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反式自主转运蛋白紧密黏附素Intimin离体重组系统的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第3期43卷 191-195页

作者：韦良婉王哲王星媛储引娣范恩国中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建反式自主转运蛋白的离体重组系统,以用于深入研究反式自主转运蛋白的跨膜转运机制。方法以大肠埃希菌紧密黏附素Intimin为例,进行离体重组系统的构建。获得Intimin的过表达菌株后,将其制备成原生质球,诱导Intimin表达。纯化重... 详细信息

目的构建反式自主转运蛋白的离体重组系统,以用于深入研究反式自主转运蛋白的跨膜转运机制。方法以大肠埃希菌紧密黏附素Intimin为例,进行离体重组系统的构建。获得Intimin的过表达菌株后,将其制备成原生质球,诱导Intimin表达。纯化重组表达的桶状蛋白组装复合物,将其制备成蛋白脂质体。反应体系中加入蛋白酶K处理后,观察转运是否成功。结果原生质球诱导表达未折叠的Intimin后,向体系中加入桶状蛋白组装复合物制备的蛋白脂质体,反应结束后加入蛋白酶K处理。与不加蛋白脂质体的对照组相比,能观察到Intimin不被蛋白酶K消化,表明Intimin被成功转运至膜上。结论反式自主转运蛋白Intimin的跨膜转运需要桶状蛋白组装复合物的参与。本研究成功建立反式自主转运蛋白的离体重组系统,从而有助于深入研究反式自主转运蛋白的跨膜转运机制。

关键词：反式自主转运蛋白 BAM蛋白复合物跨膜转运

基于自转运蛋白Ag43的HPV16L1蛋白的细菌表面展示

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中华微生物学和免疫学杂志 2022年第3期42卷 178-184页

作者：蔡锟王哲黄丕英韦良婉王星媛许雪梅储引娣朱沛沛范恩国中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国人民解放军总医院第二医学中心神经内科二病区国家老年疾病临床医学研究中心北京100036

目的:通过构建含有不同大小乘客结构域的Ag43表面展示载体,观察其将外源蛋白HPV16L1展示在细菌细胞表面的效率。方法:(1)利用基因工程手段将不同长度的Ag43基因序列连接到pET22b载体,获得4种Ag43表面展示载体:Ag43/138、Ag43/551、Ag43/... 详细信息

目的:通过构建含有不同大小乘客结构域的Ag43表面展示载体,观察其将外源蛋白HPV16L1展示在细菌细胞表面的效率。方法:(1)利用基因工程手段将不同长度的Ag43基因序列连接到pET22b载体,获得4种Ag43表面展示载体:Ag43/138、Ag43/551、Ag43/552、Ag43/700;(2)克隆HPV16L1编码基因序列,利用基因工程手段将其分别连接到上述4种Ag43表面展示载体,获得4种重组蛋白表达载体;(3)HPV16L1-Ag43融合蛋白表达及SDS-PAGE分析;(4)利用胰蛋白酶消化验证HPV16L1蛋白在大肠埃希菌的表面展示。结果:琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR扩增获得的Ag43和HPV16L1条带与预期大小一致,表面展示载体和重组蛋白表达载体的基因序列均通过基因测序验证无误。经IPTG诱导后,构建的4种Ag43表面展示载体均能表达HPV16L1蛋白。胰蛋白酶消化后,4种重组蛋白条带均减弱,且Ag43/700-HPV16L1条带减弱最明显。结论:成功构建了基于自转运蛋白Ag43的细菌表面展示载体,HPV16L1蛋白可通过构建的4种Ag43表面展示载体表达并展示在大肠埃希菌表面,且仅保留α-螺旋和β-桶状结构域部分的Ag43表达载体即Ag43/700的表面展示效果最优。

关键词：自转运蛋白细菌表面展示 HPV16L1 Ag43

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大肠杆菌离体重组系统转运FhaB突变体

基础医学与临床 2022年第4期42卷 565-569页

作者：黄丕英蔡锟韦良婉王星媛王哲储引娣范恩国中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨离体重组系统用于双组分转运系统机制研究的可行性。方法通过构建不同分子质量大小的FhaB突变体,制备成原生质球,加入到FhaC蛋白脂质体中,使用蛋白酶K消化的方法检测所构建的离体重组体系转运不同大小底物的能力。结果成功构建... 详细信息

目的探讨离体重组系统用于双组分转运系统机制研究的可行性。方法通过构建不同分子质量大小的FhaB突变体,制备成原生质球,加入到FhaC蛋白脂质体中,使用蛋白酶K消化的方法检测所构建的离体重组体系转运不同大小底物的能力。结果成功构建突变体后,检测到原生质球分泌的37、60和80 ku大小的条带,并且含FhaC的蛋白脂质体能转运这3种分子质量大小的底物,此次所转运的底物分子质量高达80 ku。结论体外构建的重组转运系统可以转运大分子质量的底物,可尝试使用该体系进行双组分系统机制的研究。

