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冰穿膜剂的制备及对大鼠口腔溃疡的治疗作用

冰穿膜剂的制备及对大鼠口腔溃疡的治疗作用

作者：颜璐璐河南大学

学位级别：硕士

口腔溃疡又称复发性口腔溃疡,是一种常见的发生于口腔黏膜的慢性炎症疾病,在人群中的发病率高达25%,溃疡发作时局部疼痛剧烈、灼痛明显。口腔溃疡的发病原因较复杂,临床上对其多采用对症治疗,且以局部治疗为主。临床证实,中药可有效的... 详细信息

口腔溃疡又称复发性口腔溃疡,是一种常见的发生于口腔黏膜的慢性炎症疾病,在人群中的发病率高达25%,溃疡发作时局部疼痛剧烈、灼痛明显。口腔溃疡的发病原因较复杂,临床上对其多采用对症治疗,且以局部治疗为主。临床证实,中药可有效的减轻疼痛、促进溃疡愈合,且具有较少的副反应。穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分,主要含有二萜内酯类和黄酮类等成分。课题组前期研究发现穿心莲提取物可通过AkT/NF-кB通路有效的抑制口腔溃疡的局部炎症反应,减轻疼痛,促进溃疡愈合。在前期研究基础上,本课题将穿心莲提取物制备成口腔溃疡膜剂,优化膜剂处方,评价两种膜剂对口腔溃疡的治疗效果,并对膜剂的质量标准进行研究建。冰穿膜剂的处方优化:本实验以穿心莲提取物为主药,冰片为收敛剂,聚乙烯醇17-88（PVA 17-88）、羟丙基甲基纤维素（HPMC）、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）为成膜材料,甘油为增塑剂,阿斯巴甜为矫味剂制备冰穿膜剂。固定溶液总体积为100 mL,水提物的浓度为16%、醇提物的浓度为12%,冰片的浓度为1.2%,羧甲基纤维素钠的浓度（CMC-Na）为1%,以膜剂的成膜性、脱膜性、柔韧性、均匀性为评价指标,通过正交实验考察PVA 17-88与HPMC的比例、成膜材料的总浓度、甘油的浓度,筛选出冰穿水提物膜剂的最优处方:PVA 17-88与HPMC的比例为120:1,成膜材料的总浓度为6%,甘油浓度为4%;冰穿醇提物膜剂的最优处方:PVA 17-88与HPMC的比例为60:1,成膜材料的总浓度为9%,甘油浓度为3%。冰穿膜剂对大鼠口腔溃疡的治疗作用研究:造模前随机选8只大鼠作为正常组,剩余大鼠采用化学灼烧法建立大鼠口腔溃疡模型,将造模大鼠随机分8组,共9组:正常组（生理盐水,0.2 mL/只）;阳性药组（5 mg西瓜霜/只）;模型组（不含药物的空白膜）;冰穿水提物膜剂组:低剂量组、中剂量组、高剂量组（水提物的给药量分别为2 mg、4 mg、8 mg,冰片的给药量分别为0.15 mg、0.3 mg、0.6 mg）;冰穿醇提物膜剂组:低剂量组、中剂量组、高剂量组（水提物的给药量分别为1.5 mg、3 mg、6 mg,冰片的给药量分别为0.15 mg、0.3 mg、0.6 mg）,给药前7%水合氯醛麻醉大鼠,药膜直接贴于大鼠溃疡处,每日给药两次,连续给药7天。