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作者：靳旺杰南方医科大学

学位级别：硕士

背景与目的地中海贫血(Thalassemia)又名“海洋性贫血”,以下简称“地贫”,是世界上最早被阐明分子基础的人类单基因病之一。在地中海、中东、印度和东南亚等沿线地区高发,全世界地贫基因的携带率约为1.5%～2%。我国南方地区,特别是广... 详细信息

背景与目的地中海贫血(Thalassemia)又名“海洋性贫血”,以下简称“地贫”,是世界上最早被阐明分子基础的人类单基因病之一。在地中海、中东、印度和东南亚等沿线地区高发,全世界地贫基因的携带率约为1.5%～2%。我国南方地区,特别是广东、广西和海南等地,发生率较高,地贫基因的携带率约为3%～20%。地贫的临床表型多样,轻者需要反复输血,重者未成年即夭折甚至胎死腹中,给家庭和社会带来巨大的精神压力和经济负担。目前对于重型地贫尚无彻底根治办法,最为有效的治疗措施就是进行骨髓干细胞移植。但是骨髓移植受到很多因素影响,譬如:难以找到匹配供者;移植手术费用昂贵,普通家庭难以承受;有复发风险,术后需要免疫治疗及不断监测等等。因此仅有少数患者能够进行骨髓移植,大部分的重型地贫患儿仍然无法得到有效的治疗。通过地贫基因诊断及产前诊断,控制和降低重型地贫患儿的出生率是目前地贫防治工作的重点。地贫为常染色体隐性遗传病,致病基因为人类珠蛋白基因,根据其致病基因不同主要分为α和β两类。α-珠蛋白基因位于16号染色体16p13.3位点,β-珠蛋白基因位于11号染色体11p15.3位点。目前世界上已报道的地贫基因突变类型共有500余种。国内市场上α-地贫基因检测试剂盒主要包括3种缺失突变(--SEA、-α3.7和-α4.2)和3种点突变(CS、WS和QS),β-地贫基因检测试剂盒主要为17种点突变(CD41-42、CD43、IVS-Ⅱ-654、-28、-29、-30、-32、CD71-72、βE、CD17、CD31、CD14-15、CD27-28、IVS-Ⅰ-1、、IVS-Ⅰ-5、、CAP+1 和 IntM)。这两类试剂盒涵盖了中国人群中95%左右的α-和β-地贫致病基因缺陷,仍有约5%罕见或未知突变可能会被漏诊,需要进行罕见地贫基因检测明确或排除病因。罕见地贫基因突变的检测方法因突变类型不同而不同:α-和β-珠蛋白基因测序分析主要用于检测点突变和小片段的缺失或重复突变;Gap-PCR可针对东南亚缺失型HPFH(遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合征)、中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫、泰国型和菲律宾型α-地贫以及香港型α-地贫基因进行检测;此外,MLPA(多重连接探针扩增技术)、DHPLC(变性高效液相色谱分析)等方法也被用于一些罕见缺失型地贫基因的检测。开展罕见地贫基因检测,并应用于产前诊断,可有效降低重型地贫患儿的出生率;同时可以发现一些新发突变类型,丰富地贫基因突变谱;为改进临床诊断试剂盒提供数据支持,提高试剂盒检测准确性,降低漏诊率。材料与方法1.研究对象分析2011-2016年间在南方医科大学南方医院产前诊断中心行常见地贫基因检测的所有病例。从中筛选出表型和基因型不符的病例。2.方法对于表型和基因型不符的疑似罕见地贫病例,根据其表型资料不同,分别进行相应的罕见地贫基因检测。2.1 α-珠蛋白基因测序主要针对表型为小细胞低色素,血红蛋白(Hb)电泳结果HbA23.5%,常见β-地贫基因检测正常的病例;或者表型为重型β-地贫,但基因型仅为携带者的患者。2.2东南亚缺失型HPFH和中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫基因检测主要针对表型为小细胞低色素,Hb电泳HbF增高(一般大于8%),但常见β-地贫基因检测正常病例;或者患儿基因型为ββ-地贫纯合子,但父母一方常见β-地贫基因检测正常的情况。2.3泰国型和菲律宾型α-地贫基因检测主要针对表型为小细胞低色素,血红蛋白(Hb)电泳结果HbA2<2.5%,排除缺铁性贫血,常见α-地贫基因检测正常的病例;或者生育过Bart's水肿胎,但父母一方常见α-地贫基因检测正常的情况。2.4香港型α-地贫基因检测主要针对常见缺失型α-地贫基因检测琼脂糖电泳结果为三条带(3.7带,正常带,SEA带);或者电泳为两条带(弱的3.7带和正常带)的病例。2.5已经排除泰国型和菲律宾型α-地贫,生育过HbH病患儿或Bart's水肿胎,但父母一方常见α-地贫基因检测正常的情况,需要通过MLPA检测罕见缺失型α-地贫;已排除东南亚缺失型HPFH和中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫,生育过纯合子重型地贫患儿,但父母一方常见β-地贫基因检测正常的情况,需要通过MLPA检测罕见缺失型β-地贫基因。结果1.对45例疑似病例进行α-珠蛋白基因测序分析,共发现23例罕见α-地贫基因突变,11种突变类型。对108例疑似罕见病例进行ββ-珠蛋白基因测序分析,共发现79例罕见β-地贫基因突变,35种突变类型。2.对85例疑似病例进行东南亚缺失型HPFH和中国型Gγ+(Aγδβ)0突变检测,共检测出23例东南亚缺失型HPFH突变,40例中国型Gγ+(Aγδβ)0突变。3.对

