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江苏泰州地区HIV感染人群的血浆病毒群落研究

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病毒学报 2022年第1期38卷 72-83页

作者：窦安华韩崇旭周成林李旺张文扬州大学医学院扬州225001 江苏省苏北人民医院医学检验科扬州225001 江苏省泰州市人民医院检验科泰州225300 江苏大学医学院镇江212000

为探讨人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染人群血浆病毒群落组成,分析HIV感染人群血浆病毒群落的特点,研究病毒载量对HIV感染人群血浆病毒群落的影响,本研究通过Miseq高通量测序,对江苏泰州地区203份HIV感染人群... 详细信息

为探讨人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染人群血浆病毒群落组成,分析HIV感染人群血浆病毒群落的特点,研究病毒载量对HIV感染人群血浆病毒群落的影响,本研究通过Miseq高通量测序,对江苏泰州地区203份HIV感染人群的血浆样本进行了病毒宏基因组学分析。结果显示,高通量测序共得到243824条注释为病毒的序列,可注释到至少17个不同的病毒科(包括未分类病毒),包括12种哺乳动物类病毒(占99.87%),2种昆虫病毒(占0.05%),1种植物病毒(占不到0.01%),2种其他病毒(占0.02%)及未分类病毒;检出HIV病毒载量组的病毒群落中占据主导地位的是细小病毒科,其次是黄病毒科和指环病毒科,未检出病毒载量组中的主要病毒为黄病毒科,其次为指环病毒科和细小病毒科;系统进化分析显示,注释为细小病毒的序列与已知病毒的同源性较高,而注释为指环病毒和人佩吉病毒的序列中有部分序列与已知病毒同源性较高,另有部分序列与已知病毒的差异较大,疑似有新型病毒的存在;应用PCR扩增对部分病毒序列进行验证,将验证后的部分序列与原始序列进行比对,一致性达到近99%。

关键词：人类免疫缺陷病毒(HIV) 病毒宏基因组学(VM) 指环病毒(Anellovirus) 细小病毒(Parvovirus) 佩吉病毒(Pegivirus) 病毒群落高通量测序(NGS)

TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中的作用机制

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实用医学杂志 2023年第17期39卷 2176-2182页

作者：孙晓彤韩崇旭王婵任传利张明明扬州大学医学院江苏扬州225009 扬州大学临床医学院江苏省苏北人民医院医学检验科江苏扬州225009 东南大学生命科学与技术学院发育基因与人类疾病重点实验室南京210096

目的探讨TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中的作用机制。方法为研究TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中如何调节自噬的表达,选用人肝胆管癌细胞RBE来进行研究。并用疏水性胆汁酸甘氨鹅脱氧胆酸(GCDC)处理人肝胆管癌细胞RBE分为3组:control组、... 详细信息

目的探讨TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中的作用机制。方法为研究TMEM39A在原发性胆汁性胆管炎中如何调节自噬的表达,选用人肝胆管癌细胞RBE来进行研究。并用疏水性胆汁酸甘氨鹅脱氧胆酸(GCDC)处理人肝胆管癌细胞RBE分为3组:control组、500μmol/L组和1000μmol/L组。细胞计数试剂盒(CCK-8)、细胞克隆、细胞划痕和Hoechst染色实验检测细胞活力、增殖、伤口愈合率和凋亡。qPCR检测细胞中TMEM39A mRNA表达量;Western blot检测TMEM39A和LC3的蛋白表达量。结果与control组相比较,1000μmol/L组的细胞活力、增殖和伤口愈合率降低,细胞凋亡现象最明显。在构建的原发性胆汁性胆管炎的模型中,过表达TMEM39A会促进LC3的表达。结论TMEM39A的表达增高引起胆管细胞自噬增强使胆管受损,可能是引起原发性胆汁性胆管炎的机制之一。

关键词： TMEM39A 原发性胆汁性胆管炎人肝胆管癌细胞微管相关蛋白3β 甘氨鹅脱氧胆酸

血清外泌体来源的miRNAs在多发性骨髓瘤中的临床研究

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中国实验血液学杂志 2022年第5期30卷 1490-1495页

