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三种方法建立干燥综合征小鼠模型对比研究

辽宁中医药大学学报 2024年

作者：张苏丹王妍琦刘亚伟杨双庆孟庆良马俊福河南中医药大学骨伤学院河南省中医院河南中医药大学

目的探讨三种干燥综合征小鼠造模方式在临床症状、病理改变、炎症指标等方面的差异。对比研究临床症状、病变相关组织的病理改变、炎症因子表达情况。方法：分别采用NOD小鼠自发、毒蕈碱受体3（M3R）抗原表位多肽N49免疫诱导与颌下腺... 详细信息

目的探讨三种干燥综合征小鼠造模方式在临床症状、病理改变、炎症指标等方面的差异。对比研究临床症状、病变相关组织的病理改变、炎症因子表达情况。方法：分别采用NOD小鼠自发、毒蕈碱受体3（M3R）抗原表位多肽N49免疫诱导与颌下腺蛋白诱导构建小鼠干燥综合征模型，定期监测饮水量、唾液流量，造模结束时取病理组织做HE染色观察淋巴细胞浸润程度，眼球取血检测炎症因子表达水平。结果：①造模5周后，与正常组相比，各造模组饮水量增长显著（P＜0. 01）；N49组、颌下腺组与NOD组相比有统计学差异（P＜0. 01）；颌下腺组与N49组相比有统计学差异（P＜0. 01）。②第5周与正常组相比，各造模组唾液流量显著减少（P＜0. 01）；N49组、颌下腺组两组唾液流量均低于NOD组，具有统计学差异（P<0.05）。③与正常组相比，N49组、颌下腺组小鼠颌下腺指数、胸腺指数、脾指数上升较明显（P＜0. 01）；颌下腺组与NOD组颌下腺指数相比有统计学差异（P＜0. 05）。N49组、颌下腺组与NOD组相比，胸腺指数上升较明显，有统计学差异（P＜0. 01）。④颌下腺病理切片观察中，仅见颌下腺组有淋巴细胞浸润；各造模组胸腺和脾均有损害，但差异不大。⑤与正常组相比，NOD组IL-10、IL-17水平稍高（P＜0. 05），N49组、颌下腺组IL-10和IL-17水平显著升高（P＜0. 01），颌下腺组与NOD组相比，IL-10和IL-17水平显著升高（P＜0. 05），颌下腺组与N49组相比，IL-10轻微升高（P＜0. 05），IL-17表达水平更高（P＜0. 01），有统计学意义。结论：相较于NOD模型和N49模型，颌下腺模型造模成本低，免疫效果快，症状更类似于人SS，优点较为突出，可用于人SS发病机制的研究和治疗药物的筛选。

关键词：干燥综合征动物模型 NOD小鼠自发毒蕈碱受体3 抗原表位多肽颌下腺蛋白

基于NF-κB通路探讨痛风汤对急性痛风性关节炎模型大鼠炎症的影响机制

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陕西中医 2024年第6期45卷 740-744页

作者：王赓丰马俊福邓雍钲孟庆良河南中医药大学骨伤学院河南郑州450002 河南中医药大学第二附属医院风湿免疫科河南郑州450053

目的:研究痛风汤通过调控核因子-κB(NF-κB)信号通路对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠炎症的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组,每组各10只。正常组和模型组每天灌胃蒸馏水... 详细信息

目的:研究痛风汤通过调控核因子-κB(NF-κB)信号通路对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠炎症的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组,每组各10只。正常组和模型组每天灌胃蒸馏水,秋水仙碱组、痛风汤H组、痛风汤M组、痛风汤L组每天灌胃相应药物,共7 d,除正常组外均于灌胃第4天通过右踝关节注射尿酸钠(MSU)溶液诱导造模;检测大鼠关节肿胀体积、步态及关节炎症指数;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-1β炎症因子水平;HE染色观察大鼠踝关节滑膜组织病理学变化;Western blot检测大鼠踝关节滑膜组织NF-κB通路相关蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀体积、步态级别、关节炎症指数、血清炎症因子水平、组织病理学程度、NF-κB通路相关蛋白水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,痛风汤各组大鼠关节肿胀体积、步态级别、关节炎症指数显著降低(P<0.05),且痛风汤各组剂量依赖性地降低大鼠血清炎症因子水平和踝关节炎性细胞浸润程度,下调NF-κB通路蛋白表达(P<0.05)。结论:痛风汤可能通过介导NF-κB通路来改善AGA大鼠炎症状态。

