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p53磷酸化位点S15和S392在非小细胞肺癌重构p53抗癌功能的作用研究

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p53磷酸化位点S15和S392在非小细胞肺癌重构p53抗癌功能的作用研究

作者：龙靖娴广西师范大学

学位级别：硕士

p53失活是肺癌治疗无效和耐药性产生的常见诱因,使得基于重构p53抗癌功能作为肺癌治疗策略成为可能。但研究发现基于重构p53抗癌功能的治疗策略在细胞水平研究非常有效,但在人体或动物水平收效甚微,原因是p53抗癌功能不能有效的被激活。... 详细信息

p53失活是肺癌治疗无效和耐药性产生的常见诱因,使得基于重构p53抗癌功能作为肺癌治疗策略成为可能。但研究发现基于重构p53抗癌功能的治疗策略在细胞水平研究非常有效,但在人体或动物水平收效甚微,原因是p53抗癌功能不能有效的被激活。p53抗癌功能与其磷酸化位点有关,之前研究结果表明S15位点的磷酸化在p53抗癌功能中发挥重要作用,我们研究发现S392位点的磷酸化与重构p53抗癌功能密切相关。这两个磷酸化位点在重构p53抗癌功能的具体作用以及二者之间是否存在相互影响尚不明确,因此本课题拟深入研究p53磷酸化位点S15和S392在非小细胞肺癌重构p53抗癌功能的作用,具体研究内容如下:1.本文首先直接合成p53基因、p53(S15A)基因、p53(S392A)基因和p53(S15A-S392A)基因,然后将目的基因与p HBAD-EF1-MCS-CMV-GFP载体进行重组,其产物转化细菌感受态细胞,进行平板挑菌,对长出的克隆菌落做PCR鉴定。并对转化成功的阳性克隆菌液送测序公司测序,测序结果显示载体构建成功,随后将构建的载体质粒包装成腺病毒用于后续研究。将构建的腺病毒感染p53-null NCI-H1299细胞24小时后,可见绿色荧光产生,表明病毒载体转染进入了NCI-H1299细胞,随后通过蛋白免疫印迹实验证实构建的表达载体可以成功表达目的基因。以上实验结果说明成功构建了p53和p53磷酸化位点突变的腺病毒表达载体,为研究p53磷酸化位点在非小细胞肺癌重构p53抗癌功能的作用提供前期基础。2.其次通过p-p53(S15)和p-p53(S392)位点激活剂激活p53磷酸化位点检测p53磷酸化位点S15和S392对NSCLC细胞的增殖抑制作用,结果显示S15和S392位点磷酸化能够有效激活p53肿瘤抑制功能;然后通过Hoechst染色、AIF免疫荧光染色、亚细胞分布等方法确定p53位点S15磷酸化对NSCLC细胞的增殖抑制作用的方式不是通过诱导细胞凋亡;最后通过流式细胞术检测细胞周期,研究结果表明p53位点S15磷酸化和S392磷酸化通过阻滞细胞周期来抑制细胞增殖。3.最后检测了p53两个磷酸化位点S15和S392之间的相互作用。结果表明用两个位点激活剂同时处理细胞,细胞的增殖抑制作用与单独使用一个位点激活剂相比差异不显著。蛋白质免疫印迹结果表明当Nutlin-3加入NCI-H1299和NCI-H460细胞中,在激活p53位点S15磷酸化时,同时激活了p53位点S392磷酸化,说明两个位点磷酸化是相互作用的。总之,本文初步研究了p53磷酸化位点S15和S392对NSCLC细胞的增殖抑制作用及潜在作用机制,明确了两个位点之间的相互作用关系,为重构p53抗癌功能提供了理论支持和数据参考。

关键词：非小细胞肺癌 p53 磷酸化 NCI-H1299 NCI-H460

注意力视角下平台化转型企业的可持续创业实现机制——基于盛隆群体老板制的案例研究

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外国经济与管理 2022年第8期44卷 24-41页

作者：陶厚永施靖娴张蒙武汉大学经济与管理学院湖北武汉430072

“双创”及可持续发展背景下,传统企业迫切需要通过平台化转型以满足更多的利益相关者的要求、不断获取竞争优势从而实现可持续创业。然而国内的可持续创业研究不足以支撑甚至落后于可持续创业的实践,因此本文基于注意力视角,选取盛隆... 详细信息

“双创”及可持续发展背景下,传统企业迫切需要通过平台化转型以满足更多的利益相关者的要求、不断获取竞争优势从而实现可持续创业。然而国内的可持续创业研究不足以支撑甚至落后于可持续创业的实践,因此本文基于注意力视角,选取盛隆群体老板制为研究对象,运用扎根理论研究方法,构建了决策环境影响下企业通过平台赋能及管控进行平台化转型进而对可持续创业产生影响的关系模型。研究主要发现:受到内外部决策环境的影响,企业在平台化转型过程中会将注意力放到赋能及管控这两种协同互动的行为上,以确保创业平台构建与运行的良性发展;创业平台在赋能与管控的过程中使得资源、规则、社会关系等环境发生了变化,利益相关者提出了新的要求,促使创业平台将注意力配置到经济、社会、生态三者的平衡上来,最终实现可持续创业。本研究对于平台化转型中赋能与管控行为及可持续创业的实现都有着丰富的理论和现实意义。

