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微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞的氧化损伤及γ-GCS基因表达的影响

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微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞的氧化损伤及γ-GCS基因表达的影响

作者：韦宏旷广西医科大学

学位级别：硕士

目的：研究微囊藻毒素-LR（Microcystin-LR，MC-LR）短期重复暴露对小鼠肝细胞产生的氧化损伤效应，以及对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthethase,γ-GCS)相关亚基的mRNA、蛋白表达水平的影响，探讨MC-LR诱导的肝细... 详细信息

目的：研究微囊藻毒素-LR（Microcystin-LR，MC-LR）短期重复暴露对小鼠肝细胞产生的氧化损伤效应，以及对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthethase,γ-GCS)相关亚基的mRNA、蛋白表达水平的影响，探讨MC-LR诱导的肝细胞氧化损伤与γ-GCS基因表达水平之间的关系。方法：80只健康昆明小鼠，随机分为2批，每批4组，每组10只，分别为对照组（含0.02%二甲基亚砜的生理盐水0.005ml/g）、低剂量组（MC-LR5μg/kg）、中剂量组（MC-LR10μg/kg）、高剂量组（MC-LR20μg/kg），分别染毒10天和20天。每日1次经腹腔注射染毒，每隔1日称量体重，观察小鼠体重增长情况，计算体重增长率。分别于染毒第11天和第21天处死小鼠，取肝脏组织。用硫代巴比妥酸（TBA）法测定丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，用二硫代硝基苯甲酸（DTNB）法测定GSH含量;用免疫组织化学法测定DNA氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxydeoxiguanosine，8-OHdG）水平;提取肝细胞RNA，逆转录成cDNA，用Real-time PCR法测定γ-GCS催化亚基(Glutamate cysteine ligasecatalytic subunit,GCLC)和调节亚基（Glutamate cysteine ligase modifiersubunit，GCLM）的mRNA表达水平;提取肝细胞蛋白用蛋白免疫印迹法（Western blot，WB）测定GCLC和GCLM的蛋白表达水平。结果：1、经10天和20天染毒后，低剂量组小鼠的体重增长率与对照组比较没有明显差异（P>0.05），中、高剂量组小鼠体重增长率均显著低于其对照组，差异有统计学意义（P0.05），而中、高剂量组MDA水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P0.05），中、高剂量组GSH水平低于对照组，差异有统计学意义（P0.05），但中、高剂量组GCLC蛋白表达量均明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;染毒20天后，低、中、高剂量组GCLC蛋白表达量均低于染毒10天相应的剂量组，差异有统计学意义（P<0.05）。8、染毒10天后，低剂量组小鼠肝细胞GCLM蛋白表达量与对照组比较无显著性差异，中、高剂量组GCLM蛋白表达水平均明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;染毒20天后，低、中、高剂量组GCLM蛋白表达水平均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;中剂量组染毒20天后，GCLM蛋白表达水平明显低于染毒10天的水平，差异有统计学意义（P<0.05）。9、肝细胞GCLC、GCLM mRNA表达水平与MDA水平呈正相关关系（rGCLC=0.425，P<0.05;rGCLM=0.304，P<0.05）;肝细胞GCLC、GCLM mRNA表达水平与8-OHdG水平呈正相关关系（rGCLC=0.420，P<0.05;rGCLM=0.476，P<0.05）。结论： MC-LR可抑制小鼠肝细胞γ-GCS的催化亚基GCLC、调节亚基GLCM的mRNA表达和蛋白表达，降低GSH水平，升高MDA和8-OHdG水平，引起脂质和DNA氧化损伤，但MC-LR对γ-GCS表达的影响机制仍有待于进一步研究。

关键词：微囊藻毒素-LR 氧化损伤 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶谷胱甘肽

广西2010—2014年部分临床核医学工作人员外照射个人剂量监测结果分析

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中国职业医学 2016年第4期43卷 497-499页

作者：韦宏旷谢萍唐孟俭陈掌凡刘丽广西壮族自治区疾病预防控制中心放射卫生防护所广西南宁530028

目的了解广西壮族自治区(以下简称"广西")部分医疗机构临床核医学工作人员职业外照射受照水平情况。方法以广西2010—2014年部分市县16家医院589名临床核医学工作人员为调查对象,采用热释光剂量计对其进行外照射个人剂量监测。结果 2010... 详细信息