关键词：罕见地中海贫血基因突变表型基因型

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MCV、MCH和血红蛋白A2检测在地中海贫血筛查中的价值

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中华妇产科杂志 2012年第2期47卷 96-100页

作者：李莉艳李强宋兰林靳旺杰麻振华余艳红钟梅南方医科大学南方医院妇产科广州510515 南方医科大学南方医院检验科广州510515

目的探讨平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白（Hb）含量（MCH）及HbA2等3项指标在地中海贫血（地贫）筛查中的价值,以及临床不同情况下地贫筛查的最佳策略.方法选择2008年9月-2011年5月南方医科大学南方医院妇产科及内科门诊... 详细信息

目的探讨平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白（Hb）含量（MCH）及HbA2等3项指标在地中海贫血（地贫）筛查中的价值,以及临床不同情况下地贫筛查的最佳策略.方法选择2008年9月-2011年5月南方医科大学南方医院妇产科及内科门诊进行地贫筛查和地贫基因诊断的受检者1384例,其中1036例确诊地贫基因携带者为地贫组（包括α地贫408例、β地贫608例、αβ复合型地贫20例）；348例确诊非地贫基因携带者为非地贫组.所有受检者均进行了血液学表型指标筛查,并分别对单独应用MCV、MCH和HbA2作为地贫筛查指标、MCV＋ MCH联合应用作为地贫筛查指标以及MCV＋ MCH＋ HbA2联合筛查在两组受检者中诊断地贫的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和诊断准确率进行对比分析.结果（1）地贫组MCV筛查的灵敏度分别为：α地贫92.9％（379/408）；β地贫99.3％（ 604/608）；αβ复合型地贫100.0％（ 20/20）.非地贫组MCV的特异度为75.0％（261/348）.（2）地贫组MCH筛查灵敏度分别为：α地贫92.9％（ 379/408）；β地贫99.0％（602/608）；αβ复合型地贫100.0％（20/20）.非地贫组MCH特异度为72.7％（253/348）.（3）地贫组HbA2筛查的灵敏度分别为：α地贫67.4％（ 275/408）,β地贫97.5％（593/608）,αβ复合型地贫100.0％（20/20）；非地贫组HbA2的特异度为72.4％（ 252/348）.（4）单独以MCV、MCH或MCV＋MCH为表型筛查指标,而以HbA2作为地贫分型结果显示,HbA2＞ 3.5％作为β地贫的分型标准对临床有重要指导意义,而以HbA2＜2.5％作为α地贫的分型标准则有较高的假阴性率.（5）MCV、MCH和HbA2单独作为地贫筛查指标时,MCV和MCH的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和诊断符合率均高于HbA2.结论 MCV、MCV＋MCH及MCV＋MCH＋HbA23种不同的地贫筛查策略中,MCV＋MCH的初筛效果最优；而MCV＋ MCH＋ HbA2在β地贫筛查中效果最优.但针对MCV和MCH筛查阳性的孕妇,可直接行α及β地贫基因诊断.

