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幽门螺杆菌感染的诊断方法

临床内科杂志 2003年第2期20卷 111-112页

作者：顾晓萌赵幼安山东大学齐鲁医院消化科济南市250012

随着对幽门螺杆菌(Hp)研究的不断深入,其实验诊断技术也日趋完善和准确.根据是否需要作内镜检查可将这些诊断方法分为侵入性和非侵入性两大类.每一种诊断方法各有其优缺点,适用于不同的临床情况.

关键词：幽门螺杆菌感染诊断方法侵入性诊断快速尿素酶试验组织学检查细菌培养聚合酶链反应技术非侵入性诊断血清学试验尿素呼气实验粪便Hp抗原检测准确性应用价值

胃癌细胞血管内皮生长因子RNA干扰对血管内皮细胞生长的影响

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中华消化杂志 2007年第4期27卷 278-280页

作者：顾晓萌褚衍六赵幼安山东大学齐鲁医院消化科济南250012

目前抗肿瘤血管生成的研究多在动物模型中进行，这样虽然可以模拟肿瘤生长的微环境，但由于受到体内环境诸多因素的影响，促血管生成因子人为表达降低后，血管内皮细胞的生物学行为发生了哪些变化难以明确。采用分泌促血管生成因子的肿... 详细信息

目前抗肿瘤血管生成的研究多在动物模型中进行，这样虽然可以模拟肿瘤生长的微环境，但由于受到体内环境诸多因素的影响，促血管生成因子人为表达降低后，血管内皮细胞的生物学行为发生了哪些变化难以明确。采用分泌促血管生成因子的肿瘤细胞与血管内皮细胞共培养可以初步明确这一问题。本研究采用RNA干扰（RNAi）技术观察其抑制肿瘤细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达后对血管内皮细胞生长的影响。

关键词：血管内皮细胞生长血管内皮生长因子 RNA干扰胃癌细胞促血管生成因子抑制肿瘤细胞抗肿瘤血管生成生物学行为

张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因在胰腺癌中的表达及其与P27蛋白的关系

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中华消化杂志 2007年第8期27卷 556-557页

作者：顾晓萌李延青山东大学齐鲁医院消化科济南250012

近年来新发现的张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因（PTEN）是第一个具有脂质磷酸酶活性的抑癌基因，其表达产物负性调控细胞周期及多种信号途径，抑制细胞粘附迁移，诱导细胞分化及凋亡等多种生理活动。P27是多功能细胞周期蛋白... 详细信息

近年来新发现的张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因（PTEN）是第一个具有脂质磷酸酶活性的抑癌基因，其表达产物负性调控细胞周期及多种信号途径，抑制细胞粘附迁移，诱导细胞分化及凋亡等多种生理活动。P27是多功能细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子，负性调控细胞周期，是已知重要抑癌基因之一。我们应用免疫组化法研究82例胰腺癌患者肿瘤组织中PTEN及P27蛋白表达水平及相关性，分析其与胰腺癌进展及在临床评估中的意义。

关键词： P27蛋白胰腺癌患者磷酸酶基因染色体丢失细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子张力蛋白蛋白表达水平抑癌基因

重组腺病毒Ad/siRNA/环氧合酶-2的构建及其抑制食管癌细胞的效果

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中华消化杂志 2005年第12期25卷 733-736页

作者：赵晖顾晓萌山东大学齐鲁医院胸外科济南250012 山东大学齐鲁医院消化内科济南250012

目的观察腺病毒介导的 RNA 干扰(RNAi)技术对人食管鳞癌细胞(Eca-109)环氧合酶(COX)-2基因表达的抑制效果及其对 Eca-109细胞生长的影响。方法采用含 RNA 聚合酶Ⅲ启动于H1的质粒 pSUPER 构建针对人 COX-2 mRNA 的重组质粒 psiRNA/COX-2... 详细信息

