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拉米夫定长期治疗复发病例中HBV YMDD基序的变化

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中华传染病杂志 2001年第4期19卷 245-246页

作者：舒欣李刚马会慧谢冬英姚集鲁中山医科大学第三附属医院传染科广州510630

拉米夫定为核苷类似物,对乙型肝炎病毒(HBV)的复制有抑制作用,近年应用于慢性乙型肝炎和肝移植术后防治HBV再感染.有报道在长期接受拉米夫定治疗的部分患者中出现耐药,耐药的产生与病毒多聚酶编码区的变异有关.我们检测了4例拉米夫定治... 详细信息

拉米夫定为核苷类似物,对乙型肝炎病毒(HBV)的复制有抑制作用,近年应用于慢性乙型肝炎和肝移植术后防治HBV再感染.有报道在长期接受拉米夫定治疗的部分患者中出现耐药,耐药的产生与病毒多聚酶编码区的变异有关.我们检测了4例拉米夫定治疗复发患者的HBVDNA,了解变异的发生情况,报道如下.材料与方法一、研究对象4例患者为1997年始在我院接受拉米夫定治疗的慢性HBV感染者,均为男性,平均年龄24岁(中位数).治疗前HBsAg、HBeAg、抗-HBc和血清HBV DNA均为阳性,其他肝炎病毒标志为阴性,血清丙氨酸转氨酶(ALT)正常或轻度升高(平均为35.3 U/L).4例患者接受拉米夫定治疗,100mg/d,在治疗第4周时出现HBV DNA阴转,在治疗第128周检查时HBsAg、HBeAg、抗-HBc仍阳性,血清HBV DNA也复转为阳性,血清ALT正常(平均为27 U/L).

关键词：乙型肝炎 HBV-DNA YMDD 拉米夫定氨基酸序列

趋化因子RANTES水平与慢性乙型肝炎患者肝脏炎症程度的关系

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中山大学学报（医学科学版） 2006年第B04期27卷 146-148页

作者：尉秀清文卓夫马会慧郑丰平姚集鲁中山大学附属第三医院消化内科感染科广东广州510630 中山大学附属第三医院感染科广东广州510630

[目的]了解慢性乙型肝炎患者肝脏组织趋化因子RANTES水平与肝脏炎症程度是否相关。[方法]64例慢性乙型肝炎患者和10例正常人肝组织按照炎症分级标准分为G0-G4,并用免疫组织化学染色定性及图象分析系统定量检测肝组织趋化因子RANTES表达... 详细信息

[目的]了解慢性乙型肝炎患者肝脏组织趋化因子RANTES水平与肝脏炎症程度是否相关。[方法]64例慢性乙型肝炎患者和10例正常人肝组织按照炎症分级标准分为G0-G4,并用免疫组织化学染色定性及图象分析系统定量检测肝组织趋化因子RANTES表达。[结果]慢性乙型肝炎组的肝组织RANTES的表达量较正常对照组显著为高(P<0.05); G0—G4肝组织RANTES的表达量分别为3.7±1.5,15.0±5.7,21.6±5.9,30.3±8.2和40.9±12.3阳性单位值,随着慢性乙型肝炎患者肝脏组织炎症分级的增加,肝组织RANTES的表达强度逐渐升高且各级之间比较均具有显著的差异(P<0.05)。[结论]趋化因子RANTES在慢性乙型肝炎的发病机制中具有重要的作用。

关键词：趋化因子 RANTES 肝炎乙型炎症

重组人BMP-7真核表达质粒的构建及转染软骨细胞后的表达

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中国矫形外科杂志 2006年第11期14卷 845-848页

作者：卢华定蔡道章马会慧卢建溪中山大学附属第三医院骨科广州510630 中山大学附属第三医院传染科广州510630 中山大学附属第三医院中心实验室广州510630

[目的]构建重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7)基因真核表达质粒,转染兔关节软骨细胞,探讨外源性人rhBMP-7基因在转染软骨细胞中的表达情况及对细胞生物学性状的影响。[方法]采用PCR技术扩增rhBMP-7基因,将其插入真核表达载体pcDNA 3.1中,体... 详细信息

[目的]构建重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7)基因真核表达质粒,转染兔关节软骨细胞,探讨外源性人rhBMP-7基因在转染软骨细胞中的表达情况及对细胞生物学性状的影响。[方法]采用PCR技术扩增rhBMP-7基因,将其插入真核表达载体pcDNA 3.1中,体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的rhBMP-7质粒转染软骨细胞,经G418筛选、免疫组化染色和逆转录PCR检测其表达,同时检测表达产物对维持软骨细胞表型的作用。[结果]经过PCR及酶切鉴定证实获得了BMP-7真核表达质粒pcDNA 3.1-rhBMP-7,通过免疫组化染色和逆转录PCR鉴定证实rhBMP-7在转染后的软骨细胞中得到了表达,其表达产物促进软骨细胞表型的维持。[结论]外源性rhBMP-7基因转染软骨细胞可以获得高效表达,并具有一定的维持软骨细胞表型的作用,为软骨组织工程的研究提供了改良的种子细胞。

