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基于蛋白质组学的消癌解毒方干预肝癌大鼠的作用机制研究

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基于蛋白质组学的消癌解毒方干预肝癌大鼠的作用机制研究

作者：饶希午南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:中医肿瘤癌毒病机理论认为,癌毒是引起恶性肿瘤发生发展的关键因素,毒、痰、瘀、虚等是其主要病机要素,消癌解毒方是基于癌毒病机理论的临床验方。本课题主要运用蛋白质组学技术观察消癌解毒方干预肝癌模型大鼠肝组织与血清总蛋白... 详细信息

目的:中医肿瘤癌毒病机理论认为,癌毒是引起恶性肿瘤发生发展的关键因素,毒、痰、瘀、虚等是其主要病机要素,消癌解毒方是基于癌毒病机理论的临床验方。本课题主要运用蛋白质组学技术观察消癌解毒方干预肝癌模型大鼠肝组织与血清总蛋白的表达差异,并对差异表达蛋白质进行生物信息学分析,以此探讨消癌解毒方治疗肝癌的潜在作用机制。方法:40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、消癌解毒方低剂量组、消癌解毒方高剂量组,每组10只。模型组与消癌解毒方组大鼠自由饮用0.01%二乙基亚硝胺(DEN)溶液建立肝癌模型。造模第4周开始,消癌解毒方低、高剂量两组大鼠分别给予10.87 g/kg·d、21.74 g/(kg·d)的消癌解毒方溶液灌胃;正常组与模型组同时给予等体积量0.9%生理盐水灌胃。第16周处死大鼠后采集肝组织样本与血清样本。提取肝组织总蛋白样本与血清总蛋白样本,分别进行TMT肽段标记,质谱鉴定,运用KOBAS数据库对差异表达蛋白质进行生物学作用分析、信号通路分析,及应用String数据库进行蛋白互作网络(PPI)分析。结果:(1)肝组织差异蛋白表达肝组织样本中共鉴定出6287个蛋白。模型组与正常组相比,具有显著性差异表达的蛋白共1002个,其中下调蛋白536个,上调蛋白466个。消癌解毒方低剂量组与模型组相比,显著性差异表达的蛋白共456个,包括下调蛋白191个,上调蛋白265个。消癌解毒方高剂量组与模型组相比,显著性差异表达的蛋白共752个,包括下调蛋白328个,上调蛋白424个。差异表达蛋白主要参与了代谢、糖酵解、免疫炎症反应、细胞增殖、细胞分化、细胞生长、细胞凋亡、细胞周期、粘附分子、纤溶酶原受体、纤维蛋白细胞外基质蛋白、金属蛋白酶、血管生长、活性氧、氧化应激、热休克、肝脏修复和分化、原癌基因、肿瘤进展等。信号通路分析结果(按照富集分数由高到低排列)发现差异表达蛋白涉及如过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路、糖酵解、AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)信号通路;细胞外基质受体相互作用信号通路,纤溶酶原激活物联转导信号通路、DNA复制、细胞周期、细胞黏附分子、磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路、p53信号通路、两面神激酶/信号传导及转录激活因子(Jak/STAT)信号通路、缝隙连接、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、自噬调节、Wnt信号通路、低氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、凋亡信号通路、钙黏附素信号通路、B细胞激活信号通路、FoxO信号通路、核转录-κB(NF-κB)信号通路等;(2)血清差异蛋白表达血清样品共鉴定出1151个蛋白点。模型组与正常组相比,显著差异表达的蛋白共234个,其中下调蛋白83个,上调蛋白151个。消癌解毒方低剂量组与模型组相比,显著差异表达的蛋白共144个,包括下调蛋白88个,上调蛋白56个。消癌解毒方高剂量组与模型组相比,显著差异表达的蛋白共182个,包括下调蛋白88个,上调蛋白94个。差异表达蛋白主要参与了代谢、免疫炎症反应、氧化应激、热休克、细胞生长与分化、细胞周期与凋亡、细胞外基质蛋白、血管生成、癌相关等。信号通路分析结果(按照富集分数由高到低排列)发现差异表达蛋白涉及的信号通路包含了细胞外基质受体相互作用信号通路、PPAR信号通路、TLRs信号通路。HIF-1信号通路、p53信号通路、PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路、吞噬体、NF-κB信号通路、糖酵解、TGF-β信号通路、B细胞激活、Jak/STAT信号通路、Fox0信号通路等。结论:本研究通过应用蛋白质组学技术检测消癌解毒方干预肝癌模型大鼠的肝脏组织及外周血清中蛋白表达的差异,探讨了消癌解毒方治疗肝癌的潜在作用机制。我们发现消癌解毒方抑制肝癌发生、发展的作用机制呈现多靶点、多中心、多途径的特点,其中尤其与对代谢和基质受体相互作用的调控关系最密切,同时对肿瘤微环境的免疫炎症反应的也具有调控作用。