关键词：地中海贫血红细胞指数血红蛋白A2 表型

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十个缺失型β-地中海贫血家系的产前诊断

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中华围产医学杂志 2012年第10期15卷 616-618页

作者：李莉艳常清贤靳旺杰高云飞裘毓雯钟梅南方医科大学南方医院妇产科广州510515

β-地中海贫血（简称β-地贫）是我国南方最常见的单基因遗传病之一，主要是因点突变（或少数几个核苷酸的插入或缺失）使β-珠蛋白肽链合成障碍（减少或缺如）所致。

关键词： β-地中海贫血产前诊断缺失型家系单基因遗传病珠蛋白肽链 β-地贫合成障碍

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69例αβ复合型地中海贫血的血液学和基因型研究

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实用妇产科杂志 2011年第5期27卷 378-382页

作者：李莉艳李强宋兰林靳旺杰余艳红钟梅南方医科大学南方医院广东广州510515

目的:分析69例αβ复合型地中海贫血患者基因型、血液学与临床表现的关系,探索和指导这类复杂基因型组合方式的临床诊断。方法:采用标准的血液学分析技术测量红细胞参数和血红蛋白组分。反向点杂交技术诊断β地中海贫血和α地中海贫血... 详细信息

目的:分析69例αβ复合型地中海贫血患者基因型、血液学与临床表现的关系,探索和指导这类复杂基因型组合方式的临床诊断。方法:采用标准的血液学分析技术测量红细胞参数和血红蛋白组分。反向点杂交技术诊断β地中海贫血和α地中海贫血基因点突变,缺口聚合酶链反应技术检测α-地中海贫血缺失突变。结果:45例轻型β地中海贫血合并α地中海贫血(轻型复合型)患者的临床表现与β地中海贫血携带者无异;24例重型β地中海贫血合并α地中海贫血(重型复合型)则从重度贫血到轻度贫血均有,差异较大,但多数表型为中间型地中海贫血。69例患者中,β地中海贫血的突变基因类型共检出8种,α地中海贫血的突变基因类型共检出5种。结论:轻型复合型的临床表现以轻型β地中海贫血的表现为主,α地中海贫血被掩盖;重型复合型则多表现为中间型地中海贫血。这一结果提示我们进行地中海贫血的临床检测时,尤其对β地中海贫血携带者,建议常规同时进行α地中海贫血致病基因的筛查,防止误诊、漏诊发生,进而确保地中海贫血产前诊断的准确性。

关键词：地中海贫血基因型临床表型

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206例地中海贫血家系产前基因诊断结果分析

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中华围产医学杂志 2012年第1期15卷 5-9页

作者：李莉艳钟梅陈翠华宋兰林靳旺杰王志坚南方医科大学南方医院妇产科产前诊断与遗传病诊断技术中心广州510515

目的总结206例地中海贫血（简称地贫）产前诊断家系资料，分析其地域分布、基因型分布以及胎儿产前基因诊断结果，用于指导临床遗传咨询，避免高风险地区严重类型地贫患儿的出生。方法206例地贫产前诊断家系来自2008年1月至2009年12月... 详细信息

