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不同品系桂郁金主要表型性状的差异和相关分析

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辽宁中医杂志 2017年第6期44卷 1259-1262页

作者：靳雅惠西安外事学院陕西西安710000

目的:分析不同品系桂郁金表型性状的差异和相关性。方法:选择广西产30个桂郁金品系,测定17个主要表型参数(包括8个描述型性状和9个数量型性状),运用SPSS 22.0对数据进行相关性分析、主成分分析和聚类分析。结果:不同品系的桂郁金表型性... 详细信息

目的:分析不同品系桂郁金表型性状的差异和相关性。方法:选择广西产30个桂郁金品系,测定17个主要表型参数(包括8个描述型性状和9个数量型性状),运用SPSS 22.0对数据进行相关性分析、主成分分析和聚类分析。结果:不同品系的桂郁金表型性状变异丰富,最优良的参比品系是16号。主成分分析表明桂郁金产量和桂郁金形态可以作为筛选桂郁金优良品系的指标,聚类分析按照桂郁金产量分为3类。结论:不同品系桂郁金表型性状存在显著差异和相关性,多因素分析在不同品系桂郁金的研究中具有可行性,可为桂郁金优良品系评价及筛选等研究提供一定的参考依据。

关键词：桂郁金表型性状相关分析

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桂郁金种质资源的SSR分析

中华中医药学刊 2017年第9期35卷 2296-2298页

作者：靳雅惠西安外事学院陕西西安710000

目的:为了了解桂郁金种质资源的遗传多样性和亲缘关系。方法:利用SSR分子标记技术对广西12个不同产地的35份桂郁金种质进行分析,并运用NTsys 2.10e软件进行聚类。结果:11条引物扩增得到片段52条,其中35条为多态性片段,多态率达67.31%,... 详细信息

目的:为了了解桂郁金种质资源的遗传多样性和亲缘关系。方法:利用SSR分子标记技术对广西12个不同产地的35份桂郁金种质进行分析,并运用NTsys 2.10e软件进行聚类。结果:11条引物扩增得到片段52条,其中35条为多态性片段,多态率达67.31%,遗传相似系数的范围在0.63~1.00之间。结论:广西12个不同产地的桂郁金种质存在着较大的差异,遗传多样性较丰富。该结果可以为桂郁金优良种质资源筛选,良种繁育等研究提供一定的参考依据。

关键词：桂郁金种质 SSR 遗传多样性

适用于SSR分析的广西莪术DNA提取方法考察

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中国实验方剂学杂志 2015年第4期21卷 80-83页

作者：杨妮苏伟敏靳雅惠方彬华王建广西中医药大学药学院南宁530001

目的：获取适片j于广两莪术简单序列重复（SSR）分析的高质量DNA，为陔品种的遗传多样性研究提供参考。方法：选择广西莪术嫩叶为材料，采用经典十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法和改良CTAB法提取广西莪术总DNA，考察手工和机器研磨的差... 详细信息

目的：获取适片j于广两莪术简单序列重复（SSR）分析的高质量DNA，为陔品种的遗传多样性研究提供参考。方法：选择广西莪术嫩叶为材料，采用经典十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）法和改良CTAB法提取广西莪术总DNA，考察手工和机器研磨的差异性，采用UV检测DNA浓度和纯度，DNA作为模板进行聚合酶链反应（PCR）扩增，引物选择clest SSR-01，clest SSR-03，clest SSR-06，clest SSR-08，clest SSR-14，clest SSR-15，利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA扩增效果。结果：改良CTAB法所提DNA的A260nm／A280nm 1.8-2.0，蛋白质、多糖、RNA等物质去除较彻底，DNA符合PCR扩增结果要求，使用姜黄属通用引物能扩增出清晰条带。经典CTAB法所提DNA的A260nm／A280nm 1.50-1.60，含较多杂质，无法用于PCR扩增等分子生物学研究。结论：改良CTAB法提取所得DNA质量较好，可有效上除次生代谢产物对DNA的干扰，适用于广西莪术SSR分子标记和遗传多样性分析。

关键词：广西莪术基因组DNA 简单序列重复引物研磨方式

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高产高油桂郁金种质的筛选

中国药房 2017年第12期28卷 1673-1676页

作者：靳雅惠杨传强王建广西中医药大学药学院南宁530001

目的:建立分析高产高油桂郁金挥发油的方法,以期为桂郁金良种选育繁育提供参考。方法:采用气相色谱-质谱联用法。色谱条件:色谱柱为HP-5MS石英弹性毛细管柱,载气为高纯氦气(99.999%),载气流量为1.0 m L/min,进样口温度为250℃,色谱柱初... 详细信息