关键词：创业平台平台赋能平台管控可持续创业注意力视角

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初探研究性学习在高中英语教学中的运用

中学教学参考 2012年第4期 99-100页

作者：阮靖娴广西贺州市平桂管理区平桂高级中学

研究性学习泛指学生探究问题的学习方式，是“学生在教师指导下，以类似科学研究的方式主动学习，在掌握知识内容的同时，让学生体验、理解和应用探究问题的方法，培养创新精神和实践能力”。可见，研究性学习是主动探索的一种学习活动... 详细信息

研究性学习泛指学生探究问题的学习方式，是“学生在教师指导下，以类似科学研究的方式主动学习，在掌握知识内容的同时，让学生体验、理解和应用探究问题的方法，培养创新精神和实践能力”。可见，研究性学习是主动探索的一种学习活动，研究内容由学生和教师设定，评价注重过程，改变以往偏重知识传授与技能训练的教师教学方式、学生被动学习方式，充分发挥学生学习的主动性和创造性。

关键词：研究性学习高中英语教学学生体验教师指导学习方式探究问题知识传授主动学习

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课堂讨论策略应如何运用于英语阅读教学中

教育界（教师培训） 2011年第2期 38-38,55页

作者：阮靖娴广西贺州市平桂区平桂高级中学

课堂讨论是一种多向的信息交流活动，是英语教学的一种有效手段。本文探讨了基于教材内容上组织英语课堂讨论的类型、作用，以及出现的问题和对策。

关键词：课堂讨论类型作用问题和对策

甲泼尼龙对单侧输尿管梗阻诱导的肾纤维化的影响

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广西师范大学学报（自然科学版） 2020年第1期38卷 93-101页

作者：龙靖娴潘毓敏潘国律黄容诚彭艳广西师范大学生命科学学院广西桂林541006 广西师范大学化学与药学学院广西桂林541004

为探讨甲泼尼龙在小鼠肾纤维化中的作用,本文通过单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)实验建立肾纤维化模型。实验将25只雄性Balb/c小鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。手术后第2天给药,14 ... 详细信息

为探讨甲泼尼龙在小鼠肾纤维化中的作用,本文通过单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)实验建立肾纤维化模型。实验将25只雄性Balb/c小鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。手术后第2天给药,14 d后,使用HE染色和Masson染色检测各组小鼠肾脏病理变化情况。Western blotting和IHC染色检测各组梗阻侧肾脏中Col-1、Col3A1、FN、α-SMA的表达情况以及TGF-β/Smad和NF-κB信号通路中蛋白的表达情况。结果显示UUO会导致小鼠肾间质纤维化,甲泼尼龙能显著减弱UUO小鼠肾间质细胞外基质Col-1、Col3A1、FN、α-SMA的生成,下调TGF-β/Smad和NF-κB信号通路中蛋白的表达。由此可知,甲泼尼龙对小鼠肾纤维化有明显的改善作用,它通过抑制TGF-β/Smad和NF-κB信号通路来减轻UUO诱导的肾纤维化。

关键词：甲泼尼龙 UUO TGF-β/Smad NF-κB

L-精氨酸对脂多糖应激下大鼠抗氧化能力、免疫功能和肠道健康的影响

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动物营养学报 2023年第11期35卷 7401-7410页

作者：焦靖娴王瑶彭煜畅孟小龙刘慧茹甄东恒张立阳张薇付彤河南农业大学动物科技学院河南省家畜营养调控与生态养殖国际联合实验室郑州450046

本试验旨在研究L-精氨酸(L-Arg)对脂多糖应激下大鼠抗氧化能力、免疫功能和肠道健康的影响。选取24只健康且体型相近的雄性SD大鼠,随机分为2组,分别为空白对照组(CON组)和L-Arg处理组(L-Arg组),每组6个重复,每个重复2只。L-Arg组每日灌... 详细信息

本试验旨在研究L-精氨酸(L-Arg)对脂多糖应激下大鼠抗氧化能力、免疫功能和肠道健康的影响。选取24只健康且体型相近的雄性SD大鼠,随机分为2组,分别为空白对照组(CON组)和L-Arg处理组(L-Arg组),每组6个重复,每个重复2只。L-Arg组每日灌胃2 mL L-Arg溶液(0.2 g/kg BW L-Arg),CON组每日灌胃等量生理盐水。试验期共18 d,其中预试期3 d,正试期15 d。正式试验第14天,每个重复随机挑选1只大鼠腹腔注射2 mL LPS溶液(2 mg/kg BW LPS),其余大鼠腹腔注射等量无菌生理盐水。注射LPS后禁食12 h,之后进行屠宰采样。结果显示:1)与CON组相比,L-Arg组大鼠的第10天体重、末重和平均日采食量均显著升高(P0.05)。2)LPS应激导致大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性显著升高(P0.05),而L-Arg处理后大鼠回肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度的比值均显著提高(P<0.05)。综上可知,LPS应激可诱导大鼠肝脏损伤、氧化应激和免疫系统过度活化及炎症;L-Arg能够促进大鼠生长,并可通过提高机体抗氧化能力、免疫功能以及改善回肠形态而在一定程度上预防和缓解LPS攻毒对大鼠造成的负面影响。

