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HeLa/GFP—H2B细胞系的构建及对其有丝分裂进程的动态观察

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科学技术与工程 2011年第21期11卷 5150-5153,5157页

作者：李腾高彦飞常艳王玉博穆蕊陈亮甄诚韩秋影于鸣巩伟丽张维娜李慧艳国家生物医学分析中心北京100850 军事医学科学院基础医学研究所细胞免疫学教研室北京100850

准确的染色体分离依赖于有丝分裂过程的精确调控,包括有丝分裂的时间,及纺锤体检查点的正确调控等。通过动态观察有丝分裂染色体的运动可对上述研究进行精确定量。结果显示,利用逆转录病毒系统成功构建了稳定融合表达绿色荧光蛋白GFP—... 详细信息

准确的染色体分离依赖于有丝分裂过程的精确调控,包括有丝分裂的时间,及纺锤体检查点的正确调控等。通过动态观察有丝分裂染色体的运动可对上述研究进行精确定量。结果显示,利用逆转录病毒系统成功构建了稳定融合表达绿色荧光蛋白GFP—H2B的HeLa细胞系,结合细胞同步化方法,建立了一套利用活细胞荧光共聚焦显微镜观察HeLa细胞有丝分裂的实验体系。

关键词：有丝分裂细胞同步化活细胞观察

体外APC/C活性体系的建立及其影响因素的研究

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科学技术与工程 2011年第21期11卷 5154-5157页

作者：高彦飞李腾常艳王玉博穆蕊陈亮甄诚韩秋影于鸣巩伟丽张维娜李慧艳国家生物医学分析中心北京100850 军事医学科学院基础医学研究所细胞免疫学教研室北京100850

为获得具有细胞周期后期促进复合物(APC/C)活性的细胞裂解液并建立APC/C体外活性检测体系,以其底物Cyc-lin B及Securin的降解为检测指标,分别从细胞阻滞于有丝分裂期的时间,UBCH10(APC/C的E2酶)的浓度以及裂解液浓度等几个方面研究了各... 详细信息

为获得具有细胞周期后期促进复合物(APC/C)活性的细胞裂解液并建立APC/C体外活性检测体系,以其底物Cyc-lin B及Securin的降解为检测指标,分别从细胞阻滞于有丝分裂期的时间,UBCH10(APC/C的E2酶)的浓度以及裂解液浓度等几个方面研究了各种处理因素对APC/C活性的影响,并且用体外翻译底物验证了其活性及相关结论。此项工作为进一步探索APC/C相关分子事件奠定了基础。

关键词：后期促进复合物 Cyclin B Securin UBCH10 活性

Mad2蛋白在有HeLa细胞有丝分裂期的动态定位

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科学技术与工程 2011年第21期11卷 5158-5161页

在细胞有丝分裂中纺锤体检查点对保证遗传信息的稳定性有着重要的调控意义。其中Mad2蛋白作为纺锤体检查点蛋白在前中期被招募到未与微管正确结合的着丝粒上,从而保证纺锤体检查点的激活并抑制后期的开始。通过活细胞荧光共聚焦显微镜对... 详细信息

在细胞有丝分裂中纺锤体检查点对保证遗传信息的稳定性有着重要的调控意义。其中Mad2蛋白作为纺锤体检查点蛋白在前中期被招募到未与微管正确结合的着丝粒上,从而保证纺锤体检查点的激活并抑制后期的开始。通过活细胞荧光共聚焦显微镜对Mad2的定位动态追踪,定量了其在有丝分裂过程中位于着丝粒上的光强变化,从而为研究纺锤体检查点的功能提供了依据。而Mad2本身的蛋白表达过强过弱均可导致肿瘤的发生,因此通过对其有丝分裂中光强的定量也为研究肿瘤的发生机制提供了线索。