关键词：双组分转运系统突变体 FhaC FhaB

孙一奎命门观对宋明理学太极理论的继承和发展

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中国中医基础医学杂志 2024年

作者：孙超韦良玉佟旭首都医科大学中医药学院中国中医科学院中医基础理论研究所

孙一奎的命门思想深受宋明理学太极理论的影响，形成了不同于既往医界认识的有形命门，将其作为形而上者进行论述，跳出了具体脏腑的限制，提高了命门的理论地位。其命门思想大体宗宋明理学本体论宗旨，但也与其有本质上的不同。宋明理... 详细信息

孙一奎的命门思想深受宋明理学太极理论的影响，形成了不同于既往医界认识的有形命门，将其作为形而上者进行论述，跳出了具体脏腑的限制，提高了命门的理论地位。其命门思想大体宗宋明理学本体论宗旨，但也与其有本质上的不同。宋明理学“太极”是万事万物产生的根源，而孙一奎命门观中，人体“命门”以两肾为所确立的基础；宋明理学“太极”非阴非阳，而孙一奎命门观中命门性质“谓之阳则可，谓之火则不可”。由于医学本质上仍要为指导临床辨证用药服务，孙一奎的命门观无法、也不能忽视人体脏腑的实际而虚无存在，他的命门观仍是为其主张通过培补肾与命门，达到“固本培元”的治疗目的而服务的。

关键词：孙一奎宋明理学命门太极温补

油橄榄果渣的营养与功能特性及其在畜禽生产中的应用研究进展

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动物营养学报 2024年第1期36卷 1-11页

作者：韦良开张安宁李瑞印遇龙湖南农业大学动物科学技术学院湖南畜禽安全生产协同创新中心长沙410128 中国科学院亚热带农业生态研究所中国科学院亚热带农业生态过程重点实验室畜禽养殖污染控制与资源化技术国家工程实验室动物营养生理与代谢过程湖南省重点实验室长沙410125 南宁大北农饲料科技有限责任公司南宁530105 甘肃新牧原丹谷生态农业发展集团股份有限公司陇南746000

油橄榄果渣是油橄榄榨油后的主要副产物,其粗脂肪、粗蛋白质、可溶性纤维、矿物质等营养成分含量丰富,且富含植物多酚、黄酮、环烯醚、甾醇等多种天然活性成分,有降血脂、抗氧化、抗菌、抗炎症等功效。油橄榄果渣作为畜禽饲料原料,不仅... 详细信息

油橄榄果渣是油橄榄榨油后的主要副产物,其粗脂肪、粗蛋白质、可溶性纤维、矿物质等营养成分含量丰富,且富含植物多酚、黄酮、环烯醚、甾醇等多种天然活性成分,有降血脂、抗氧化、抗菌、抗炎症等功效。油橄榄果渣作为畜禽饲料原料,不仅可以变“废”为宝、降低饲料成本、减少环境污染,还能改善畜禽生长性能、增强机体免疫和抗氧化能力、提高畜禽产品品质。本文概述了油橄榄果渣的营养特点、生物学功能及其在畜禽中的应用现状,旨在为油橄榄果渣作为饲料原料的高效利用提供参考。

关键词：油橄榄果渣营养特性生物学功能畜牧业

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港口船闸围堰中防渗施工工艺的应用研究

中文科技期刊数据库（引文版）工程技术 2024年第7期 0163-0166页

作者：韦良明北部湾港股份有限公司广西南宁530021

为保证港口船闸围堰工程整体的安全性,需有效实现围堰的防渗处理,因此,以某地区的水库二期工程为例,结合研究工程的实际情况,设计塑性混凝土防渗墙施工技术。选择复合水泥、膨润土以及黏土等材料,在最佳配合比下制备塑性混凝土,并且确... 详细信息

为保证港口船闸围堰工程整体的安全性,需有效实现围堰的防渗处理,因此,以某地区的水库二期工程为例,结合研究工程的实际情况,设计塑性混凝土防渗墙施工技术。选择复合水泥、膨润土以及黏土等材料,在最佳配合比下制备塑性混凝土,并且确定该施工技术的工艺流程,完成防渗墙施工;对施工后的围堰塑性混凝土防渗墙进行测试,确定其最大渗透系数结果为7.97.×10-8cm/s,防渗效果良好,满足围堰防渗施工需求。

关键词：港口船闸围堰防渗施工工艺应用研究塑性混凝土

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综合能源系统能效评价方法初探

热力发电 2024年第6期53卷 58-64页

作者：韦良炜付昶王伟锋薛志恒刘磊西安热工研究院有限公司陕西西安710054

为合理评价综合能源的整体性能,突出系统低碳高效的核心特征,指导可再生能源安全消纳,提出了一种加权能源利用率评价指标。园区级综合能源系统是综合能源应用中一个典型场景,考虑到系统中的可再生能源具有能量转化效率低的特点,分别采... 详细信息