目的总结206例地中海贫血（简称地贫）产前诊断家系资料，分析其地域分布、基因型分布以及胎儿产前基因诊断结果，用于指导临床遗传咨询，避免高风险地区严重类型地贫患儿的出生。方法206例地贫产前诊断家系来自2008年1月至2009年12月期间于广州南方医科大学南方医院产前检查的地贫携带者孕妇及其配偶，抽取夫妇双方外周血和胎儿绒毛、羊水或脐血样本并提取DNA，以跨越断裂位点的聚合酶链反应（gappolymerasechainreaction，gap—PCR）技术和反向点杂交技术（reversedotblot，RDB）对a和β一地贫常见突变位点进行检测，同时对临床表型阳性而常见突变位点检测结果阴性的样本进行DNA测序。婴儿出生后半年电话随访婴儿表型。结果206例产前诊断家系来自包括黑龙江在内的12个不同省份和地区。a-地贫的基因突变类型有SEA、-a307／a402／、acsa／和aQsa／，全部为试剂盒中可检测的突变类型；而β-地贫的基因突变除常见的试剂盒中可检测到的类型外，还有中国型GY＋（AyQβ）0、-28（A—C）、CD5458（-TATGGGCAACCCT）和CD37（G—A）等4种突变类型无法用常规试剂盒做出诊断。57例a地贫家系中，产前诊断严重类型地贫11例（19．3％），包括巴氏水肿胎8例和HbH病3例，杂合子26例（45．6％），正常胎儿20例（35．1％）；149例β-地贫产前诊断家系中，严重类型地贫28例（18．8％），杂合子82例（55．0％），正常胎儿39例（26．2％），其中1例B地贫杂合子合并13三体。11例严重类型“地贫胎儿、28例严重类型β-地贫胎儿和1例β-地贫杂合子伴β-三体胎儿均在围产期前后接受了终止妊娠的处理。结论地贫的发病地域从长江以南各省逐渐扩散至一些北方地区。运用gap—PCR和PCR—RDB技术对地贫家系进行产前基因诊断，检出严重类型地贫胎儿，是降低高危地域严重类型地贫患儿出生的有效手段。但目前的试剂盒覆盖的检测位点在β-地贫筛查中存在漏诊现象，因此对临床表型阳性而常见突变位点检测结果阴性的样本进行DNA测序是十分必要的。此外，在进行地贫产前诊断的同时，也要注意染色体病产前诊断指征的确定。

关键词：地中海贫血产前诊断序列分析 DNA

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Ⅰ型脊髓灰质炎病毒基因密码子使用偏好性分析

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山东医药 2019年第24期59卷 13-17页

作者：王猛陈莉靳旺杰孙朋辉王莎莎南方医科大学南方医院广州510515 中山大学中山眼科中心/眼科学国家重点实验室

目的分析Ⅰ型脊髓灰质炎病毒(简称脊灰病毒)基因密码子使用偏好性。方法从NCBI基因数据库(GenBank)检索并筛选出40条Ⅰ型脊灰病毒株的基因信息,计算其相对同义密码子使用度(RSCU)值、有效密码子数(ENc)值。将Ⅰ型脊灰病毒基因中碱基C... 详细信息

