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沟叶结缕草ZmCOR410基因抗逆功能鉴定

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华北农学报 2022年第4期37卷 53-61页

作者：张晓寒陈彦良马欣张珊珊韦善君中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

为研究结缕草抗逆分子机制,报道了沟叶结缕草一个低温响应基因ZmCOR410的抗逆功能。基于转录组数据克隆获得了ZmCOR410基因,采用实时定量PCR技术检测了其表达的低温响应模式,将其转化拟南芥中和酵母中鉴定了其抗逆功能。结果表明,ZmCOR... 详细信息

为研究结缕草抗逆分子机制,报道了沟叶结缕草一个低温响应基因ZmCOR410的抗逆功能。基于转录组数据克隆获得了ZmCOR410基因,采用实时定量PCR技术检测了其表达的低温响应模式,将其转化拟南芥中和酵母中鉴定了其抗逆功能。结果表明,ZmCOR410基因编码区序列长927 bp,编码308个氨基酸,为酸性脱水素。在同源基因的系统进化树中ZmCOR410蛋白与耐旱性强的无芒隐子草和弯叶画眉草的同源基因亲缘关系最近。在基因组中,ZmCOR410基因编码区上游1700 bp范围内有4个DRE顺式元件核心序列,其mRNA在低温胁迫下显著积累。转化了ZmCOR410基因的拟南芥,叶片抗冻能力增强,植株在干旱和高温胁迫下的存活率提高。转化了ZmCOR410基因的酵母细胞抗高温能力增强。结果说明,ZmCOR410基因的表达产物在冷冻、高温和干旱胁迫下对细胞起保护作用,将有利于沟叶结缕草度过不良环境。

关键词：沟叶结缕草 COR基因非生物胁迫脱水素

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番茄根际土尚未培养细菌的分离培养方法探究

中国土壤与肥料 2023年第8期 233-242页

作者：吴晨晨李怡君徐双马荣韦善君张晓霞中央民族大学生命与环境科学学院北京100081 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/农业农村部农业微生物资源收集与保藏重点实验室北京100081

为探究获得土壤中尚未培养细菌资源的方法,以MS无机盐为基础养分,设置1/100×TSB、1/50×R2A和土壤浸提液(SE)3种低有机营养类型,凝固剂用琼脂(A)或结冷胶(G),得到一组培养基MS+TSG、MS+TSA、MS+R2A和MS+SE,以及在此基础上添加1.5 g/L... 详细信息

为探究获得土壤中尚未培养细菌资源的方法,以MS无机盐为基础养分,设置1/100×TSB、1/50×R2A和土壤浸提液(SE)3种低有机营养类型,凝固剂用琼脂(A)或结冷胶(G),得到一组培养基MS+TSG、MS+TSA、MS+R2A和MS+SE,以及在此基础上添加1.5 g/L丙酮酸钠作为抗氧化剂的第二组培养基。用上述8种培养基分离培养健康番茄根际土壤中的细菌,并对各种培养基平板上代表性菌落进行16S rRNA基因分析。结果表明,在MS无机盐和低有机营养组合的培养基平板上,在28℃下培养28 d后可检测到菌落数达1×10^(7)CFU/g土,4种培养基平板上检测到的菌落数量由多到少顺序为MS+SE>MS+TSG>MS+R2A>MS+TSA;在相同的低有机营养条件下,用结冷胶作为凝固剂可获得更多菌落,添加丙酮酸钠为抗氧化剂会显著降低菌落的多样性。鉴定的84个代表性菌落属于34个属的52个种,其中7个(占检测菌株数的8.33%)为可能新种,不同培养基上种丰富度表现为MS+TSA>MS+R2A>MS+TSG>MS+SE。结果说明,采用低有机营养的MS无机盐培养基有利于分离获得土壤中的一些尚未培养细菌。

关键词：尚未培养微生物分离培养番茄根际土壤

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水稻内生细菌新资源分离培养方案探究

生物技术通报 2023年第4期39卷 201-211页

作者：李怡君吴晨晨李睿王喆何山文韦善君张晓霞中央民族大学生命与环境科学学院北京100081 中国农业科学院农业资源与农业区划研究所农业农村部农业微生物资源收集与保藏重点实验室北京100081 上海市园林科学规划研究院上海200232

为了探究适用于分离水稻内生细菌的方案以获得水稻内细菌新资源,本研究基于培养组的方法,以水稻3个品种种子及幼苗为材料,从材料表面消毒、菌悬液的制备和培养基配比3个方面进行探究,并对分离获得代表性纯培养物的16S rRNA基因进行测序... 详细信息

