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BADH基因转化水稻的方法比较

中国水稻科学 2003年第4期17卷 323-327页

作者：卢德赵祝水金钱前王慧中颜美仙黄大年中国水稻研究所农业部水稻生物学重点实验室浙江杭州310006 浙江大学农业与生物技术学院农学系浙江杭州310029 杭州师范学院生物科学系浙江杭州310036

应用基因枪法与农杆菌介导法将来源于山菠菜的BADH (betainealdehydedehydrogenase)基因导入水稻。从获得转基因植株数量、转化率、转化植株PCR阳性率、外源基因拷贝数及其表达活性、T0 代植株的结实率对两种转化方法进行了比较。结果表... 详细信息

应用基因枪法与农杆菌介导法将来源于山菠菜的BADH (betainealdehydedehydrogenase)基因导入水稻。从获得转基因植株数量、转化率、转化植株PCR阳性率、外源基因拷贝数及其表达活性、T0 代植株的结实率对两种转化方法进行了比较。结果表明 ,用农杆菌介导法转化BADH基因的转化效率和PCR阳性率比基因枪法更高 ,且用农杆菌介导法得到的转基因植株T0 的结实率等农艺性状也优于基因枪法。

关键词： BADH基因转化水稻基因枪法农杆菌介导法

基因枪转化获得的转基因水稻中外源基因整合与表达规律研究

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Acta Genetica Sinica 2001年第11期28卷 1012-1018页

作者：华志华朱雪峰林鸿生高振宇钱前颜美仙黄大年中国水稻研究所生物工程系农业部水稻生物学重点实验室韩山师范学院潮州521041

通过基因枪法将cecropinB和bar基因共转化水稻 ,获得多个水稻优良品系的转化材料。对转基因的结构和表达的系统分析 ,发现外源基因的整合模式多种多样 ,有简单也有复杂。其中插入位点数的变化范围为 1～ 7个 ,拷贝数的变化范围为 1～ 1 ... 详细信息

通过基因枪法将cecropinB和bar基因共转化水稻 ,获得多个水稻优良品系的转化材料。对转基因的结构和表达的系统分析 ,发现外源基因的整合模式多种多样 ,有简单也有复杂。其中插入位点数的变化范围为 1～ 7个 ,拷贝数的变化范围为 1～ 1 0个。转基因拷贝数的多少与其表达和沉默不存在必然的联系。相同整合模式的转基因事件中基因的表达存在较大的差异。选择标记基因bar比非选择标记基因cecropinB的表达框的完整性和转录概率要高。但是发现大部分表达框完整的bar基因发生基因沉默 ,而在终止子发生序列丢失的cecropinB基因的表达则明显提高。

关键词：水稻转基因外源基因整合表达基因枪转化

6-磷酸山梨醇脱氢酶基因转化水稻(Oryza sativa L.)研究

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科技通报 2002年第6期18卷 441-445页

作者：王慧中卢德赵颜美仙钱前黄大年杭州师范学院生物化学与分子生物学重点实验室浙江杭州310036 中国水稻研究所浙江杭州310006

以水稻品种秀水 1 1的幼胚为外植体 ,对影响愈伤组织诱导及植株再生的因素进行了研究 .结果表明 :MS+2 ,4- D 2 mg/L作培养基 ,愈伤组织诱导率达 1 0 0 % ,愈伤组织在 MS+6- BA2 mg/L+NAA 0 .1 mg/L的培养基上 ,分化频率高达 75.3% ;在... 详细信息

以水稻品种秀水 1 1的幼胚为外植体 ,对影响愈伤组织诱导及植株再生的因素进行了研究 .结果表明 :MS+2 ,4- D 2 mg/L作培养基 ,愈伤组织诱导率达 1 0 0 % ,愈伤组织在 MS+6- BA2 mg/L+NAA 0 .1 mg/L的培养基上 ,分化频率高达 75.3% ;在此基础上利用基因枪转化技术 ,将外源的 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因 (gut D)导入水稻基因组 ,转基因植株表现出对 Na Cl较强的耐性 .

关键词： 6-磷酸水梨醇脱氢酶水稻组织培养基因枪转化转基因植株耐盐能力

转甜菜碱醛脱氢酶基因水稻的获得及其耐盐性研究

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科技通报 2003年第3期19卷 179-182页

作者：卢德赵王慧中华志华颜美仙钱前黄大年浙江中医学院生命科学系浙江杭州310053 杭州师范学院生物化学与分子生物学重点实验室浙江杭州310036 中国水稻研究所农业部水稻生物学重点实验室浙江杭州310006

利用农杆菌介导法和基因枪法将来源于山菠菜的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转入水稻基因组,并获得了具有一定耐盐性状的转基因植株,在0.5%NaCl盐浓度下生长良好,同时对Kan和G418的筛选效果及两种转化方法进行了比较.