关键词：肝癌蛋白质组学癌毒病机消癌解毒方

健脾解毒方通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制幽门螺杆菌诱导的胃癌细胞干性增强的机制研究

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中华中医药杂志 2022年第9期37卷 5361-5365页

作者：刘宁宁饶希午张志鹏谢咚季青谈政孙明瑜上海中医药大学附属曙光医院肿瘤科上海201203 上海中医药大学曙光医院肝病研究所教育部肝肾疾病重点实验室上海201203

目的:探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(H. pylori)感染诱导的胃癌细胞干性增强的调控作用及可能的机制。方法:采用H. pylori标准株NCTC11637与人胃癌MKN45细胞共培养的方法感染MKN45细胞,分为对照组,***感染组,健脾解毒方醇提物低、中、高剂... 详细信息

目的:探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(H. pylori)感染诱导的胃癌细胞干性增强的调控作用及可能的机制。方法:采用H. pylori标准株NCTC11637与人胃癌MKN45细胞共培养的方法感染MKN45细胞,分为对照组,***感染组,健脾解毒方醇提物低、中、高剂量(0.5、1.0、2.5 mg/mL)组,成球实验观察上述细胞成球能力;Western Blot检测H. pylori感染胃癌细胞后干性转录因子OCT-4、CD44、Nanog、SOX-2的表达变化,检测健脾解毒方对H. pylori感染诱导的人胃癌MKN45细胞干性转录相关因子表达的影响;检测H. pylori感染对胃癌细胞核中β-catenin表达的影响及健脾解毒方的调控作用。结果:H. pylori感染可增强胃癌细胞的成球能力(P<0.01),健脾解毒方低、高剂量组可不同程度抑制胃癌细胞的成球能力(P<0.01)。***感染可显著增加人胃癌MKN45细胞中OCT-4、CD44、Nanog、SOX-2蛋白表达(P<0.01)。健脾解毒方可以下调H. pylori感染诱导的OCT-4、CD44和SOX-2表达(P<0.01),其中对OCT-4和CD44的作用最强,并呈一定的剂量依赖效应。H. pylori感染MKN45细胞12 h后,β-catenin表达显著增加(P<0.01),与MKN45+H. pylori组比较,健脾解毒方醇提物低、高剂量作用后,胞核β-catenin蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:健脾解毒方可抑制H. pylori诱导的胃癌细胞的成球能力,抑制H. pylori诱导的人胃癌细胞干性转录因子OCT-4、CD44和SOX-2表达,调控Wnt/β-catenin信号通路是其机制之一,这可能是其防治胃癌的重要作用靶点。

关键词：幽门螺杆菌健脾解毒方胃癌干性转录因子

含水乙醇/RP-3航空煤油混合燃料的层流燃烧速度

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航空动力学报 2024年第1期39卷 1-11页

作者：刘宇周博谷午饶大为马洪安曾文沈阳航空航天大学航空发动机学院、辽宁省航空推进系统先进测试技术重点实验室沈阳110136

采用定容燃烧实验装置获得初始压力为0.1 MPa、初始温度为450 K、当量比为0.8~1.4工况下乙醇/RP-3航空煤油预混火焰和含水乙醇/RP-3航空煤油预混火焰的层流燃烧速度(LBVs),并分析了乙醇掺混比、乙醇含水量、当量比等因素对混合燃料层流... 详细信息