作者：周林刘晓莉李玉武吴亮王广洲王正芳马莉管俊韩崇旭扬州大学附属苏北人民医院医学检验科江苏扬州225001 大连医科大学研究生院辽宁大连116044 江苏大学医学院江苏镇江212013 扬州大学附属苏北人民医院血液病实验室江苏扬州225001 扬州大学附属苏北人民医院血液科江苏扬州225001

目的:研究血清外泌体来源的miR-21、miR-18a、miR-146a、Let-7b在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达水平及其在预后评估中的价值。方法:采用ExoQuick试剂盒提取57例MM患者和20例健康体检者血清外泌体,用RTq PCR检测血清外泌体中miR-21、miR-... 详细信息

目的:研究血清外泌体来源的miR-21、miR-18a、miR-146a、Let-7b在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达水平及其在预后评估中的价值。方法:采用ExoQuick试剂盒提取57例MM患者和20例健康体检者血清外泌体,用RTq PCR检测血清外泌体中miR-21、miR-18a、miR-146a、Let-7b的相对表达水平,采用Spearman相关性分析研究miR-21、miR-18a、miR-146a、Let-7b表达水平与常规实验室指标之间的相关性,Kaplan-Meier生存曲线分析miR-21、miR-18a、miR-146a、Let-7b的表达水平与MM患者总体生存的关系。结果:MM患者血清外泌体来源的miR-21、miR-18a、Let-7b的表达水平均显著低于正常对照组(P0.05)。miR-21的表达水平与血清β_(2)-微球蛋白浓度呈较强的负相关(r=-0.830),而与血肌酐、校正血清钙、胱抑素C等呈较弱的负相关(r=-0.488,-0.282,-0.627);Let-7b、miR-18a的表达水平与校正血清钙、β_(2)-微球蛋白、胱抑素C浓度均呈较弱的负相关(r=-0.305,-0.362,-0.461;-0.317,-0.542,-0.434);miR-146a的表达水平与常规实验室指标均无显著相关性。miR-21、miR-18a、Let-7b低表达组的MM患者的总体生存率显著低于高表达组患者(P<0.05),而miR-146a的表达水平与MM患者的总体生存无显著相关性。结论:血清外泌体来源的miR-21、miR-18a、Let-7b在MM患者中存在异常低表达,且与MM患者的总体生存率下降存在关联。

关键词：多发性骨髓瘤血清外泌体 miRNA 预后

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临床肝胆病杂志 2022年第6期38卷 1307-1310页

作者：李畅闫雷王丽韩崇旭叶耘峰靳德甫姜玉章南京医科大学附属淮安第一医院医学检验科江苏淮安223300 徐州市第一人民医院医学检验科江苏徐州221000 苏北人民医院医学检验科江苏扬州225000 江苏职业护理学院江苏淮安223300

目的探讨血清IgG4水平在鉴别诊断IgG4相关胰-肝胆疾病(IgG4-PHD)与非IgG4相关性疾病(IgG4-RD)的自身免疫性疾病中的应用价值。方法选择2014年8月—2021年4月于南京医科大学附属淮安第一医院、苏北人民医院及徐州医科大学附属第一医院住... 详细信息