给药期间记录大鼠的溃疡面积,给药结束后剪取溃疡处的口腔黏膜进行HE染色并在光学显微镜观察,ELISA检测溃疡局部组织中的炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的含量。结果表明:与模型组相比,两种提取物膜剂均可促进溃疡愈合,减轻溃疡处的炎症反应,且具有剂量依赖性。与模型组相比,水提物膜剂中剂量组、醇提物膜剂高剂量组和阳性药组可显著减少大鼠的溃疡面积,降低口腔黏膜中IL-1β的水平（P<0.05）,水提物高剂量组有极显著性差异（P<0.01）。与模型组相比,水提物膜剂中剂量组显著降低大鼠溃疡局部组织中TNF-α,IL-6的水平（P<0.05）,水提物膜剂高剂量组、醇提物膜剂高剂量组和阳性药组具有极显性差异（P<0.01）。染色结果表明,与模型组相比,两种冰穿膜剂组均能显著减少溃疡组织的固有层内炎症细胞浸润,减轻红细胞外渗,黏膜组织结构变得完整清晰,随给药剂量的增加浸润程度逐渐缓解,水提物膜剂高剂量组减轻炎症细胞浸润作用最明显。冰穿水提物膜剂的质量标准研究:依据2015年版《中国药典》四部通则（0125膜剂）、（0931溶出度与释放度测定方法）,对膜剂的外观、重量差异、释放度进行评价;参照文献资料,对膜剂的厚度、表面pH、耐折度、释放度进行评价;采用薄层色谱法对制剂中穿心莲、冰片进行定性鉴别;高效液相法测定冰穿膜剂中穿心莲内酯（A）、新穿心莲内酯（NA）、14-去氧穿心莲内酯（DA）、脱水穿心莲内酯的含量（DDA）的含量;紫外分光光度法测定膜剂中总黄酮的含量。结果表明:冰穿水提物膜剂呈黑褐色,外观完整光洁、色泽均匀、无气泡;膜剂的重量差异（±10.0%）符合药典规定;在人工唾液中（pH=7.4,PPBS）,80 min累积释放率约为85%,体外释药较完全;冰穿水提物膜剂的厚度为470-490μm,表面pH值在6.4-6.8范围内,耐折度较好;薄层色谱鉴别中穿心莲、冰片与对照品相应位置上均显示相同颜色的斑点,阴性对照无干扰;水提物膜剂穿心莲内酯的含量不低于0.154 mg/cm,穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量的总含量不低于0.782 mg/cm,总黄酮的含量不低于1.26 mg/cm。综上所述,冰穿膜剂具有制备简单、给药方便、质量可控的特点,并对化学灼烧法致大鼠口腔溃疡模型有治疗作用,因此冰穿膜