目的分析Ⅰ型脊髓灰质炎病毒(简称脊灰病毒)基因密码子使用偏好性。方法从NCBI基因数据库(GenBank)检索并筛选出40条Ⅰ型脊灰病毒株的基因信息,计算其相对同义密码子使用度(RSCU)值、有效密码子数(ENc)值。将Ⅰ型脊灰病毒基因中碱基C和G位于第三位的密码子占所有密码子的百分比[(C+G)3%]与ENc值进行关联性分析,绘制散点图,并与(C+G)3%标准曲线进行比较。采用主成分分析法对Ⅰ型脊灰病毒基因密码子的RSCU值进行分析,并利用分析获得的主因子绘制散点图,观察不同时间和地域的Ⅰ型脊灰病毒基因密码子使用偏好性。结果 Ⅰ型脊灰病毒基因密码子AGA、AGG、CCA、UCA和GUG的RSCU值均≥1.5,密码子GCG、CGA、CGG、CGC、UCG和ACG的RSCU值均≤0.5。Ⅰ型脊灰病毒的ENc平均值为53.633。40株Ⅰ型脊灰病毒毒株均位于(C+G)3%标准曲线以下。2009年之前分离出来的毒株均位于图的下方,2009年之后分离于不同国家或地区的毒株分别聚集于图的一处。结论 Ⅰ型脊灰病毒在AGA、AGG、CCA、UCA、GUG等密码子的使用上偏好性较强,在GCG、CGA、CGG、CGC、UCG、ACG等密码子的使用上偏好性较弱。Ⅰ型脊灰病毒在密码子使用偏好性上处于较弱水平。自然选择在Ⅰ型脊灰病毒基因密码子使用偏好性上起主要作用,不同时间和地域的Ⅰ型脊灰病毒基因密码子使用模式差异较大。

关键词：脊髓灰质炎病毒密码子密码子使用偏好性自然选择

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102例罕见珠蛋白生成障碍性贫血基因突变测序分析

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国际检验医学杂志 2017年第15期38卷 2019-2021页

作者：靳旺杰李莉艳钟梅宋兰林阚文宏南方医科大学南方医院产前诊断和遗传病诊断技术中心广州510515 南方医科大学法医学院广州510515

目的通过对α及β-珠蛋白基因测序分析发现罕见珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)基因突变,了解罕见突变的出现频率,丰富中国人群地贫基因突变谱。方法采用一代测序对表型与基因型不符的患者进行α或β-珠蛋白基因编码区序列分析。结果通... 详细信息

目的通过对α及β-珠蛋白基因测序分析发现罕见珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)基因突变,了解罕见突变的出现频率,丰富中国人群地贫基因突变谱。方法采用一代测序对表型与基因型不符的患者进行α或β-珠蛋白基因编码区序列分析。结果通过测序发现102例罕见地贫基因突变,其中β-地贫79例,共35种突变类型;α-地贫23例,共11种突变类型。结论地贫基因测序可以发现罕见突变基因,明确患者的基因型,为罕见地贫家系产前诊断提供重要支持,降低漏检率,降低重型地贫患儿出生率。

关键词：罕见地贫测序基因突变

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MCV、MCH、HbA_2在妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的临床应用价值

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中国医学前沿杂志（电子版） 2015年第12期7卷 1-4页

作者：李莉艳常清贤靳旺杰裘毓雯陈翠华黄莉萍南方医科大学第一临床医学院南方医院妇产科广州510515

目的探讨简单有效的珠蛋白生成障碍性贫血产前筛查策略,以提高妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血筛查的检出率,减少漏诊和误诊。方法对照分析2010年1月至2014年12月本院妇产科诊治的1800例产检孕妇的平均红细胞体积(mean corpuscular volume,M... 详细信息

目的探讨简单有效的珠蛋白生成障碍性贫血产前筛查策略,以提高妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血筛查的检出率,减少漏诊和误诊。方法对照分析2010年1月至2014年12月本院妇产科诊治的1800例产检孕妇的平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)及血红蛋白(Hb)A2三个表型指标筛查结果与珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断结果,总结妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血筛查策略。结果将MCV单独作为妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血的筛查指标,其筛查的灵敏度为95.53%,特异性为60.21%,诊断符合率为86.11%;将MCV+MCH作为妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血的筛查指标,其灵敏度为95.45%,特异性为59.58%,诊断符合率为85.89%;MCV+MCH+Hb A2用于筛查妊娠期β-珠蛋白生成障碍性贫血,灵敏度可达96.88%,对α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查灵敏度仅为77.24%,漏诊率较高。结论将MCV单纯作为妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血的初级筛查指标,简单有效,易于在基层医院推广。MCV初筛阳性者可进一步行Hb A2检测,进行分类筛查,Hb A2升高者同时行β/α-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断确诊,Hb A2降低则可仅行α-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断。