关键词：遗传学甜菜碱醛脱氢酶基因基因转化耐盐性

籼稻幼胚组织培养高频率植株再生及其基因转化的研究

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浙江大学学报（理学版） 2000年第4期27卷 469-472页

作者：王慧中华志华高振宇颜美仙黄大年杭州师范学院生物系浙江杭州310012 中国水稻研究所浙江杭州310006

以籼稻品种特青的幼胚作为外植体 ,研究了激素对愈伤组织诱导及植株再生的影响 .MS+2 ,4 -D2 mg/ L作培养基 ,愈伤组织诱导率达 10 0 % ;愈伤组织在 MS+KT3mg/ L+NAA0 .5mg/ L的培养基上 ,分化频率为 6 7.3% ;在此基础上利用基因枪转化... 详细信息

以籼稻品种特青的幼胚作为外植体 ,研究了激素对愈伤组织诱导及植株再生的影响 .MS+2 ,4 -D2 mg/ L作培养基 ,愈伤组织诱导率达 10 0 % ;愈伤组织在 MS+KT3mg/ L+NAA0 .5mg/ L的培养基上 ,分化频率为 6 7.3% ;在此基础上利用基因枪转化技术 ,将外源的 bar基因导入了水稻基因组 ,转基因植株表现出对除草剂 Basta很强的抗性 .

关键词：籼稻组织培养基因枪转化转基因植株幼胚

水稻稻米糊化温度控制基因ALK的图位克隆及其序列分析

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中国科学（C辑） 2003年第6期33卷 481-487页

作者：高振宇曾大力崔霞周奕华颜美仙黄大年李家洋钱前中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室杭州310006 国家植物基因研究中心

糊化温度是仅次于直链淀粉含量的评价水稻稻米蒸煮品质的重要指标,许多文献报道,糊化温度受一主效基因控制,采用图位克隆法分离克隆了水稻糊化温度基因(ALK),序列分析表明其编码可溶性淀粉合酶Ⅱ,进一步比较不同品种间该基因DNA序列与... 详细信息

糊化温度是仅次于直链淀粉含量的评价水稻稻米蒸煮品质的重要指标,许多文献报道,糊化温度受一主效基因控制,采用图位克隆法分离克隆了水稻糊化温度基因(ALK),序列分析表明其编码可溶性淀粉合酶Ⅱ,进一步比较不同品种间该基因DNA序列与碱消法分析结果,推测出ALK基因编码区内的碱基替换可能引起了支链淀粉晶体层结构的改变,从而导致糊化温度的变化。

关键词：图位克隆水稻可溶性淀粉合酶II 糊化温度基因 ALK 基因序列稻米蒸煮品质

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外源基因转水稻的途径、遗传行为和表达

中国稻米 2008年第1期14卷 8-11页

作者：颜美仙黄大年钱前中国水稻研究所水稻生物学国家重点试验室浙江杭州310006

随着分子生物学和转基因技术的快速发展,人类对外源基因在植物体内的遗传和表达有了进一步的认识。本文着重介绍了水稻转基因技术以及外源基因在水稻中的遗传、表达行为。

关键词：水稻转基因遗传行为遗传表达

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1-磷酸甘露醇脱氢酶基因转化水稻的研究

中国水稻科学 2003年第1期17卷 6-10页

作者：王慧中刘俊君卢德赵赵艳颜美仙钱前彭学贤陈受宜黄大年杭州师范学院生物化学与分子生物学重点实验室浙江杭州310036 中国科学院遗传与发育生物学研究所植物生物技术开放实验室北京100101 中国水稻研究所浙江杭州310006 杭州商学院浙江杭州310035

PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的... 详细信息

PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的相对电导率和大分子渗漏值明显降低。部分转基因株系能在 1 .0 % Na Cl浓度下正常生长 ,而对照在 0 .5% Na Cl浓度下已不能存活。通过有性杂交途径实现了 mtl D和 gut D两个基因的聚合 ,部分杂交后代株系能在 1 .2 5% Na Cl胁迫下正常生长结实。

关键词：水稻 1-磷酸甘露醇脱氢酶基因 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因转基因植株耐盐性产量性性有性杂交农艺性状

基因枪转化的bar基因表达盒在水稻中的重组结构

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中国水稻科学 2007年第5期21卷 469-474页

作者：赵艳钱前王慧中高振宇颜美仙黄大年浙江工商大学食品生物与环境工程学院浙江杭州310035 中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室浙江杭州310006 杭州师范大学生命科学学院浙江杭州310036

用Southern杂交和引物组合PCR技术研究了基因枪转化的bar基因表达盒（包括启动子、编码区和终止子）在水稻（Oryza sntiva L．）中的重组结构。bar基因表达盒的多个拷贝通过重组连接形成l～3个转基因串联子，彼此邻近整合在受体基因组... 详细信息

用Southern杂交和引物组合PCR技术研究了基因枪转化的bar基因表达盒（包括启动子、编码区和终止子）在水稻（Oryza sntiva L．）中的重组结构。bar基因表达盒的多个拷贝通过重组连接形成l～3个转基因串联子，彼此邻近整合在受体基因组内一个较大的染色体区域，不同转基因串联子之间由水稻基因组DNA间隔，形成转基因簇。bar基因表达盒形成转基因串联子时，存在头接头、头接尾、尾接尾3种连接方式，通常伴随着bar基因片段的截短。

关键词： bar基因表达盒基因枪法转化转基因串联子重组结构水稻