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P38激酶介导胆红素诱导的SHSY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2002年第1期22卷 45-46页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ... 详细信息

观察P38激酶在胆红素诱导神经细胞凋亡中的作用 ,探讨参与此过程的信号转导通路。将胆红素 (2× 1 0 -2g L)直接作用于体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SHSY5Y ,利用Hochest332 58染色在荧光显微镜下观察细胞核的形态是否发生凋亡样改变 ;用P38激酶抑制剂SB2 0 3580预处理细胞后 ,在倒置光显微镜下观察胆红素作用不同时间细胞形态的变化及存活情况 ;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的改变。结果显示SHSY5Y细胞经胆红素作用后细胞核出现典型的凋亡样改变 ;细胞经SB2 0 3580预处理 1h ,胆红素作用 3h后凋亡率为 (1 2 1± 2 4) % ,对照组为(1 9 4± 2 7) % ;4h后凋亡率为 (39 3± 4 8) % ,对照组为 (66 2± 5 2 ) % ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。

关键词：胆红素 P38激酶凋亡人神经母细胞瘤细胞系

短暂激活c-jun N-terminal激酶抑制胆红素诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

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基础医学与临床 2002年第5期22卷 473-476页

作者：韩张胡萍倪道凤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京10005

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2... 详细信息

探讨c junN terminal激酶 (JNK)在胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡信号转导中的作用。我们用 30 0 μmol LH2 O2 预处理SH SY5Y细胞 1h以激活JNK ,与经PBS预处理的对照组比较 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞百分比由 (37 4± 3 2 ) %降低到 (12 6± 2 6 ) %。为了进一步证实JNK的作用 ,在SH SY5Y细胞经H2 O2 预处理前 ,先经 2 0 μmol LJNK c jun AP1抑制剂curcumin作用 12h以抑制H2 O2 对JNK的激活 ,流式细胞仪结果显示凋亡细胞增高到 (42 8± 4 4 ) % ,curcumin完全抑制了短暂激活JNK所提供的保护作用。结果表明短暂激活JNK可能在胆红素诱导的SH SY5Y细胞凋亡中提供抗凋亡信号。

关键词：细胞凋亡胆红素 JNK 人神经母细胞瘤细胞

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阜蒙县新型农村合作医疗运行情况调查

阜蒙县新型农村合作医疗运行情况调查

作者：韩张大连理工大学

学位级别：硕士

我国是农业大国农村人口数量众多,农村人口始终占我国人口比重较大。新型农村合作医疗是由我国农民创造的具有农民自愿参与、互助共济、大病统筹等特点的医疗保障制度,使农民在基本医疗卫生服务能够得以保障的前提下,逐步缓解农民(农村... 详细信息

我国是农业大国农村人口数量众多,农村人口始终占我国人口比重较大。新型农村合作医疗是由我国农民创造的具有农民自愿参与、互助共济、大病统筹等特点的医疗保障制度,使农民在基本医疗卫生服务能够得以保障的前提下,逐步缓解农民(农村户口)因病致贫、因病返贫、看病难和看病贵等重要问题。但是,我国由于地域辽阔区域经济、医疗水平发展不均衡,导致城市与农村之间医疗卫生服务水平差异大。本文通过调查阜蒙县卫生局、镇卫生院及村卫生室和当地农民群众对新型农村合作医疗保险制度的评价,研究阜蒙县新型农村合作医疗运行情况,深入分析新型农村合作医疗保险制度存在问题及其成因,并针对以上问题提出对策建议。首先,本文采取问卷调查方法,对阜蒙县新型农村合作医疗保险制度调查问卷进行设计,发放320份问卷,并选取有效问卷300份,用SPSS19.0软件对问卷的信度、效度及数据进行有效处理。其次,通过调查结果分析,发现阜蒙县新型农村合作医疗保险制度相关立法滞后、医疗卫生机构设置不够合理、财政投入不足且未统筹考虑、医疗信息整合不到位、监督问责机制不健全等问题。最后,从制定完善阜蒙县新型农村合作医疗保险法规制度、优化新型农村合作医疗保险体制建设、制定新型农村合作医疗保险人才培养与统筹计划、建立健全新型农村合作医疗保险监督机制四个方面提出阜蒙县新型农村合作医疗保险制度的对策建议。本文在阜蒙县卫生局的指导下探索当地新型农村合作医疗保险制度,从理论上探讨新型农村合作医疗如何能够更好的为当地农民群众服务。同时,结合具体工作实践,力求使新型农村合作医疗保险制度的完善工作引起政府和有关部门的重视,从而为新型农村合作医疗进一步发展提供政策、制度、体制、人才、监督等方面的完善建议。

