检索结果-南通市图书馆

作者：韩灵莉上海海洋大学

学位级别：硕士

水霉病(Saprolegniasis)是淡水养殖的常见病害,其发病地域广,对宿主无选择性,感染品种多,在5℃-30℃均可发生。国内外众多真菌学家和水产学家对其进行了研究,取得了一定的进展。但是这类疾病至今仍没有很好的解决,目前还没有确定是哪些... 详细信息

水霉病(Saprolegniasis)是淡水养殖的常见病害,其发病地域广,对宿主无选择性,感染品种多,在5℃-30℃均可发生。国内外众多真菌学家和水产学家对其进行了研究,取得了一定的进展。但是这类疾病至今仍没有很好的解决,目前还没有确定是哪些种类的水霉菌导致七彩神仙鱼发病。七彩神仙鱼水霉菌病原种类的鉴定及其生活史的观察,以及其防治方法的研究亟待解决。鉴此,本论文通过提取患有水霉病的七彩神仙鱼鱼卵,并通过人工感染实验验证,获得一株致病菌株YL2,并对其使用传统形态学和ITS相结合的现代分子学方法对其种类进行鉴定,结果显示七彩神仙鱼水霉病的致病菌为寄生水霉(S aprolegnia parasitica);进一步对其防治方法进行了探究,使用不同药物对YL2菌丝的抑制效果进行了比较,发现卡松对其的抑制效果较好,然后探讨分析其对七彩神仙鱼的安全性;最后通过人工感染试验对其抑菌效果进行验证。本文的研究结果为:1.菌株YL2的分离鉴定取实验室的患有水霉病七彩神仙鱼卵,通过分离纯化的方法,得到一株致病水霉菌,命名为YL2,采用现在最常用的水霉菌种类鉴定的方法,即传统形态学和分子生物ITS序列分析技术作为菌株种类的鉴定方法。试验除常用方法外,使用现在最新的微生物裂解液,可以直接释放核酸用于PCR检测反应,作为YL2菌株DNA的提取方法以上两种方法,均鉴定菌株YL2为寄生水霉(Saprolegnia parasitica),相比而言后一种方法更加高效的提取DNA,能够达到微生物快速进行PCR检测的目的,可作为水霉菌DNA提取研究的新方法。2.菌株YL2的生活史YL2菌株菌丝外观为白色棉絮状,经乳酸棉兰染液固定,于显微镜下观察到是无隔透明的管状结构;恒温水培于倒置显微镜下观察其生活史,在不同温度下培养时25℃时生长最好,25℃时最适合菌株YL2的生长,这与七彩神仙鱼生长孵化的温度比较接近,猜测此是七彩神仙鱼在孵化时易被感染的主要原因;在20℃-25℃恒温条件下,第3d有棒状孢子囊形成,第4d开始释放孢子,释放的方式为典型的水霉属菌模式,在15℃恒温条件下能够产生大量有性器官,第5d时有大量的球形藏卵器形成,与雄器主要为同体或者同枝,是水霉属的典型形态特征。3.菌株YL2的药敏特性通过采用四种不同类型的药物对水霉菌杀菌效果进行研究,药物包括益生菌,消毒剂类、防腐剂类和酶类。通过比较分析四类药物对于水霉菌YL2菌丝的生长抑制力和对水霉菌孢子萌发的的抑制浓度间的差异,发现:益生菌和酶类对于抑制菌丝生长的效果不明显,防腐剂和消毒剂类均可抑制菌丝生长,通过高、中、低3个浓度组之间组内比较,发现四种药物抑制效果为:卡松>聚维酮碘>溴硝丙二醇=过氧乙酸,且浓度增大抑菌能力增强,得到卡松的抑菌效果最好;益生菌和酶类在对于水霉菌孢子萌发无抑制效果,防腐剂和消毒剂类则可以抑制其孢子萌发,其中浓度为16mg/L即可抑制80%的水霉菌孢子萌发,而聚维酮碘、过氧乙酸和溴硝丙二醇,能够抑制80%的水霉孢子萌发的浓度均比常用高浓度大。因此,得出卡松对于水霉菌具有较好的抑制效果。4.卡松对七彩神仙鱼的防治效果卡松是国际上公认的日用品广谱防腐剂,且在安全范围内长期,反复使用是安全的。试验测定了卡松对七彩神仙鱼半数致死浓度(LC50)和安全浓度(SC),并在之前卡松对水霉菌YL2菌丝抑菌力和孢子萌发的抑菌浓度基础上,通过人工反感染试验,探索了卡松对七彩神仙鱼水霉病预防效果的研究。最后,发现浓度为16mg/L的卡松能够有效地抑制水霉菌的菌丝生长和孢子的萌发,从而达到抑制水霉菌的效果,可以作为水霉病的预防药物。

关键词：七彩神仙鱼水霉病鉴定抑制预防

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黑格尔七彩神仙鱼摩氏摩根菌分离鉴定及耐药性分析

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南方农业学报 2016年第10期47卷 1772-1777页

作者：王磊孙培英陈再忠罗小溪高建忠李仲璞韩灵莉上海海洋大学水产与生命学院上海201306

【目的】对患病七彩神仙鱼进行摩氏摩根菌(Morganella morganii)分离鉴定及药敏试验,为七彩神仙鱼养殖过程中摩氏摩根菌感染的临床诊断和科学用药提供科学依据。【方法】从患病野生黑格尔七彩神仙鱼体表分离病原菌,然后对其进行形态观... 详细信息

【目的】对患病七彩神仙鱼进行摩氏摩根菌(Morganella morganii)分离鉴定及药敏试验,为七彩神仙鱼养殖过程中摩氏摩根菌感染的临床诊断和科学用药提供科学依据。【方法】从患病野生黑格尔七彩神仙鱼体表分离病原菌,然后对其进行形态观察、生理生化指标测定及16S rDNA序列分析,并采用纸片扩散法(K-B)进行药敏试验。【结果】从患病野生黑格尔七彩神仙鱼分离获得一株优势菌株(DS2015),该菌为革兰氏阴性杆菌,其生理生化测定结果与摩氏摩根菌的相似度达100%。菌株DS2015的16S rDNA序列1208 bp(GenBank收录号KR866070),由基于16S rDNA序列构建的系统发育进化树可知,菌株DS2015与摩氏摩根菌聚为一簇,Bootstrap检验值为99;Biolog微生物自动鉴定结果也显示,菌株DS2015最具可能性为摩氏摩根菌。药敏试验结果表明,菌株DS2015对庆大霉素、新霉素、卡那霉素、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、氯霉素、诺氟沙星、氧氟沙星和复方新诺明等抗生素高度敏感,对米诺环素中度敏感,对青霉素G、头孢氨苄、头孢拉定、四环素、多西环素、红霉素、克林霉素、万古霉素和呋喃唑酮等抗生素已产生耐药性。【结论】摩氏摩根菌可引起七彩神仙鱼身体发黑、皮肤大量分泌黏液及鳍条溃烂等症状,严重者甚至引起死亡,生产中可选用庆大霉素、新霉素、卡那霉素、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、氯霉素、诺氟沙星、氧氟沙星和复方新诺明等抗生素进行防治。

关键词：七彩神仙鱼摩根氏菌分离鉴定药敏试验

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