关键词：穿心莲膜剂穿心莲提取物口腔溃疡质量控制药效学

鞘内注射PSD-93 AS ODN对CCI大鼠吗啡耐受的影响

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鞘内注射PSD-93 AS ODN对CCI大鼠吗啡耐受的影响

作者：颜璐璐中南大学

学位级别：硕士

背景：神经源性疼痛是由中枢或外周神经系统损伤或疾病引起的疼痛综合征。外周神经损伤引起的神经源性疼痛，表现为痛觉过敏、痛觉超敏和自发性疼痛等，目前发病机制尚不清楚，缺乏有效的治疗措施。吗啡作为一种强效麻醉性镇痛药，对许... 详细信息

背景：神经源性疼痛是由中枢或外周神经系统损伤或疾病引起的疼痛综合征。外周神经损伤引起的神经源性疼痛，表现为痛觉过敏、痛觉超敏和自发性疼痛等，目前发病机制尚不清楚，缺乏有效的治疗措施。吗啡作为一种强效麻醉性镇痛药，对许多急慢性疼痛均具有较强的镇痛作用，但它的成瘾性和耐受性大大限制了其使用范围。吗啡耐受的机制非常复杂，涉及多种神经递质系统和信号转导系统。近年来，有人提出N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDA受体)参与吗啡耐受的形成。PSD-93蛋白属于膜结合鸟苷酸激酶(MAGUK)蛋白家族的一种，PSD-93蛋白的PDZ2区可与NMDA受体的NMDAR2亚基羧基端结合，影响其下游的信号传导(如神经细胞的一氧化氮合酶，nNOS)。PSD-93反义寡聚脱氧核苷酸(PSD-93 AS DON)是一串脱氧核苷酸序列，可在基因水平下调PSD-93蛋白在中枢神经系统突触后膜的含量。目的：观察鞘内注射PSD-93 AS ODN对大鼠坐骨神经慢性结扎损伤(CCI)模型大鼠的镇痛效应及对吗啡镇痛耐受的影响，并探讨其作用机制。方法：选取体重为200-250g的健康Sprague-Dawley(SD)大鼠(雌雄不拘)，用改良的Yaksh法进行大鼠腰段鞘内置管。取鞘内置管成功的SD大鼠(雌雄不拘)36只，随机分为6组(n=6)：F组，NS组，MS组，AS组，MA组，Mor组。F组大鼠左下肢中段坐骨神经仅于空气中暴露5min后，还复至原位;其余5组大鼠取左下肢中段坐骨神经做CCI模型。F组、NS组予生理盐水(20ul，2次／日，给药时间：8am，6pm)。MA组于上午8am：鞘内予吗啡(20ug／5ul)+PSD-93 AS DON(5ug／10ul)，以5ul生理盐水冲管;下午6pm：鞘内予吗啡(20ug／5ul)，以15ul生理盐水冲管。Mor组鞘内予吗啡(20ug／5ul，2次／日，给药时间：8am，6pm)，每次注药后以15ul生理盐水冲管。AS组于上午8am：鞘内予PSD-93 AS DON(5ug／10ul)，注药后以10ul生理盐水冲管;下午6pm：鞘内予生理盐水20ul。MS组于上午8am：鞘内予PSD-93 MS PSD(5ug／10ul)，注药后以10ul生理盐水冲管;下午6pm：鞘内予生理盐水20ul。各组于CCI术后第4d(手术组大鼠出现热、机械痛敏反应后)开始鞘内给药，注药部位为大鼠腰段，连续6d。于CCI术前1d，术后1d，3d，4d，5d，6d，7d，9d选择第二次注药后0.5小时观察大鼠热敏，机械痛敏。于第9d观察完毕后处死，取大鼠腰4-腰6段脊髓行免疫组化观察。结果：1．行为学方面各组间术前基础机械痛、热痛阈值差异无显著意义，F组术侧在实验的9d内机械痛、热痛阈值波动于初始水平，各实验点差异无显著意义(P＞0.05)。AS组、MOR组、MA组、MS组、NS组大鼠CCI术后第1-3d，机械痛、热痛阈值无明显差异;术后4-9d，除F组外其余各组大鼠术侧机械痛、热痛阈值下降，以MS组、NS组为下降最为显著，与AS组、MOR组、MA组相比差异有显著意义(P＜0.01);术后第7d，MOR组机械痛、热痛阈值下降明显，与MA组相比差异有显著意义(P＜0.01)，而AS组于术后第6天机械痛、热痛阈值明显下降，与MA组相比差异有显著意义(P＜0.01)。2．免疫组化观察本实验选取nNOS阳性细胞作为观察疼痛程度的免疫组化指标，疼痛程度越高，nNOS阳性细胞越多，灰度值也越高。NS组、MS组、AS组术侧所标的nNOS阳性细胞明显多于F组(P＜0.05)。在MA组的术侧背角浅层，nNOS阳性细胞表达较MOR组、AS组明显减少(P＜0.01)。Mor组的NMDAR1受体表达量比F组、NS组、MS组、AS组明显增加(P＜0.01);MA组的NMDAR1受体数量也有所增加，但与Mor组相比明显减少(P＜0.01)。结论：1．鞘内注射5ug PSD93 AS ODN对CCI大鼠具有轻度镇痛作用，但镇痛作用不超过3天。2．大鼠脊髓背角NMDA R1受体和nNOS与慢性吗啡耐受形成的中枢机制有关。3．5ug PSD-93 AS ODN对预防CCI大鼠慢性吗啡耐受有一定作用。