目的探讨血清IgG4水平在鉴别诊断IgG4相关胰-肝胆疾病(IgG4-PHD)与非IgG4相关性疾病(IgG4-RD)的自身免疫性疾病中的应用价值。方法选择2014年8月—2021年4月于南京医科大学附属淮安第一医院、苏北人民医院及徐州医科大学附属第一医院住院治疗的541例就诊患者和健康体检人群的临床资料,分为4组:IgG4-PHD组(n=20);非IgG4-RD自身免疫性疾病组(n=431),包括系统性红斑狼疮104例,类风湿性关节炎79例,干燥综合征174例,强直性脊柱炎16例,硬皮病11例,成人Still病4例,肌炎30例,银屑病3例,原发性硬化性胆管炎10例;胰腺肝脏胆囊恶性肿瘤组(n=40);健康对照组(n=50)。使用免疫散射比浊法测定各组样本血清IgG4水平。计量资料组间比较使用两样本Mann-Whitney U检验,计数资料组间比较采用Fisher精确检验。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),确定IgG4诊断IgG4-PHD的最佳临界值。结果IgG4-PHD组血清IgG4水平均明显高于非IgG4-RD自身免疫性疾病各组、胰腺肝脏胆囊恶性肿瘤组和健康对照组(P值均<0.05),单独干燥综合征组血清IgG4水平显著低于健康对照组(Z=2.958,P<0.05)。分别以血清IgG4≥1.35 g/L和IgG4≥2.01 g/L作为临界值,IgG4-PHD组的阳性率明显高于非IgG4-RD自身免疫性疾病组和健康对照组,差异均具有统计学意义(P值均<0.05)。ROC曲线显示,以IgG4≥2.21 g/L作为鉴别诊断IgG4-PHD与非IgG4-RD自身免疫性疾病的临界值时,敏感度为100.00%,特异度为94.00%,AUC为0.980。结论非IgG4-RD自身免疫性疾病也可出现血清IgG4水平升高,而以2.21 g/L作为诊断临界值,能提升对IgG4-PHD与非IgG4-RD自身免疫性疾病的鉴别诊断效能,但仍需在临床中进一步验证。

关键词：免疫球蛋白G 自身免疫疾病诊断

血清IgG4水平对常见自身免疫性疾病的鉴别诊断价值

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中国免疫学杂志 2022年第5期38卷 604-608,613页

作者：闫雷靳德甫李畅王丽韩崇旭叶耘峰姜玉章(指导) 南京医科大学附属淮安第一医院检验科淮安223000 徐州市第一人民医院检验科徐州221000 苏北人民医院检验科扬州225000 江苏护理职业学院淮安223000

目的:探讨血清IgG4水平在鉴别诊断IgG4相关性疾病(IgG4-RD)与其他自身免疫性疾病中的应用价值。方法:选择2014年9月至2021年3月于南京医科大学附属淮安第一医院、苏北人民医院及徐州市第一人民医院住院治疗并确诊的IgG4-RD患者26例,自... 详细信息

目的:探讨血清IgG4水平在鉴别诊断IgG4相关性疾病(IgG4-RD)与其他自身免疫性疾病中的应用价值。方法:选择2014年9月至2021年3月于南京医科大学附属淮安第一医院、苏北人民医院及徐州市第一人民医院住院治疗并确诊的IgG4-RD患者26例,自身免疫性疾病患者549例,包括系统性红斑狼疮83例,类风湿关节炎80例,干燥综合征188例,强直性脊柱炎21例,进行性系统性硬化症10例,结缔组织病126例,成人Still病5例,白塞氏病3例,皮肌炎28例,风湿性多肌痛症5例。另选取50例健康体检者作为对照组。使用BNII特定蛋白分析仪检测各组样本血清IgG4水平。通过ROC曲线评价血清IgG4鉴别诊断IgG4-RD与其他自身免疫性疾病的敏感度和特异度。结果:IgG4-RD组血清IgG4水平明显高于其他各自身免疫性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。分别以血清IgG4≥1.35 g/L和IgG4≥2.01 g/L作为诊断IgG4-RD的临界值,IgG4-RD组的阳性率明显高于自身免疫性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。以血清IgG4≥1.35 g/L为正常参考值上限,IgG4-RD组样本血清IgG4水平及IgG4在总IgG中所占比例均高于非IgG4-RD阳性样本,差异有统计学意义(P<0.001)。血清IgG4水平用于鉴别诊断IgG4-RD的ROC曲线显示,以IgG4≥2.07 g/L作为诊断临界值时,敏感度为96.15%,特异度为92.57%,曲线下面积(AUC)为0.979。结论:非IgG4-RD自身免疫性疾病也可出现血清IgG4水平升高现象,以血清IgG4≥2.07 g/L作为诊断临界值能提升对IgG4-RD与非IgG4-RD自身免疫性疾病的鉴别诊断效能,但仍需在临床中进一步验证。

