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CSFV/BVDV双重荧光RT-PCR检测方法的建立与山东地区CSFV的分子生物学研究

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CSFV/BVDV双重荧光RT-PCR检测方法的建立与山东地区CSFV的分子生...

作者：韦雪华山东农业大学

学位级别：硕士

猪瘟（Classical swine fever,CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起的一种高度接触性致死性传染病,现阶段,猪瘟的防控通常采用猪瘟兔化弱毒疫苗（C株）进行接种预防,该疫苗是世界上公认的最有效和安全的弱毒疫苗... 详细信息

猪瘟（Classical swine fever,CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起的一种高度接触性致死性传染病,现阶段,猪瘟的防控通常采用猪瘟兔化弱毒疫苗（C株）进行接种预防,该疫苗是世界上公认的最有效和安全的弱毒疫苗,对猪瘟的防控起到了重要的作用。然而,在免疫良好的猪场仍有猪瘟的病例的发生,CSFV与牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）同属于黄病毒科、瘟病毒属,存在抗原相关性和交叉反应性,两者自然条件下感染猪,其临床症状和病理变化相似,加大了临床诊断的困难。为了解山东地区CSFV的流行状况和更好地进行CSFV的监测,本试验建立了双重荧光RT-PCR（RT-qPCR）检测方法,并对成功分离的CSFV的C、E0、E1基因和E2部分基因进行了克隆测序和遗传进化分析。为建立CSFV和BVDV的鉴别检测方法,根据Genbank公布的基因序列设计特异性引物和TaqMan探针,以构建的CSFV Npro和BVDV 5′-UTR的阳性重组质粒作为阳性质控品,优化反应条件,建立了双重RT-qPCR检测方法。以阳性质控品和常见病毒为模板进行了特异性、灵敏性和重复性试验,并应用于临床检测。结果,CSFV和BVDV的检测灵敏度均为100拷贝/μl,特异性强、稳定性好。应用所建立的RT-qPCR方法和本实验室常用单项CSFV RT-qPCR试剂盒和单项BVDV RT-qPCR试剂盒对本实验室2016年采集的206份猪病料进行检测,结果显示CSFV阳性59份、BVDV皆为阴性,与常用单项CSFV和BVDV RT-qPCR试剂盒检测结果一致。本研究建立的双重RT-qPCR整个检测过程不到3h,采取闭管反应,检测完毕直接处理,避免开盖造成气溶胶污染,具有简单、快捷、灵敏度高、生物安全性好等优点,可用于CSFV和BVDV的临床鉴别检测,且BVDV-1和BVDV-2皆能检出,为2种病毒的交叉污染的检测提供一种方便、快捷的方法。本研究采取体外培养技术,选取来自济南、德州、临沂、泰安、日照、淄博、济宁等地区的26份CSFV阳性病料接种PK15细胞进行病毒分离,成功分离了26株CSFV,分别命名为SDJN-1、SDJN-2、SDJN-3、SDJN-4、SDJN-5、SDDZ-1、SDDZ-2、SDDZ-3、SDQH-1、SDQH-2、SDQH-3、SDQH-4、SDQH-5、SDQH-6、SDQH-7、SDXJ-1、SDXJ-2、SDXJ-3、SDLY-1、SDLY-2、SDRZ-1、SDZB-1、SDTA-1、SDTA-2、SDSS-1、SDLS-1。采用猪瘟野毒荧光RT-PCR试剂盒对26株分离株进行了检测,结果表明其皆为野毒株。采用分子克隆技术对已分离的26株CSFV C、E0、E1基因和E2部分基因序列进行扩增、克隆、测序,并利用DNAStar软件对测序结果进行序列拼接并分析,同源性分析发现,26株分离株之间核苷酸和推导氨基酸同源性都很高,分别为为91.1%-99.2%、93.8%-99.6%,与其他毒株同源性最低的是SDJN-3;与Shimen、HCLV、pardarborn、HEBZ等8株经典猪瘟毒株比较,核苷酸同源性为83.8%-96.2%和氨基酸同源性为88.6%-97.6%;利用MEGA6软件对26株分离株与8株已知参考毒株序列进行比较,绘制系统发生树发现,所比较的34株分离株分为2个分支,Shimen株、HCLV疫苗株与Brescia株组成一支为1群;其他毒株为一支组成2群,其中26株分离株与Parderborn、HEBZ株亲缘关系较近组成一支为2.1群,CSFV39株为2.2群,Alfort/Tueginen株与SP01株组成一支为2.3群,结果表明本研究分离的26株CSFV属于2.1亚群,是山东地区的优势毒株。

关键词： CSFV BVDV 双重RT-q PCR 分离鉴定分子生物学研究

共青团服务青年创业的对策研究 ——以三明为例

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共青团服务青年创业的对策研究 ——以...