为了探究适用于分离水稻内生细菌的方案以获得水稻内细菌新资源,本研究基于培养组的方法,以水稻3个品种种子及幼苗为材料,从材料表面消毒、菌悬液的制备和培养基配比3个方面进行探究,并对分离获得代表性纯培养物的16S rRNA基因进行测序鉴定。结果表明,75%乙醇和含2%有效氯的次氯酸钠溶液组合对种子先后处理90 s和12 min,对植株组织先后处理90 s和5 min即可获得良好的消毒效果。水稻种子内生细菌量为10^(5)-10^(6) CFU/g,其中90%-95%分布于颖壳内,不同品种或同一品种的不同生境来源的种子之间内生细菌群落组成有明显差异;在制备种子菌悬液时需注意控制研磨程度以获得种类丰富的菌落,剥去颖壳有利于分离培养糙米中的内生菌。对于根、茎、叶内生细菌的分离,需要根据材料不同控制接种菌悬液的浓度以获得其中微量的内生细菌;在培养基中添加组织浸提液和延长培养时间至两周以上,可促进根、茎、叶内生细菌的分离培养。采用调整后的方案,本研究对3个水稻品种的种子和它们的植株根、茎、叶内生细菌进行分离培养,分别完成了71、14、10和2个代表性纯培养物的16S rRNA基因测序鉴定,其中有8株与已知类群模式菌株同源序列相似度在97.22%-98.74%,新种获得率为8.25%。研究结果为分离培养水稻内生细菌新资源提供了方法参考。

关键词：水稻内生细菌培养基组织浸提液表面消毒菌悬液制备

脂肪酸分析技术在土壤微生物多样性研究中的应用现状

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安徽农业科学 2011年第17期39卷 10327-10329页

作者：江凌玲詹艺凌韦善君中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

从土壤微生物鉴定、微生物生物量及群落结构分析等方面,综述脂肪酸分析技术应用于土壤微生物多样性研究的现状,并对该技术的优点与不足进行评述,提出利用多种研究技术相结合研究土壤微生物多样性的发展前景。

关键词：脂肪酸分析技术土壤微生物多样性鉴定生物量群落结构

草酸对重寄生真菌盾壳霉分生孢子萌发和菌丝生长的影响

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植物病理学报 2004年第3期34卷 199-203页

作者：韦善君李国庆姜道宏王道本华中农业大学植科院植保系武汉430070

本文研究了草酸对核盘菌的重寄生真菌盾壳霉 ( Coniothyrium minitans)分生孢子萌发和菌丝生长的影响。结果表明 :草酸对盾壳霉分生孢子萌发没有明显促进作用 ,在酸碱性非缓冲基质 (水琼脂 )和酸碱性缓冲基质中 ,抑制盾壳霉分生孢子萌... 详细信息

本文研究了草酸对核盘菌的重寄生真菌盾壳霉 ( Coniothyrium minitans)分生孢子萌发和菌丝生长的影响。结果表明 :草酸对盾壳霉分生孢子萌发没有明显促进作用 ,在酸碱性非缓冲基质 (水琼脂 )和酸碱性缓冲基质中 ,抑制盾壳霉分生孢子萌发的最低浓度分别为 1 5 0和 70 0 μg/m L。在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中 ,当草酸浓度为 1 0 0～ 2 0 0 0 μg/m L时 ,盾壳霉菌丝能够生长 ,且浓度为 3 0 0～ 5 0 0μg/m L的草酸对盾壳霉的菌丝生长具有明显的促进作用。在以草酸为唯一碳源的合成培养基中 ,在酸碱性非缓冲的条件下 ,当草酸浓度为 1 0 0～ 2 0 0 0 μg/m L时 ,盾壳霉菌丝能够生长 ,且草酸浓度为 5 0 0 μg/m L时对盾壳霉菌丝生长具有促进作用 ,而当草酸浓度为 2 5 0 0μg/m L时 ,盾壳霉菌丝则停止生长。在酸碱性缓冲的合成基质中 ,草酸浓度为 1 0 0～ 40 0 0 μg/m L时 ,盾壳霉菌丝能够生长 ,且草酸浓度为 1 5 0 0～ 2 5 0 0 μg/m L时对盾壳霉菌丝生长具有促进作用。在含草酸钙的混浊培养基 (以草酸为唯一碳源 )上 ,盾壳霉菌落区域形成了透明圈。上述结果说明盾壳霉能忍耐一定浓度的草酸而进行分生孢子萌发及菌丝生长 ,且这种真菌可能对草酸分子具有分解作用。

