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两种不同手术方式治疗新鲜RockwoodⅢ型肩锁关节脱位的疗效比较

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广西医科大学学报 2014年第2期31卷 296-297页

作者：劳锟苏伟颜秋霞王东广西北海市第二人民医院广西医科大学第一附属医院创伤骨科南宁530021

目的:比较单纯锁骨钩钢板固定与锁骨钩钢板并修复喙锁韧带两种不同的方法治疗新鲜RockwoodⅢ型肩锁关节脱位的临床疗效。方法:回顾性分析我院2008年1月至2013年6月收治的37例新鲜RockwoodⅢ型肩锁关节脱位患者的临床资料,单纯锁骨钩钢... 详细信息

目的:比较单纯锁骨钩钢板固定与锁骨钩钢板并修复喙锁韧带两种不同的方法治疗新鲜RockwoodⅢ型肩锁关节脱位的临床疗效。方法:回顾性分析我院2008年1月至2013年6月收治的37例新鲜RockwoodⅢ型肩锁关节脱位患者的临床资料,单纯锁骨钩钢板固定19例(A组),锁骨钩钢板并修复喙锁韧带18例(B组),两组均不缝合肩锁韧带。观察两组患者术后肩关节活动的功能疗效。结果:两组术后1个月疗效及内固定取出后1个月疗效评定比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单纯锁骨钩钢板固定与锁骨钩钢板并喙锁韧带修复治疗新鲜RockwoodⅢ型肩锁关节脱位疗效相似。

关键词：肩锁关节脱位锁骨钩钢板喙锁韧带

时差成像系统对IVF/ICSI周期胚胎发育及移植结局的影响

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生殖医学杂志 2022年第8期31卷 1037-1042页

作者：乔静冯玲颜秋霞周秀琴朱振杰张国志陈彩蓉广州医科大学附属第六医院清远市人民医院生殖医学中心清远511520

目的比较时差成像(TLI)系统培养与常规培养胚胎的发育情况及其新鲜胚胎移植的临床结局,探讨TLI系统应用于辅助生殖技术的临床价值。方法回顾性分析2019年1月至2020年12月在我中心行体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)并选择新鲜... 详细信息

目的比较时差成像(TLI)系统培养与常规培养胚胎的发育情况及其新鲜胚胎移植的临床结局,探讨TLI系统应用于辅助生殖技术的临床价值。方法回顾性分析2019年1月至2020年12月在我中心行体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)并选择新鲜移植的510个周期的临床资料。按照胚胎培养方式的不同分为TLI组(n=166)和常规组(n=344);常规组通过胚胎形态学评分优选胚胎进行移植,TLI组通过胚胎发育动力学参数及形态学评分优选胚胎进行移植。比较两组的一般资料、胚胎发育情况以及卵裂期胚胎新鲜周期移植的临床妊娠结局。结果(1)两组患者的一般资料比较,TLI组的平均年龄显著小于常规组,获卵数显著高于常规组(P0.05)。两组间受精率、2PN卵裂率、D3可利用胚胎率、卵母细胞利用率、D3优质胚胎率均无显著性差异(P>0.05);TLI组的正常受精率(67.99%vs.62.11%)、囊胚形成率(69.51%vs.65.76%)、可利用囊胚率(43.41%vs.38.86%)及优质囊胚率(28.36%vs.24.36%)均显著高于常规组(P0.05)。(2)因两组间年龄、获卵数存在统计学差异,故对数据进行倾向性匹配分析。匹配后两组患者间基线资料比较均无显著性差异(P>0.05);相关结局与匹配前基本一致,TLI组的正常受精率、囊胚形成率、可利用囊胚率、优质囊胚率均显著优于常规组(P0.05)。结论TLI系统可显著提高卵子的正常受精率,改善囊胚形成和发育,提高囊胚利用率和优质囊胚率,为优选胚胎选择提供了可靠的依据;通过TLI系统选择胚胎,在减少胚胎移植数量的基础上,保证了稳定的临床妊娠结局。因此,认为通过TLI系统可优选出发育潜能较好的胚胎,为单胚胎移植提供有力支持。

