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蜱及蜱媒传染病

上海畜牧兽医通讯 2011年第4期 52-53页

作者：周锦萍张维谊鞠厚斌上海市动物疫病预防控制中心上海201103

蜱是许多种脊椎动物体表的暂时性寄生虫,是一些人兽共患病的传播媒介和贮存宿主。家畜中受侵害的宿种包括马、黄牛、奶牛、水牛、牦牛、绵羊、山羊、骆驼、犬、梅花鹿、大熊猫等。最常见、危害最严重的是硬蜱,其次是软蜱。近年我国多个... 详细信息

蜱是许多种脊椎动物体表的暂时性寄生虫,是一些人兽共患病的传播媒介和贮存宿主。家畜中受侵害的宿种包括马、黄牛、奶牛、水牛、牦牛、绵羊、山羊、骆驼、犬、梅花鹿、大熊猫等。最常见、危害最严重的是硬蜱,其次是软蜱。近年我国多个省市发生蜱媒传染病,造成数十人死亡。目前，此病已蔓延到我国的12个省，引起民众的广泛关注。

关键词：传染病硬蜱人兽共患病脊椎动物传播媒介寄生虫暂时性梅花鹿

共表达AsiaⅠ型口蹄疫病毒P1-2A和3C基因重组山羊痘病毒的构建及鉴定

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中国畜牧兽医 2009年第5期36卷 87-91页

作者：鞠厚斌张强周锦萍刘佩红卫广森上海市动物疫病预防控制中心上海201103 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046

将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因与启动绿色荧光蛋白双向串连痘苗病毒启动子相连,以KpnⅠ为插入位点,将整体基因片段插入山羊痘病毒转移载体骨架pUC119-TK之中,构建共表达重组山羊痘病毒转移载体pTK-P7.5-GFP-P1... 详细信息

将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因与启动绿色荧光蛋白双向串连痘苗病毒启动子相连,以KpnⅠ为插入位点,将整体基因片段插入山羊痘病毒转移载体骨架pUC119-TK之中,构建共表达重组山羊痘病毒转移载体pTK-P7.5-GFP-P12A3C。与疫苗弱毒株山羊痘病毒共转染BHK21细胞,经绿色荧光筛选,RT-PCR检测,成功获得能正确表达目的蛋白的重组山羊痘病毒株vTK-3CP1-GFP。

关键词：口蹄疫病毒山羊痘病毒 P12A基因 3C基因 TK基因

牛白血病前病毒Taqman荧光PCR检测方法的建立

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上海畜牧兽医通讯 2014年第1期 12-13页

作者：李凯航鞠厚斌杨显超宁昆王建上海市动物疫病预防控制中心上海201103

设计并合成荧光引物，建立了Taqman荧光PCR体系，可快速检测全血样品中的牛白血病前病毒DNA。所建立的荧光PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸，而对牛病毒性腹泻-粘膜病毒（BVDV ）、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV ）以及羊胎肾细胞（FLK... 详细信息

设计并合成荧光引物，建立了Taqman荧光PCR体系，可快速检测全血样品中的牛白血病前病毒DNA。所建立的荧光PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸，而对牛病毒性腹泻-粘膜病毒（BVDV ）、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV ）以及羊胎肾细胞（FLK ）、牛布鲁氏菌扩增均呈阴性反应，对pBST-pol重组质粒的检测敏感性可达0．32拷贝。重复性实验的Ct值变异系数介于0．67％～1．16％之间，稳定性实验的Ct值变异系数为3．14％。采用建立的Taqman荧光PCR体系和OIE推荐的套式PCR对94份临床样品进行检测，两者定性符合率达到97．87％。

关键词：牛白血病前病毒引物

2018年上海市活禽市场6株H9N2亚型禽流感病毒全基因进化分析

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中国动物传染病学报 2021年第2期29卷 65-70页

作者：葛菲菲吴杰李鑫刘健杨德全鞠厚斌周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103 扬州大学生物科学与技术学院扬州225009

为了解上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对2018年分离的6株H9N2AIV的8个基因片段进行PCR扩增、克隆和测序,并对获得的HA和NA基因序列进行同源性和关键位点分析。结果显示:6个分离株的HA裂解位点均为R... 详细信息