目的了解广西壮族自治区(以下简称"广西")部分医疗机构临床核医学工作人员职业外照射受照水平情况。方法以广西2010—2014年部分市县16家医院589名临床核医学工作人员为调查对象,采用热释光剂量计对其进行外照射个人剂量监测。结果 2010—2014年,临床核医学工作人员外照射个人剂量监测覆盖率为78.8%;年集体有效剂量为389.54人·mSv,人均年有效剂量0.66 mSv/年,个人受照剂量<1.00 mSv/a者占实际监测总人数的83.2%(490/589);个人年有效剂量超过5.00 mSv的人数分布比为0.02(9/589),集体剂量分布比为0.18(69.86/389.54)。结论广西临床核医学工作人员人均受照剂量较低,但仍需进一步提高工作人员辐射防护意识,加强核医学工作场所和患者管理。

关键词：临床核医学个人剂量外照射监测辐射防护

儿童注意缺陷多动障碍与5-羟色胺R2A基因多态性的相关性研究

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中国全科医学 2016年第11期19卷 1287-1291页

作者：梁友芳农清清覃健敏韦宏旷郭尧平范誉班彩霞李慕军广西医科大学第一附属医院广西南宁市530021 广西医科大学公共卫生学院南宁市疾病预防控制中心广西壮族自治区疾病预防控制中心广西壮族自治区妇幼保健院

目的探讨5-羟色胺(5-HT)R2A基因单核苷酸多态性与儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)的关系。方法于2011年12月—2013年1月广西儿童ADHD流行病学抽样调查筛查出的ADHD患儿中,采用随机数字表法选取158例为病例组,另在与ADHD患儿同一聚居区非ADH... 详细信息

目的探讨5-羟色胺(5-HT)R2A基因单核苷酸多态性与儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)的关系。方法于2011年12月—2013年1月广西儿童ADHD流行病学抽样调查筛查出的ADHD患儿中,采用随机数字表法选取158例为病例组,另在与ADHD患儿同一聚居区非ADHD者中选择性别、年龄匹配的159例为对照组。取外周静脉血5 ml,提取DNA。根据Hap Map提供的存在于中国人群5-HT R2A基因的单核苷酸多态位点(SNPs)数据,及国内外相关文献,选择14个SNPs进行研究,并设计引物序列。PCR扩增,于反应终点判读基因型。结果病例组与对照组rs2770304、rs985934和rs6311位点的基因型分布不同,病例组CC/CT基因型频率高于对照组,TT基因型频率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组rs2770304、rs985934、rs4941573、rs2070040、rs6313和rs6311位点关联等位基因频率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。rs1745837、rs3742279和rs2296972位点两两间存在强连锁不平衡(D'和r2均大于0.95),rs2770304、rs985934和rs4941573位点两两间存在较强连锁不平衡,rs2070040与rs6313、rs6311位点存在较强连锁不平衡。病例组单体型CCA、ACC频率高于对照组,单体型TTG、GTT频率低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 5-HT R2A基因rs2770304、rs985934、rs4941573、rs2070040、rs6313和rs6311位点多态性及单体型CCA、ACC、TTG、GTT可能与儿童ADHD的发生有关。

关键词：注意力缺陷障碍伴多动 5-羟色胺多态性,单核苷酸连锁不平衡

2014-2018年南宁市某妇幼保健院手足口病流行病学特征分析

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现代预防医学 2020年第11期47卷 1925-1928页

作者：韦宏旷杨小艺林明陈明广西壮族自治区妇幼保健院预防保健科

目的了解2014至2018年广西妇幼保健院手足口病(HFMD)患儿的流行病学特征以及致病肠道病毒类型,为手足病防控提供科学依据。方法通过传染病报告信息管理系统导出2014-2018年广西妇幼保健院报告HFMD病例,利用Excell对数据进行整理和分析... 详细信息

目的了解2014至2018年广西妇幼保健院手足口病(HFMD)患儿的流行病学特征以及致病肠道病毒类型,为手足病防控提供科学依据。方法通过传染病报告信息管理系统导出2014-2018年广西妇幼保健院报告HFMD病例,利用Excell对数据进行整理和分析。结果 2014-2018年累计报告HFMD病例共32 477例,占法定传染病报告总数的75.08%,其中332例重症手足口病例,累计4例死亡病例;HFMD每年3-6月份为发病高峰期,7-8月发病情况呈下降趋势,9-10月发病数又开始增加,之后开始下降;2014-2018年手足口发病数总体呈下降趋势;HFMD发病年龄为2月龄～35岁,5岁及以下患儿占94.56%,1～2岁年龄组发病例数最多,占33.13%;男女性别比例为1.50∶1;HFMD以散居儿童最多,累计发病22 869例,占70.48%,幼托儿童9 045例,占27.88%,学生481例,占1.48%;南宁市其他城区HFMD病例数累计16 019例,占49.37%,西乡塘区累计病例数为12 413例,占38.26%; 2014-2018年累计采集手足口病咽拭子标本411份,阳性标本301份,阳性率73.24%,其中EV71、COX A16和其他肠道病毒分别为68例(22.59%)、137例(45.51%)和96例(31.89%)。结论 HFMD仍为威胁儿童健康的主要疾病,应加强手足口病相关防控知识的宣教,提高家长及儿童卫生意识;重视HFMD流行趋势以及病原学监测,研制更多有效针对HFMD疫苗来预控HFMD,降低儿童手足口病发病率。