采用定容燃烧实验装置获得初始压力为0.1 MPa、初始温度为450 K、当量比为0.8~1.4工况下乙醇/RP-3航空煤油预混火焰和含水乙醇/RP-3航空煤油预混火焰的层流燃烧速度(LBVs),并分析了乙醇掺混比、乙醇含水量、当量比等因素对混合燃料层流燃烧速度的影响。研究表明:随着乙醇掺混比的增加,乙醇/RP-3航空煤油混合燃料层流燃烧速度增大;当RP-3航空煤油中乙醇掺混比一定时,随着乙醇含水量的增加,含水乙醇/RP-3混合燃料层流燃烧速度减小。由燃烧反应动力学分析可知,混合燃料的层流燃烧速度受动力学、热力学等的综合影响。本研究所获实验数据能够为生物乙醇燃料在航空发动机中的应用提供理论基础和技术支持。

关键词：定容燃烧 RP-3航空煤油含水乙醇层流燃烧速度(LBV) 燃烧反应动力学

湿热证大肠癌患者肠道菌群对AOM/DSS小鼠肠癌发生的影响

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2842-2846页

作者：周晔禄赵玲贾茹饶希午侯新新岑戎张怡冯媛媛刘宁宁周利红王炎李琦上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学中西医结合研究院上海201203

目的:探讨湿热证大肠癌患者肠道菌群结构特点及其对肠癌发生的影响。方法:通过16S rRNA测序分析湿热证和无明显证候大肠癌患者肠道菌群特征,并将其粪菌提取液对伪无菌小鼠进行粪菌移植,同时通过AOM/DSS诱导小鼠肠癌发生。观察小鼠的体... 详细信息

目的:探讨湿热证大肠癌患者肠道菌群结构特点及其对肠癌发生的影响。方法:通过16S rRNA测序分析湿热证和无明显证候大肠癌患者肠道菌群特征,并将其粪菌提取液对伪无菌小鼠进行粪菌移植,同时通过AOM/DSS诱导小鼠肠癌发生。观察小鼠的体质量、成瘤数,比较各组细胞因子表达水平。结果:与无明显证型大肠癌患者比较,湿热证大肠癌患者具有显著不同的微生物群落结构,其中致病菌(如大肠杆菌属、别样杆菌属、肠球菌属、Intestinibacter菌属、嗜胆菌属等)的丰度明显增高,此外以大肠杆菌为代表的产LPS病原菌明显富集(P<0.01)。对AOM/DSS小鼠模型进行粪菌移植后,相较于无明显证型粪菌移植小鼠,湿热证粪菌移植小鼠体质量明显减轻(P<0.01),结肠肿瘤形成增多(P<0.01),且促炎细胞因子IL-6 mRNA表达显著增高(P<0.05)。结论:湿热证大肠癌患者具有致病菌增多和以LPS合成细菌增多为主要特点的肠道菌群结构,其肠道菌通过粪菌移植后可促进AOM/DSS小鼠肠癌发生。

关键词：湿热证大肠癌肠道菌群粪菌移植 16S rRNA测序脂多糖致病菌大肠杆菌

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南非人类学两种范式的冲突与融合

中南民族大学学报（人文社会科学版） 2024年第4期44卷 134-142,221页

作者：王昊午中国社会科学院民族学与人类学研究所北京100081

南非人类学研究受到了来自英国和德国的两种不同学术传统的影响,围绕这两种传统形成了两种不同的分支:以英语为主要媒介的社会人类学(social anthropology)和使用阿非利卡语的阿非利卡民族学(volkekunde)。这两种学术传统不仅表现出了... 详细信息

