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肝细胞癌中PTEN、Cx43及VEGF蛋白的表达

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癌症 2004年第6期23卷 662-666页

作者：张天一安君岭顾君一何松南通医学院分析细胞学研究室江苏南通226001 南通市肿瘤医院病理科江苏南通226001

背景与目的:肿瘤抑制基因PTEN、间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)及血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达在肿瘤发生和进展中发挥重要的作用。本研究目的是观察肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中PTEN、Cx43及VEGF蛋白的表达及其关系,探讨它们在HCC发生和发展中的作用。方法:免疫组化链酶素抗生物素-过氧化物酶(SP)法研究47例HCC组织中PTEN、Cx43及VEGF的表达情况。结果:PTEN、Cx43、VEGF在HCC组织中总的阳性率分别为76.6%、42.6%、70.2%。随着肿瘤病程进展,PTEN和Cx43阳性率降低(P均<0.05),而VEGF阳性率显著增高(P=0.001)。与肝内血管癌栓组相比,PTEN在无肝内血管癌栓组的阳性率显著增高(P=0.006)。肝硬化组Cx43阳性率明显低于无肝硬化组(χ2=4.7135,P=0.03)。PTEN阳性率在肿瘤大小、癌组织分化程度及肝硬化背景组无显著性差异。Cx43阳性率在肿瘤大小、癌组织分化程度及肝内血管瘤栓组无显著性差异。VEGF阳性率在肿瘤大小、癌组织分化程度、肝硬化及肝内血管癌栓组无显著性差异。相关分析表明:PTEN阳性率与Cx43阳性率正相关(CramersV=0.3949,P=0.023);PTEN阳性率与VEGF阳性率负相关(CramersV=0.3937,P=0.024);Cx43阳性率与VEGF阳性率无明显相关(CramersV=0.3072,P=0.

关键词：肝细胞癌 PTEN Cx43 VEGF 免疫组化

缺血—再灌注损伤对大鼠心肌中氨基酸的影响及牛磺酸的保护作用

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中国药理学通报 1993年第2期9卷 110-113页

作者：顾君一李靖陆曙胡迎青南通医学院江苏226001 南京中医学院中医系 210005

使用大鼠离体作功心脏缺血一再灌注损伤模型,观察心肌内游离氨基酸含量的变化以及牛磺酸(Taurine,Tau)对心脏的影响.发现再灌注损伤使心肌内所测17种游离氨基酸含量除Cys外部减少,其中Tau降低最显著.20 mmol·L^(-1)Tau能改善心脏的再... 详细信息

使用大鼠离体作功心脏缺血一再灌注损伤模型,观察心肌内游离氨基酸含量的变化以及牛磺酸(Taurine,Tau)对心脏的影响.发现再灌注损伤使心肌内所测17种游离氨基酸含量除Cys外部减少,其中Tau降低最显著.20 mmol·L^(-1)Tau能改善心脏的再灌注损伤,表现为:在再灌注期间促进心脏机械功能的恢复,减少室性心律失常的发生率,减少LDH与CK从心肌中漏出,减少脂质过氧化作用与钙的积聚以及减少心肌内游离氨基酸的丢失.提示:外源性Tau能够改善心脏的缺血一再灌注损伤.

关键词：心肌缺血再灌注损伤牛磺酸

缺血-再灌注对大鼠心肌氨基酸的影响及牛磺酸的作用

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中国病理生理杂志 1993年第4期9卷 555-555,513页

作者：顾君一李靖陆曙胡迎青南通医学院南通市226001

心肌缺血—再灌注后可出现一系列损伤性变化,其中形态结构变化,各种酶与离子的改变都有深入的研究。本文利用大鼠离体心脏缺血—再灌注损伤模型。

关键词：心肌缺血再灌注氨基酸牛磺酸

异硫氰酸荧光素标记动态观察天花粉蛋白对黑色素瘤B16细胞的损伤

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第29期11卷 5792-5796页

作者：周欣阳张天一顾君一南通大学神经再生重点实验室江苏省南通市226001

目的:应用异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白,在激光共聚焦显微镜下直接观察天花粉蛋白进入黑色素瘤B16细胞的动态过程并分析其对黑色瘤B16细胞的损伤作用。方法:实验于2003-08/2004-08在南通大学神经再生重点实验室完成。将常规传代培养的... 详细信息