为了解上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对2018年分离的6株H9N2AIV的8个基因片段进行PCR扩增、克隆和测序,并对获得的HA和NA基因序列进行同源性和关键位点分析。结果显示:6个分离株的HA裂解位点均为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的分子特征;并对6株分离株HA基因分析了糖基化位点;受体结合位点除198位、202位和203位有变异外,其他位点均保守;226位氨基酸均为L,因此具有与哺乳动物唾液酸α2-6受体结合的特征。此外也对NA基因红细胞结合位点,活性中心以及抗原决定簇进行了分析,在红细胞结合位点403位发生突变,在活性中心(同时为抗原决定簇)143位发生突变,这6株病毒其余位点均保守。HA基因进化树显示,上述6株分离株均属于近几年在中国鸡群中流行的Y280分支。从8个基因片段组成方式分析这6个毒株属于G57基因型。以上研究为H9N2亚型AIV的防控和疫苗研制提供了科学参考。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因 NA基因进化树

2019年上海地区H9N2禽流感病毒分子特征及演化分析

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畜牧与兽医 2021年第1期53卷 66-72页

作者：葛杰徐志远李鑫刘健杨德全鞠厚斌葛菲菲上海市动物疫病预防控制中心上海201103 扬州大学生物科学与技术学院江苏扬州225009

为了解上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对2019年分离的4株H9N2 AIV的8个基因节段进行PCR扩增、克隆和测序,并对获得的8个基因序列进行同源性以及基因进化分析,对与病毒适应性增加的关键氨基酸位点进... 详细信息

为了解上海市活禽市场H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株的遗传变异情况,本研究对2019年分离的4株H9N2 AIV的8个基因节段进行PCR扩增、克隆和测序,并对获得的8个基因序列进行同源性以及基因进化分析,对与病毒适应性增加的关键氨基酸位点进行了分析,并和目前我国使用的H9N2流感疫苗毒株HA上的抗原位点进行了比较。结果:4个分离株的HA基因仍然属于Y280/97,8个基因节段的重组模式属于G57;裂解位点均为PSRSSR/GLF,符合低致病性AIV的分子特征;这4株病毒存在多个与适应性增加相关的氨基酸突变。在已报道的33个抗原位点中,这4株病毒与我国目前使用的2种H9N2禽流感疫苗毒株(A/chicken/Shandong/6/96(6/96)和A/chicken/Shanghai/F/98(F/98))相比较,最大差异18个抗原位点。以上研究为H9N2亚型AIV的防控和疫苗研制提供了科学参考。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒基因进化分析低致病性

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鸡传染性贫血病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

畜牧与兽医 2015年第10期47卷 112-114页

作者：杨德全王建沈莉萍鞠厚斌刘健葛菲菲李鑫张维谊周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了查明浦东某鸡场三黄肉鸡发生疑似鸡传染性贫血的病因,临床调查后采集相应病料,实验室研磨处理后备用。对病料进行鸡传染性贫血病毒(CIAV)的PCR检测、细菌分离鉴定及药敏试验。结果显示:3份病料接种鸡胚,收获的尿囊液PCR检测均为CIA... 详细信息

为了查明浦东某鸡场三黄肉鸡发生疑似鸡传染性贫血的病因,临床调查后采集相应病料,实验室研磨处理后备用。对病料进行鸡传染性贫血病毒(CIAV)的PCR检测、细菌分离鉴定及药敏试验。结果显示:3份病料接种鸡胚,收获的尿囊液PCR检测均为CIAV阳性,且细菌分离确定有大肠杆菌感染。药敏试验显示:分离的大肠杆菌对头孢噻呋、大观霉素敏感,对庆大霉素表现为中介,对阿米卡星、阿莫西林等13种药物均表现耐药。因此表明本次疫情为CIAV与大肠杆菌混合感染引起。

关键词：鸡传染性贫血病毒大肠杆菌混合感染

用于病毒高通量测序样品前处理及核酸扩增方案概述

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中国兽医杂志 2016年第12期52卷 115-117页

作者：杨德全鞠厚斌刘健葛菲菲李鑫王建杨显超邓波葛杰周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海闵行201103