南非人类学研究受到了来自英国和德国的两种不同学术传统的影响,围绕这两种传统形成了两种不同的分支:以英语为主要媒介的社会人类学(social anthropology)和使用阿非利卡语的阿非利卡民族学(volkekunde)。这两种学术传统不仅表现出了研究关注点以及研究方法、理论上的差异,学科的价值取向也渐行渐远。社会人类学强调普遍性,倾向于自由主义,反对殖民与种族隔离;阿非利卡民族学强调文化特殊性,并受到阿非利卡民族主义的裹挟,成为种族隔离制度的思想与理论来源。这些差异最终导致两个学科分支经历了不同的发展轨迹,走向了不同命运。

关键词：人类学南非学科史种族隔离

唾液乳杆菌代谢物丁二酸调控蛋鸡产蛋性能与蛋品质的研究

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福建畜牧兽医 2024年第4期46卷 1-4页

作者：饶希清流县畜牧兽医水产中心福建清流365307

本试验旨在研究唾液乳杆菌代谢物丁二酸对蛋鸡产蛋性能与蛋品质的影响,并分析其机制。选择450日龄海兰褐蛋鸡108羽,随机分为4组:空白对照组,丁二酸低剂量组(25 mM)、中剂量组(50 mM)和高剂量组(100 mM)。对照组饲喂基础日粮,丁二酸低、... 详细信息

本试验旨在研究唾液乳杆菌代谢物丁二酸对蛋鸡产蛋性能与蛋品质的影响,并分析其机制。选择450日龄海兰褐蛋鸡108羽,随机分为4组:空白对照组,丁二酸低剂量组(25 mM)、中剂量组(50 mM)和高剂量组(100 mM)。对照组饲喂基础日粮,丁二酸低、中、高剂量组在基础日粮上分别添加25 mM、50 mM、100 mM丁二酸,试验期14 d,测定各组的产蛋性能、蛋品质;试验结束后,选取产蛋性能最优组、对照组的十二指肠进行HE染色,测量肠绒毛高度和隐窝深度。结果:(1)试验期内,低、中、高剂量组日产蛋率高于对照组的天数分别为10 d、8 d、7 d,平均日产蛋率分别较对照组提高5.03%、1.06%、1.85%;(2)25 mM组和50 mM组的蛋白高度分别比对照组提高33.51%和38.92%,差异极显著(P0.05);试验各组的蛋壳强度与蛋壳厚度较对照组高4.12%~10.26%(P>0.05);(3)与对照组相比,25 mM组的肠绒毛高度提高22.19%,差异显著(P<0.05),肠绒毛高度/隐窝深度(V/C比值)提高37.04%,差异显著(P<0.05)。综上,产蛋鸡后期饲喂丁二酸可提升产蛋性能和蛋品质,生产实践中以添加25 mM效果最好。

关键词：乳杆菌丁二酸蛋鸡产蛋性能蛋品质肠黏膜

孝的发生、意蕴结构与本真性——基于现象学-诠释学的一种考察

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现代哲学 2024年第2期 92-100页

作者：江午奇湖南理工学院马克思主义学院岳阳414006

孝的发生既非基于“生生”“亲亲”,也非单纯源于“原时间”,而是源于前理论的“理解”。后者的“赋义”特质指引出孝的意蕴结构。“理解”基于其自身的“空间”“时间”“情绪”等特质,使得我们“作为”亲、子角色来照面,由此父母尊亲... 详细信息

孝的发生既非基于“生生”“亲亲”,也非单纯源于“原时间”,而是源于前理论的“理解”。后者的“赋义”特质指引出孝的意蕴结构。“理解”基于其自身的“空间”“时间”“情绪”等特质,使得我们“作为”亲、子角色来照面,由此父母尊亲与子女才会相互“顾惜”,才有慈爱、孝爱之可能。孝的结构非单向的子女朝向父母的孝爱关系,而是具有阴阳时间流特质的亲子关系结构不可分割的环节。虽如此,慈爱更多的是基于自然性,而孝爱更多的是基于仁、善,因而“孝”在前述结构中处于更重要地位。以“孝爱”为重心的关系结构,不仅“参与构成意蕴”“参与构成世界之为世界”,而且根本上就是组建整体意蕴世界的基本结构。正因如此,孝爱总是陷入非本真态。本真态的孝的实现,关键在于“诚”。作为把我们自身引回到子女朝向父母的源初时间流的“理解”活动,“诚”是一种解蔽着的赢获本己自身之行动。