目的:应用异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白,在激光共聚焦显微镜下直接观察天花粉蛋白进入黑色素瘤B16细胞的动态过程并分析其对黑色瘤B16细胞的损伤作用。方法:实验于2003-08/2004-08在南通大学神经再生重点实验室完成。将常规传代培养的黑色素瘤B16细胞用胰酶消化,以5×109个/L的浓度种植于24孔培养板。将天花粉蛋白、异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白、异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白分别加入培养细胞中,终浓度为50mg/L,同时加入等量生理盐水作为正常对照组,每组再分别设3,6,12h不同孵育时间组。异硫氰酸荧光素标记天花粉蛋白后,利用激光共聚焦显微镜观察异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白进入细胞的过程及其荧光强度,CCK-8细胞毒性实验评估各组细胞存活率、并用单细胞凝胶电泳及hoechst33258染核观察天花粉蛋白对黑色素瘤B16细胞致DNA损伤作用。结果:①终浓度50mg/L的异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白孵育3h时已经进入黑色素瘤细胞,6h时进入细胞量达到最高,12h时已轻度下降,各时间点比较差异有统计学意义(P<0.01)。异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白组与异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白组荧光强度差异有显著性(P<0.01)。②终浓度50mg/L异硫氰酸荧光素-天花粉蛋白、天花粉蛋白孵育黑色素瘤细胞3,6h后利用单细胞电泳和Hoechst33258染色未观察到核形态的变化;但孵育6h后CCK-8细胞毒性实验显示活细胞数量明显下降;孵育12h后出现DNA损伤的特征性彗星尾现象,并观察到明显的核浓缩和边集现象,出现特征性凋亡小体。结论:孵育6h时天花粉蛋白进入细胞量最多,但并没有明显的细胞DNA损伤的作用,而孵育12h时产生明显的细胞毒作用和凋亡的发生。

关键词：天花粉蛋白黑色素瘤B16细胞 DNA损伤

牛磺酸对大鼠离体作功心脏缺血—再灌注损伤的保护作用

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中国病理生理杂志 1992年第3期 330-331页

作者：顾君一陆曙李靖黄宗勤南通医学院附院心内科南京中医学院中医系南通医学院附院心内科硕士研究生南通医学院病生教研室

本文采用改良Neely氏大鼠离体作功心脏模型,动物分为缺血(旷置40分钟)再灌注(30分钟)组,缺血再灌注+牛磺酸组(再灌液中含20mM牛磺酸)及假旷置组。结果显示:(1)牛磺酸改善再灌注损伤心脏的作功

关键词：大鼠离体牛磺酸乙磺酸(P) 作功再灌注损伤心脏

实验性心肌损伤时心肌G-6-PD酶电镜研究

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电子显微学报 1998年第4期17卷 419-420页

作者：张天一李靖顾君一林琳南通医学院电镜室南通医学院附属医院心内科

实验性心肌损伤时心肌Ｇ－６－ＰＤ酶电镜研究张天一李靖＊顾君一林琳（南通医学院电镜室，＊南通医学院附属医院心内科，南通２２６００１）大剂量异丙肾上腺素（ＩＳＰ）可引起大鼠心肌组织发生梗塞样的损伤，其心电图、能量代谢及组... 详细信息

实验性心肌损伤时心肌Ｇ－６－ＰＤ酶电镜研究张天一李靖＊顾君一林琳（南通医学院电镜室，＊南通医学院附属医院心内科，南通２２６００１）大剂量异丙肾上腺素（ＩＳＰ）可引起大鼠心肌组织发生梗塞样的损伤，其心电图、能量代谢及组织病理学（包括细胞超微结构）的变化...