关键词：急性痛风性关节炎痛风汤核因子-κB信号通路炎症因子肿瘤坏死因子-α 白介素-6

基于OPG/RANKL/RANK信号通路探讨桂枝芍药知母汤对胶原诱导性关节炎大鼠的影响

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北京中医药大学学报 2024年第1期47卷 70-80页

作者：杨双庆马俊福孟庆良丁明辉刘亚伟张苏丹王妍琦李锦锦李玉洁冼锦忠河南中医药大学骨伤学院郑州450046 河南省中医院西安市第五医院

目的基于护骨因子(OPG)/NF-κB受体激活蛋白配体(RANKL)/NF-κB受体激活蛋白(RANK)信号通路探究桂枝芍药知母汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠骨破坏与骨保护相关因子的影响。方法60只雌性Wistar大鼠按照体质量随机分为6组,正常组、模型... 详细信息

目的基于护骨因子(OPG)/NF-κB受体激活蛋白配体(RANKL)/NF-κB受体激活蛋白(RANK)信号通路探究桂枝芍药知母汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠骨破坏与骨保护相关因子的影响。方法60只雌性Wistar大鼠按照体质量随机分为6组,正常组、模型组、雷公藤多苷组(0.01 g/kg)、桂枝芍药知母汤低剂量组(8.6 g/kg)、桂枝芍药知母汤中剂量组(17.2 g/kg)、桂枝芍药知母汤高剂量组(34.4 g/kg),每组10只。除正常组外,其他大鼠第1、8天使用牛Ⅱ型胶原蛋白(100μg)复制CIA模型,在大鼠左足足底和尾根部位注射。造模成功后灌胃给药4周。监测大鼠一般状态、体质量及关节炎指数(AI)评分,酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中RANKL、OPG的含量,实时荧光PCR法与蛋白质印迹法分别测定踝关节中RANKL、RANK、OPG mRNA与蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组一般状态欠佳,足趾肿胀明显,AI评分升高,血清RANKL含量升高、OPG含量降低,踝关节RANKL、RANK mRNA与蛋白表达均升高(均P<0.05)。与模型组比较,桂枝芍药知母汤各剂量组大鼠足趾肿胀程度与AI评分下降,血清RANKL含量降低、OPG含量升高,踝关节中RANKL、RANK mRNA与蛋白表达均降低,OPG mRNA与蛋白表达均升高,踝关节RANKL/OPG值降低(均P<0.05)。结论桂枝芍药知母汤能够改善CIA模型大鼠关节的骨破坏情况,其作用机制可能与降低RANKL水平、降低RANKL/OPG值、调控骨平衡有关。

关键词：桂枝芍药知母汤护骨因子/NF-κB受体激活蛋白配体/NF-κB受体激活蛋白信号通路胶原诱导性关节炎骨代谢骨平衡大鼠

桂枝芍药知母汤抑制cGAS/STING/NF-κB通路对类风湿关节炎大鼠炎症活动的影响

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现代中西医结合杂志 2024年第8期33卷 1053-1059页

作者：丁明辉曹茸徐鹏刚任宝娣李映雪吕水英马俊福西安市第五医院陕西西安710082 河南省中医院河南郑州450002

目的基于环状GMP-AMP合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激因子(STING)/核因子-κB(NF-κB)通路探讨桂枝芍药知母汤对类风湿关节炎大鼠炎症活动的影响及机制。方法取70只Wistar大鼠,随机选择10只作为正常组,其余60只大鼠制备胶原诱导性关节炎模... 详细信息