关键词：珠蛋白生成障碍性贫血产前筛查基因诊断

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等离子体处理的V掺杂镍铁基电催化剂用于高效析氢

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太阳能学报 2024年第3期45卷 305-309页

作者：靳葆杰王婧朱小宁黄林泉陕西煤业化工技术研究院西安710100

该文采用一步水热法在泡沫镍表面原位生长V掺杂的镍铁层状双氢氧化物(NiFe LDH),结合H_(2)等离子体还原法,构建Ni纳米粒子锚定在大量氧空位和镍空位上的异质结构,增加活性位点数量,提升NiFe LDH的HER活性。结果表明,在1 mol/L的KOH电解... 详细信息

该文采用一步水热法在泡沫镍表面原位生长V掺杂的镍铁层状双氢氧化物(NiFe LDH),结合H_(2)等离子体还原法,构建Ni纳米粒子锚定在大量氧空位和镍空位上的异质结构,增加活性位点数量,提升NiFe LDH的HER活性。结果表明,在1 mol/L的KOH电解液中电流密度为10 mA/cm^(2)下催化剂的过电势仅为37.5 mV,Tafel斜率为49 mV/dec,经过100 h的恒电流测试其析氢活性无明显衰减。此外,全解水测试中其同样具有良好的析氢活性和稳定性,10 mA/cm^(2)电流密度下全解水电压仅为1.57 V,经过1000 h的恒电流测试其析氢活性无明显下降。

关键词：等离子体镍铁氢氧化物电催化剂析氢反应异质结

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基于空间布局和杂散电感优化的直流断路器并联IGBT动态均流法

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电力系统自动化 2024年

作者：温伟杰靳鹤志范晶涵杨赫李斌国网天津市电力有限公司天津大学电气自动化与信息工程学院

与压接式绝缘栅双极型晶体管(IGBT)相比，模块式IGBT具有成本低、不需要单独压装结构、安装方便、故障后呈开路等特点，是750 V/1 500 V混合式直流断路器中的核心元件。然而，受限于单个模块式IGBT器件的标称开断能力，多个模块式IGBT... 详细信息

与压接式绝缘栅双极型晶体管(IGBT)相比，模块式IGBT具有成本低、不需要单独压装结构、安装方便、故障后呈开路等特点，是750 V/1 500 V混合式直流断路器中的核心元件。然而，受限于单个模块式IGBT器件的标称开断能力，多个模块式IGBT的并联均流技术是实现10 kA级直流开断的关键。文中从理论上分析了IGBT器件、缓冲电路和快速真空开关的空间排布位置对换流速度、动态均流、关断过电压等性能的影响。分析表明：从减少换流难度角度考虑，快速真空开关应与IGBT就近并联；从降低关断过电压角度考虑，各并联IGBT应采用分布式缓冲电路结构。进一步，考虑空间磁场耦合作用，建立了并联IGBT的动态开断电路模型，分析了并联IGBT动态开断性能的影响因素，发现增大子模块支路杂散电感、降低避雷器残压可有效提高并联IGBT的动态均流性能；子模块间负耦合电感可有效抑制IGBT关断过电压。最后，为兼顾换流速度、动态均流、关断过电压抑制等，提出了缓冲电路、IGBT、快速真空开关就近并联构成子模块，子模块再经电感并联的混合式直流断路器拓扑方案，并进行了仿真验证和1.5 kV/3 kA试验验证。

关键词：混合式直流断路器绝缘栅双极型晶体管缓冲电路均流过电压抑制暂态换流电磁耦合

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