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稀土元素生物效应的蛋白质组学研究

稀土元素生物效应的蛋白质组学研究

作者：韩威威中国科学院研究生院（植物研究所）

学位级别：硕士

蛋白质组学是研究细胞内全部蛋白的动态表达及其相互关系的新兴学科,是功能基因组学研究的重要组成部分和战略制高点,广泛应用于生命科学的各个领域,研究对象涵盖微生物、动物和植物等。稀土元素(rare earth elements),亦称镧系元素(la... 详细信息

蛋白质组学是研究细胞内全部蛋白的动态表达及其相互关系的新兴学科,是功能基因组学研究的重要组成部分和战略制高点,广泛应用于生命科学的各个领域,研究对象涵盖微生物、动物和植物等。稀土元素(rare earth elements),亦称镧系元素(lanthanides),是性质相似的15种金属元素。随着稀土元素在工业、农牧业和医疗等领域的应用日益深入,它们对生物体的作用机制亟待研究。生物固氮作用为生命世界提供75%的绿色氮源,根瘤菌是重要的固氮微生物,具有基因组结构简单、培养周期短等特点。酿酒酵母是与人类关系最密切的一种酵母,不仅因为传统上其用于制作食品及酿酒,而且是现代分子生物学和细胞生物学中的真核模式生物。为了全面地了解稀土元素对细胞的作用,我们运用高分辨率的蛋白质双向电泳分离技术和高通量的蛋白质质谱分析手段以及生物信息学等方法,分析了稀土元素钆(Gadolinium,Gd)在原核生物费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)USDA205和真核生物酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YM4271的生物效应。结果表明,经1mM Gd(NO3)3处理12小时后,费氏中华根瘤菌USDA205中22个蛋白质表达有差异。这些蛋白质可根据功能分为8类,包括转运蛋白、胁迫相关蛋白、代谢相关蛋白等。其中13个蛋白质表达量增加,9个蛋白质表达量下降。膜蛋白在差异蛋白中占有很大比重。另外,我们分析了不同浓度的钆处理后蛋白质表达的变化情况,发现蛋白质组的变化是与处理浓度密切相关的。研究中还发现同种浓度的钆与另一种稀土元素铒(Erbium,Er)相比,离子半径较小的铒离子对根瘤菌的抑制作用更加明显。比较不同浓度的钆对酿酒酵母YM4271的影响,发现酵母对稀土元素的反应不及根瘤菌敏感,对数生长初期的酵母经钆处理12小时或24小时后均无显著变化。本研究首次用蛋白质组学的方法研究稀土元素对微生物的作用,鉴定了一些有价值的蛋白质,并得到了它们的表达特点和相关数据,为更好地理解稀土元素的生物效应提供了有力的分子生物学证据。

关键词：蛋白质组稀土元素钆费氏中华根瘤菌USDA205 酿酒酵母YM4271

散发性脊髓小脑型共济失调与多系统萎缩患者FMR1基因前突变分析

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散发性脊髓小脑型共济失调与多系统萎缩患者FMR1基因前突变分析

作者：韩威威中南大学

学位级别：硕士

背景脆性X相关震颤／共济失调综合征(fragile X-associated tremor/ataxia syndrome, FXTAS)是一种以意向性震颤和／或小脑性共济失调为主要特征的神经退行性疾病。FXTAS的临床表现为：进展性的小脑性共济失调、意向性震颤、认知功能下... 详细信息