目的基于环状GMP-AMP合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激因子(STING)/核因子-κB(NF-κB)通路探讨桂枝芍药知母汤对类风湿关节炎大鼠炎症活动的影响及机制。方法取70只Wistar大鼠,随机选择10只作为正常组,其余60只大鼠制备胶原诱导性关节炎模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、甲氨蝶呤组、雷公藤组及桂芍知母汤低、中、高剂量组,每组10只。甲氨蝶呤组给予0.104 mg/mL的甲氨蝶呤片混悬液灌胃,1次/周,其余时间每天给予蒸馏水灌胃1次;雷公藤组给予0.625 mg/mL的雷公藤多甙片混悬液灌胃,桂芍知母汤低、中、高剂量组分别给予0.958 g/mL、1.916 g/mL、2.874 g/mL的桂枝芍药知母汤灌胃,正常组、模型组给予蒸馏水灌胃,均1次/d。各组均干预4周。测量各组大鼠干预1,2,3,4周末足趾肿胀程度,并计算关节炎指数(AI);末次干预结束后,ELISA法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blot法检测滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65、IκBα蛋白表达情况。结果干预1,2,3,4周末,模型组大鼠的关节肿胀度均明显高于正常组(P均0.05);干预2,3,4周末,桂芍知母汤高剂量组AI评分均明显低于模型组和桂芍知母汤低剂量组(P均<0.05),且桂芍知母汤高剂量组干预2周末的AI评分明显低于雷公藤组(P<0.05);干预3周末,甲氨蝶呤组、桂芍知母汤中剂量组AI评分均明显低于模型组(P均<0.05);干预4周末,甲氨蝶呤组、雷公藤组、桂芍知母汤中剂量组、桂芍知母汤低剂量组AI评分均明显低于模型组(P均<0.05)。与正常组比较,模型组血清IL-1β、IL-17、TNF-α水平及滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),滑膜组织中IκBα蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组血清IL-1β、IL-17、TNF-α水平及滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),滑膜组织中IκBα蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。桂芍知母汤高剂量组和甲氨蝶呤组血清IL-1β、IL-17和TNF-α水平及滑膜组织中cGAS、STING、NF-κB p65蛋白相对表达量均明显低于桂芍知母汤低剂量组(P均<0.05),滑膜组织中IκBα蛋白相对表达量均明显高于桂芍知母汤低剂量组(P均<0.05)。结论桂枝芍药知母汤可明显减轻类风湿关节炎大鼠关节肿胀和关节炎症,机制可能与抑制cGAS/STING/NF-κB通路,降低炎症因子水平有关。

关键词：类风湿关节炎桂枝芍药知母汤环状GMP-AMP合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激因子(STING)/核因子-κB通路关节炎指数

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基于CiteSpace的经方桂枝芍药知母汤近11年文献可视化分析

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华西医学 2024年第6期39卷 920-926页

作者：杨双庆马俊福刘亚伟李锦锦李玉洁冼锦忠王妍琦张苏丹孟庆良河南中医药大学骨伤学院郑州450002 河南省中医院风湿病科郑州450053

目的直观呈现经方桂枝芍药知母汤(Guizhi Shaoyao Zhimu decoction,GSZD)近11年来在国内的相关研究进展、热点、前沿和趋势,以更好地指导相关临床研究。方法检索中国知网中国学术期刊网络出版总库、万方数据库、万方医学网、维普中文期... 详细信息

目的直观呈现经方桂枝芍药知母汤(Guizhi Shaoyao Zhimu decoction,GSZD)近11年来在国内的相关研究进展、热点、前沿和趋势,以更好地指导相关临床研究。方法检索中国知网中国学术期刊网络出版总库、万方数据库、万方医学网、维普中文期刊服务平台中已经发表的GSZD相关文献,时限为2012年1月1日—2022年12月8日。筛选后运用CiteSpace 6.1.R3软件对纳入文献进行可视化分析。结果共检索出文献1791篇,经筛选后纳入文献595篇。年度论文发表量呈现波动上升趋势;纳入文献分别来源于179种期刊和21所高等院校及研究院,发文量≥10篇的机构有12个(其中期刊11个),这12个机构累计发文量占总发文量的27.23%,《风湿病与关节炎杂志》发表论文最多(22篇);该领域中已形成的主要作者团队有高永翔、刘振丽和房树标等合作团队;通过关键词分析形成了8个共现关键词、10个聚类模块、25个突现关键词。结论未来GSZD相关研究将会持续增长,存在着巨大的发展潜力,研究团队之间应当紧密合作,加强交流,以中西医结合思想为指导深度开发GSZD潜力,助力其更好地发展,使其能够更好地服务于临床应用。