目的观察腺病毒介导的 RNA 干扰(RNAi)技术对人食管鳞癌细胞(Eca-109)环氧合酶(COX)-2基因表达的抑制效果及其对 Eca-109细胞生长的影响。方法采用含 RNA 聚合酶Ⅲ启动于H1的质粒 pSUPER 构建针对人 COX-2 mRNA 的重组质粒 psiRNA/COX-2。Not Ⅰ和 Xho Ⅰ双酶切psiRNA/COX-2得到 siRNA/COX-2表达片段,定向克隆至腺病毒穿梭质粒 pAdTrack 的相同位点得到pAdTrack/siRNA/COX-2,后者与骨架质粒 pAdEasy-1在大肠杆菌 BJ5183中同源重组得到腺病毒 Ad/siRNA/COX-2,经293细胞包装、扩增后转染 Eca-109细胞。ELISA 法测定培养液上清的前列腺素(PG)E2浓度,PCR 法检测细胞 COX-2 mRNA 水平,流式细胞仪检测细胞凋亡与周期分布,绘制细胞生长曲线。结果重组腺病毒 Ad/siRNA/COX-2构建成功,转染 Eca-109细胞后,细胞 COX-2 mRNA 水平下降71.7%(P<0.01),培养液上清 PGE2浓度下降62.0%(P<0.01);细胞生长明显减缓,GO-G1期细胞比例增加、S 期与 G2-M 期细胞比例减少(P<0.01),细胞凋亡增多(P<0.01)。结论腺病毒介导的 RNAi 技术可显著抑制人食管鳞癌细胞 COX-2基因表达.从而导致肿瘤细胞增殖减缓、凋亡增加。

关键词： RNA干扰环氧合酶-2沉默食管肿瘤细胞生长

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恶性食管间质瘤的血管生成拟态研究

中华消化杂志 2006年第6期26卷 405-407页

作者：赵晖顾晓萌丛波李希波山东大学齐鲁医院外科济南2500012 山东大学齐鲁医院消化科

1999年Maniotis等[1]在人眼葡萄膜恶性黑色素瘤中发现一种全新的血液输送管道,其管壁为变形的恶性黑色素瘤细胞及其间质形成,因其结构与正常血管类似,称之为血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）.相继研究发现,含有VM的肿瘤在生物... 详细信息

1999年Maniotis等[1]在人眼葡萄膜恶性黑色素瘤中发现一种全新的血液输送管道,其管壁为变形的恶性黑色素瘤细胞及其间质形成,因其结构与正常血管类似,称之为血管生成拟态（vasculogenic mimicry,VM）.相继研究发现,含有VM的肿瘤在生物学行为上具有如下特点：恶性程度高、非定向分化或双向性分化、生长迅速、血道转移率高,如其他部位的恶性黑色素瘤、滑膜肉瘤、间皮肉瘤及卵巢癌等。

关键词：葡萄膜恶性黑色素瘤血管生成拟态食管间质瘤恶性黑色素瘤细胞定向分化生物学行为正常血管研究发现恶性程度滑膜肉瘤

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消化道双向分化肿瘤的血管生成拟态研究

中华医学杂志 2007年第34期87卷 2398-2400页

作者：顾晓萌李延青赵幼安山东大学齐鲁医院消化内科济南250012

目的探讨在消化道双向分化恶性肿瘤中是否存在血管生成拟态(VM)。方法采用免疫组化和 PAS 染色技术研究消化道双向分化恶性肿瘤的血管生成模式,收集消化道双向分化恶性肿瘤111例,包括恶性胃肠间质瘤80例;恶性黑色素瘤18例;癌肉瘤13例。... 详细信息

目的探讨在消化道双向分化恶性肿瘤中是否存在血管生成拟态(VM)。方法采用免疫组化和 PAS 染色技术研究消化道双向分化恶性肿瘤的血管生成模式,收集消化道双向分化恶性肿瘤111例,包括恶性胃肠间质瘤80例;恶性黑色素瘤18例;癌肉瘤13例。分别进行血管内皮生长因子(VEGF)、CD31及 PAS 染色,通过体视学网格计数法计算 VEGF 的表达量、显微图像分析仪下分别计算 CD31和 PAS 阳性图案围成的管道面积即微血管密度(MVD)与 VM 密度(VMD),根据三者的表达量研究 VM 并比较分析三者之间的关系以及与肿瘤恶性程度的关系。结果消化道双向分化恶性肿瘤有 VM 形成,其内存在红细胞,含有 VM 的肿瘤其 VEGF 表达(89±20)及 MVD(47±12)均低于无 VM 者(126±18,78±13,均 P<0.05);随着肿瘤恶性程度的增高,VM 肿瘤的比例逐渐增高,VM肿瘤 VEGF 的表达、MVD、VMD 均逐渐增高,上述指标在各肿瘤的低度恶性(45±19,15±8,38±25)与高度恶性(128±42,81±17,122±39)之间差异均有统计学意义(均 P<0.05)。结论消化道双向分化恶性肿瘤细胞具有可塑性,存在 VM。肿瘤细胞通过 VM 可进一步获得血液供应和血道转移。

