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猪圆环病毒2a/2b亚型病毒株毒力分析

中国畜牧兽医 2013年第2期40卷 23-27页

作者：刘健张维谊鞠厚斌杨德全王建刘佩红周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

本研究对367份猪内脏样本进行PCV2检测,对阳性样本进行2a/2b鉴别诊断,并采用ORF2测序方法对部分阳性样本进行测序。在发病猪群中PCV2b阳性率远高于健康猪群,而健康猪群中PCV2a的阳性率高于发病猪群,从而在临床表型方面论证了PCV2b毒力强... 详细信息

本研究对367份猪内脏样本进行PCV2检测,对阳性样本进行2a/2b鉴别诊断,并采用ORF2测序方法对部分阳性样本进行测序。在发病猪群中PCV2b阳性率远高于健康猪群,而健康猪群中PCV2a的阳性率高于发病猪群,从而在临床表型方面论证了PCV2b毒力强于PCV2a。通过比较12株PCV2ORF2推导氨基酸序列的关键氨基酸位点,9株PCV2b毒株在ORF2氨基酸76位为I,131位为T;而3株PCV2a毒株在ORF2氨基酸76位为L,131位为P,据比对结果可知,PCV2b毒株为强毒株,PCV2a毒株为弱毒株。研究结果表明,PCV2的2种亚型2a/2b无论是临床表型还是ORF2基因型,毒力表现都是有差异的,且PCV2b毒力要强于PCV2a。

关键词： PCV2 2a 2b 毒力分析

猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及其在临床检测中的应用

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中国畜牧兽医 2010年第7期37卷 64-66页

作者：刘健曹火仁周锦萍鞠厚斌张维谊王建刘佩红上海市动物疫病预防控制中心上海201103 上海市松江区动物疫病预防控制中心上海201611

选择猪圆环病毒2型(PCV-2)基因保守区设计1对引物P1和P2,扩增536 bp的片段,该方法可以特异地检测出PCV-2的DNA,而对猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒及未接PCV-2的PK-15细胞均呈阴性;该法能检测出29 ng/L的病毒DNA。对扩增片段进行测... 详细信息

选择猪圆环病毒2型(PCV-2)基因保守区设计1对引物P1和P2,扩增536 bp的片段,该方法可以特异地检测出PCV-2的DNA,而对猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒及未接PCV-2的PK-15细胞均呈阴性;该法能检测出29 ng/L的病毒DNA。对扩增片段进行测序,结果表明扩增片段属于PCV-2。应用该方法对2008年度上海及周边地区送检的91份临床样本进行了PCV-2的检测,结果表明,阳性样本为52份,阳性率为57.14%。研究结果表明,建立的PCR方法检测PCV-2具有较好的敏感性和特异性,可用于PCV-2感染疑似病例的诊断及其分子流行病学调查。

关键词： PCV-2 PCR 检测

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上海地区猪和奶牛血清中TTV感染的检测

上海地区猪和奶牛血清中TTV感染的检测

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会

作者：孙泉云李凯航张维谊邓波鞠厚斌鞠龚讷上海市动物疫病预防控制中心

于2009年3～5月采集上海地区的200份牛血清和400份猪血清,采用ELISA和荧光PCR方法检测其TTV感染状况。经ELISA检测,牛血清样品中检出阳性数2份,阳性率1.0%;猪血清样品中共检出阳性数15份,阳性率3.75%,其中生产母猪和育肥肉猪的阳性率分...

于2009年3～5月采集上海地区的200份牛血清和400份猪血清,采用ELISA和荧光PCR方法检测其TTV感染状况。经ELISA检测,牛血清样品中检出阳性数2份,阳性率1.0%;猪血清样品中共检出阳性数15份,阳性率3.75%,其中生产母猪和育肥肉猪的阳性率分别为5.5%和2.0%,而荧光PCR检测结果均为阴性.

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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狂犬病病毒微滴式数字PCR检测方法的建立

中国兽医杂志 2023年第3期59卷 41-45页

作者：李鑫鞠厚斌葛菲菲杨德全沈海潇王建赵洪进上海市动物疫病预防控制中心上海长宁201103

为了建立可绝对定量狂犬病病毒(RABV)的微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本试验根据RABV基因组起始区域设计引物和探针,继而优化引物和探针浓度以及退火温度,并对建立的ddPCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行分析。结果显示:ddPCR方法的... 详细信息

为了建立可绝对定量狂犬病病毒(RABV)的微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本试验根据RABV基因组起始区域设计引物和探针,继而优化引物和探针浓度以及退火温度,并对建立的ddPCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行分析。结果显示:ddPCR方法的最佳引物和探针浓度分别为900 nmol/L和250 nmol/L,最佳退火温度为55℃;ddPCR方法的标准曲线相关系数(R~2)为0.999,呈现良好的线性关系;灵敏度高,最低可检测到3.37 copies/μL;特异性良好,与常见犬病原无交叉反应;重复性好,检测结果稳定。临床样品的检测结果显示,本试验建立的狂犬病病毒ddPCR方法与实时荧光定量反转录PCR(RT-PCR)方法的符合率为100%。结果表明,本试验建立的狂犬病病毒微滴式数字PCR方法灵敏度高、特异性强,可用于狂犬病病毒的绝对定量检测。