关键词： IgG4 IgG4相关性疾病自身免疫性疾病诊断

基于生物信息学筛选肝细胞癌年轻患者特有关键枢纽基因及其临床意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第2期27卷 161-169页

作者：连旭孙唯秀韩崇旭大连医科大学研究生院辽宁大连116044 江苏省苏北人民医院医学检验科江苏扬州225001 扬州大学医学院研究生院江苏扬州225001

目的:运用生物信息学方法筛选年轻肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者特有的关键枢纽基因(Hub gene),并探索其生物学和临床意义。方法:从GEO芯片数据集GSE45267获取年轻(确诊HCC时年龄≤40岁)和年老(确诊HCC时年龄>40岁)组的HC... 详细信息

目的:运用生物信息学方法筛选年轻肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者特有的关键枢纽基因(Hub gene),并探索其生物学和临床意义。方法:从GEO芯片数据集GSE45267获取年轻(确诊HCC时年龄≤40岁)和年老(确诊HCC时年龄>40岁)组的HCC组织及正常肝组织数据信息,通过GEO2R和Venn图工具筛选两组的HCC组织相对正常肝组织差异表达基因(differentially expressed gene,DEG),运用STRING和Cytoscape软件构建年轻组特有差异表达基因的蛋白互作网络并筛选关键Hub基因及显著模块。利用GEPIA数据库对关键基因进行验证,并通过Kaplan–Meier分析相关HCC患者总生存期。最后应用DAVID对年轻组特有基因及年轻与年老组共有DEGs进行GO富集分析和KEGG通路分析比较。结果:筛选出年轻组特有117个上调、179个下调DEGs,构建PPI网络选取出10个连接度最高的基因为Hub基因,其中7个Hub基因集中于第一模块。GEPIA验证与Kaplan–Meier生存分析提示TYMS、CDC6、BUB1、TPX2、OIP5、KIF23等6个表达上调的Hub基因可能与年轻HCC癌患者的不良预后相关。功能富集分析显示年轻HCC特有DEGs主要参与ATP结合等生物学过程,并主要富集到了细胞周期S期;年轻与年老组共有DEGs主要参与环氧酶P450、细胞分裂等生物学过程,并主要富集到细胞周期G2/M期。结论:本研究鉴定出6个在年轻HCC患者肿瘤组织中特有的显著上调且提示预后不良的Hub基因,可能成为年轻HCC患者潜在的治疗和预后预测靶点。

关键词：年轻肝细胞癌生物信息学分析枢纽基因 GSE45267

8-表氧-前列腺素F2α放免方法的建立及在糖尿病肾病大鼠和孕高征患者水平变化的研究

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8-表氧-前列腺素F2α放免方法的建立及在糖尿病肾病大鼠和孕高征...

作者：韩崇旭苏州大学

学位级别：硕士

90年代以来，人们发现体内有一类异构前列腺素F2α(epi-PGF2α)，是氧自由基催化的脂质过氧化产物，不依赖于环氧化酶，其中最主要的成分是8-表氧-PGF2α。在多种病理生理过程中氧自由基的产生增加，与糖尿病肾病(diabetic nephropathy... 详细信息