关键词：桂枝芍药知母汤 CiteSpace软件文献计量学可视化分析

基于Citespace雷公藤在类风湿关节炎中治疗作用的文献计量分析

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世界中西医结合杂志 2024年第6期19卷 1105-1112页

作者：杨双庆马俊福刘亚伟张苏丹王妍琦李锦锦李玉洁冼锦忠孟庆良河南中医药大学骨伤学院河南郑州450002 河南省中医院风湿病科河南郑州450053

目的分析雷公藤在类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)治疗中的发展趋势以及近年来的研究进展,以期为临床发展提供更好的参考依据。方法以中国学术期刊网络出版总库(CNKI)作为数据库来源,检索CNKI中已发表的雷公藤治疗RA的相关文献,... 详细信息

目的分析雷公藤在类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)治疗中的发展趋势以及近年来的研究进展,以期为临床发展提供更好的参考依据。方法以中国学术期刊网络出版总库(CNKI)作为数据库来源,检索CNKI中已发表的雷公藤治疗RA的相关文献,检索范围为2002年1月1日—2021年12月31日。采用文献计量分析方法,运用科学计量学工具CiteSpace 6.1.R3对这20年期间年发文量、期刊分布、研究现状,研究热点及发展趋势等进行可视化分析,绘制雷公藤治疗类风湿关节炎的知识图谱。结果共纳入1252篇文献,发文量总体呈上升趋势,基金来源主要是国家自然科学基金,学科主要分布在中医学和中药学。关键词共现中心度高于0.1的关键词有6个,分别为“雷公藤”“类风湿”“关节炎”“甲氨蝶呤”“中药”和“大鼠”。关键词聚类共得出11个聚类,突现词有17个。结论雷公藤治疗RA相关文献呈上升趋势,该领域的研究热点主要集中在RA的诊断方法和药物临床疗效。从各种可视化图谱分析可知,通过Citespace软件分析雷公藤对RA药物研究热点以及趋势分析,并提出相应思路以供临床研究使用,提高药物临床疗效。

关键词：雷公藤类风湿性关节炎文献计量分析 CiteSpace

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柑橘成熟度机器视觉无损检测方法研究

农业工程学报 2004年第2期20卷 144-147页

作者：应义斌饶秀勤马俊福浙江大学生物系统工程与食品科学学院杭州310029

水果内部品质无损检测技术是确定水果最佳采收期和按成熟度进行准确分级的关键。本研究以表面色泽与固酸比为柑橘成熟度指标,建立了用于柑橘成熟度检测的机器视觉系统,确定了适宜的背景颜色,进行了柑橘的分光反射试验,发现绿色柑橘表面... 详细信息

水果内部品质无损检测技术是确定水果最佳采收期和按成熟度进行准确分级的关键。本研究以表面色泽与固酸比为柑橘成熟度指标,建立了用于柑橘成熟度检测的机器视觉系统,确定了适宜的背景颜色,进行了柑橘的分光反射试验,发现绿色柑橘表面与桔黄色表面的反射率在700nm时反射率相差最大,约达53%,且各自的反射率都较大,700nm是获得高质量的柑橘图像的较佳中心波长。建立了利用协方差矩阵和样本属于桔黄色和绿色的概率来判断柑橘成熟度的判别分析法,并以实测的固酸比值作为对照,对72枚柑橘样本进行了试验,柑橘成熟度的判别准确率达到91.67%。这表明柑橘果实的表皮颜色与成熟度之间具有相关性。

关键词：柑橘成熟度机器视觉无损检测颜色协方差矩阵

丹酚酸B对人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制

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解放军医学杂志 2022年第4期47卷 334-339页