关键词：吗啡耐受神经源性疼痛一氧化氮合酶 NMDA受体 PSD-93蛋白

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海萝多糖的提取分离及其生理活性的研究

海萝多糖的提取分离及其生理活性的研究

作者：颜璐璐汕头大学

学位级别：硕士

海萝多糖具有重要的科学价值与应用价值,对丰富海藻药物新品种和海藻类健康食品的开发具有重要的现实意义。本文分别对海萝多糖的提取工艺,分离纯化与结构分析,包括体外抑菌活性、体外抗氧化活性、体内抗氧化及对免疫调节功能的影响... 详细信息

海萝多糖具有重要的科学价值与应用价值,对丰富海藻药物新品种和海藻类健康食品的开发具有重要的现实意义。本文分别对海萝多糖的提取工艺,分离纯化与结构分析,包括体外抑菌活性、体外抗氧化活性、体内抗氧化及对免疫调节功能的影响、抗突变作用等生理活性等多方面进行研究,并以小鼠为实验对象对海萝多糖进行安全性评价,最后在此基础上进一步研制了复合多糖含片、复合多糖果冻等多糖类功能性食品。对海萝多糖的提取研究中采用溶剂提取法、微波提取法和复合酶法提取三种方法, 提取所得海萝多糖得率分别可达29.8%、28.1%和31.4%,其中采用酶法提取得率最高,且提取条件温和,有效保存多糖生物活性,并可去除部分蛋白,便于后续纯化工作的进行, 是一种理想的提取方法。海萝多糖分离纯化显示,海萝多糖主要含由6-硫酸基-琼脂糖组成,含3,6-内醚-L-半乳糖和6-硫酸基-D-半乳糖两种组分。抑菌实验结果显示,海萝多糖对大肠杆菌等菌有良好的抑制作用,抑菌率可达64.9%。体外抗氧化实验结果显示具有较好的抗氧化活性。其中,清除羟自由基活性最强,清除率达70%,其次是清除超氧阴离子活性,清除率达61.5%,并具有一定抗脂质过氧化能力。小鼠实验结果证实,海萝多糖有明显的体内抗氧化及增强机体免疫功能的作用,实验组与对照组相比差异极显著。海萝多糖对由环磷酰胺诱发的微核率和精子畸形率也有着显著的抑制作用,具有很好的抗突变作用。由急性毒性实验可知,小鼠对海萝多糖的最大耐受量大于60g/kg,说明海萝多糖属无毒级。以此基础上研制成以海萝多糖为主的复合多糖含片、复合多糖营养保健果冻功能性食品,丰富海藻类健康食品的种类。本文对海萝多糖进行较全面深入的研究,将为海萝这一珍贵海洋藻类的开发与利用提供一定理论依据。

关键词：海萝多糖提取结构生理活性功能性食品

滇重楼皂苷对10种肿瘤细胞株的细胞毒谱及构效关系研究

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中国中药杂志 2008年第16期33卷 2057-2060页

作者：颜璐璐张艳军高文远满淑丽天津大学药物科学与技术学院天津300072 天津中医药大学中药学院天津300193

滇重楼Paris polyphylla ***(Franch.)Hand.-Mazz.为百合科重楼属植物的干燥根茎。重楼昧苦,性微寒,有小毒,归肝经,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效,用于痈疮、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等。已有研究表明,重楼的... 详细信息

滇重楼Paris polyphylla ***(Franch.)Hand.-Mazz.为百合科重楼属植物的干燥根茎。重楼昧苦,性微寒,有小毒,归肝经,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效,用于痈疮、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等。已有研究表明,重楼的水、甲醇和乙醇提取物对A549(人肺癌)、[第一段]

关键词：重楼皂苷肿瘤细胞株构效关系细胞毒谱乙醇提取物清热解毒消肿止痛咽喉肿痛

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复合减肥茶及其减肥机理的研究

食品科学 2003年第10期24卷 145-149页

作者：陈美珍郭慧敏余杰颜璐璐汕头大学生物学系汕头515063

研究了乌龙茶以及山楂、荷叶等常见食用中药对大鼠离体激素敏感性脂肪酶和胰脂酶活性的影响, 据此确定复合减肥茶的配方,并通过动物试验检验了其减肥功效。试验结果表明, 该减肥茶能极显著地提高激素敏感性脂肪酶活性(p<0.01),增加离体... 详细信息

