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三黄鸡临床多发性肿瘤相关的J亚群禽白血病病毒的分离鉴定及其病理学观察

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中国预防兽医学报 2011年第2期33卷 101-104页

作者：齐新永张维谊鞠厚斌邓波周锦萍刘建王曲直上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为研究蛋鸡多发性肿瘤的病因,本实验对病鸡肿瘤组织进行病毒分离、培养及PCR检测,均扩增出针对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85基因序列的阳性条带;组织病理学观察显示发病鸡呈现髓细胞瘤、血管瘤以及纤维肉瘤等多发性肿瘤的病理变化;肿... 详细信息

为研究蛋鸡多发性肿瘤的病因,本实验对病鸡肿瘤组织进行病毒分离、培养及PCR检测,均扩增出针对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85基因序列的阳性条带;组织病理学观察显示发病鸡呈现髓细胞瘤、血管瘤以及纤维肉瘤等多发性肿瘤的病理变化;肿瘤细胞通过血液转移、浸润,在肝和脾组织形成局灶性或弥漫性肿瘤病灶。免疫组化染色显示肿瘤组织内,部分肿瘤细胞呈现阳性反应,表明只有部分肿瘤细胞存在ALV-J感染,而大部分肿瘤细胞检测结果呈阴性。这些病毒检测为阴性的肿瘤细胞可能是正常细胞转化为肿瘤细胞大量克隆化增殖的结果。

关键词： J亚群禽白血病病毒多发性肿瘤组织病理学免疫组化

2015—2017年上海规模猪场和生猪屠宰场猪群中猪细小病毒病的病原学监测

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养猪 2018年第3期 127-128页

作者：孙泉云夏炉明鞠厚斌杨德全朱九超上海市动物疫病预防控制中心上海长宁201103

为了解上海规模猪场种猪和生猪屠宰场上市肉猪群的猪细小病毒(PPV)感染状况,于2015—2017年间采集上海市12个规模猪场种猪1 259份扁桃体样品和3个生猪屠宰场1 879份上市肉猪的颌下淋巴结、扁桃体样品,采用荧光PCR试验进行猪细小病毒病... 详细信息

为了解上海规模猪场种猪和生猪屠宰场上市肉猪群的猪细小病毒(PPV)感染状况,于2015—2017年间采集上海市12个规模猪场种猪1 259份扁桃体样品和3个生猪屠宰场1 879份上市肉猪的颌下淋巴结、扁桃体样品,采用荧光PCR试验进行猪细小病毒病的病原学检测。结果显示,规模猪场种猪样品中检出PPV阳性110份,阳性率8.74%,阳性率范围2.97%~19.27%,以2017年检出率为最高;生猪屠宰场1 879份上市肉猪样品中检出PPV阳性671份,阳性率35.71%,阳性率范围21.11%~61.71%,以2017年检出率为最高,说明猪群PPV感染的普遍性。

关键词：猪规模猪场屠宰场细小病毒病原学监测

犬细小病毒PCR检测方法的建立及其临床应用

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中国畜牧兽医 2008年第8期35卷 96-97页

作者：张维谊鞠厚斌刘健周锦萍龚国华卢军上海市动物疫病预防控制中心上海201103

针对犬细小病毒(CPV)特异保守的VP2基因设计一对引物,预扩增片段大小244 bp。通过摸索试验和特异性、敏感性试验,建立了对犬细小病毒进行快速检测的PCR方法,最低能检测出13 pg的CPV核酸模板,初步对13例疑似病料检测,阳性检出率为84.61%... 详细信息

针对犬细小病毒(CPV)特异保守的VP2基因设计一对引物,预扩增片段大小244 bp。通过摸索试验和特异性、敏感性试验,建立了对犬细小病毒进行快速检测的PCR方法,最低能检测出13 pg的CPV核酸模板,初步对13例疑似病料检测,阳性检出率为84.61%,结果表明建立的PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于CPV的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。

关键词：犬细小病毒 PCR检测应用

猫科动物冠状病毒感染情况调查及其基因的进化分析

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野生动物学报 2021年第1期42卷 21-28页

作者：杨德全鞠厚斌朱九超葛菲菲杨显超李鑫沈海潇赵洪进王建上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了解冠状病毒在猫科动物的感染情况,对采自上海某动物园的猫科动物144份样品进行检测,并对获得的阳性样品进行扩增和测序。结果显示:SARS-CoV-2荧光RT-PCR检测全部为阴性;FCoV荧光RT-PCR检测阳性3份。测序结果显示,检测到FCoV的ORF3、... 详细信息