关键词： L-精氨酸大鼠抗氧化能力免疫功能肠道健康

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下行风险、失望厌恶与资产定价

系统工程理论与实践 2024年第5期44卷 1485-1500页

作者：许海川卢静娴华东理工大学商学院上海200237

运用包含市场因子、波动因子和下行风险相关因子的广义失望厌恶模型,研究下行风险及其风险溢价,并实证检验该模型对中国市场资产横截面定价的适用性.分别基于公司特征组合和股债组合作为测试资产,发现波动因子、下行状态因子和波动下行... 详细信息

运用包含市场因子、波动因子和下行风险相关因子的广义失望厌恶模型,研究下行风险及其风险溢价,并实证检验该模型对中国市场资产横截面定价的适用性.分别基于公司特征组合和股债组合作为测试资产,发现波动因子、下行状态因子和波动下行因子可产生显著的风险溢价,广义失望厌恶模型具有一定的普适性.波动因子、下行状态因子和波动下行因子的风险溢价均为负,表明投资者更青睐收益率与相关因子的协方差为正的资产,从而愿意为此支付溢价.采用不同的失望阈值、波动率度量方式,以及不同的测试资产组合,广义失望厌恶模型均产生稳健的结果,引入下行风险能有效地提升模型对资产收益率的解释能力.此外,更低的定价误差对应的失望阈值和市场波动率权重都偏小,说明中国市场投资者的失望阈值较低,且更在意市场收益率的下降而非市场波动率的上升.

关键词：风险溢价广义失望厌恶下行风险资产定价

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益母草愈伤组织诱导与生物转化能力初探

中医药学报 2017年第2期45卷 50-54页

作者：唐婕妤罗月芳龙靖娴彭菲湖南中医药大学生物工程实验室中药鉴定与资源实验室湖南长沙410208 广西师范大学药用资源化学与药物分子工程重点实验室广西桂林541004

目的:建立益母草愈伤组织培养体系,用于生物转化外源底物初探。方法:以MS为基本培养基,研究不同外植体及植物生长调节剂对益母草愈伤组织诱导及增殖的影响,并对获得的愈伤组织生物转化能力进行初探。结果:益母草子叶诱导率85.79%、真叶... 详细信息

目的:建立益母草愈伤组织培养体系,用于生物转化外源底物初探。方法:以MS为基本培养基,研究不同外植体及植物生长调节剂对益母草愈伤组织诱导及增殖的影响,并对获得的愈伤组织生物转化能力进行初探。结果:益母草子叶诱导率85.79%、真叶诱导率97.88%、下胚轴诱导率29.78%;诱导的最适配方为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;初期增殖最适配方为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;长期继代最适配方为MS+2,4-D 0.1 mg/L+6-BA 1 mg/L;最佳继代周期10 d;获得的3种愈伤组织悬浮培养均具有转化外源氢醌生成熊果苷的能力。结论:益母草愈伤组织经优选增殖,有望成为转化外源物质的良好材料。

关键词：益母草愈伤组织生物转化氢醌熊果苷糖基化

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数据交易平台治理：欧盟制度经验与借鉴

世界社会科学 2024年第4期 65-79+243-244页

作者：杨瑜娴武汉市社会科学院

因先发优势和权利保护导向，欧盟数据治理与交易平台治理的相关制度处于世界前列，具有镜鉴价值。欧盟关于数据交易平台治理的相关制度，发端于数据处理的基本要求，成长于数据权利的普遍保护，完善于数字市场的专门立法。其制度内容以... 详细信息

因先发优势和权利保护导向，欧盟数据治理与交易平台治理的相关制度处于世界前列，具有镜鉴价值。欧盟关于数据交易平台治理的相关制度，发端于数据处理的基本要求，成长于数据权利的普遍保护，完善于数字市场的专门立法。其制度内容以《通用数据保护条例》的数据保护规则为核心，以交易平台的规制与监管为抓手，并以数据利用的规范与保障为目标。结合当前数据交易平台的发展趋势和治理需求，我国在制度借鉴时，可采取“总—分”式立法模式，通过统领性立法引领数据交易平台治理制度体系建构，用原则性制度及时回应实践治理难题，进而构建涵盖“主体—平台—使用者”全流程的规制方案。

关键词：数据交易平台数据保护平台监管欧盟