关键词：盾壳霉核盘菌草酸毒害作用

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盐芥ThDREB2B基因克隆及功能分析

西北植物学报 2013年第2期33卷 215-222页

作者：韦善君武运芳徐小静高飞周宜君中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

利用RACE技术从抗逆模式植物盐芥中克隆获得了1个DREB(dehydration responsive element binding)类转录因子基因,命名为ThDREB2B(NCBI登录号EF653377)。结果表明:(1)ThDREB2B基因cDNA全长1 486bp,包含1个954bp的开放阅读框,编码316个氨基酸;推测编码的蛋白质分子量约36.0kD,等电点为4.81,第76～135位氨基酸构成1个AP2结构域。(2)系统进化分析表明,ThDREB2B属于DREB亚家族的A-2亚组,与拟南芥AtDREB2B基因遗传距离最近。(3)半定量RT-PCR检测显示,ThDREB2B基因在正常生长条件下低丰度表达,在低温、干旱或高盐胁迫下上调表达。(4)酵母单杂交结果表明,ThDREB2B蛋白能与DRE元件特异结合,但转录激活能力弱。推测ThDREB2B蛋白可能需要翻译后修饰以获得转录激活功能。

关键词：盐芥 DRE元件结合蛋白逆境响应酵母单杂交

结缕草Zjlea3基因逆境响应模式及抗逆功能鉴定

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华北农学报 2020年第3期35卷 55-62页

作者：闫逢英农钧绣锁忠花韦善君中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

为揭示结缕草LEA蛋白在植物逆境胁迫应答过程中的作用与功能,利用RT-PCR方法从日本结缕草Meyer中克隆得到一个lea基因,命名为Zjlea3,对其进行生物信息学分析。蛋白质理化性质分析结果表明:该基因编码产物包含177个氨基酸,预测分子质量为... 详细信息

为揭示结缕草LEA蛋白在植物逆境胁迫应答过程中的作用与功能,利用RT-PCR方法从日本结缕草Meyer中克隆得到一个lea基因,命名为Zjlea3,对其进行生物信息学分析。蛋白质理化性质分析结果表明:该基因编码产物包含177个氨基酸,预测分子质量为18.3 ku,理论等电点(pI)为5.63,为亲水性蛋白,含有9个特征性的11氨基酸基序,属于LEA蛋白中的第3组成员。聚类分析结果表明:Zjlea3蛋白与高粱、石茅等耐高温物种的同源蛋白亲缘关系最近。荧光定量PCR分析显示:在低温、干旱和高盐胁迫下,Zjlea3基因表达量均有上调,表达量峰值分别出现在72,24,72 h,其中受低温诱导上调幅度最大。转基因酵母抗逆性分析显示:转化Zjlea3基因的酵母细胞对冷冻、高盐和高渗胁迫的耐受能力显著提升。由此推测Zjlea3蛋白参与结缕草抵御低温、干旱和高盐等非生物胁迫的调控。

关键词： LEA蛋白日本结缕草非生物胁迫表达模式抗逆功能

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紫云英根瘤菌的系统发育多样性

应用与环境生物学报 2010年第3期16卷 380-384页

作者：张晓霞马晓彤曹卫东韦善君蔡建辉姜瑞波中国农业科学院农业资源与农业区划研究所中国农业微生物菌种保藏中心北京100081 中央民族大学生命与环境科学学院北京100081

在筛选根瘤菌与不同紫云英品种高效结瘤的基础上,通过16S rRNA基因序列分析,对13株共生结瘤效果好的菌种进行了系统发育研究.结果表明,13株菌属于3个主要聚类群,分别与Mesorhizobium、Agrobacterium和Stenotrophomonas亲缘关系最为接近... 详细信息

在筛选根瘤菌与不同紫云英品种高效结瘤的基础上,通过16S rRNA基因序列分析,对13株共生结瘤效果好的菌种进行了系统发育研究.结果表明,13株菌属于3个主要聚类群,分别与Mesorhizobium、Agrobacterium和Stenotrophomonas亲缘关系最为接近,种类多样性较为丰富;其中编号为ACCC13065株的菌株与S.rhizophila16S rDNA序列相似性为100%,位于γ-变形菌纲,这是除α-变形亚纲、β-变形亚纲外所发现的一类新的根瘤菌类型.

关键词：紫云英根瘤菌 16S rDNA 系统发育多样性 γ-变形菌纲

刺孢小克银汉霉Cunninghamella echinulata对和厚朴酚的特异性氧化(英文)

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2013年第6期22卷 531-534页

作者：王照华张德武闻正顺杨林王业玲韦善君戴均贵中央民族大学生命与环境科学学院北京100081 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050 浙江海洋学院食品与医药学院浙江舟山316000

在所试验的37株微生物中,发现刺孢小克银汉霉Cunninghamella echinulata AS 3.3400能在和厚朴酚的8位上进行特异性氧化作用。通过质谱、核磁共振、CD等波谱方法确定了产物(R)-magnolignan C(1)和(S)-magnolignan C(2)的结构。其中1为新... 详细信息

在所试验的37株微生物中,发现刺孢小克银汉霉Cunninghamella echinulata AS 3.3400能在和厚朴酚的8位上进行特异性氧化作用。通过质谱、核磁共振、CD等波谱方法确定了产物(R)-magnolignan C(1)和(S)-magnolignan C(2)的结构。其中1为新化合物。

关键词：和厚朴酚氧化刺孢小克银汉霉