关键词：孝理解亲子关系阴阳时间流诚

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关于素域上的Koblitz曲线

密码学报(中英文) 2024年

作者：伍涵许光午山东大学密码技术与信息安全教育部重点实验室山东大学网络空间安全学院山东区块链研究院 4. 泉城实验室

二元扩域F2m上的Koblitz曲线Ea属于椭圆曲线密码学中最早一类具有理论和实际意义的曲线,在其上算术运算起重要作用的Frobenius映射τ以下面的方式关联基域的元素个数和有理点的个数:2m=N(τm),#Ea(F2m)=N(τm-1),其中N是Z[τ]上的范,而... 详细信息

二元扩域F2m上的Koblitz曲线Ea属于椭圆曲线密码学中最早一类具有理论和实际意义的曲线,在其上算术运算起重要作用的Frobenius映射τ以下面的方式关联基域的元素个数和有理点的个数:2m=N(τm),#Ea(F2m)=N(τm-1),其中N是Z[τ]上的范,而有理点的个数公式通过zeta函数得出.近来区块链平台中的密码选择使素域上的Koblitz曲线Eb:y2=x3+b/Fp得到关注,这里的素特征p≡1(mod 3).关于Eb的有理点的个数计算已有Rajwade的经典结果,其推导过程与zeta函数并无关系.本文从Rajwade公式得到Eb的有理点的个数的一个简洁表达,只需复数的基本运算,不再涉及平方剩余或立方剩余,也不用列出六个分段情况.本文公式基于Eisenstein整数环Z[ω],证明存在素元π∈Z[ω]和单位u∈Z[ω],使得p=N(π),#Eb(Fp)=N(π-u).这是同二元域上Koblitz曲线的情形完全相似的表达,存在两个Z[ω]中差为一个单位的整数,它们的范分别给出基域的元素个数和曲线上有理点的个数.为此还发展了一些计算三次剩余的工具,包括有理整数的三次剩余的判定,也首次给出了2的三次剩余的确切公式.

关键词： Koblitz曲线 Eisenstein整数有理点数

“第三滞留”:技术图像时代的摄影本体论阐释

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文艺研究 2024年第4期 26-38页

作者：周午鹏南昌大学人文学院

摄影发展至今近两百年,但哲学与艺术仍未能就“什么是摄影”这一摄影本体论问题达成基本共识。传统摄影理论求助于皮尔斯的“指示符”、巴特的“刺点”与本雅明的“灵晕”等术语,因过于强调摄影的图像性而忽视了摄影的技术发生。在现象... 详细信息

摄影发展至今近两百年,但哲学与艺术仍未能就“什么是摄影”这一摄影本体论问题达成基本共识。传统摄影理论求助于皮尔斯的“指示符”、巴特的“刺点”与本雅明的“灵晕”等术语,因过于强调摄影的图像性而忽视了摄影的技术发生。在现象学看来,回答摄影本体论问题的关键在于认识到:第一,摄影的技术物性,即“第三滞留”,其作为摄影经验的时间性决定了摄影的图像性;第二,“摄影”首先是动词,而后才是名词。一旦将摄影与身体、技术的关系纳入摄影本体论的视域中,摄影在自然与文化之间的二者择一就被还原为在身体与技术之间的二者择一,分别给予观者摄影艺术与摄影科学:前者视摄影为一种技术化的身体实践,后者视摄影为一种具身化的技术实践,它们以相互阐释的方式确立了摄影在生活世界中的位置。

关键词：图像时代本体论问题本雅明灵晕摄影艺术传统摄影皮尔斯指示符