关键词：手足口病流行病学病原学监测

冠状动脉介入手术患者不同部位表面受照剂量分析

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中国职业医学 2017年第2期44卷 215-217页

作者：韦宏旷梁桂强覃志英陈掌凡唐孟俭吴应宇广西壮族自治区疾病预防控制中心放射卫生防护所广西南宁530028

目的分析冠状动脉造影介入手术患者不同部位受到的辐射剂量。方法采用整群随机抽样法,选取广西4家三级甲等医院的60例分别行冠状动脉造影术(CAG)和冠状动脉造影术及支架植入术(PTCA)的患者为研究对象,采用热释光剂量监测方法分别于手术... 详细信息

目的分析冠状动脉造影介入手术患者不同部位受到的辐射剂量。方法采用整群随机抽样法,选取广西4家三级甲等医院的60例分别行冠状动脉造影术(CAG)和冠状动脉造影术及支架植入术(PTCA)的患者为研究对象,采用热释光剂量监测方法分别于手术时对患者甲状腺、后胸部、会阴和左上臂4个部位表面受照剂量进行监测。结果 CAG和PTCA患者甲状腺、会阴和左上臂表面受照剂量均低于后胸部(P<0.05);PTCA患者甲状腺、后胸部和左上臂表面受照剂量均高于CAG患者相应部位(P<0.05)。D医院CAG手术患者甲状腺和左上臂表面受照剂量均高于其他3家医院(P<0.05),会阴表面受照剂量均低于其他3家医院(P<0.05)。结论冠状动脉造影介入手术患者的胸部和甲状腺表面受照剂量较高,应采取适当的辐射防护措施以减少患者的表面受照剂量。

关键词：冠状动脉造影介入术患者辐射表面受照剂量

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南宁市青秀区小学生行为问题现状

中国学校卫生 2015年第1期36卷 126-128页

作者：梁友芳农清清韦宏旷何灏渝冯天达广西医科大学第一附属医院预防保健科南宁530021 广西医科大学公共卫生学院

目的探讨南宁市青秀区小学生行为问题状况,为研究小学生行为问题的机制与干预手段提供依据。方法采用整群随机抽样的方法,用Conners父母用症状问卷（PSQ）对南宁市青秀区5所小学3 061名6-14岁小学生的行为问题进行调查。结果学龄儿童行... 详细信息

目的探讨南宁市青秀区小学生行为问题状况,为研究小学生行为问题的机制与干预手段提供依据。方法采用整群随机抽样的方法,用Conners父母用症状问卷（PSQ）对南宁市青秀区5所小学3 061名6-14岁小学生的行为问题进行调查。结果学龄儿童行为问题检出率为10.49%,男生的品行问题、学习问题、冲动—多动和多动指数得分皆高于女生（t值分别为4.975,6.454,6.760,7.393,P值均〈0.01）。多因素Logistic回归分析显示,性别、父亲文化程度在高中及以下、父亲经常打骂孩子、母亲偶尔或经常责骂孩子、父母关系不和睦以及经常吃零食是儿童多动行为的风险因素（P值均〈0.05）。结论南宁青秀区小学生行为问题发生率较高。影响多动行为的因素包括生物因素和家庭因素,尤其是家庭因素应引起充分重视。

关键词：行为回归分析学生

微囊藻毒素-LR对小鼠肝甲基转移酶活性影响

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中国公共卫生 2013年第4期29卷 533-535页

作者：何灏逾农清清韦宏旷陆继培李春宏荆敏广西医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学教研室广西南宁530021 广西医科大学第一附属医院检验科

目的观察微囊藻毒素-LR(MCLR)暴露对小鼠肝组织DNA甲基转移酶(DNMTs)活性的影响。方法 80只昆明小鼠,雌雄各半,随机分为4组,每组20只,即对照组(生理盐水)及MCLR低、中、高剂量组(MCLR5、10、20μg/kg),1次/d经腹腔注射染毒,分别于染毒... 详细信息

