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四氯化碳不同条件下复制大鼠肝纤维化模型的比较

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山东畜牧兽医 2019年第11期40卷 1-4页

作者：梁洁孟根斯立木颜羽昕王昕金蓉苏晓丽马月宏谢敏琦内蒙古医科大学基础医学院内蒙古呼和浩特010110 内蒙古自治区第三医院

为了探讨四氯化碳在不同条件下建立肝纤维化动物模型的最佳方法,将大鼠分为5组。除正常组外,各组采用不同条件的四氯化碳造模法,每周给药2次。8周后,测定血清谷丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶和碱性磷酸酶;取肝脏组织作病理学相关检查... 详细信息

为了探讨四氯化碳在不同条件下建立肝纤维化动物模型的最佳方法,将大鼠分为5组。除正常组外,各组采用不同条件的四氯化碳造模法,每周给药2次。8周后,测定血清谷丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶和碱性磷酸酶;取肝脏组织作病理学相关检查。结果表明,各试验组大鼠均表现出肝纤维化,其中腹腔注射组程度最严重,灌胃2组程度最轻。结论:本研究中不同方法都能成功制作肝纤维化大鼠模型,但肝纤维化程度有所不同并且各有利弊,其中灌胃2组最为理想。

关键词：肝纤维化四氯化碳疾病模型大鼠

基于蛋白质组学研究七味清肝散的抗肝纤维化作用及机制

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中国药房 2020年第11期31卷 1294-1302页

作者：梁洁孟根斯立木颜羽昕金蓉包小妹马丽杰那日苏苏晓丽谢敏琦马月宏内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010110 内蒙古医科大学药学院呼和浩特010110 内蒙古自治区第三医院睡眠科呼和浩特010110

目的:探讨七味清肝散的抗肝纤维化(HF)作用,并挖掘其潜在机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为空白组、HF模型组和七味清肝散低、中、高剂量组[135、270、405 mg/(kg·d),以生药总量计],每组12只。除空白组外,其余各组均灌胃50%四氯化... 详细信息

目的:探讨七味清肝散的抗肝纤维化(HF)作用,并挖掘其潜在机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为空白组、HF模型组和七味清肝散低、中、高剂量组[135、270、405 mg/(kg·d),以生药总量计],每组12只。除空白组外,其余各组均灌胃50%四氯化碳花生油溶液(2 mL/kg,每周2次,连续8周)以复制HF模型;与此同时,空白组和HF模型组大鼠均灌胃等容0.5%羧甲基纤维素钠溶液,各给药组大鼠均灌胃相应药物,每日1次,连续8周。观察各组大鼠的一般情况,于末次给药后观察其肝脏形态,并测定肝脏指数;检测大鼠血清肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、羟脯氨酸(HYP)]含量以及肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,并采用苏木精-伊红染色和Masson染色进行组织病理学观察。采用串联质谱标签(TMT)技术,以蛋白表达量的差异倍数为指标,筛选药物组(合并七味清肝散各剂量组肝组织样品)和HF模型组的差异表达蛋白,并借助Uniprot-GOA数据库以及KAAS、KEGG mapper在线工具等对其进行基因本体(GO)和KEGG通路富集分析。结果:空白组大鼠健康状况好;肝脏呈鲜红色且表面光滑,肝小叶完整,未见变性坏死、炎症细胞浸润或纤维组织增生。与空白组比较,HF模型组大鼠饮食减少、精神萎靡、皮毛杂乱且无光泽;肝脏呈暗红色或黄色,表面粗糙,质地较硬,可见炎症细胞浸润、纤维组织破坏、桥间连接等现象;其肝脏系数、肝功能指标含量和α-SMA的表达水平均显著升高(P<0.05)。与HF模型组比较,七味清肝散各剂量组大鼠上述症状均有不同程度的改善,且低剂量组肝脏系数、高剂量组ALP含量以及各剂量组ALT、AST、HYP含量和α-SMA的表达水平均显著降低(P<0.05)。共筛选出与HF有关的差异表达蛋白42个,其中表达上调15个、表达下调27个,包括脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)等。富集分析结果显示,差异表达蛋白主要富集于细胞外空间、血液微粒等细胞部位,涉及氧化还原酶活性、脂肪酸结合等分子功能,异型细胞间黏附的调控、蛋白质活化级联等生物过程以及视黄醇代谢、花生四烯酸代谢、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)等信号通路。结论:七味清肝散可降低HF模型大鼠的肝脏系数以及血清中ALT、AST、ALP、HYP含量,下调α-SMA的表达,改善肝组织的炎症及纤维化程度,具有一定的肝保护作用。该方潜在抗HF作用机制可能涉及FABP4、CYP7A1、PPAR等多个靶点和信号通路。