关键词：新型农村合作医疗阜蒙县医疗保险制度

人参茎叶皂甙抑制肝癌细胞系SMMC7721增殖的实验研究

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中国中西医结合杂志 2001年第S1期21卷 118-120页

作者：韩张朱大和李珣北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 华中科技大学同济医学院病理教研室武汉430030

目的:探讨人参茎叶皂甙(GSL)对人肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:人肝癌细胞系 SMMC 7721在体外培养条件下,经浓度为200 gg/ml 的 GSL 作用3天后,进行如下检测:应用流式细胞仪检测对照组和 GSL 组人肝癌细胞细胞周期频数分布及... 详细信息

目的:探讨人参茎叶皂甙(GSL)对人肝癌细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:人肝癌细胞系 SMMC 7721在体外培养条件下,经浓度为200 gg/ml 的 GSL 作用3天后,进行如下检测:应用流式细胞仪检测对照组和 GSL 组人肝癌细胞细胞周期频数分布及细胞周期蛋白 D_1(Cyclin D_1)表达水平;运用原位杂交技术检测其 N-ras 基因 mRNA 转录水平,通过图像分析仪测量其胞浆内阳性杂交颗粒的平均吸光度值进行半定量分析。结果:GSL 组 S 期细胞数明显小于对照组(P<0.01);Cyclin D_1蛋白表达及 N-ras 基因 mRNA转录亦明显较对照组降低(P<0.0)。结论:人参茎叶皂甙通过抑制 N-ras 基因 mRNA 转录,进而 Cyclin D_1蛋白表达下调,从而使较多的人肝癌细胞被阻止于 G_1/S 检查点(checkpoint)。

关键词：人参茎叶皂甙人肝癌细胞细胞周期细胞周期蛋白 D1 N-ras 基因

胆红素诱导神经细胞凋亡及对其线粒体膜电位的影响——胆红素对中枢神经细胞损伤机理的研究

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中华耳鼻咽喉科杂志 2002年第4期37卷 243-246,T001页

作者：韩张胡萍倪道凤中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院耳鼻咽喉科北京100730 中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所药理室

目的　观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法　将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用... 详细信息

目的　观察胆红素诱导人神经母细胞瘤SH SY5Y细胞凋亡及对其线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的影响 ,探讨高胆红素血症对中枢神经细胞损伤的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法　将胆红素 (0 0 2g/L)直接作用于体外培养的SH SY5Y细胞 ,在不同时间点通过倒置显微镜观察细胞形态的变化及存活情况 ;经Hoechst332 5 8染色后 ,在荧光显微镜下观察细胞核的形态变化 ;利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率 ;经罗丹明 12 3染色后 ,用流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果　在 0 0 2g/L胆红素作用下 ,SH SY5Y细胞 2h后即可见较多细胞皱缩、变圆 ,4h可见有少数细胞飘起 ,细胞轮廓不清 ,6h可见大部分细胞飘起 ,并已开始崩解 ;染色质在胆红素作用 6h出现典型的凋亡样改变 ;细胞凋亡率随作用时间的延长明显增加 ,3h为 19 4 % ,4h为 76 4 % ,6h达到 79 0 % ;在胆红素作用 1h后反映线粒体膜电位相对荧光强度即由 (16 6± 1 5 5 6 )U下降到 (7 11± 0 70 1)U ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,并随作用时间的延长而进一步降低。结论　胆红素作用早期即可导致SH SY5Y细胞线粒体膜电位下降 ,既而发生凋亡 ,提示通过诱导听觉中枢神经元凋亡可能在高胆红素血症所致的听力损伤和听神经病发病中起重要作?

关键词：胆红素脱噬作用线粒体膜电位 MMP 神经母细胞瘤听神经疾病细胞凋亡

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成为插画师你该知道的大小事

非神经材料(干热变性骨骼肌)修复面神经缺损:附一例报告

作者： (韩)张

来源：南通市图书馆图书评论

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中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 211-214页

作者：高志强张连山葛平江何林吕威韩张中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻喉科北京100730

目的探讨骨骼肌作为一种非神经材料在修复面神经缺损方面的临床应用价值。方法经动物实验证实,经微波变性处理后的骨骼肌作为桥接材料修复面神经缺损,具有较好的效果。在此基础上,对一例较大面神经瘤患者采取经乳突进路面神经鞘膜瘤切除... 详细信息