作者：韦雪华福建农林大学

学位级别：硕士

当前就业问题面临十分严峻的形势,青年就业难、失业率居高不下的问题引发社会高度关注,在这一形势下,以创业带动就业对缓解青年就业问题具有重要现实意义。本文通过三明共青团服务青年创业的个案分析,从青年创业意愿和诉求入手,提出共... 详细信息

当前就业问题面临十分严峻的形势,青年就业难、失业率居高不下的问题引发社会高度关注,在这一形势下,以创业带动就业对缓解青年就业问题具有重要现实意义。本文通过三明共青团服务青年创业的个案分析,从青年创业意愿和诉求入手,提出共青团改进具体服务措施以促进青年就业创业的建议,为有关部门研究、指导青年创业工作提供有一定参考价值的对策。为了研究共青团如何更好地帮助青年创业这一课题,本文采用文献研究法对当前国内外青年创业的研究成果进行梳理,从共青团性质和职能定位、自身优势以及服务青年创业社会意义等方面说明了共青团为什么能服务青年创业、能做什么,进而以三明共青团服务青年创业的个案为例对共青团服务青年创业怎么做进行介绍,并从青年群体这一被服务对象的视角出发,通过问卷调查和访谈的方法,在该地区青年群体对创业看法、创业环境、创业诉求等方面进行调研的基础上,考察三明共青团服务青年创业做得如何,即在满足青年创业诉求方面的效果,在此基础上分析服务过程中做得不好（服务认可度、满意度不高）的成因,找出青年创业真实诉求点,从制度保障、资金筹措、项目培育、创业培训等方面提出共青团服务青年创业具体改进措施。做到服务过程中实用化、优质化的举措与青年创业诉求相契合,通过优化创业生态环境进而促进青年创业的发展。

关键词：共青团青年创业三明

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归化异化在网络语言翻译中的应用

辽宁科技学院学报 2018年第4期20卷 72-74,76页

作者：韦雪华三明医学科技职业学院福建三明365000

网络语言翻译是翻译领域中的前沿项目,现拟站在翻译美学的角度,通过用对归化、异化的认知,以及对网络语言特点的分析,进而说明归化异化在网络语言翻译中的应用策略,借以说明在不同语言间的可译性限度之内,选择更加灵活化的翻译手段,对... 详细信息

网络语言翻译是翻译领域中的前沿项目,现拟站在翻译美学的角度,通过用对归化、异化的认知,以及对网络语言特点的分析,进而说明归化异化在网络语言翻译中的应用策略,借以说明在不同语言间的可译性限度之内,选择更加灵活化的翻译手段,对网络词汇进行有效翻译,既保持网络语言的时代性色彩,又体现出跨文化的异域之美,使中西双方在网路信息时代的交流合作更顺畅。

关键词：归化异化网络语言翻译应用

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翻译技巧视角下解读钱钟书的《林纾的翻译》

辽宁科技学院学报 2017年第4期19卷 83-85页

作者：韦雪华三明职业技术学院学生处福建三明365000

在中国的传统观念里,翻译研究始终推崇钱钟书所说的"化境"观念,也就是对不同文化环境的适应性调整。而钱钟书在其所著《林纾的翻译》里面,也一再说明,从本质上说,翻译即是讹写,只不过分为好讹和错讹而已。我们现以钱著《林纾的翻译》为... 详细信息

在中国的传统观念里,翻译研究始终推崇钱钟书所说的"化境"观念,也就是对不同文化环境的适应性调整。而钱钟书在其所著《林纾的翻译》里面,也一再说明,从本质上说,翻译即是讹写,只不过分为好讹和错讹而已。我们现以钱著《林纾的翻译》为线索,试析基于化境的好讹做法,如文化调整、可译限度,还有翻译标准几方面问题。

关键词：翻译技巧林纾的翻译文学研究

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功能对等理论在商务英语翻译中的应用

湖南税务高等专科学校学报 2017年第5期30卷 44-47页

作者：韦雪华三明职业技术学院福建三明365000

通过简述尤金·奈达的功能对等理论和商务英语及特点,基于商务英语翻译的要求,从消除商务英语中存在的文化差异和保持商务英语翻译工作的客观性两方面阐述功能对等理论应用于商务英语翻译实践的必要性,进而提出功能对等理论在商务英语... 详细信息