目的:建立分析高产高油桂郁金挥发油的方法,以期为桂郁金良种选育繁育提供参考。方法:采用气相色谱-质谱联用法。色谱条件:色谱柱为HP-5MS石英弹性毛细管柱,载气为高纯氦气(99.999%),载气流量为1.0 m L/min,进样口温度为250℃,色谱柱初始温度为50℃(程序升温),分流进样,分离比为10∶1。质谱条件:电离方式为电子轰击离子源,电离能量为70 e V,离子源温度为230℃,四极杆温度为150℃,传输线温度为280℃,电子倍增器电压为1 588 V,质量扫描范围为m/z 45~500。从100株不同种质样品中筛选产量大、含油量高的桂郁金较好种质,比较筛选单株的挥发油成分及各成分的相对含量,采用SPSS 22.0统计软件进行聚类分析。结果:共筛选出10个桂郁金高产高油种质,鉴定出54种化合物,10个不同种质的桂郁金挥发油共有成分为樟脑、1-石竹烯、γ-榄香烯、莪术烯、吉马酮、新莪术二酮,大多数种质含有龙脑、异龙脑、δ-榄香烯、大根香叶烯、白菖烯。C78、C104、药用2的产量、挥发油含量以及挥发油中有效成分相对含量均较高。10个桂郁金高产高油种质可以分为3类。结论:该研究基本明确了高产高油桂郁金挥发油的主要化学成分,C78、C104、药用2为高产高油桂郁金种质中较优良的品系。

关键词：桂郁金种质挥发油成分高产高油

桂郁金EST资源的SSR信息分析及EST-SSR标记开发

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中国实验方剂学杂志 2016年第24期22卷 37-42页

作者：靳雅惠苏伟敏杨妮王建广西中医药大学药学院南宁530001

目的:分析桂郁金EST中SSR位点分布规律,开发桂郁金EST-SSR引物,探讨EST-SSR用于桂郁金品种遗传多样性的可行性。方法:从NCBI公共数据库下载姜黄属EST序列(expressed sequence tag,EST)12 678条,利用MISA软件对其进行SSR位点查找,选出符... 详细信息

目的:分析桂郁金EST中SSR位点分布规律,开发桂郁金EST-SSR引物,探讨EST-SSR用于桂郁金品种遗传多样性的可行性。方法:从NCBI公共数据库下载姜黄属EST序列(expressed sequence tag,EST)12 678条,利用MISA软件对其进行SSR位点查找,选出符合条件的序列,采用Primer 5.0软件设计EST-SSR引物,利用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳研究这些EST-SSR引物PCR扩增的特点,进一步验证开发结果的合理性与有效性。结果:下载得到的12 678条EST序列中,共有926条序列包含SSR位点,占整个EST数据库的7.30%,其中SSR位点所占比例最大的是二核苷酸重复序列,三核苷酸和四核苷酸次之,分别为623(50.90%)个,388(31.70%)个和125(10.21%)个。根据筛选得到的微卫星序列共设计了165个EST-SSR引物对,选择其中92分以上的24个合成。PCR检测表明,21个引物对(87.50%)可以扩增出稳定清晰的带型;在6份不同种质桂郁金中检测到13对EST-SSR引物有多态性,占设计引物的54.17%。利用13对验证的EST-SSR引物对20个桂郁金品种进行了亲缘关系分析。结论:桂郁金EST-SSR标记开发的效率较高,是桂郁金SSR标记开发的重要措施,对于桂郁金品种鉴定和遗传多样性分析以及育种等方面具有重要的意义。

关键词：桂郁金表达序列标签简单重复序列引物开发

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广西莪术高油种质GC-MS分析

陕西农业科学 2020年第2期66卷 60-62,66页

作者：靳雅惠西安外事学院陕西西安710077

目的:分析广西莪术高油种质的挥发油成分。方法:GC-MS法被用以15份广西莪术高油种质挥发油的测定。结果:挥发油含量及成分由于药材种质不同而区别较大,相同成分与特有成分共存,色谱峰数量也存在差异,共检出化合物31种。结论:综合挥发油... 详细信息

目的:分析广西莪术高油种质的挥发油成分。方法:GC-MS法被用以15份广西莪术高油种质挥发油的测定。结果:挥发油含量及成分由于药材种质不同而区别较大,相同成分与特有成分共存,色谱峰数量也存在差异,共检出化合物31种。结论:综合挥发油含量及有效成分含量两方面因素,筛选出优良种质D11、B97、A28,该结果可以在广西莪术育种等方面提供参考。