关键词： Mad2 有丝分裂活细胞观察

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体外反应体系中APC/C活性及相关研究

科学技术与工程 2011年第21期11卷 4982-4985页

为利用体外反应体系研究纯化的细胞周期后期促进复合物(APC/C)相关的分子事件,以其底物泛素化为检测指标,分别从来源细胞裂解液浓度,不同底物间泛素化强度,以及与纺锤体检查点复合物的解离等几方面进行了研究。结果显示,由浓度高的细胞... 详细信息

为利用体外反应体系研究纯化的细胞周期后期促进复合物(APC/C)相关的分子事件,以其底物泛素化为检测指标,分别从来源细胞裂解液浓度,不同底物间泛素化强度,以及与纺锤体检查点复合物的解离等几方面进行了研究。结果显示,由浓度高的细胞裂解液纯化出的APC/C活性高,其对底物Geminin的泛素化活性较Cyclin B高,在APC/C活性由被抑制到释放过程中,APC/C与Mad2,BubR1结合减少且Cdc20泛素化增强。

关键词：后期促进复合物底物活性解离

SCN区初级纤毛节律性改变调控生物钟中枢功能

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第7期37卷 489-489页

作者：涂海情李森许钰铃张宇程李佩瑶梁丽云宋广平简肖肖吴敏宋增庆李亭亭胡怀斌李佳凝韩秋影王凯李慧艳南湖实验室国家生物医学分析中心

昼夜节律，俗称生物钟，是生物为了适应地球自转产生的昼夜更替而形成的一种节律性生命活动规律，一直被认为是生物体内一种无形的“时钟”，精密调控着机体重要生理功能。大脑视交叉神经上核（SCN）区域是昼夜节律的指挥中枢，又称“... 详细信息

昼夜节律，俗称生物钟，是生物为了适应地球自转产生的昼夜更替而形成的一种节律性生命活动规律，一直被认为是生物体内一种无形的“时钟”，精密调控着机体重要生理功能。大脑视交叉神经上核（SCN）区域是昼夜节律的指挥中枢，又称“中枢时钟”，其神经元的初级纤毛，在每个神经元的细胞膜上只有1根，犹如“天线”结构。这一“天线”结构每24 h伸缩1次，如同生物钟的指针，通过它可实现对机体节律的调整和时差的调节。进一步在倒时差动物模型中发现，野生型小鼠需要7～9 d才能适应新的时间周期，而SCN纤毛特异缺陷小鼠仅需1～2 d就适应了新的时间周期。同时，该缺陷型小鼠SCN神经元间的通讯能力大为减弱。更深入的机制研究发现，SCN初级纤毛的节律性变化驱动了Hedgehog通路的节律性激活，进而调控多个核心生物钟基因以及神经递质等的振荡性变化。利用化学抑制剂Vismodegib特异阻断小鼠SCN区Hedgehog通路，发现给药后的小鼠也能够快速适应新的时间周期（1～2 d）。此项发现为节律调控新药研发开辟了全新路径。

关键词：昼夜节律大脑视交叉神经上核初级纤毛倒时差 Hedgehog通路

日常观念与专业知识:知识类型与知识社会学的基本结构

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浙江学刊 2025年第01期 35-45+239页

作者：许松影李钧鹏华中师范大学政治学与国家治理研究院华中师范大学社会学院

“知识”定义的模糊性阻碍了知识社会学的发展。探索恰当的知识类型学，从研究对象角度将知识社会学加以系统化处理，有望改善这一问题。文章讨论社会学既有的多种知识分类，指出日常观念/专业知识的区分满足了系统化知识社会学的四条... 详细信息

“知识”定义的模糊性阻碍了知识社会学的发展。探索恰当的知识类型学，从研究对象角度将知识社会学加以系统化处理，有望改善这一问题。文章讨论社会学既有的多种知识分类，指出日常观念/专业知识的区分满足了系统化知识社会学的四条标准，进而考察日常观念/专业知识这组区分的不同形态，分析实用主义等流派对该区分的理解，总结其逻辑内涵。在此基础上，细化日常观念/专业知识的区分，结合既有的知识社会学研究，对该领域的相关议题做系统性分类，简述其中的八个重点部分。通过知识分类呈现知识社会学的基本结构，不仅是学科自反性的要求，也对知识社会学的未来具有重要意义。