研究了乌龙茶以及山楂、荷叶等常见食用中药对大鼠离体激素敏感性脂肪酶和胰脂酶活性的影响, 据此确定复合减肥茶的配方,并通过动物试验检验了其减肥功效。试验结果表明, 该减肥茶能极显著地提高激素敏感性脂肪酶活性(p<0.01),增加离体脂肪释放FFA的百分率达112.9%;能有效地抑制营养肥胖型大鼠体重的增长和减少其体内脂肪含量(p<0.01);降血脂作用显著(p<0.05),减肥效果良好。

关键词：动物试验复合减肥茶乌龙茶山楂荷叶配方减肥机理

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埃万妥单抗致皮肤不良反应并蜂窝织炎1例

中国皮肤性病学杂志 2024年第11期38卷 1280-1283页

作者：刘衍盈颜璐璐贵州医科大学附属医院皮肤科贵州贵阳550004

患者男,59岁,头皮、躯干、肢端皮疹伴痒痛1年,加重1个月。1年前患者因“右肺腺癌骨转移”完善基因检测示表皮生长因子(EGFR)第21外显子L858R突变(Ex21.L858R)、间质表皮转化因子(c-MET)基因扩增,接受埃万妥单抗(JNJ-61186372,amivantam... 详细信息

患者男,59岁,头皮、躯干、肢端皮疹伴痒痛1年,加重1个月。1年前患者因“右肺腺癌骨转移”完善基因检测示表皮生长因子(EGFR)第21外显子L858R突变(Ex21.L858R)、间质表皮转化因子(c-MET)基因扩增,接受埃万妥单抗(JNJ-61186372,amivantamab)靶向药物GCPⅢ期临床试验,在每周期用药后2~3 d逐渐出现广泛的痤疮样皮疹、甲沟炎、甲周的渗液和出血,并伴瘙痒、疼痛,皮疹随单抗治疗周期呈反复复发-缓解的趋势,逐渐加重,1个月前接受靶向治疗3 d后上述皮疹加重并出现右下肢红肿热痛。诊断:埃万妥单抗(JNJ-61186372)致皮肤不良反应并蜂窝织炎。患者予苯唑西林钠抗感染、甲泼尼龙琥珀酸钠抗炎及对症治疗后皮损明显消退。

关键词：埃万妥单抗皮肤不良反应蜂窝织炎

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滇重楼的抗肿瘤活性成分研究

中国中药杂志 2007年第14期32卷 1425-1428页

作者：王羽张彦军高文远颜璐璐天津大学药物科学与技术学院天津300072 天津中医药大学天津300193

目的：研究滇重楼Paris polyphylla Smith ***根茎中具有抗肿瘤作用的活性成分。方法：利用硅胶柱色谱，Sephadex LH-20，反相制备HPLC等手段进行分离纯化，并通过波谱技术进行结构鉴定。采用MTT法对分离到的化合物进行抗肿瘤活性筛选... 详细信息

目的：研究滇重楼Paris polyphylla Smith ***根茎中具有抗肿瘤作用的活性成分。方法：利用硅胶柱色谱，Sephadex LH-20，反相制备HPLC等手段进行分离纯化，并通过波谱技术进行结构鉴定。采用MTT法对分离到的化合物进行抗肿瘤活性筛选。结果：从醋酸乙酯和正丁醇层中分离得到了6个化合物，鉴定为薯蓣皂苷元-3—O-α-L-呋喃阿拉伯糖基（1→4）-β-D-葡萄糖苷（1）、偏诺皂苷元-3-O-α—L-呋喃阿拉伯糖基（1→4）-β-D-葡萄糖苷（2）、异鼠李素-3—O-β-D-葡萄糖苷（3）、乙基-α—D-呋喃果糖苷（4）、偏诺皂苷元-3—O-α—L-吡喃鼠李糖基（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-葡萄糖苷（5）、偏诺皂苷元-3—O-α—L-吡喃鼠李糖基（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-葡萄糖苷（6）。结论：化合物1—4为首次从滇重楼中分离得到，化合物3和4为首次从重楼属植物中分离得到，化合物5为首次从滇重楼的根茎中分离得到。药理实验表明，化合物1—3，5和6对小鼠肺腺癌细胞LA795都显示出一定的抑制作用，其中化合物5和6最显著。