关键词：骨形成蛋白-7 基因转染软骨细胞

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人源性抗-HBc单链噬菌体抗体库的构建

中华传染病杂志 2003年第6期21卷 403-406页

作者：汤正好马会慧李刚黄呈辉卢建溪姚集鲁中山大学附属第三医院传染科

目的　构建人源性单链噬菌体抗体库 ,为筛选人源性抗 HBc单链抗体奠定基础。方法　利用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和噬菌体表面展示技术 ,直接从乙肝病毒核心抗体 (抗 HBc)阳性患者淋巴细胞中提取总RNA ,逆转录成cDNA ;合成全套人... 详细信息

目的　构建人源性单链噬菌体抗体库 ,为筛选人源性抗 HBc单链抗体奠定基础。方法　利用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和噬菌体表面展示技术 ,直接从乙肝病毒核心抗体 (抗 HBc)阳性患者淋巴细胞中提取总RNA ,逆转录成cDNA ;合成全套人抗体可变区引物扩增抗体可变区基因 ,并将重、轻链可变区基因进行拼接装配成单链抗体 (ScFv)基因 ,重组于噬菌粒载体 pHEN1,转化抑制型大肠埃希菌E .coliTG1,以辅助噬菌体援救后 ,构建成人源性单链噬菌体库。结果　成功地构建了人源性抗 HBc单链噬菌体库 ,库容量达 10 6。结论　利用RT PCR和噬菌体表面展示技术可以成功构建人源性单链抗体库 ,并达到建库标准 ,可进一步从中筛选人源性单链抗体。

关键词：人源性单链噬菌体抗体乙肝病毒核心抗体聚合酶链反应抗体库抗-HBc

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监护仪计量检定存在的问题及解决对策

医疗装备 2020年第21期33卷 25-25,28页

作者：马会慧合肥市第三人民医院安徽合肥230022

只有量值准确的监护仪才能客观地监测、预警患者的生命体征。该研究归类整理了院内149台监护仪计量检定存在的问题,通过科学分析问题成因,制定针对性的修复对策,实现了复检结果全部合格的目标。此外,该研究还总结了监护仪日常维护保养... 详细信息

只有量值准确的监护仪才能客观地监测、预警患者的生命体征。该研究归类整理了院内149台监护仪计量检定存在的问题,通过科学分析问题成因,制定针对性的修复对策,实现了复检结果全部合格的目标。此外,该研究还总结了监护仪日常维护保养及计量检定过程中的注意事项,为医疗机构规范、提高对监护仪的质量控制管理工作提供参考。

关键词：监护仪计量检定问题分析解决对策血氧饱和度

人源性抗HBc单链抗体的筛选、鉴定及基因序列测定

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中国病理生理杂志 2003年第3期19卷 329-333页

作者：汤正好马会慧陈文思顾琳李刚姚集鲁中山大学附属第三医院传染病科广东广州510630

目的 :筛选人源性抗乙型肝炎病毒核心蛋白 (HBc)单链抗体 (ScFv)并在体外原核表达、鉴定和基因序列测定 ,为抗HBcScFv的进一步研究奠定基础。方法 :采用噬菌体表面展示技术 ,以乙肝病毒核心抗原为包被抗原 ,从人源性单链噬菌体抗体库中... 详细信息

目的 :筛选人源性抗乙型肝炎病毒核心蛋白 (HBc)单链抗体 (ScFv)并在体外原核表达、鉴定和基因序列测定 ,为抗HBcScFv的进一步研究奠定基础。方法 :采用噬菌体表面展示技术 ,以乙肝病毒核心抗原为包被抗原 ,从人源性单链噬菌体抗体库中经过 3轮“吸附 -感染 -扩增”的筛选过程 ,获得抗原结合活性较强的人源性抗HBc单链抗体阳性克隆 ,并在大肠杆菌HB2 15 1中进行ScFv可溶性表达 ,对其进行免疫学鉴定和序列测定。结果 :筛选出的ScFv具有抗HBc的特异性 ,并可在大肠杆菌中进行可溶性表达 ;基因序列测定表明 ,该ScFv的重链段基因与人类免疫球蛋白重链可变区相符 ,轻链段基因为人类免疫球蛋白κ轻链可变区。结论 :利用噬菌体抗体库技术。

关键词：人源性抗HBc单链抗体筛选鉴定基因序列测定乙型肝炎

逆转录病毒介导的反义c-myb对肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原基因表达的影响

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中国病理生理杂志 2003年第6期19卷 726-729,T001页

作者：马会慧姚集鲁姚春斓李刚陈雪娟顾琳杨绍基中山大学附属第三医院传染科广东广州510630

目的 :探讨反义c -mybRNA对体外培养的肝星状细胞 (HSC)增殖及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法 :构建含有反向c-myb基因片段的重组逆转录病毒载体pDOR -myb ,将其导入包装细胞PA317中 ,收获含病毒的培养上清 ,进一步感染体外培养的大鼠HS... 详细信息