关键词：广西莪术 GC-MS 优良种质开发

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桂郁金SSR-PCR反应体系的建立及优化

陕西农业科学 2020年第6期66卷 53-55页

作者：靳雅惠西安外事学院陕西西安710077

目的:对桂郁金SSR-PCR反应体系进行建立与优化,使其适合分析桂郁金遗传多样性等研究内容。方法:通过正交设计法对PCR反应体系的引物,模板,2×Taq PCR MasterMix(包括Tap DNA聚合酶,dNTPs,缓冲液等)以及扩增程序进行建立和优化。结果:桂... 详细信息

目的:对桂郁金SSR-PCR反应体系进行建立与优化,使其适合分析桂郁金遗传多样性等研究内容。方法:通过正交设计法对PCR反应体系的引物,模板,2×Taq PCR MasterMix(包括Tap DNA聚合酶,dNTPs,缓冲液等)以及扩增程序进行建立和优化。结果:桂郁金SSR-PCR反应的最佳体系是在15μL的反应体系中,DNA模板2.5μL(25 ng·μL^-1),引物1.0μL(1.0μmol·L^-1),2×Taq PCR MasterMix6μL,其中Tap DNA聚合酶0.05 U·μL^-1,Mg23.0 mmol·L^-1,dNTPs0.3 mmol·L^-1,加ddH-2O至15μL。PCR反应程序的最佳参数设定为变性30 s,退火30 s,延伸45 s,循环35次。结论:建立了桂郁金SSR-PCR反应体系,并通过10份桂郁金材料进行验证,结果显示该体系稳定可靠,可以为桂郁金引物开发,良种选育繁育等相关研究提供参考。

关键词：桂郁金 SSR-PCR 正交设计体系优化

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桂郁金优良种质的筛选

陕西农业科学 2020年第11期66卷 29-33,86页

作者：靳雅惠西安外事学院陕西西安710077

[目的]通过产量及化学成分分析,建立桂郁金优良种质筛选标准,优选桂郁金种质资源,提高桂郁金育种优势。[方法]参考2015版《中国药典》要求对桂郁金产量进行测定,采用挥发油测定法对桂郁金挥发油进行提取以及GC-MS法分析,利用HPLC法对桂... 详细信息

[目的]通过产量及化学成分分析,建立桂郁金优良种质筛选标准,优选桂郁金种质资源,提高桂郁金育种优势。[方法]参考2015版《中国药典》要求对桂郁金产量进行测定,采用挥发油测定法对桂郁金挥发油进行提取以及GC-MS法分析,利用HPLC法对桂郁金姜黄素类成分(姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素)进行含量测定,根据药用植物良种选育标准,确立更加严格的桂郁金优良种质筛选标准。[结果]50份不同种质的桂郁金无论在产量还是化学成分(挥发油及姜黄素类)方面均存在着显著的差异性,根据桂郁金优良种质筛选标准,共筛选出了C104、C16、A81等9个优良种质,其中C104为最优良种质。[结论]研究建立的优良种质筛选标准能够筛选出高产优质的桂郁金种质,这将有助于桂郁金良种繁育及后续药理学方面的研究。

关键词：桂郁金种质筛选化学成分

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桂郁金种质资源姜黄素类化学成分分析

陕西农业科学 2021年第9期67卷 61-64页

作者：靳雅惠西安外事学院陕西西安710077

[目的]探索桂郁金种质资源姜黄素类化学成分分析方法。[方法]:HPLC法被用以检测桂郁金姜黄素类成分,选用Agilent SB-C18色谱柱(250mm×4.6mm, 5μm),流动相为乙腈-冰醋酸水溶液,采用梯度洗脱,以420 nm作为检测波长,以30℃作为柱温;流速1... 详细信息

[目的]探索桂郁金种质资源姜黄素类化学成分分析方法。[方法]:HPLC法被用以检测桂郁金姜黄素类成分,选用Agilent SB-C18色谱柱(250mm×4.6mm, 5μm),流动相为乙腈-冰醋酸水溶液,采用梯度洗脱,以420 nm作为检测波长,以30℃作为柱温;流速1 mL·min-1。[结果]桂郁金种质资源姜黄素类化学成分在测定范围内线性关系良好;符合要求的试验包括精密度、稳定性、重复性、加样回收试验。桂郁金姜黄素类化学成分的种类和含量由于种质不同而存在明显差异。[结论]该方法操作简单,适用于桂郁金种资源姜黄素类化学成分分析,其中桂郁金种质B71、C16在姜黄素类成分含量方面表现突出,为桂郁金优良种质。

关键词：桂郁金种质姜黄素 HPLC