为了解冠状病毒在猫科动物的感染情况,对采自上海某动物园的猫科动物144份样品进行检测,并对获得的阳性样品进行扩增和测序。结果显示:SARS-CoV-2荧光RT-PCR检测全部为阴性;FCoV荧光RT-PCR检测阳性3份。测序结果显示,检测到FCoV的ORF3、ORF7和S基因均呈遗传多样性,序列存在很大的个体间差异。3a、3b和3c基因主要表现为氨基酸突变。7a基因在第9位(F)、12位(V)和47位(S)均未发生氨基酸替换。它们均具有完整的7b基因。S基因的S1/S2裂解位点处有连续的R-R-S/A-R-R-S序列模体,符合FECV裂解位点的氨基酸序列特征。在第1045位(M)、1047位(S)和1108位(D)均没有发生氨基酸的完全替换。上述结果显示,这3株病毒均为致病性低的FECV。基于ORF3c和S2基因的遗传进化树显示,SH1951与SH2003和SH2004处于同一分支,与血清型Ⅰ型毒株的亲缘关系最近;而基于ORF7b基因的进化树显示,SH1951与SH2003和SH2004处于不同的遗传进化分支,表明它们之间的亲缘关系较远。因此,需要加强对野猫的管理与监测,防止野猫携带的FECV或其他病毒传染给豹猫。

关键词：新型冠状病毒猫冠状病毒血清型生物型序列分析

上海地区犬细小病毒病流行情况调查与病毒的分离鉴定

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畜牧与兽医 2020年第12期52卷 127-131页

作者：沈海潇李鑫杨德全鞠厚斌刘健龚国华赵洪进上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了解犬细小病毒病在上海地区各类犬中的流行与病毒遗传变异情况,在全市范围内对流浪犬和家养犬进行了犬细小病毒的集中监测。分别采集家养犬和流浪犬粪便样品121份与675份,通过荧光定量PCR检测病毒DNA,阳性率分别为9.10%和34.52%。将... 详细信息

为了解犬细小病毒病在上海地区各类犬中的流行与病毒遗传变异情况,在全市范围内对流浪犬和家养犬进行了犬细小病毒的集中监测。分别采集家养犬和流浪犬粪便样品121份与675份,通过荧光定量PCR检测病毒DNA,阳性率分别为9.10%和34.52%。将阳性病料处理后接种至猫肾传代细胞(F81),成功分离到4株犬细小病毒,对4株犬细小病毒的VP2基因测序,并结合GenBank中的相关序列进行遗传演化分析,确定了这4株犬细小病毒分别属于2c和2b亚型。选取了2c亚型犬细小病毒对其进行持续传代,至其细胞病变与病毒增殖效率逐渐稳定,将其纯化后测定TCID50,通过电镜对病毒形态进行观察。结果表明,纯化后的病毒在电镜下观察呈现二十面体立体对称,无囊膜,直径20 nm左右,为典型细小病毒样粒子,病毒滴度为107.0 TCID50/mL。本研究结果为上海地区犬细小病毒病防控提供了依据。

关键词：犬细小病毒亚型流行遗传演化病毒分离

雉鸡禽偏肺病毒、鸡毒支原体及细菌混合感染的诊断

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中国家禽 2017年第10期39卷 65-66页

作者：葛菲菲齐新永李鑫刘健杨德全鞠厚斌陆雪林周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为确定上海市某雉鸡场雉鸡发生眼睑肿胀的原因,通过PCR检测、病理组织学以及细菌学检查查找致病病原。PCR检测为鸡传染性鼻炎阴性、鸡毒支原体阳性和禽偏肺病毒(Avi-an metapneumovirus,a MPV)阳性。通过对F基因核苷酸序列分析,禽偏肺... 详细信息

为确定上海市某雉鸡场雉鸡发生眼睑肿胀的原因,通过PCR检测、病理组织学以及细菌学检查查找致病病原。PCR检测为鸡传染性鼻炎阴性、鸡毒支原体阳性和禽偏肺病毒(Avi-an metapneumovirus,a MPV)阳性。通过对F基因核苷酸序列分析,禽偏肺病毒属于B亚型。同时细菌分离到大肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌和链球菌。结果表明,B亚型禽偏肺病毒并混合感染鸡毒支原体和细菌是该场雉鸡群发病的原因。