为合理评价综合能源的整体性能,突出系统低碳高效的核心特征,指导可再生能源安全消纳,提出了一种加权能源利用率评价指标。园区级综合能源系统是综合能源应用中一个典型场景,考虑到系统中的可再生能源具有能量转化效率低的特点,分别采用能效比和一次能源利用率评价可再生能源系统和化石能源系统的性能,再以供能量占比作为权重反映该系统在整个能源系统的相对重要性,计算出园区级综合能源的加权能源利用率。通过算例对比分析了所提指标与传统一次能源利用率和?效率指标的区别,结果表明,该指标的评价结果能够反映系统的可再生能源消纳水平,体现低碳、高效的核心特征,对于指导系统节能降耗具有重要意义。

关键词：综合能源系统性能分析能效评价

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微创小切口对不停跳冠脉搭桥术患者炎症因子及疼痛的影响

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继续医学教育 2024年第3期38卷 185-188页

作者：韦良淮安市第五人民医院心脏大血管外科江苏淮安223399

目的探究微创小切口对不停跳冠脉搭桥术患者炎症因子及致痛因子表达的影响。方法将2022年9月至2023年9月淮安市第五人民医院的60例不停跳冠脉搭桥术患者根据随机数表法分为对照组和观察组,每组各30例。对照组采用正中切口,观察组则采用... 详细信息

目的探究微创小切口对不停跳冠脉搭桥术患者炎症因子及致痛因子表达的影响。方法将2022年9月至2023年9月淮安市第五人民医院的60例不停跳冠脉搭桥术患者根据随机数表法分为对照组和观察组,每组各30例。对照组采用正中切口,观察组则采用微创小切口。比较2组术后不同时间的疼痛评分[视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)]、手术前后的炎症因子[血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)及白介素-8(interleukin-8,IL-8)]、致痛因子[血清前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)及P物质(Substance P,SP)]及机体应激激素[血清皮质醇(cortisol,Cor)、醛固酮(aldosterone,ALD)及去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)]。结果术后6、12及24 h观察组和对照组的VAS评分持续降低,且观察组的VAS评分低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);术后24 h观察组的炎症因子、致痛因子及机体应激激素水平低于对照组,且2组的炎症因子、致痛因子及机体应激激素水平高于组内术前的检测结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论微创小切口更有助于改善不停跳冠脉搭桥术患者的疼痛程度,且对炎症因子及致痛因子的表达也有更好的控制作用,因此机体的不良应激控制更好。

关键词：微创小切口不停跳冠脉搭桥术炎症因子致痛因子疼痛评分机体应激

基于质量源于设计(QbD)理念的氧化苦参碱-黄芪甲苷共载脂质体处方工艺研究

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药学学报 2024年第1期59卷 232-242页

作者：韦良银李霞王虹黄琳清刘聪燕陈彦南京中医药大学附属中西医结合医院江苏南京210028 江苏省中医药研究院中药组分与微生态研究中心江苏南京210028

本研究以“质量源于设计”(quality by design,QbD)理念为核心,优化氧化苦参碱-黄芪甲苷共载脂质体(oxymatrine-astragaloside IV liposomes,Om-As-Lip)的处方工艺并对其进行放大验证。采用乙醇注入联合pH梯度法制备Om-As-Lip,通过双重... 详细信息

本研究以“质量源于设计”(quality by design,QbD)理念为核心,优化氧化苦参碱-黄芪甲苷共载脂质体(oxymatrine-astragaloside IV liposomes,Om-As-Lip)的处方工艺并对其进行放大验证。采用乙醇注入联合pH梯度法制备Om-As-Lip,通过双重风险评估工具、Plackett-Burman设计和Box-Behnken响应面实验对其关键物料属性进行优化,建立设计空间;进一步考察Om-As-Lip的放大工艺,采用单因素试验优化高压匀质的关键工艺参数,并对其终产品进行质量评价。研究结果发现,黄芪甲苷药脂比、胆脂比和混合磷脂比例(氢化大豆卵磷脂∶大豆卵磷脂)是影响Om-As-Lip质量的关键材料属性,Box-Behnken设计建立的回归模型具有良好的预测性,并确定Om-As-Lip的最佳处方为:黄芪甲苷药脂比为1∶40,胆脂比为1∶10,氢化大豆卵磷脂∶大豆卵磷脂为51∶9。设计空间内的胆脂比可控制在1∶12~1∶5,氢化大豆卵磷脂∶大豆卵磷脂比例可控制在1∶7~17∶3。Om-As-Lip高压匀质的最佳压力为600 bar,循环次数为6次,温度为4℃。基于QbD理念制备的Om-As-Lip质量评价符合预期,建立的处方工艺稳定可行,有望为其今后的开发应用奠定实验基础。

关键词：质量源于设计脂质体高压匀质黄芪甲苷氧化苦参碱