随着测序技术水平的改进,测序通量的不断提高,高通量测序技术得到迅猛的发展与普及,其在病毒学领域的应用也越来越广泛。通常,有效的降低宿主细胞和其他微生物基因的干扰并提高病毒核酸的丰度是鉴别病毒的重要前提,分离、扩增、获取目... 详细信息

随着测序技术水平的改进,测序通量的不断提高,高通量测序技术得到迅猛的发展与普及,其在病毒学领域的应用也越来越广泛。通常,有效的降低宿主细胞和其他微生物基因的干扰并提高病毒核酸的丰度是鉴别病毒的重要前提,分离、扩增、获取目的基因的序列则是鉴别病毒的关键。然而,临床上获得的样品中病毒含量一般较低,从少量高度复杂的临床样品中发现目的序列如同＂大海捞针＂,因此,

关键词：病毒基因组测序技术核酸扩增宿主细胞目的基因核酸序列信息病毒颗粒丰度 DNA DNase

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H9N2亚型禽流感病毒抗原性变异的研究

中国动物传染病学报 2015年第5期23卷 10-14页

作者：葛菲菲刘健杨德全李鑫鞠厚斌周锦萍上海市动物疫病预防控制中心上海201103

为了解不同年分离的H9N2亚型禽流感病毒（Avian infl uenza virus,AIV）之间的抗原相关性,挑选2002年、2006～2014年在上海市分离的14株H9N2亚型禽流感病毒,通过血凝抑制（hemagglutination inhibition,HI）交叉试验进行抗原性比较和分... 详细信息

为了解不同年分离的H9N2亚型禽流感病毒（Avian infl uenza virus,AIV）之间的抗原相关性,挑选2002年、2006～2014年在上海市分离的14株H9N2亚型禽流感病毒,通过血凝抑制（hemagglutination inhibition,HI）交叉试验进行抗原性比较和分析。HI试验结果显示,2002年,2006～2014年这14株H9N2亚型AIV不同毒株间已经发生了抗原漂移,划分成4个不同的抗原群,A/Chicken/Shanghai/Y1/2002和A/Chicken/Shanghai/Y1/2006归为一个抗原群,A/Chicken/Shanghai/C/2011独自成为一个抗原群,A/Pigeon/Shanghai/JC1/2013、A/Chicken/Shanghai/1107/2013归为同一个抗原群,其余毒株均为一个抗原群。综上所述,随着时间的推移,H9N2 AIV抗原发生了不同程度的漂变,但是也存在在某个时间段多种抗原群共存的情况。该研究结果从理论上为上海市制定禽流感防控策略,有效防制H9N2 AIV流行提供了科学的指导,为生产H9N2亚型流感免疫与疫苗候选毒株的选择提供参考依据。

关键词： H9N2亚型禽流感病毒交叉HI试验抗原漂移

猪圆环病毒2型继发感染大肠杆菌和副猪嗜血杆菌的诊断

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中国畜牧兽医 2009年第9期36卷 147-149页

作者：刘健周锦萍张维谊鞠厚斌沈莉萍徐锋上海市动物疫病预防控制中心上海201103

江苏某猪场断奶仔猪发生以体温升高为主要临床特征的传染病,发病率和死亡率均较高。本研究对其送检的病死猪样本进行了病原学检测和病原的分离与鉴定,结果从其内脏样本中检测和分离到多种病原。通过细菌学方法分离到副猪嗜血杆菌和大肠... 详细信息

江苏某猪场断奶仔猪发生以体温升高为主要临床特征的传染病,发病率和死亡率均较高。本研究对其送检的病死猪样本进行了病原学检测和病原的分离与鉴定,结果从其内脏样本中检测和分离到多种病原。通过细菌学方法分离到副猪嗜血杆菌和大肠杆菌,通过病毒学方法分离到猪圆环病毒2型(PCV-2)。通过临床诊断、病理解剖和实验室确诊,综合判断该猪场感染了PCV-2,并继发感染了副猪嗜血杆菌和大肠杆菌,造成较大损失。

关键词： PCV-2 大肠杆菌副猪嗜血杆菌诊断