关键词：雉鸡禽偏肺病毒鸡毒支原体细菌混合感染

活禽批发市场内家禽停留时间与H9亚型禽流感病毒检出的关系

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中国动物传染病学报 2017年第1期25卷 32-35页

作者：葛杰葛菲菲刘健杨德全李鑫鞠厚斌周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了解上海市活禽批发市场中家禽停留时间与H9亚型禽流感病毒检出之间的关系,连续4 d每隔24 h在2个批发市场各4个固定摊位共采集960份活禽咽喉/泄殖腔拭子样品。采用H9亚型荧光RT-PCR方法对样品进行检测,结果发现随着时间的推移,H9亚型... 详细信息

为了解上海市活禽批发市场中家禽停留时间与H9亚型禽流感病毒检出之间的关系,连续4 d每隔24 h在2个批发市场各4个固定摊位共采集960份活禽咽喉/泄殖腔拭子样品。采用H9亚型荧光RT-PCR方法对样品进行检测,结果发现随着时间的推移,H9亚型禽流感病毒在同一个摊位和不同摊位间传播扩散,并且随着家禽在批发市场内停留时间的延续,H9亚型禽流感病毒的阳性检出率明显上升,72 h时最高达到24.58%,提示我们应加强活禽批发市场禽流感的监测和监管。

关键词： H9亚型禽流感病毒活禽批发市场家禽停留时间

一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006的全基因组序列测定及遗传演化分析

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江苏农业学报 2012年第4期28卷 815-822页

作者：杨德全葛菲菲刘健鞠厚斌王建刘佩红周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了解鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006(DK/SH/Y20/06)的来源、特征及其分子演化规律,进一步丰富水禽流感病毒的基因库,对该病毒8个基因片段分别进行了扩增和序列测定,利用分子生物学软件对测序结果进行序列分析,并与Ge... 详细信息

为了解鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006(DK/SH/Y20/06)的来源、特征及其分子演化规律,进一步丰富水禽流感病毒的基因库,对该病毒8个基因片段分别进行了扩增和序列测定,利用分子生物学软件对测序结果进行序列分析,并与GenBank登录的相关病毒进行了遗传演化分析。结果表明,DK/SH/Y20/06的HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于欧亚分支;NA基因与A/mallard/Yanchen/2005(H4N6)在同一分支内,核苷酸序列同源性为98.3%;而PB2、PB1、NP、PA基因与目前在国内流行的H6亚型禽流感病毒关系密切;M基因与A/environment/Korea/CSM05/2004(H3N1)处于同一分支;而NS基因与A/wild duck/Korea/YS44/2004(H1N2)同源性最高。且DK/SH/Y20/06的8个基因与美洲H4N6亚型AIV分离株均不处在同一遗传进化分支上,相互之间遗传关系较远。可见,DK/SH/Y20/06可能是由H4N6、H6N2、H6N5、H3N1和H1N2等不同亚型来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。

关键词：鸭源禽流感病毒 H4N6亚型全基因组序列遗传演化分析基因重组

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上海地区一株猪伪狂犬病毒的分离与鉴定

中国畜禽种业 2013年第7期9卷 124-125页

作者：刘健杨德全鞠厚斌葛菲菲王建周锦萍上海市动物疫病预防控制中心 201103

上海地区某猪场发生疑似伪狂犬病毒感染,采集其内脏样品进行伪狂犬病毒的分离,并采用细胞病变观察和荧光PCR方法进行鉴定。结果表明采用BHK-21细胞能够从该发病猪体内分离到猪伪狂犬病毒,其分离株能够引起BHK-21细胞产生典型的细胞病变... 详细信息

上海地区某猪场发生疑似伪狂犬病毒感染,采集其内脏样品进行伪狂犬病毒的分离,并采用细胞病变观察和荧光PCR方法进行鉴定。结果表明采用BHK-21细胞能够从该发病猪体内分离到猪伪狂犬病毒,其分离株能够引起BHK-21细胞产生典型的细胞病变。该猪场发生猪伪狂犬后,已连续造成2头成年猪的死亡,全群发病率高达50%,这与以往伪狂犬病并不造成成年猪的死亡不同,需要对该分离株进行进一步病原特性的研究。

关键词：猪伪狂犬病死亡病毒分离鉴定细胞病变 PCR