关键词：新生血管化病理性消化系统肿瘤血管生成拟态

恶性胃间质瘤的血管生成拟态与恶性程度的关系

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山东大学学报（医学版） 2009年第5期47卷 117-119,130页

作者：顾晓萌于涛山东大学齐鲁医院消化内科济南250012

目的探讨恶性胃间质瘤中是否存在血管生成拟态(VM),即肿瘤细胞变形并模仿正常血管结构形成的拟态血管。方法将36例恶性间质瘤分为低、中、高度3组,分别采用免疫组织化学和PAS染色双重染色测定微血管密度(MVD)、血管生成拟态密度(VMD),... 详细信息

目的探讨恶性胃间质瘤中是否存在血管生成拟态(VM),即肿瘤细胞变形并模仿正常血管结构形成的拟态血管。方法将36例恶性间质瘤分为低、中、高度3组,分别采用免疫组织化学和PAS染色双重染色测定微血管密度(MVD)、血管生成拟态密度(VMD),并分析肿瘤的恶性程度与VMD的关系。结果恶性胃间质瘤中有VM形成,含有VM的恶性胃间质瘤VEGF表达及MVD均低于无VM者(P均0.05)。结论恶性胃间质瘤细胞具有可塑性,能通过自身变形并分泌细胞外基质,模拟正常血管结构形成可输送血液的管道系统,即血管生成拟态。

关键词：血管生成拟态肿瘤血管生成胃问质瘤

Ki-67抗原表达与食管鳞癌临床病理特征及其预后的关系

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山东医药 2003年第6期43卷 14-15页

作者：赵晖顾晓萌王善政山东大学齐鲁医院山东济南250012

为探讨食管鳞癌患者癌组织中增殖细胞核相关抗原 Ki- 67表达的临床意义 ,采用免疫组织化学 S- P法检测了 62例食管鳞癌患者癌组织标本中 Ki- 67的表达水平。结果证实 ,Ki- 67表达与性别、年龄、淋巴结转移、远处转移无相关性 ( P >0 .0 ... 详细信息

为探讨食管鳞癌患者癌组织中增殖细胞核相关抗原 Ki- 67表达的临床意义 ,采用免疫组织化学 S- P法检测了 62例食管鳞癌患者癌组织标本中 Ki- 67的表达水平。结果证实 ,Ki- 67表达与性别、年龄、淋巴结转移、远处转移无相关性 ( P >0 .0 5 ) ,与肿瘤长径、食管壁浸润程度、p TNM分期及肿瘤分化程度呈正相关关系( P<0 .0 1)。高表达组患者术后 3年生存率低于低表达组 ,但无统计学差异。认为 Ki- 67抗原表达与反映食管鳞癌恶性程度的临床病理参数呈正相关关系。

关键词： Ki-67抗原表达食管鳞癌病理特征预后

福尔马林灭活RSV疫苗增强性疾病模型建立及特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第4期29卷 326-327页

作者：余蓓蓓彭慧琴顾晓萌刘怡严杰钱景浙江大学医学院基础医学系病原生物学教研室杭州310058 浙江大学医学院医学系

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“... 详细信息

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“疫苗增强性疾病”（vaccine enhanced disease，VED）。目前关于VED免疫病理调控机制的研究多建立在动物模型基础上。本研究通过制备FI—RSV疫苗，建立BALB／c小鼠FI—RSV相关VED模型，定义其病毒滴度、抗体水平以及病理诊断特征，为进一步研究RSV相关VED的分子机制提供实验资料。

关键词： RSV疫苗疾病模型福尔马林强性灭活 BALB/c小鼠呼吸道合胞病毒病原微生物感染