关键词：滇重楼异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷乙基-α—D-呋喃果糖苷甾体皂苷抗肿瘤活性

超声引导动态针尖定位法在新生儿桡动脉穿刺置管中的应用

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中国医师杂志 2021年第2期23卷 285-288页

作者：刘晶晶汪丽娜肖婷颜璐璐屈双权湖南省儿童医院麻醉手术科长沙410007

目的新生儿的动脉穿刺置管极具挑战性,本研究评估超声引导下动态针尖定位法(DNTP)相比常规短轴平面外法在新生儿桡动脉穿刺置管中的优势。方法选取2020年1月至5月湖南省儿童医院符合纳入标准的80例新生儿随机分为两组:DNTP组使用动态针... 详细信息

目的新生儿的动脉穿刺置管极具挑战性,本研究评估超声引导下动态针尖定位法(DNTP)相比常规短轴平面外法在新生儿桡动脉穿刺置管中的优势。方法选取2020年1月至5月湖南省儿童医院符合纳入标准的80例新生儿随机分为两组:DNTP组使用动态针尖定位法,常规组使用短轴平面外法。比较两组的首次置管成功率和5 min内总的置管成功率、穿刺时间、总穿刺次数、后壁穿刺率,总并发症发生率。结果与常规组比较,DNTP组首次置管成功率高(P0.05)。常规组总的并发症发生率高于DNTP组(P<0.05)。最常见的并发症为血肿。结论在新生儿桡动脉穿刺置管中,相比短轴平面外法,DNTP法一次置管成功率高、并发症发生率低。

关键词：新生儿超声检查桡动脉动脉穿刺置管

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滇重楼皂苷成分体内外抗肺癌活性研究

中草药 2009年第3期40卷 424-428页

作者：颜璐璐张艳军高文远满淑丽天津大学药物科学与技术学院天津300072 天津中医药大学天津300193

目的研究滇重楼皂苷成分滇重楼总皂苷、滇重楼皂苷Ⅰ、薯蓣皂苷元的抗肺癌活性。方法以小鼠肺腺癌细胞株LA795及其宿主近交系T739荷瘤小鼠为研究模型,采用MTT法检测滇重楼总皂苷、滇重楼皂苷Ⅰ和薯蓣皂苷元的细胞毒活性,荷瘤小鼠实验检... 详细信息

目的研究滇重楼皂苷成分滇重楼总皂苷、滇重楼皂苷Ⅰ、薯蓣皂苷元的抗肺癌活性。方法以小鼠肺腺癌细胞株LA795及其宿主近交系T739荷瘤小鼠为研究模型,采用MTT法检测滇重楼总皂苷、滇重楼皂苷Ⅰ和薯蓣皂苷元的细胞毒活性,荷瘤小鼠实验检测抑瘤率、组织病理形态变化及瘤细胞转移情况。结果MTT结果显示滇重楼总皂苷、滇重楼皂苷Ⅰ和薯蓣皂苷元对LA795细胞生长有很强的抑制作用,其IC50分别为24.33μg/mL,1.85、149.75μmol/L;各受试药物高剂量组对T739荷瘤小鼠抑瘤率分别为41.82%、29.44%、33.94%;滇重楼总皂苷给药组可不同程度抑制肿瘤细胞的肺转移和肝转移。结论滇重楼总皂苷成分在体外、体内皆有强的抗肺癌作用。

关键词：滇重楼总皂苷滇重楼皂苷Ⅰ 薯蓣皂苷元抗肺癌活性