目的观察微囊藻毒素-LR(MCLR)暴露对小鼠肝组织DNA甲基转移酶(DNMTs)活性的影响。方法 80只昆明小鼠,雌雄各半,随机分为4组,每组20只,即对照组(生理盐水)及MCLR低、中、高剂量组(MCLR5、10、20μg/kg),1次/d经腹腔注射染毒,分别于染毒第11、21 d测定肝功能生化指标,观察肝脏组织形态学变化,检测DNMTs酶活性。结果染毒11 d时,与对照组比较,低剂量MCLR组小鼠肝脏谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)无明显变化,高剂量组ALT、AST、ALP酶活性均升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒21 d时,与对照组比较,各剂量MCLR组小鼠肝脏ALT和AST水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);染毒11、21 d时,低、中、高MCLR组小鼠DNMTs酶活性分别为(89 135.7±14 334.7)、(92 645.8±15 962.3)、(70481.3±15 621.3)和(59 115.6±9 884.6)、(83 310.7±15 066.3)、(86 612.5±20 572.8)RFU/(h.mg),均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MCLR暴露可引起ALT、AST、ALP水平升高,肝组织DNMTs酶活性升高。

关键词：微囊藻毒素-LR(MCLR) DNA甲基转移酶(DNMTS)活性肝功能

广西巴马长寿人群血清胰岛素样生长因子Ⅰ水平及其影响因素分析

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中国全科医学 2014年第12期17卷 1350-1353页

作者：韦宏旷农清清覃健敏张志勇何敏何灏逾覃健范誉郭尧平广西医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学教研室广西南宁市530021 南宁市疾病预防控制中心传染病防制科广西医科大学医学科学实验中心

目的探讨广西巴马长寿人群血清胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）水平及其影响因素。方法2008年5月采用随机抽样的方法在广西巴马长寿区抽取160名长寿老人（90-110岁）作为长寿组，另抽取一般地区健康青壮年人（20-50岁）102名作为青壮年对... 详细信息

目的探讨广西巴马长寿人群血清胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）水平及其影响因素。方法2008年5月采用随机抽样的方法在广西巴马长寿区抽取160名长寿老人（90-110岁）作为长寿组，另抽取一般地区健康青壮年人（20-50岁）102名作为青壮年对照组。测量其身高、体质量、腰围、血压、血糖、血脂等，应用酶联免疫吸附法检测血清IGF-Ⅰ水平，利用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）法分析长寿老人胰岛素样生长因子Ⅰ受体（IGF-IR）基因3174位点多态性，并对长寿老人血清IGF-Ⅰ水平的影响因素进行多元逐步回归分析。结果长寿组血清IGF-Ⅰ水平低于青壮年对照组（114．0±31．5）μg/L与（140．7±37．3）μg/L，F=6．321，P〈0．05。长寿组中，GG、GA和AA基因型携带者血清IGF-Ⅰ水平分别为（115．3±30．4）μg／L、（112．1±34．5）μg/L及（113．24-27，3）μg/L，差异无统计学意义（F=1．030，P=0．386）。多元线性回归分析显示，血清IGF-Ⅰ与体质指数和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）呈正相关，与性别、年龄、民族、臀围、腰围、血压、血糖、总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇均无直线相关关系。结论广西巴马长寿人群血清IGF-Ⅰ水平明显低于青壮年人。长寿人群IGF-IR基因3174位点多态性可能对其血清IGF-Ⅰ表达无影响，血清IGF-Ⅰ水平与体质指数及血清HDL-C水平呈正相关。

关键词：胰岛素样生长因子Ⅰ 长寿多态性单核苷酸危险因素

微囊藻毒素-LR对小鼠肝细胞DNA甲基化的影响

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环境与健康杂志 2014年第10期31卷 906-909页

作者：郭尧平农清清范誉韦宏旷何灏逾胡新梅廖娟陆继培广西医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学教研室广西南宁530021

目的研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)暴露对小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平及DNA甲基转移酶(DNMTs)mRNA表达的影响。方法将40只健康SPF级昆明小鼠随机分为4组,分别为对照组(含0.02%DMSO)和5、10、20μg/kg MCLR染毒组,每组10只,雌雄各半。采用... 详细信息

目的研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)暴露对小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平及DNA甲基转移酶(DNMTs)mRNA表达的影响。方法将40只健康SPF级昆明小鼠随机分为4组,分别为对照组(含0.02%DMSO)和5、10、20μg/kg MCLR染毒组,每组10只,雌雄各半。采用腹腔注射方式进行染毒,连续染毒20 d。采用高效液相色谱(HPLC)法检测小鼠肝细胞DNA中的脱氧胞苷和5-甲基脱氧胞苷含量,并计算DNA的总体甲基化水平;采用实时荧光定量PCR法检测DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B m RNA的表达水平。结果 10、20μg/kg MC-LR染毒组小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平,DNMT1、DNMT3A及DNMT3B mRNA的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠肝细胞DNA总体甲基化水平与DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05)。结论 MC-LR可抑制小鼠肝细胞DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA的表达,降低DNA总体甲基化水平。

关键词：微囊藻毒素-LR DNA甲基化 DNA甲基转移酶