关键词：肝纤维化七味清肝散蛋白质组学串联质谱标签技术差异表达蛋白大鼠

基于ITGB4/FAK/p38信号通路蒙药蓝盆花总黄酮提取物体内外抗肝纤维化的作用研究

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医学研究杂志 2023年第8期52卷 55-62页

作者：赵晓璐孟根斯立木张春艳颜羽昕高晓阳马月宏内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010000

目的探讨蒙药蓝盆花总黄酮提取物(total flavonoid extract of Scabiosa comosa,TFS)对肝纤维化体内外的影响,以及通过对ITGB4/FAK/p38信号通路的调控对肝纤维化的作用。方法体内实验:选取50只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,TFS高(20... 详细信息

目的探讨蒙药蓝盆花总黄酮提取物(total flavonoid extract of Scabiosa comosa,TFS)对肝纤维化体内外的影响,以及通过对ITGB4/FAK/p38信号通路的调控对肝纤维化的作用。方法体内实验:选取50只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,TFS高(200mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)剂量组,除对照组外均给予2ml/kg CCl_(4)灌胃。期间对TFS各剂量组给药,而对照组和模型组不做处理,灌胃10周。检测血清丙氨酸氨基转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量及肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色、Masson染色观察肝组织病理学改变;肝组织经转录组测序筛选与肝纤维化相关的通路;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)与Western blot法分别检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、collagenⅠ及ITGB4/FAK/p38信号通路相关mRNA及蛋白表达情况。体外实验:MTT法检测TFS对HSC-T6细胞的抑制率;RT-qPCR与Western blot法分别检测HSC-T6细胞中α-SMA、collagenⅠ及ITGB4/FAK/p38信号通路相关mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测不同浓度TFS对HSC-T6细胞凋亡的影响。结果与空白组比较,TFS显著增加了模型组中ALT、AST、ALP及HYP的含量(P<0.01);与模型组比较,TFS显著降低了TFS剂量组中ALT、AST、ALP、HYP的含量(P<0.01);肝组织病理变化显示,肝纤维化增生明显改善;GO、KEGG富集分析表明,ITGB4/FAK/p38信号通路在模型组相关性显著。不同剂量的TFS对HSC-T6细胞均有抑制作用;体内外RT-qPCR与Western blot法检测结果显示,TFS各剂量组α-SMA、collagenⅠ、ITGB4/FAK/p38信号通路相关的mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05);凋亡结果亦显示,TFS各剂量组细胞凋亡数明显增加(P<0.01)。结论蒙药蓝盆花总黄酮提取物可显著抑制肝纤维化进展,其调控机制可能与ITGB4/FAK/p38信号通路有关。

关键词：蓝盆花总黄酮 ITGB4/FAK/p38信号通路肝纤维化

线粒体自噬在器官纤维化疾病中作用的研究进展

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解剖学杂志 2023年第5期46卷 428-431页

作者：高晓阳金蓉赵晓璐张春艳颜羽昕马月宏内蒙古医科大学基础医学院药理学教研室呼和浩特010059

线粒体自噬是一种选择性降解细胞中损伤或多余线粒体的特异性自噬现象,使细胞在应激损伤时能够维持线粒体数量和质量的稳定,从而维持细胞的正常表型和功能。其分子机制途径较为复杂,主要涉及PINK1/Parkin途径、NIX和BNIP3、FUNDC1等。... 详细信息

线粒体自噬是一种选择性降解细胞中损伤或多余线粒体的特异性自噬现象,使细胞在应激损伤时能够维持线粒体数量和质量的稳定,从而维持细胞的正常表型和功能。其分子机制途径较为复杂,主要涉及PINK1/Parkin途径、NIX和BNIP3、FUNDC1等。线粒体自噬的异常与多种疾病密切相关,而调节不同阶段线粒体自噬分子机制在疾病发展中的作用已被重视。现就近年线粒体自噬在多种器官纤维化病变中的研究进展综述如下。

关键词：器官纤维化细胞自噬线粒体自噬