关键词：时差成像系统胚胎培养新鲜移植妊娠结局

人睾丸特异性新基因hT279单克隆抗体制备及其应用

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免疫学杂志 2014年第7期30卷 641-644页

作者：颜秋霞李介华陈彩蓉冼英杰周秀琴陈润强蔡志明唐爱发暨南大学医学院附属清远医院清远市人民医院生殖中心 511518 清远市人民医院检验科 511518 深圳大学第一附属医院深圳市第二人民医院科教科 518035

目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫Balb/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET32... 详细信息

目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫Balb/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET32a原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白表达;获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE鉴定后,免疫Balb/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗hT279 mAb,并通过间接ELISA、Western blot和免疫组织化学法对mAb进行特性鉴定。结果实现了hT279的原核表达,获得了1株稳定分泌抗hT279 mAb的杂交瘤细胞株4B2,抗体亚型为IgG2b(κ),效价达到1×104。Western blot鉴定表明,该mAb在人正常睾丸蛋白中相对分子质量约为22 000处检测到特异条带。免疫组织化学显示hT279蛋白主要在正常人睾丸的精母细胞及圆形精子细胞中表达,而在男性不育患者睾丸组织中表达消失。结论成功制备出1株抗hT279的mAb 4B2,为进一步研究hT279在人类精子发生中的功能和男性不育症的诊断提供了特异的检测工具。

关键词：人睾丸特异性新基因原核表达单克隆抗体男性不育症

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弱精子症患者精子中DKKL1的表达

南方医科大学学报 2018年第3期38卷 324-328页

作者：颜秋霞马义陈润强周秀琴乔静冼英杰冯玲陈彩蓉广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院生殖医学中心广东清远511518 暨南大学细胞生物学系//暨南大学生物医药研究院广东广州510632

目的探讨精子顶体相关基因(DKKL1)在弱精子症患者精子中的表达特征及临床意义。方法收集正常男性和弱精子症患者精液,各取10μL精液用全自动计算机辅助精液分析系统(CASA)对精液进行常规分析。为了避免白细胞和生精细胞对结果的影响,剩... 详细信息

目的探讨精子顶体相关基因(DKKL1)在弱精子症患者精子中的表达特征及临床意义。方法收集正常男性和弱精子症患者精液,各取10μL精液用全自动计算机辅助精液分析系统(CASA)对精液进行常规分析。为了避免白细胞和生精细胞对结果的影响,剩余精液采用4个梯度的Percoll法离心分离和纯化精子。Trizol法提取精子RNA,实时荧光定量PCR从基因水平检测DKKL1基因在正常人和弱精子症患者精子中的表达差异;最后采用Western blot方法从蛋白水平检测DKKL1蛋白在正常人和弱精子症患者精子中的表达差异。结果精液常规分析结果显示,弱精子症和正常人两组之间的年龄、精液体积、精子浓度和正常精子形态比例均没有统计学差异(P>0.05)。与正常对照组相比,弱精子症组PR和PR+NP精子的比例显著降低(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,与正常对照组相比,DKKL1 m RNA在弱精子症患者精子中的表达量降低11.1倍。此外,Western blot结果显示,弱精子症组DKKL1蛋白的表达量与正常对照组相比,降低了2.4倍,差异具有统计学意义(P<0.01),该结果与实时荧光定量PCR结果一致。结论 DKKL1在弱精子症患者精子中的表达水平明显下降,表明其与精子运动密切相关,是导致弱精子症发生的原因之一。

关键词： DKKL1 男性不育弱子精症

两种不同剂量雷洛昔芬促排卵对小鼠围着床期子宫内膜胞饮突表达的影响

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南方医科大学学报 2018年第2期38卷 234-238页