关键词：社会理论知识社会学知识类型日常观念专业知识

一种偏差校正方法在青藏高原夏季CMIP6降水数据订正中的应用评估

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高原气象 2025年第1期44卷 16-31页

作者：刘雨萌赵林李照国王少影马媛媛孟宪红中国科学院西北生态环境资源研究院/冰冻圈科学与冻土工程重点实验室甘肃兰州730000 中国科学院大学北京100049

利用第六次国际耦合模式比较计划(CMIP6)中的18个模式,基于欧洲中期天气预报中心第五代再分析资料(ERA5)再分析数据对青藏高原夏季降水数据进行了偏差校正,并从平均降水和极端降水两方面评估了校正前后的CMIP6数据以及单个模式在1979-2... 详细信息

利用第六次国际耦合模式比较计划(CMIP6)中的18个模式,基于欧洲中期天气预报中心第五代再分析资料(ERA5)再分析数据对青藏高原夏季降水数据进行了偏差校正,并从平均降水和极端降水两方面评估了校正前后的CMIP6数据以及单个模式在1979-2014年的表现。研究结果表明,该校正方法高度依赖于用于偏差校正的ERA5再分析数据在研究区域的质量,尽管偏差校正后的青藏高原夏季平均降水的误差和误差率上有所改善,但在年际时间变化特征方面却不如偏差校正前的数据。大多数CMIP6模式能够较好地模拟1979-2014年青藏高原上由西北至东南逐渐递增的平均降水空间变化特征。偏差校正前的降水数据在高原上会出现显著的高估,误差率为60.4%,经过偏差校正后的数据相对观测数据误差降低,误差率为-13.9%,并且偏差校正后的数据与ERA5的平均误差仅为0.003 mm·d^(-1),与ERA5的空间相关性高达0.999。空间趋势方面,观测数据表明青藏高原大部分地区夏季降水在1979-2014年呈现轻微增加的趋势,只有东缘出现明显降低的趋势。偏差校正前后的数据都能够大致刻画出这一空间分布特征,然而,未经偏差校正的大多数单个CMIP6模式与ERA5的空间相关系数未超过0.5。与由独立观测降水数据的年际变化特征相比,偏差校正前的数据高估了高原上的降水量,而偏差校正后的数据相比观测结果则偏低。通过确定95%分位阈值选取了极端降水个例,其集合平均极端降水空间分布与年平均降水类似,也呈西北向东南递增的趋势。部分CMIP6模式较好地模拟了这一特征,如MRI-ESM2-0(The Meteorological Research Institute Earth System Model version 2.0)和ACCESSCM2(Australian Community Climate and Earth System Simulator Climate Model Version 2),与观测结果的空间相关系数分别为0.851和0.821。但偏差校正后的数据在空间相关性方面下降,由偏差校正前的0.861降为0.730,未能准确刻画高原极端降水阶梯式递增的特点。偏差校正后的极端降水数据误差分布与偏差校正前相似,偏低区域主要集中在高原南部腹地和东部。进一步的极端降水贡献率分析结果表明,观测结果与CMIP6降水数据均显示1979-2014年期间极端降水贡献率变化趋势不明显。单个CMIP6模式中,EC-Earth3-Veg(European Community Earth-Vegetation model version 3)和EC-Earth3(European Community Earth Model version 3)及CanESM5(The Canadian Earth System Model version 5)在多个统计评估指标上排名靠前,展示出较好的模拟能力;IPSL-CM6A-LR(Institut Pierre-Simon Laplace Climate Model 6A Low Resolution)在平均降水误差和极端降水的误差指标上表现出色。