背景脆性X相关震颤／共济失调综合征(fragile X-associated tremor/ataxia syndrome, FXTAS)是一种以意向性震颤和／或小脑性共济失调为主要特征的神经退行性疾病。FXTAS的临床表现为：进展性的小脑性共济失调、意向性震颤、认知功能下降、帕金森病样表现、自主神经功能障碍、周围神经病变、精神异常等;头部MRI表现为全脑萎缩、脑室扩大、小脑及皮质下白质病变和小脑中脚T2项高信号(middle cerebellar peduncles, MCP);病理特征为：广泛分布于脑神经元及胶质细胞内的泛素化阳性的核内包涵体(intranuclear inclusions)。FXTAS的致病基因FMR1定位于Xq27.3,在其5’端非编码区有一个(CGG)n三核苷酸串联重复序列,FMR1 (CGG) n重复次数在人群中存在多态性。FMR1CGG重复次数为55-200时,称为FMR1基因的前突变(premutation, PM)。FMR1PM可导致FMR1mRNA活性及水平增加,核内包涵体形成,部分FMR1PM携带者表现为FXTAS。目前,关于FXTAS尚没有具体的流行病学资料,国外报道FMR1PM在正常男性中的携带率为0.12%(1／813),在正常女性中携带率为0.38%(1／259)。PM携带率存在种族差异：在地中海人群中携带率较高,而在亚洲人群携带率低。欧、美洲等多项研究发现：大于50岁的散发性不明原因的小脑性共济失调男性患者中FMR1PM的携带率为1.5%(16／1049),约是一般人群PM携带率的13倍;MSA小脑亚型(MSA-C)中FMR1PM携带率为0.8%(5／663),也显著高于一般人群。目前在亚洲小脑性共济失调患者中缺少大规模FMR1PM的相关研究,新加坡Tan等人的研究未发现FMR1PM。目前,尚未有中国大陆不明原因的散发性脊髓小脑型共济失调与多系统萎缩患者FMR1PM携带率的报道。目的在中国大陆不明原因的散发性脊髓小脑型共济失调与多系统萎缩患者中开展FMR1基因前突变分析方法运用聚合酶链式反应(PCR),8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳方法(capillary electrophoresis, CE)对散发性不明原因的发病年龄大于45岁的68例SCA、32例MSA患者及100例正常人进行FMR1基因核苷酸重复次数的检测,并对经毛细管电泳检测为纯合子的8例女性患者及15例正常女性进行Southern blot检测。结果运用PCR、8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、CE及Southern blot方法在本组研究中未发现FMR1PM (CGG>55次),SCA与MSA患者中CGG重复范围15-44次,其中最常见的CGG重复为28次,正常人中CGG重复范围21-40次,其中最常见的CGG重复为27次。结论1首次在国内运用PCR-毛细管电泳-southern blot技术进行FMR1CGG基因重复次数的检测。2中国大陆不明原因的散发性脊髓小脑型共济失调FMR1基因前突变携带率低。3中国大陆多系统萎缩患者中FMR1基因前突变携带率低。

关键词：脆性X相关震颤/共济失调综合征 FMR1前突变毛细管电泳 southern blot

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生物固氮研究中的蛋白质组学

农业生物技术学报 2004年第4期12卷 464-469页

作者：韩威威沈世华荆玉祥中国科学院植物研究所光合和环境分子生理学重点实验室中国科学院植物研究所光合和环境分子生理学重点实验室北京100093

生物固氮为全球的植物提供75%的氮素,是生命科学中的重大课题。蛋白质组学新思想、新技术的引入,为固氮研究的发展注入了新的活力。本综述主要介绍蛋白质组学在自生固氮菌、根瘤菌及其与豆科植物结瘤固氮中的蛋白质组学的研究概况,以助... 详细信息

生物固氮为全球的植物提供75%的氮素,是生命科学中的重大课题。蛋白质组学新思想、新技术的引入,为固氮研究的发展注入了新的活力。本综述主要介绍蛋白质组学在自生固氮菌、根瘤菌及其与豆科植物结瘤固氮中的蛋白质组学的研究概况,以助于在我国生物固氮研究中应用这一有力工具,推动和发展其基础和应用的创新性研究。

关键词：自生固氮菌根瘤菌生物固氮蛋白质组学

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脆性X相关震颤和（或）共济失调综合征

中华医学遗传学杂志 2011年第1期28卷 52-55页

作者：韩威威张琳江泓唐北沙中南大学湘雅医院神经内科长沙410008 Davis Medical Center Neurology California Sacramento University of California USA

脆性X相关震颤和（或）共济失调综合征（fragile X-associated tremor／ataxia syndrome，FXTAS）是由FMR1基因的前突变（premutation，PM）所导致的一种神经退行性疾病，其临床表现主要为意向性震颤和（或）共济失调，其发病机制与RNA... 详细信息

脆性X相关震颤和（或）共济失调综合征（fragile X-associated tremor／ataxia syndrome，FXTAS）是由FMR1基因的前突变（premutation，PM）所导致的一种神经退行性疾病，其临床表现主要为意向性震颤和（或）共济失调，其发病机制与RNA毒性获得机制有关。本文就FXTAS的临床表现、病理特征、流行病学及分子机制等的研究进展做一综述。

关键词：脆性X相关震颤和(或)共济失调综合征前突变意向性震颤共济失调

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钆对费氏中华根瘤菌抑制效应的蛋白质组分析

中国稀土学报 2006年第5期24卷 623-627页

作者：韩威威沈世华台培东中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室中国科学院沈阳应用生态研究所辽宁沈阳110016

运用双向凝胶电泳和MALDI-TOF质谱技术,分析了Gd3+对费氏中华根瘤菌USDA 205的抑制效应。结果表明,经1 mmol.L-1Gd3+处理12 h后,22个蛋白质表达量有显著变化,其中13个蛋白质表达量增加,9个蛋白质表达量下降。这些蛋白质可根据功能分为8... 详细信息

运用双向凝胶电泳和MALDI-TOF质谱技术,分析了Gd3+对费氏中华根瘤菌USDA 205的抑制效应。结果表明,经1 mmol.L-1Gd3+处理12 h后,22个蛋白质表达量有显著变化,其中13个蛋白质表达量增加,9个蛋白质表达量下降。这些蛋白质可根据功能分为8类,包括转运蛋白、胁迫相关蛋白、代谢相关蛋白等。