关键词：狂犬病微滴式数字PCR 检测方法

环介导等温扩增技术及其在动物疫病诊断中的应用

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中国动物传染病学报 2011年第2期19卷 75-81页

作者：杨德全鞠厚斌葛菲菲刘健王建周锦萍刘佩红上海市动物疫病预防控制中心上海201103

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplifi cation,LAMP)技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性强、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛... 详细信息

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplifi cation,LAMP)技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性强、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。本文综述了近年来LAMP在动物疫病检测中的具体应用实例和目前的研究进展,并对LAMP方法在动物疫病诊断中的应用前景做了展望。

关键词：环介导等温扩增技术动物疫病诊断

上海地区发病猪群猪圆环病毒2型阳性样本中其他病原混合感染状况调查

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中国动物传染病学报 2012年第6期20卷 77-82页

作者：刘健鞠厚斌张维谊杨德全王建刘佩红周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

本研究对2009年至2011年上海地区发病猪群内脏样本进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus,PCV2)检测,对PCV2阳性样本进行2a/2b分型检测,并对PCV2阳性样本进行其他病原混合感染状况调查。上海地区发病猪群PCV2阳性率平均为54.34%,以PCV2... 详细信息

本研究对2009年至2011年上海地区发病猪群内脏样本进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus,PCV2)检测,对PCV2阳性样本进行2a/2b分型检测,并对PCV2阳性样本进行其他病原混合感染状况调查。上海地区发病猪群PCV2阳性率平均为54.34%,以PCV2b单纯感染为主。在PCV2阳性样品中,其他病毒混合感染率平均达到60.2%,细菌混合感染率达到61.22%,病毒与细菌同时混合感染率为41.84%,平均混合感染率达到53.06%。研究表明,上海地区发病猪群PCV2阳性样本与其他病原混合感染比例较高,病毒主要以PRRSV为主,细菌主要以大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌及副猪嗜血杆菌为主;混合感染是导致猪群死亡的重要因素,也是当今上海地区猪群疫病的感染现状及发病模式。

关键词：发病猪群猪圆环病毒2型阳性样本混合感染

上海地区散养户病死猪伪狂犬病病毒感染情况调查

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上海畜牧兽医通讯 2016年第3期 36-37页

作者：鞠厚斌杨德全刘健葛菲菲李鑫周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

鉴于近年来本市养殖场户频频发生猪伪狂犬病例,笔者为了解本市猪伪狂犬病感染情况,对近年来采自我中心临床门诊病死猪内脏样品开展了猪伪狂犬病毒病荧光PCR检测。结果表明,被检病料中猪伪狂犬病病毒年平均阳性检出率为18.3%,其中以2012... 详细信息

鉴于近年来本市养殖场户频频发生猪伪狂犬病例,笔者为了解本市猪伪狂犬病感染情况,对近年来采自我中心临床门诊病死猪内脏样品开展了猪伪狂犬病毒病荧光PCR检测。结果表明,被检病料中猪伪狂犬病病毒年平均阳性检出率为18.3%,其中以2012、2013年临床检出率为最高,分别是24.4%、31.1%。可见,猪伪狂犬病病毒感染在上海地区散养户中仍未得到有效控制,是当今危害猪群健康的主要动物疫病,应加强防控。

关键词：猪伪狂犬病感染情况散养户上海

动物戊型肝炎病毒(HEV)RT-nPCR检测方法的建立及应用

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中国动物检疫 2010年第11期27卷 34-35页

作者：张维谊周锦萍王缦刘健鞠厚斌上海市动物疫病预防控制中心上海201103 上海科华生物工程股份有限公司上海201232

根据戊型肝炎病毒(HEV)的4个基因亚型,寻找其保守序列ORF2,成功设计了一套以Ⅰ、Ⅳ型为主兼顾Ⅱ、Ⅲ型的通用简并引物,摸索条件,建立检测动物戊型肝炎病毒反转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)的方法,扩增片段为507 bp。该方法检测所需时间... 详细信息

根据戊型肝炎病毒(HEV)的4个基因亚型,寻找其保守序列ORF2,成功设计了一套以Ⅰ、Ⅳ型为主兼顾Ⅱ、Ⅲ型的通用简并引物,摸索条件,建立检测动物戊型肝炎病毒反转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)的方法,扩增片段为507 bp。该方法检测所需时间为5 h,灵敏度可达10 pg,特异性强、重复性好;经优化研制了动物戊型肝炎病毒RT-nPCR检测试剂盒,保存期半年以上,该试剂盒可用于动物粪便、胆汁HEV RNA的检测。

关键词：戊型肝炎病毒 RT—nPCR 动物

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一例猪繁殖与呼吸综合征感染时的检测与分析

中国猪业 2017年第10期12卷 50-52页

作者：李凯航杨显超鞠厚斌吴秀娟陶田谷晟王建上海市动物疫病预防控制中心

为对猪场猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体的监测数据进行科学分析,通过绘制抗体曲线、分析抗体数据和进行病原学检测做出综合判断。结果表明,科学的数据分析才能揭示群体真实免疫状况并可提示感染,抗体监测的作用不容忽视。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征感染抗体监测