90年代以来，人们发现体内有一类异构前列腺素F2α(epi-PGF2α)，是氧自由基催化的脂质过氧化产物，不依赖于环氧化酶，其中最主要的成分是8-表氧-PGF2α。在多种病理生理过程中氧自由基的产生增加，与糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)的发生及发展有直接的关系，但由于没有敏感的自由基检测方法，对其作用机制的阐明受到限制。近年研究表明，糖尿病肾病时肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)活性升高，不仅引起全身血液动力学变化，同时可进一步增加糖尿病肾小球的高灌注、高滤压和高过滤，导致系膜区基质增加，最终引起肾小球的硬化。血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor，ACEI)通过降低血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)含量，可减轻糖尿病的肾损伤;然而具有活性的Ang Ⅱ尚可从旁路生成，且在临床上ACEI可引起部分病人顽固性咳嗽，从而限制了ACEI临床应用。新近面世的Ang Ⅱ受体拮抗剂(angiotensin Ⅱ type 1 receptor antangist，ATlRA)可竞争性抑制Ang Ⅱ与其受体结合，直接抑制Ang Ⅱ的作用。但它对糖尿病肾病的作用和影响尚不清楚。本实验在建立8-表氧-PGF2α放免测定方法的基础上，通过观察ATlRA一缬沙坦(Valsartan)对糖尿病大鼠血液中8-表氧-PGF2α和Ang Ⅱ的水平变化，探讨糖尿病肾病发生、发展的机制。方法：将8-表氧-PGF2α与人血清白蛋白共价联成完全抗原后，免疫家兔制备抗血清，将8-表氧-PGF2α与NaI连接成I-8-表氧-PGF2α标记物。采用放射免疫法测定糖尿病大鼠血浆中的8-表氧-PGF2α的含量。取健康雄性SD大鼠40只，体重250克左右，随机选取32只腹腔注射链脲佐菌素(STZ，用0.1M枸橼酸缓冲液配制成2％的注射液)60mg╱kg，制造糖尿病模型;选糖尿病成功模型随机分为(a)糖尿病组(n=11);(b)糖尿病治疗组(n=12)，Valsartan(24mg／kg.d)灌胃;剩余8只腹腔注射等量枸橼酸缓冲液，设为(c) 8－表氧－前列腺素 FZ O的基础研究摘要正常对照组＊书);a、c两组给予生理盐水3ml讨灌胃。实验中保证饮食供应，不应用降糖药物。实验第 4、8周测血压和 24小时尿蛋白定量，8周后即给予麻醉、称重，处死取血测血糖侣G人肌酚侣Cr人尿素氮(BUN人 Aug 11、超氧化物歧化酶侣OD人谷眺甘肽过氧化物酶(GSH—PX人过氧化脂质(LPO人丙H醛(MDA)和8一表氧I a的含量。结果：(沾一表氧P a抗体效价在 5次加强免疫后达 1：24， 000;放免狈定的线性范围为 6．25＊00pg／thL，灵敏度为 4．50 pg／InL，批内、批间平均变异系数分别为3．9％和8石％。抗血清与其它前列腺素及有关代谢产物的交叉反应甚低。u)a、b两组血糖水平在实验前后均较 C组明显升高，前两组比较无明显差异0＞0刀5人 u)24 ’J’时尿蛋白定量：在4、8周a、b两组均较c组明显升高;第4周时 a组为 29．5t4．7mg／日，b组为 ZI ＊t4．2 mg／日，b组明显低于 a组 o＜0刀1);第八周时a组进一步升高达35．118．7mg／日，明显高于第4 周水平①＜0刀5人而 b组为 26．9片．Illlg／日，与第 4周相比无明显升高(P＞0刀5)。(4)Cr、BUN：b组分另为＊．48土 18．55＊mol／L和 ic．38土1．79 mmol几，a组分别为161．2肚19．44 p mOI几和14．17土 2．25mmol几，两组比较有明显差异o＜0刀 1人u)平均动脉收缩压：在 4、8周 a组分别为 137．It 34．smmHg和 134．5 t 23．2 mlnHg，b组分别为M．4 t ZI．smmHg和 115．3 t 25．3mmHg，两组同期相比均有明显差异(P＜0．00)。(6)第 8周血浆 Angll 含量：a组 276．2 t

关键词： 8-表氧-PGF2α 糖尿病肾病血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ受体自由基

细胞周期蛋白Ⅰ基因在骨髓间质干细胞诱导致瘤过程中的表达

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中华检验医学杂志 2009年第2期32卷 209-214页