通过简述尤金·奈达的功能对等理论和商务英语及特点,基于商务英语翻译的要求,从消除商务英语中存在的文化差异和保持商务英语翻译工作的客观性两方面阐述功能对等理论应用于商务英语翻译实践的必要性,进而提出功能对等理论在商务英语翻译中的步骤及具体应用。

关键词：功能对等商务英语翻译应用

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中西方文化差异对英语翻译的影响研究

江西电力职业技术学院学报 2018年第2期31卷 154-155页

作者：韦雪华三明医学科技职业学院福建三明365000

不同地域和文化背景产生了不同思维方式,不同价值取向、伦理道德观念和社会习俗等因素共同作用产生了中西方文化差异。了解中西方思想文化和意识形态差异,让两种语言的翻译尽可能对等和贴切,可消除文化差异带来的沟通障碍。从中西方文... 详细信息

不同地域和文化背景产生了不同思维方式,不同价值取向、伦理道德观念和社会习俗等因素共同作用产生了中西方文化差异。了解中西方思想文化和意识形态差异,让两种语言的翻译尽可能对等和贴切,可消除文化差异带来的沟通障碍。从中西方文化差异对英语翻译影响以及减小因文化差异带来翻译影响的途径等方面进行分析,提出在跨文化背景下如何运用适当的方法进行有效翻译,以期达到对等和靠近原意的翻译境界。

关键词：文化差异英语翻译影响方法

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大学生微信移动英语学习平台的构建研究

宿州教育学院学报 2016年第3期19卷 143-144页

作者：韦雪华福建三明职业技术学院福建三明365000

当前信息时代的大力发展,信息技术被应用到众多领域之中。百年大计教育现象,在信息化建设时代推动下,运用微信等移动设备构建学习平台方式逐渐受到更多热宠。大学生是未来的建设者,掌握良好英语交流技术是当代大学生进入职场生活的标配... 详细信息

当前信息时代的大力发展,信息技术被应用到众多领域之中。百年大计教育现象,在信息化建设时代推动下,运用微信等移动设备构建学习平台方式逐渐受到更多热宠。大学生是未来的建设者,掌握良好英语交流技术是当代大学生进入职场生活的标配,以此为迎合数字时代大背景,现代高校英语教学改革应充分发挥微信移动平台作用,以便保证其教学模式迎合现代受教群体需求,巩固受教群体英语能力。基于此本文以大学生微信移动英语学习平台的构建为研究重点。

关键词：大学生微信学习平台英语学习

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十堰市张湾区公共厕所规划

中国资源综合利用 2015年第7期33卷 24-27页

作者：韦雪华安徽建筑大学环境与能源工程学院合肥230022

通过湖北省十堰市张湾区现状公共厕所数量、分布及粪便处置的介绍,对规划期内公共厕所进行了规划。综合考虑工程建设进度以及城市发展对公厕的需求变化,规划近期主要完善公厕的数量和布局,新建公厕全部达到二类及以上水平,为固定式。规... 详细信息

通过湖北省十堰市张湾区现状公共厕所数量、分布及粪便处置的介绍,对规划期内公共厕所进行了规划。综合考虑工程建设进度以及城市发展对公厕的需求变化,规划近期主要完善公厕的数量和布局,新建公厕全部达到二类及以上水平,为固定式。规划期末所有公厕中一类公厕与二类公厕的比例不小于1∶3,其中在一类公共设施用地的公厕必须达到一类标准的要求。

关键词：环境卫生规划公共厕所粪便

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十堰市张湾区生活垃圾收集站规划

中国资源综合利用 2015年第5期33卷 41-44页

作者：韦雪华安徽建筑大学环境与能源工程学院合肥230022

通过对湖北省十堰市张湾区生活垃圾收集流程的介绍,分析了张湾区生活垃圾的产生量、生活垃圾成分,并进行了生活垃圾收集站规划。认为,收集站的总体规划应依据其采用的转运工艺及技术路线确定,充分利用场地空间,保证转运作业,有效抑制二... 详细信息

通过对湖北省十堰市张湾区生活垃圾收集流程的介绍,分析了张湾区生活垃圾的产生量、生活垃圾成分,并进行了生活垃圾收集站规划。认为,收集站的总体规划应依据其采用的转运工艺及技术路线确定,充分利用场地空间,保证转运作业,有效抑制二次污染并节约土地;收集站的总图布置应利用站址地形、地貌等自然条件。

关键词：环境卫生规划生活垃圾产生量生活垃圾收集站