目的 :探讨反义c -mybRNA对体外培养的肝星状细胞 (HSC)增殖及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法 :构建含有反向c-myb基因片段的重组逆转录病毒载体pDOR -myb ,将其导入包装细胞PA317中 ,收获含病毒的培养上清 ,进一步感染体外培养的大鼠HSC ,采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法测定细胞增殖反应 ,采用半定量RT -PCR检测c -myb、α1-Ⅰ型胶原mRNA表达。结果 :成功分离培养大鼠HSC ,感染pDOR -myb病毒的HSC自身c -myb表达、细胞增殖及α -Ⅰ型胶原mRNA表达显著受抑。结论 :c-myb在HSC激活增殖过程中起重要作用 ,反义c-myb基因能抑制HSC增殖及Ⅰ型胶原基因表达 ,这提示抑制c -myb表达可能是防治肝纤维化的有效途径。

关键词：肝硬化基因反义基因 c—myb 肝星状细胞

乙、丙型肝炎病毒基因联合诊断芯片的研制及应用

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世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 866-870页

作者：陈伟李刚马会慧汤正好黄呈辉韩晓燕中山大学附属第三医院中心实验室广东省广州市510630 中山大学附属第三医院传染病科广东省广州市510630 上海市第六人民医院传染病科上海市200233 深圳市宝安区血站广东省深圳市518101

目的:制备一款肝炎病毒检测芯片,能同时实现对乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HBV YMDD变异株及HCV基因型的检测,并与其他检测方法进行比较,以探讨基因芯片技术临床应用的可行性. 方法:根据HBV、HCV的序列设计出探针,采用点样... 详细信息

目的:制备一款肝炎病毒检测芯片,能同时实现对乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HBV YMDD变异株及HCV基因型的检测,并与其他检测方法进行比较,以探讨基因芯片技术临床应用的可行性. 方法:根据HBV、HCV的序列设计出探针,采用点样法制备芯片.收集HBV DNA阳性和HCV RNA阳性血清各20 份,YMDD变异株阳性血清20份,HBV DNA阴性和HCV RNA阴性血清各10份,用基因诊断芯片检测,并与荧光定量法、错配PCR及测序法比较. 结果:HBV DNA阳性标本和HCV RNA阳性标本用芯片检测均为阳性;芯片法检测HBV YMDD变异株和错配PCR法的符合率为75%,和测序法的符合率为95%;芯片法检测HCV基因型和测序法的符合率为75%. 结论:基因诊断芯片的敏感性和特异性较高,且能检测出不同病毒株的共生状态,但在检测HCV基因型方面存在一定的假阴性和假阳性.

关键词：丙型肝炎病毒乙型肝炎病毒诊断芯片基因型

骨形态发生蛋白7在慢性HBV感染者肝组织中的表达

维普期刊数据库评论

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中山大学学报（医学科学版） 2007年第3期28卷 279-283页

作者：丁芹马会慧崇雨田杨绍基中山大学附属第三医院感染科

【目的】通过对不同慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝组织中骨形态发生蛋白7(BMP-7)表达的分析,初步探讨BMP-7在肝脏炎症和肝细胞再生过程中可能发挥的作用。【方法】对56例慢性HBV感染者及5例正常对照肝组织进行常规组织学观察,按病理诊... 详细信息

【目的】通过对不同慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝组织中骨形态发生蛋白7(BMP-7)表达的分析,初步探讨BMP-7在肝脏炎症和肝细胞再生过程中可能发挥的作用。【方法】对56例慢性HBV感染者及5例正常对照肝组织进行常规组织学观察,按病理诊断分组。其中病毒性肝炎乙型慢性轻度12例,中度12例,重度6例,重型8例,乙肝肝硬化10例,肝癌8例。进行BMP-7的免疫组织化学染色,观察光镜下分布特点,取部分标本进行图像分析。取8例肝癌患者癌结节及3例癌旁组织进行实时荧光定量RT-PCR,检测BMP-7mRNA的表达。【结果】BMP-7阳性单位在正常人肝脏(7.27±2.88)、病毒性肝炎(乙型)慢性轻度(8.50±3.22)、中度(10.96±2.88)、重度(13.11±1.26)有逐渐增加趋势,重型肝炎(7.50±1.21)、肝硬化(8.24±1.79)较中度、重度低;进一步比较BMP-7阳性区灰度有相似结果(P值均小于0.01)。BMP-7在肝脏既有胞浆型表达,也有胞膜型表达。在慢性中度、重度患者及肝硬化结节内为弥漫性表达;但在重型肝炎患者,仅呈灶状表达;在癌周组织有弥漫或灶状表达,在癌结节表达极少。【结论】在慢性乙型肝炎患者肝组织中BMP-7表达增多,但是在重型肝炎肝组织及肝癌结节中表达减少,值得进一步研究。

关键词：骨形态发生蛋白7 肝炎肝硬化肝癌