检索结果-南通市图书馆

霍乱弧菌O1群与O139群产毒株多酶恒温快速扩增检测方法的建立

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现代预防医学 2024年第4期51卷 705-712页

作者：丁卫平张士财伊廷存刘凤莲刘晓鹏赵志强霍胜楠钟棋宝蔡磊滨州市检验检测中心山东省食品药品检验研究院浙江工商大学食品与生物工程学院

目的建立一种霍乱弧菌O1群与O139群产毒株快速准确的检测方法。方法基于多酶恒温快速扩增技术，根据霍乱弧菌溶血素编码基因、霍乱毒素编码基因、O1群与O139群O抗原编码基因设计引物与探针，初步建立检测方法。以不同血清型霍乱弧菌... 详细信息

目的建立一种霍乱弧菌O1群与O139群产毒株快速准确的检测方法。方法基于多酶恒温快速扩增技术，根据霍乱弧菌溶血素编码基因、霍乱毒素编码基因、O1群与O139群O抗原编码基因设计引物与探针，初步建立检测方法。以不同血清型霍乱弧菌及其它细菌DNA为模板，验证检测方法的特异性与灵敏度。结果配制反应体系时，按试剂盒说明书推荐加入量0.6μL加入探针时可成功扩增溶血素编码基因、霍乱毒素编码基因及O1群与O139群O抗原编码基因4个目的基因，针对上述4个基因分别优化探针加入量为1.0μL、1.0μL、1.0μL、0.8μL时扩增效率更高。对优化探针加入量的检测方法进行方法特异性验证时，各引物探针组合不与非目标菌DNA产生交叉反应。进行检测方法的灵敏度分析时，不同目的基因的基因组检测灵敏度为70 fg或290 fg。上述实验结果证明检测方法的灵敏度及特异性满足设计要求。结论建立了一种霍乱弧菌O1群与O139群产毒株检测的新方法，该方法特异性强、灵敏度高、检测时间短，可适用于霍乱弧菌的常规检测及快检，对霍乱的预防具有一定的积极作用。

关键词：多酶恒温快速扩增霍乱弧菌产毒株检测

基于扩增子测序技术非定向筛查食品中的植物成分

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食品与发酵工业 2022年第18期48卷 271-277页

作者：郭颖慧郑世超任易婕程祥龙霍胜楠山东省食品药品检验研究院山东济南250101 山东省特殊医学用途配方食品质量工程技术研究中心山东济南250101

为进一步解决食品中基于扩增子测序的植物成分掺假非定向筛查问题,实现对植物源性成分高通量的检测和评估,该研究基于扩增子测序技术,利用植物通用引物RbcL,开发了常见植物成分非定向筛查方法。通过PCR技术,以红小豆、大豆、绿豆、红薯... 详细信息

为进一步解决食品中基于扩增子测序的植物成分掺假非定向筛查问题,实现对植物源性成分高通量的检测和评估,该研究基于扩增子测序技术,利用植物通用引物RbcL,开发了常见植物成分非定向筛查方法。通过PCR技术,以红小豆、大豆、绿豆、红薯、马铃薯、木薯、薏米、小麦、玉米、小米、水稻、杏、腰果、榛子、芝麻、巴旦木、核桃、桃、香蕉、梨、小番茄、南瓜、胡萝卜、苹果、花生、开心果、芸豆27种植物物种提取的DNA为模板对该方法进行特异性、通用性、灵敏度验证。结果表明,通过DNAMAN软件与美国国立生物技术信息中心数据库比对测序,可有效区分不同植物物种。此外,利用二代测序分析技术对4个混合植物源性成分样本进行高通量、非定向筛查,测序结果与产品标识一致。该方法的建立对于植物源性成分的掺杂掺假鉴定和监管、消费者权益的保护具有重要意义。

关键词：植物源性成分扩增子测序 RbcL 高通量非定向筛查

乳与乳制品中四种动物源性成分鉴定方法的研究

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中国食品卫生杂志 2022年第4期34卷 663-667页

作者：任易婕霍胜楠郭颖慧翟清燕孙潇慧郑世超山东省食品药品检验研究院山东济南250101 山东省特殊医学用途配方食品质量工程技术研究中心山东济南250101

目的针对小众乳与乳制品的掺假的现象,构建乳与乳制品中动物源性成分检测方法。方法设计合成了牛、羊、驴、水牛的特异引物探针,优化乳与乳制品中核酸提取方法,对设计的荧光PCR方法进行了特异性、灵敏度、适用性进行验证。结果该方... 详细信息

目的针对小众乳与乳制品的掺假的现象,构建乳与乳制品中动物源性成分检测方法。方法设计合成了牛、羊、驴、水牛的特异引物探针,优化乳与乳制品中核酸提取方法,对设计的荧光PCR方法进行了特异性、灵敏度、适用性进行验证。结果该方法对于常见动物物种具有较强特异性和灵敏度,牛、羊、驴、水牛的检测灵敏度分别为0.001、0.01、0.01、0.01 ng。此外,该方法适用性较强,在各类乳与乳制品样品中均能检出标识动物源性成分和掺伪动物源性成分。结论本研究构建的检测方法,特异性、灵敏度、检出限等指标均能满足日常实验需要,可为监管与检验提供有力的技术支撑。