作者：陈彩蓉颜秋霞周秀琴冼英杰郭晓燕全松广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院生殖中心广东清远511518 南方医科大学附属南方医院生殖中心广东广州510515

目的探讨两种不同剂量雷洛昔芬(RAL)促排卵对小鼠围着床期子宫内膜胞饮突表达的影响。方法以6~8周龄、连续2个动情周期均正常、未交配过的健康昆明系小白鼠为研究对象,将雌鼠随机分为4组:生理盐水(SS)组、CC组、RAL 180 mg组和RAL 240 m... 详细信息

目的探讨两种不同剂量雷洛昔芬(RAL)促排卵对小鼠围着床期子宫内膜胞饮突表达的影响。方法以6~8周龄、连续2个动情周期均正常、未交配过的健康昆明系小白鼠为研究对象,将雌鼠随机分为4组:生理盐水(SS)组、CC组、RAL 180 mg组和RAL 240 mg组,每组12只。在第3个动情周期的动情前期进行灌胃(SS组:灌胃1 mL生理盐水,1次/d,连续2 d;CC 100 mg组:灌胃l mL,CC 18 mg/kg,1次/d,连续2 d;RAL 180 mg组:灌胃l mL,RAL 33 mg/kg,1次/d,连续2 d;RAL240 mg组:灌胃l mL,RAL 44 mg/kg,1次/d,连续2 d),2 d后(两次用药后)的下午5:00,分别向每只雌鼠腹腔注射5U HCG,然后分别与正常雄性小鼠1∶1合笼,次日清晨检查阴栓,有阴栓者为受孕Dl。在D4.5采用乙醚吸入麻醉法处死各组雌鼠,取小鼠子宫内膜组织,电镜扫描观察各组子宫内膜胞饮突的发育情况。结果电镜下,RAL 180 mg组、RAL 240 mg组和SS组小鼠子宫内膜胞饮突发育成熟,表达丰富,3组间两两比较无显著差异,而CC组小鼠子宫内膜胞饮突发育不成熟,数量稀少。胞饮突在RAL 180 mg组、RAL 240 mg组和SS组的半定量表达组间比较无显著差异,均显著高于CC组的表达量。结论两种不同剂量RAL均不影响胞饮突在在围着床期期小鼠子宫内膜上皮的表达,提示两种不同剂量RAL促排卵均不影响小鼠子宫内膜容受性。

关键词：雷洛昔芬克罗米芬小鼠子宫内膜容受性胞饮突

精子顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织中的表达研究

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中国男科学杂志 2013年第10期27卷 3-7页

作者：颜秋霞郭晓燕陈彩蓉李介华蔡志明唐爱发暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院检验科暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院生殖中心深圳大学第一附属医院暨深圳市第二人民医院

目的研究顶体相关蛋白Dkk11在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的Dkk11基因。采用RTPCR方法检测Dkk11基因在小鼠不同日... 详细信息

目的研究顶体相关蛋白Dkk11在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的Dkk11基因。采用RTPCR方法检测Dkk11基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况,采用免疫组化方法检测Dkk11蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Dkk11基因。RT-PCR结果表明Dkk11 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达,在出生31d小鼠睾丸开始高表达,在成年前达到高峰。Dkk11蛋白主要定位在睾丸精母细胞和圆形精子细胞。结论 Dkk11基因存在发育的表达调控,为小鼠年龄依赖性表达基因,其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性,且具有睾丸特异性表达的特征,因此我们推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。

关键词：基因芯片 Dkkll基因精子发生

ACRV1在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异

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中国男科学杂志 2015年第2期29卷 12-16页

作者：颜秋霞漆正宇赵晓英郭晓燕陈彩蓉蔡志明唐爱发广东省清远市人民医院暨暨南大学附属清远人民医院生殖中心清远511518 北京大学深圳医院广东省男性生殖与遗传重点实验室深圳市第二人民医院暨深圳大学第一附属医院科教科