关键词：心肌损伤心肌 G-6-PD酶电镜

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年龄与血浆氨基酸含量的关系

营养学报 1989年第1期11卷 9-12页

作者：顾君一蓝之荣袁国祥王英伟南通医学院病理生理教研室

本文分析了21例百岁老人(100～106岁),21例老年人(65～78岁)及37例青年人(18～21岁)血浆中24种游离氨基酸的浓度。其中17种游离氨基酸青年组大于老年组和百岁老人组。百岁老人组与老年组之间,除血浆胱氨酸和瓜氨酸百岁老人组较高(P<0.0... 详细信息

本文分析了21例百岁老人(100～106岁),21例老年人(65～78岁)及37例青年人(18～21岁)血浆中24种游离氨基酸的浓度。其中17种游离氨基酸青年组大于老年组和百岁老人组。百岁老人组与老年组之间,除血浆胱氨酸和瓜氨酸百岁老人组较高(P<0.05),支/芳比值百岁老人组较低(P<0.02)外,余无统计学差异。结果提示:老年人血浆游离氨基酸的浓度低于青年人,百岁老人组血浆氨基酸浓度与老年组相似,但支/芳比值较低。

关键词：年龄氨基酸血浆

HSPgp96和LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞的比较研究

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第11期23卷 1050-1052页

作者：施海燕林琳朱昌来张天一顾君一南通大学医学院病理生理学教研室江苏省神经再生重点实验室细胞分析学实验室江苏南通226001

目的:比较HSPgp96与LPS对巨噬细胞免疫功能的激活作用。方法:培养小鼠腹腔巨噬细胞,分组用PBS、HSPgp96和LPS诱导后,在不同时间用酶法测定NO生成量。按效靶比10:1加入H22肝癌细胞,24h后靶细胞进行单细胞凝胶电泳,染色观察。在不同时间... 详细信息

目的:比较HSPgp96与LPS对巨噬细胞免疫功能的激活作用。方法:培养小鼠腹腔巨噬细胞,分组用PBS、HSPgp96和LPS诱导后,在不同时间用酶法测定NO生成量。按效靶比10:1加入H22肝癌细胞,24h后靶细胞进行单细胞凝胶电泳,染色观察。在不同时间用激光扫描共聚焦显微镜观测巨噬细胞MHC-Ⅱ和CD86的表达。结果:LPS和HSPgp96促进巨噬细胞NO生成的作用相当,并随作用时间延长而增加。巨噬细胞攻击后的靶细胞呈现DNA损伤后的彗星现象。LPS和HSPgp96均促进巨噬细胞MHC-Ⅱ和CD86的表达,但HSPgp96诱导组表达更快更强。结论:与LPS相比,HSPgp96活化小鼠腹腔巨噬细胞细胞毒活性的作用相当,而诱导抗原提呈功能的作用更强。

关键词：腹腔巨噬细胞细胞毒活性抗原提呈热休克蛋白gp96 脂多糖

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96KD糖蛋白诱导肿瘤免疫的实验研究

实用肿瘤杂志 2003年第2期18卷 112-114页

作者：牛纪晓张天一林琳顾君一南通医学院电镜室江苏南通226001

目的　从 H2 2肝癌细胞中纯化 96 KD糖蛋白 ,并观察其诱导肿瘤免疫作用。方法　 ( 1)分离 96 KD糖蛋白 :H2 2肝癌细胞破膜、可溶性蛋白分级硫酸铵盐析、Co A- Sepharose亲和层析、DEAE- Sephacel离子交换层析分离、SDS-聚丙烯酰胺凝胶... 详细信息

目的　从 H2 2肝癌细胞中纯化 96 KD糖蛋白 ,并观察其诱导肿瘤免疫作用。方法　 ( 1)分离 96 KD糖蛋白 :H2 2肝癌细胞破膜、可溶性蛋白分级硫酸铵盐析、Co A- Sepharose亲和层析、DEAE- Sephacel离子交换层析分离、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。 ( 2 )诱导肿瘤免疫 :用不同剂量 96 KD糖蛋白分别皮下免疫 5组小鼠 ,每周 1次 ,连续两周 ,末次免疫后的第 7天用 2× 10 5H2 2细胞攻击 ,观察各组肿瘤发生率及瘤重并与对照组比较。结果　不同剂量免疫组皆显示保护作用 ,用 18μg/只 96 KD糖蛋白免疫组效果最明显。结论　使用从 H2 2肝癌细胞中分离的 96 KD糖蛋白免疫小鼠后 ,对同类癌细胞攻击显示有效的免疫保护作用。

关键词：糖蛋白类免疫学肝肿瘤实验性小鼠