关键词：青藏高原第六次国际耦合模式比较计划(CMIP6) 偏差校正降水

缺血性脑卒中痰热腑实证大鼠模型的建立与评价

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2301-2309页

作者：平兴枫吕军影李凯黄宗轩尹建新广西医科大学第一附属医院广西壮族自治区南宁市530021

背景:中医药在治疗缺血性脑卒中痰热腑实证中具有丰富的经验和独特的优势,为深入挖掘中医药对该病的治疗靶点和治疗机制,建立稳定、可靠的缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型是关键。目的:探讨缺血性脑卒中痰热腑实证大鼠模型的建... 详细信息

背景:中医药在治疗缺血性脑卒中痰热腑实证中具有丰富的经验和独特的优势,为深入挖掘中医药对该病的治疗靶点和治疗机制,建立稳定、可靠的缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型是关键。目的:探讨缺血性脑卒中痰热腑实证大鼠模型的建立方法及评价体系。方法:采用随机数字表法将60只SD大鼠随机分为4组:空白对照组(n=12)、缺血性脑卒中组(n=18)给予普通饲料喂养25 d,病证结合组(n=18)、痰热腑实证组(n=12)给予高脂饲料喂养25 d;第26天,空白对照组、缺血性脑卒中组灌胃给予生理盐水,病证结合组、痰热腑实证组灌胃给予自体粪便混悬液,连续灌胃3 d(灌胃期间继续给予高脂饲料);灌胃结束后,缺血性脑卒中组、病证结合组采用线栓法建立缺血性脑卒中模型,记录各组大鼠饮食量、饮水量、体质量、体温、粪便性状、鼻分泌物、喉中痰鸣、舌象等表征变化。造模结束后24 h,进行神经功能缺损评分、舌象表征、血脂水平检测、脑组织及颈动脉形态学观察以及血清胃动素和生长抑素水平检测。结果与结论:(1)与空白对照组比较,病证结合组大鼠呼吸急促、精神萎靡、烦躁、行动迟缓,鼻周可见大量分泌物、可闻及厚重的喉中痰鸣,饮食量、饮水量下降,体质量、体温及舌下脉络评分升高,粪便粒数、Bristol评分及粪便含水率降低;血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇及生长抑素水平升高,胃动素水平降低,神经功能缺损评分升高,颈动脉发生显著病理改变,脑组织显示明显缺血形态学改变。缺血性脑卒中组仅能造成缺血性脑组织病理改变,不能复制出痰热腑实证的证候特征。痰热腑实证组能复制出典型的中医证候特征,但不能构建出缺血性脑卒中的脑组织病理改变。(2)结果表明,高脂诱导结合线栓法及自体粪便灌胃的多因素复合造模方法,可建立缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型。

关键词：缺血性脑卒中痰热腑实证病证结合动物模型症候因素

无种子法纳米金棒的制备及其对肿瘤细胞光热治疗效应研究

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物理化学学报 2014年第7期30卷 1363-1369页

作者：王新环韩秋森李婧影杨蓉刁国旺王琛扬州大学化学化工学院江苏扬州225002 国家纳米科学中心纳米生物效应与安全性重点实验室北京100190

采用简便快捷的无种子法一步完成了纳米金棒的制备.通过改变实验条件可以调控纳米金棒的吸收峰从可见到近红外转移.将巯基聚乙二醇(PEG-SH)置换金棒表面的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)分子,大大提高了金棒的生物相容性.制备的纳米金棒在... 详细信息

采用简便快捷的无种子法一步完成了纳米金棒的制备.通过改变实验条件可以调控纳米金棒的吸收峰从可见到近红外转移.将巯基聚乙二醇(PEG-SH)置换金棒表面的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)分子,大大提高了金棒的生物相容性.制备的纳米金棒在近红外(NIR)光照射下对肿瘤细胞有很好的杀伤效果.研究结果为纳米金棒用于抗肿瘤治疗提供了实验基础.

关键词：纳米金棒等离子共振吸收生物相容性表面修饰热疗