目的研究精子顶体小泡蛋白-1（ACRVl）在正常人和弱精子症患者精液精子中的表达差异，探讨ACRVl在弱精子症发生机制中的作用。方法采用计算机辅助精液分析（CASA）技术对精液进行常规分析，经非连续密度梯度离心分离纯化正常男性和弱精... 详细信息

目的研究精子顶体小泡蛋白-1（ACRVl）在正常人和弱精子症患者精液精子中的表达差异，探讨ACRVl在弱精子症发生机制中的作用。方法采用计算机辅助精液分析（CASA）技术对精液进行常规分析，经非连续密度梯度离心分离纯化正常男性和弱精子症患者精液精子，以排除生精细胞和白细胞的污染。采用实时荧光定量PCR（Real-timePCR）和免疫印迹（Western Blot）方法，从mRNA和蛋白水平检测ACRVl的表达及其差异。结果*** PCR结果表明，ACRVl mRNA在弱精子症患者精子中的表达量明显低于其在正常对照组精子中的表达量，下降了5．9倍。Westem Blot发现ACRVl蛋白在弱精子症组较正常组下降，该结果与Real-time PCR结果相一致。结论ACRVl基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调可能与精子活力下降有密切关系，提示ACRVl基因及蛋白可能是导致弱精子症发生的原因之一。

关键词： ACRV1 聚合酶链反应印迹法蛋白质弱精子症

探讨鼠胚实验中两种精子处理方法对实验结果影响

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国际检验医学杂志 2014年第7期35卷 803-804页

作者：冼英杰周秀琴颜秋霞陈彩蓉暨南大学第五附属医院清远市人民医院生殖中心广东清远511518

目的通过观察和比较两种精子的处理方法对昆明小鼠鼠胚实验结果的影响,探讨并建立适合鼠胚实验的精子处理方法。方法手术获取昆明小鼠卵子与精子进行常规体外受精,实验精子处理分别采用常规处理法或单密度梯度离心法。常规体外受精后培... 详细信息

目的通过观察和比较两种精子的处理方法对昆明小鼠鼠胚实验结果的影响,探讨并建立适合鼠胚实验的精子处理方法。方法手术获取昆明小鼠卵子与精子进行常规体外受精,实验精子处理分别采用常规处理法或单密度梯度离心法。常规体外受精后培养至第5天,观察其受精率、卵裂率、囊胚形成率。结果采用单密度梯度离心法处理后的受精率、卵裂率及囊胚形成率,分别为96.2%、97.7%、86.8%,常规处理法为55.1%,84.5%,56.8%,两种方法比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论昆明小鼠鼠胚实验采用单密度梯度离心法处理后行常规体外受精,能明显提高受精率、卵裂率及囊胚形成率。

关键词：昆明小鼠常规体外受精单密度梯度离心法常规处理法

精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织中的表达与定位

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生殖与避孕 2011年第9期31卷 582-586页

作者：颜秋霞唐爱发葛颂余州李文杰陈静蔡志明桂耀庭北京大学深圳医院广东省深圳市男性生殖与遗传重点实验室深圳518036 暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院检验科清远511518

目的:研究精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法:将4 d、9 d、18 d、35 d、54 d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的ACRV1基因。采用RT-PCR方法检测ACRV1基... 详细信息

目的:研究精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法:将4 d、9 d、18 d、35 d、54 d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的ACRV1基因。采用RT-PCR方法检测ACRV1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况,采用免疫组织化学方法检测ACRV1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果:对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是ACRV1基因。RT-PCR结果表明ACRV1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达,在出生31 d小鼠睾丸开始高表达,在成年前达到高峰。ACRV1蛋白主要定位在睾丸圆形精子和长形精子细胞。结论:ACRV1基因存在发育的表达调控,为小鼠年龄依赖性表达基因,其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性,且具有睾丸特异性表达的特征,因此推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。

关键词：基因芯片 ACRV1基因精子发生