大学附属瑞金医院妇产科上海200025

目的　建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系。方法　将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下 ,成瘤后行鼠间传代 ,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系 ,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤... 详细信息

目的　建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系。方法　将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下 ,成瘤后行鼠间传代 ,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系 ,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测。结果　历时 14个月传至 5代 ,皮下移植瘤存活率为 90 % ,持续 6个月 ,体外建系 (OVA 319)细胞生长稳定。镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征 ;染色体分布在 12～ 46条之间 ,多为异倍体 ,显示人类肿瘤异常染色体 ;流式细胞术和RT PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA 319细胞结果一致 ,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿 ,MAGE 2基因在mRNA水平异常表达。结论　人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA

关键词： SCID小鼠人卵巢癌移植瘤模型细胞系瘤细胞人类肿瘤体外建系传代生物学特性研究

人卵巢癌细胞特异CTL系的免疫学特性初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海医学 2002年第10期25卷 639-641页

作者：葛海良马安伦王颖张惠珍王树军上海第二医科大学上海市免疫学研究所 200025

目的　探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对靶细胞的杀伤活性。方法　应用建株的人卵巢癌细胞 (OVA 319) ,在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞 ,经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩... 详细信息

目的　探讨人卵巢癌细胞体外刺激、诱导的肿瘤特异细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对靶细胞的杀伤活性。方法　应用建株的人卵巢癌细胞 (OVA 319) ,在体外定期刺激、诱导肿瘤患者外周血淋巴细胞 ,经微量淋巴细胞毒试验和流式细胞术分别测定扩增的淋巴细胞组织相容性白细胞抗原 (HLA)I类分子表型和膜表面免疫标志物 ,并通过 4 甲基偶氮唑盐 (MTT)法分析其对肿瘤细胞的杀伤活性。结果　经卵巢癌细胞刺激、诱导 3周后扩增的淋巴细胞主要为T细胞抗原受体 (TCR) α、β及CD8阳性的CTL ,具有明显特异性杀伤肿瘤细胞的作用 ,并发现经OVA 319细胞刺激、诱导后不同个体的卵巢癌患者CTL的杀伤活性与效靶细胞的HLA A、B位点相同数成正比。结论　肿瘤细胞体外激活的CTL具有特异杀伤靶细胞作用 ,提示CTL特异杀伤作用与刺激细胞、靶细胞及本身CTL表型的HLA A。

关键词：免疫学特性卵巢癌特异性细胞毒性T淋巴细胞系组织相容性白细胞抗原表型

他克莫司与新型免疫抑制剂FK778联合应用预防肾移植急性排斥反应的实验

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华器官移植杂志 2004年第5期25卷 260-263页

作者：欧阳骏严春寅温端改朱生云王翔徐大生齐世杰马安伦蒋文雷陈惠方苏州大学附属第一医院泌尿外科江苏215006 加拿大蒙特利尔大学Notre-Dame医院实验外科器官移植中心

目的评价FK778与他克莫司(FK506)联合应用预防猴同种异体肾移植急性排斥反应的效果。方法Vervet猴同种异体肾移植后联合应用FK506和FK778预防急性排斥反应,给药60d,同时进行T、B淋巴细胞增殖抑制实验。结果术后同一时间开始使用FK506和F... 详细信息

目的评价FK778与他克莫司(FK506)联合应用预防猴同种异体肾移植急性排斥反应的效果。方法Vervet猴同种异体肾移植后联合应用FK506和FK778预防急性排斥反应,给药60d,同时进行T、B淋巴细胞增殖抑制实验。结果术后同一时间开始使用FK506和FK778者,其移植肾存活时间与单独用药组比较,差异无显著性;若FK778较FK506延迟1周给予,则移植肾的存活时间明显延长;FK778与FK506联合应用,在体外对B淋巴细胞增殖的抑制作用具有协同效应,而在抑制T淋巴细胞增殖时存在拮抗倾向。结论FK506、FK778均有很强的免疫抑制效应,联合应用时以FK778延迟1周应用效果较佳。

关键词：联合应用急性排斥反应 FK506 他克莫司预防 FKS06 同种异体肾移植结论实验倾向