作者：韩崇旭许文荣江苏省苏北人民医院临床医学检测中心扬州225001 江苏大学医学技术学院

目的研究人骨髓间质干细胞（MSCs）诱导肿瘤的机制。方法取18只SCID裸鼠随机分为对照组和实验组，对照组注射MSCs，实验组注射F6细胞，于第4（176-4）、6（F6-6）、7（F6-7）周取肿瘤组织（每组3只）。4例肺癌患者的肺癌标本（LC）和癌... 详细信息

目的研究人骨髓间质干细胞（MSCs）诱导肿瘤的机制。方法取18只SCID裸鼠随机分为对照组和实验组，对照组注射MSCs，实验组注射F6细胞，于第4（176-4）、6（F6-6）、7（F6-7）周取肿瘤组织（每组3只）。4例肺癌患者的肺癌标本（LC）和癌旁标本为分别取自不同部位的手术病理标本。并用荧光差异显示技术（FDD）寻找差异基因；用PCR扩增、蛋白质印迹（WB）加以验证；实时荧光定量逆转录（FQ—RT）-PCR技术检测诱导致瘤细胞在裸鼠体内致瘤后致瘤组织基因表达水平。用粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）和白细胞介素4（IL-4）诱导MSCs致肿瘤细胞（F6细胞）。结果FDD结果显示，细胞周期蛋白（cyclin）Ⅰ基因高表达，与PCR、WB结果一致。FQ-RT—PCR表明，cyclinⅠ基因在MSCs、F6及3组F6致瘤组织细胞之间的表达水平差异有统计学意义（F=12．29，P〈0．01），F6组cyclinⅠ基因表达水平为4．49±0．40，MSCs基因表达水平为0．04±0．02，增高112倍（P〈0．01）。裸鼠皮下注射致瘤细胞后，第4，6，7周分离肿瘤组织内cyclinⅠ基因表达分别为1．82±0．80、3．30±0．43和3．68±1．67，且呈上升趋势（与MSCs对比，P分别为〈0．05或〈0．01）。4例肺癌患者肺癌组织基因表达分别为0．15±O．02、0．58±0．23、4．82±1．12、1．21±0．60，癌旁组织基因表达分别为0．04±0．02、0．09±0．04、0．94±0．74、0．15±0．08，肺癌组织内cyclinⅠ基因表达明显高于癌旁组织（F=12．39，P〈0．01）。WB证明F6细胞cyclinⅠ蛋白表达为0．32±0．08，MSCs蛋白表达为0．09±0．06，增高3．6倍（t=3．86，P〈0．05）。结论cyclinⅠ基因在MSCs诱导突变到肿瘤细胞形成过程中高表达，且在MSCs诱导肿瘤发生过程中可能发挥重要作用。

关键词：肿瘤间质干细胞细胞周期蛋白类

干细胞及肿瘤细胞中nucleostemin基因的研究进展

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临床检验杂志 2013年第7期31卷 514-517页

作者：韩崇旭许文荣孙艳苏北人民医院临床医学检测中心江苏扬州225001 江苏大学教务处江苏镇江212013 苏北人民医院生殖中心江苏扬州225001

Nucleostemin(NS)基因在干细胞中高表达,在干细胞分化时迅速减少,参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控,维持干细胞扩增并抑制其向成熟细胞分化,从而阻止细胞凋亡。NS基因在肿瘤细胞干细胞特性维持中也起重要作用。NS蛋白以依赖于GTP的形式... 详细信息

Nucleostemin(NS)基因在干细胞中高表达,在干细胞分化时迅速减少,参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控,维持干细胞扩增并抑制其向成熟细胞分化,从而阻止细胞凋亡。NS基因在肿瘤细胞干细胞特性维持中也起重要作用。NS蛋白以依赖于GTP的形式穿梭于核仁和核质之间,参与核糖体特别是前核糖体rRNA的装配过程。NS基因与肿瘤发生关系密切,或可作为靶向治疗的候选基因。

关键词： nucleostemin基因干细胞肿瘤