目的探讨骨骼肌作为一种非神经材料在修复面神经缺损方面的临床应用价值。方法经动物实验证实,经微波变性处理后的骨骼肌作为桥接材料修复面神经缺损,具有较好的效果。在此基础上,对一例较大面神经瘤患者采取经乳突进路面神经鞘膜瘤切除术,同时采用经微波干热变性骨骼肌移植修复面神经缺损。结果术后随访一年,面肌功能恢复满意。结论提示干热变性骨骼肌作为一种非神经材料,在修复面神经缺损方面,具有较好疗效,值得进一步研究和应用。

关键词：面神经缺损骨骼肌神经移植

反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡

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反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡

反义P38cDNA抑制胆红素诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡

作者：韩张胡萍倪道凤中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所

目的:观察 P38激酶特异性抑制剂 SB203580及反义 P38激酶 cDNA 对胆红素诱导人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞凋亡的影响,探讨 P38激酶信号转导通路在胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听... 详细信息

目的:观察 P38激酶特异性抑制剂 SB203580及反义 P38激酶 cDNA 对胆红素诱导人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞凋亡的影响,探讨 P38激酶信号转导通路在胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法:分别经 SB203580和二甲基亚砜预处理的 SH-SY5Y 细胞在胆红素作用3h 和5h 后, 在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。采用脂质体法将含人反义 P38cDNA 的真核表达载体 pcDNA3.0-antiP38导入 SH-SY5Y 细胞,建立稳定低表达 P38蛋白的细胞株,经 Western blotting 鉴定后命名为 SH-SY5Y-antiP38,而转染空载体 pcD-NA3.0的 SH-SY5Y 细胞株则命名为 SH-SY5Y-pcDNA3.0;SH-SY5Y-antiP38细胞和 SH-SY5Y-pcD-NA3.0细胞分别经胆红素作用3h 和5h,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果:在0.02g/L 胆红素作用下,流式细胞仪显示与对照相比 SB203580预处理的 SH-SY5Y 细胞在胆红素作用 3h 后,其凋亡细胞由19.4%下降到12.1%,5h 后由66.2%降到39.3%;与 SH-SY5Y-pcDNA3.0细胞相比,SH-SY5Y-antiP38细胞在胆红素作用3h 后,其凋亡细胞由11.1%降到8.02%,5h 后67%降到23.4%。结论:P38激酶参与了胆红素诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡的信号转导。P38通路的激活可能在高胆红素血症导致的神经细胞损伤中（包括听神经细胞）发挥重要作用。

关键词：胆红素凋亡信号转导 P38激酶神经母细胞瘤听神经病

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国民康医学 2003年第10期15卷 577-580,587页

作者：韩张胡萍倪道凤中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所北京100730

目的 :观察P3 8激酶特异性抑制剂SB2 0 3 580及反义P3 8激酶cDNA对胆红素诱导人神经母细胞瘤SH -SY 5Y细胞凋亡的影响 ,探讨P3 8激酶信号转导通路在胆红素诱导SH -SY5Y细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听... 详细信息

目的 :观察P3 8激酶特异性抑制剂SB2 0 3 580及反义P3 8激酶cDNA对胆红素诱导人神经母细胞瘤SH -SY 5Y细胞凋亡的影响 ,探讨P3 8激酶信号转导通路在胆红素诱导SH -SY5Y细胞凋亡中的作用及高胆红素血症损伤中枢神经细胞的分子机制及在听神经病发病中的作用。方法 :分别经SB2 0 3 580和二甲基亚砜预处理的SH -SY5Y细胞在胆红素作用 3h和 5h后 ,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况 ;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。采用脂质体法将含人反义P3 8cDNA的真核表达载体 pcDNA 3 0 -antiP3 8导入SH -SY5Y细胞 ,建立稳定低表达P3 8蛋白的细胞株 ,经Westernblotting鉴定后命名为SH -SY5Y -antiP3 8,而转染空载体pcD NA3 0的SH -SY5Y细胞株则命名为SH -SY5Y -pcDNA3 0 ;SH -SY5Y -antiP3 8细胞和SH -SY5Y -pcD NA3 0细胞分别经胆红素作用 3h和 5h ,在倒置光显微镜下观察细胞形态的变化及存活情况 ;流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果 :在 0 0 2 g/L胆红素作用下 ,流式细胞仪显示与对照相比SB2 0 3 580预处理的SH -SY5Y细胞在胆红素作用 3h后 ,其凋亡细胞由 19 4%下降到 12 1% ,5h后由 66 2 %降到 3 9 3 % ;与SH -SY5Y -pcDNA3 0细胞相比 ,SH -SY5Y -antiP3 8细胞在胆红素作用 3h后。

关键词：反义P38cDNA 胆红素诱导神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞凋亡