作者：王慧莲展俊平苗喜云孟庆良马俊福河南省中医院风湿病科郑州450000

目的探讨丹酚酸B对人类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的丹酚酸B(0、1、10、20、30、40和50μmol/L)处理人RA滑膜成纤维细胞MH7A,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,... 详细信息

目的探讨丹酚酸B对人类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的丹酚酸B(0、1、10、20、30、40和50μmol/L)处理人RA滑膜成纤维细胞MH7A,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,筛选丹酚酸B的最适作用浓度。取MH7A细胞,设置对照组(正常培养)、丹酚酸B组(加入丹酚酸B培养)与丹酚酸B+3-MA组(加入丹酚酸B和5 mmol/L自噬抑制剂3-MA共培养)。采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡情况;qRT-PCR检测caspase-3 mRNA相对表达水平;Western blotting检测caspase-3、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1和p62蛋白相对表达水平。结果与0μmol/L丹酚酸B组比较,30、40和50μmol/L丹酚酸B处理的MH7A细胞增殖率明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.05),据此选择50μmol/L丹酚酸B进行后续实验。与对照组比较,丹酚酸B组细胞增殖率、p62蛋白相对表达水平明显降低,细胞凋亡率、caspase-3 mRNA和蛋白以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05);与丹酚酸B组比较,丹酚酸B+3-MA组细胞增殖率(63.47%±1.94%vs.51.33%±4.67%)、p62蛋白相对表达水平(0.97±0.06 vs.0.20±0.02)明显升高,细胞凋亡率(21.4%±1.8%vs.30.4%±0.6%)、caspase-3 mRNA(0.83±0.06 vs.1.27±0.15)和蛋白(0.64±0.05 vs.1.10±0.09)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ(0.29±0.07 vs.1.23±0.21)、Beclin-1(0.36±0.05 vs.1.05±0.08)蛋白相对表达水平明显降低(P<0.05)。结论丹酚酸B可能通过诱导自噬抑制人RA滑膜成纤维细胞的增殖并促进其凋亡。

关键词：丹酚酸B 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡自噬

加味通苓散联合中药热奄包治疗急性痛风性关节炎的疗效及对NLRP3炎性体的影响

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中国老年学杂志 2023年第3期43卷 564-568页

作者：王平杜敏李明珠孟庆良马俊福河南省中医院河南中医药大学第二附属医院风湿病科河南郑州450002

目的观察加味通苓散联合中药热奄包治疗急性痛风性关节炎(GA)湿热痹阻证的疗效及对关节液中NLRP3炎性体的影响。方法将GA患者随机分为两组,对照组(n=72)给予秋水仙碱,观察组(n=74)给予加味通苓散联合中药热奄包。观察两组关节疼痛视觉... 详细信息

目的观察加味通苓散联合中药热奄包治疗急性痛风性关节炎(GA)湿热痹阻证的疗效及对关节液中NLRP3炎性体的影响。方法将GA患者随机分为两组,对照组(n=72)给予秋水仙碱,观察组(n=74)给予加味通苓散联合中药热奄包。观察两组关节疼痛视觉模拟评分(VAS)、自我感觉的总体评价(PGA)、疼痛数字评价量表(NRS)评分、中医症状、血尿酸(BUA)、关节液尿酸(JUA)、24 h尿酸排出量(UUA)、血沉(ESR)、炎性因子、NLRP炎性体(Nod样受体蛋白(NLRP)3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-1、caspase-12)。比较两组疗效、复发率及安全性。结果观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05)。与对照组治疗后比较,观察组VAS、NRS评分、中医症状、BUA、JUA、ESR、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、NLRP3、ASC、caspase-1、caspase-12明显降低(P<0.05),24 h UUA、PGA、干扰素(IFN)-γ、IL-4明显升高(P<0.05)。观察组不良反应发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论加味通苓散联合中药热奄包可明显改善急性GA湿热痹阻证患者的临床症状,其作用机制可能与调节关节液中NLRP3炎性体有关。

关键词：加味通苓散中药热奄包痛风性关节炎湿热痹阻证 Nod样受体蛋白(NLRP)3炎性体