关键词：费氏中华根瘤菌钆蛋白质组稀土元素

Proteome Analysis of Inhibitory Effect of Gadolinium on Sinorhizobium fredii

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Journal of Rare Earths 2007年第1期25卷 106-110页

作者：韩威威沈世华台培东 Key Laboratory of Photosynthesis and Environmental Molecular Physiology Institute of Botany Chinese Academy of SciencesBeijing 100093 ChinaGraduate School of Chinese Academy of Sciences Beijing 100039 China Key Laboratory of Photosynthesis and Environmental Molecular Physiology Institute of Botany Chinese Academy of SciencesBeijing 100093 China Institute of Applied Ecology Chinese Academy of SciencesShenyang 110016 China

The inhibitory effect of gadolinium on Sinorhizobium fredii USDA 205 was studied on a global scale using twodimensional gel electrophoresis and MALDI-TOF MS. The results indicated that 22 proteins were significantly affected by 1 mmol · L^-1 Gd^3 ＋ treatment when compared with an untreated control. Among these proteins, nine were up-regulated and thirteen were down-regulated. The differently expressed proteins were classified into 8 functional categories based on their functions, including transporters, proteins for cellular defence, and proteins involved in metabolism.

关键词： Sinorhizobium fredii proteome gadolinium rare earth elements

职务发明报酬制度适用研究——英国经验与中国路径

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职务发明报酬制度适用研究——英国经验与中国路径

作者：韩威威华东政法大学知识产权学院

职务发明制度对于创新活动的激励和创新型国家的建设,具有重要意义。英国职务发明报酬制度具有悠久的历史,体现了判例法和成文法的融合,在职务发明报酬的确定过程中进行多因素、多角度的考量,并设置了可期待利益分享机制。为了平衡创新... 详细信息

职务发明制度对于创新活动的激励和创新型国家的建设,具有重要意义。英国职务发明报酬制度具有悠久的历史,体现了判例法和成文法的融合,在职务发明报酬的确定过程中进行多因素、多角度的考量,并设置了可期待利益分享机制。为了平衡创新主体和科研人员的利益,在我国职务发明报酬制度中,应纳入职务发明报酬考量的因素,以合理的机制充分保障科研人员获得收益的权利、充分考虑创新主体对科研活动的投资和所承担的风险,激励创新活动的可持续发展,从而建设创新型国家和知识产权强国。

关键词：职务发明报酬英国合理性利益平衡

来源： cnki会议评论

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换上客户的脑袋——浅谈专利代理服务理念

换上客户的脑袋——浅谈专利代理服务理念

“USPTO关于专利主题适格性的暂行指南”之分析与展望

2013年中华全国专利代理人协会年会暨第四届知识产权论坛

作者：韩威威中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

知识产权事业的蓬勃发展,离不开知识产权人才队伍的壮大和水平的提高。随着《知识产权人才"十二五"规划》的实施,国家为知识产权人才的培养和发展提供了前所未有的良好环境。在良好的宏观环境下,作为知识产权服务业人才,专利代理人需要... 详细信息

知识产权事业的蓬勃发展,离不开知识产权人才队伍的壮大和水平的提高。随着《知识产权人才"十二五"规划》的实施,国家为知识产权人才的培养和发展提供了前所未有的良好环境。在良好的宏观环境下,作为知识产权服务业人才,专利代理人需要进一步提高服务理念,以应对机遇与挑战。本文围绕细节中体现对客户的关注、与客户之间的良好沟通、帮助客户了解专利制度变革的前沿和与客户共同成长等几个方面,浅谈"换上客户的脑袋"的服务理念。

关键词：专利代理服务理念沟通细节

来源： cnki会议 cnki会议评论

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电子知识产权 2015年第1期 71-74页

作者：韩威威中国国际贸易促进委员会专利商标事务所

2014年12月16日,美国专利商标局发布"2014关于专利主题适格性的暂行指南",结合近年来美国最高法院重要的司法判例,提出了新的主题适格性判断流程,并提供了相应的实例分析。本文通过将该指南与USPTO2014年3月发布的"用于确定记载或涉及... 详细信息

2014年12月16日,美国专利商标局发布"2014关于专利主题适格性的暂行指南",结合近年来美国最高法院重要的司法判例,提出了新的主题适格性判断流程,并提供了相应的实例分析。本文通过将该指南与USPTO2014年3月发布的"用于确定记载或涉及自然法则、自然现象和/或天然产品的权利要求的主题适格性的指南"进行比较,分析新指南带来的变化,并针对主题适格性问题提出专利保护策略设计的建议,对未来的实践提出展望。

关键词： USPTO 主题适格性美国最高法院 Interim Eligibility Guidance