关键词：乳与乳制品动物源性成分特异性适用性

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国内外检测食品中叶酸标准的对比及建议

中国食品卫生杂志 2023年第1期35卷 148-150页

作者：孟静王锐霍胜楠伊廷存孙潇慧程祥龙胡梅山东省食品药品检验研究院山东济南250101 山东省特殊医学用途配方食品质量工程技术研究中心山东济南250101 山东第一医科大学化学与制药工程学院山东泰安271016

美国官方分析化学家协会的叶酸检测标准可选择性多,如使用的菌株、培养温度等,使用仪器较为先进。我国标准中在这些方面还存在一定的差距。本文收集中国、国际食品法典委员会、欧盟和美国组织制定的有关叶酸检测的标准,从适用范围、菌... 详细信息

美国官方分析化学家协会的叶酸检测标准可选择性多,如使用的菌株、培养温度等,使用仪器较为先进。我国标准中在这些方面还存在一定的差距。本文收集中国、国际食品法典委员会、欧盟和美国组织制定的有关叶酸检测的标准,从适用范围、菌株、样品的前处理、培养、测定等过程分别进行对比。标准的制修订过程中,建议对比借鉴国际标准的制修订和验证流程,逐步与国际标准化体系建设接轨,实施标准跟踪和培训,满足实验室检测需要。

关键词：叶酸食品安全标准国内外标准对比

肉制品中毛皮动物源性成分掺假检测阳性质粒分子的构建与评价

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中国食品卫生杂志 2023年第3期35卷 360-366页

作者：翟清燕霍胜楠姚现琦郑世超王骏任易婕孙潇慧杜东旭山东省食品药品检验研究院山东济南250000 国家市场监管重点实验室肉及肉制品监管技术山东济南250000 临沂金锣文瑞食品有限公司山东临沂276000

目的建立一种肉制品中毛皮动物源性成分掺假快速检测技术。方法构建狐狸、貉、水貂三种检测用阳性质粒分子,利用实时荧光定量PCR方法对其特异性、灵敏度和方法适用性等关键指标进行分析。结果构建好的狐狸、貉、水貂阳性质粒分子特异性... 详细信息

目的建立一种肉制品中毛皮动物源性成分掺假快速检测技术。方法构建狐狸、貉、水貂三种检测用阳性质粒分子,利用实时荧光定量PCR方法对其特异性、灵敏度和方法适用性等关键指标进行分析。结果构建好的狐狸、貉、水貂阳性质粒分子特异性强、灵敏度高,检验灵敏度均可达到10^(-4)ng/μL,标准曲线扩增效率分别为94.451%、117.461%、114.709%,且相关系数(R^(2))均在0.995以上。在混合肉样品和市售肉制品中均可检测,三种成分的检测限均低至1%,具有较好的可行性及适用性。结论本方法构建的三种阳性质粒分子可以满足实际工作中肉类掺假检测的需求。

关键词：毛皮动物阳性质粒分子特异性灵敏度

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沙门菌分子血清分型的鉴定方法与研究进展

中国食品卫生杂志 2023年第1期35卷 142-147页

作者：伊廷存孟静姚现琦霍胜楠王伟程祥龙郭颖慧山东省食品药品检验研究院山东济南250101 国家市场监管重点实验室肉及肉制品监管技术山东济南250101 临沂金锣文瑞食品有限公司山东临沂276000

综述沙门菌分子血清分型的鉴定方法与研究进展。介绍了沙门菌编码3种抗原(O、H、Vi)的相关基因及其表达机制,阐述了以血清型特异性标记基因为靶点进行沙门菌分子血清分型鉴定的方法及应用进展。本文回顾了沙门菌血清分型的鉴定方法及研... 详细信息

综述沙门菌分子血清分型的鉴定方法与研究进展。介绍了沙门菌编码3种抗原(O、H、Vi)的相关基因及其表达机制,阐述了以血清型特异性标记基因为靶点进行沙门菌分子血清分型鉴定的方法及应用进展。本文回顾了沙门菌血清分型的鉴定方法及研究进展,为进一步开展沙门菌分子血清型鉴定研究奠定了基础。

关键词：沙门菌分子血清分型鉴定全基因组测序

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国内外肉及肉制品微生物限量比较研究

中国食品卫生杂志 2023年第1期35卷 107-112页

作者：钟立霞霍胜楠姚现琦祝建华张卉杨振东王骏倪来学山东省食品药品检验研究院山东济南250101 国家市场监管重点实验室肉及肉制品监管技术山东济南250101 临沂金锣文瑞食品有限公司山东临沂276036

我国食品标准体系中微生物指标数量少,限量要求较宽松,缺少对食品加工过程中微生物的限量要求。本文收集了我国与欧盟、美国、澳大利亚以及日本的肉及肉制品微生物限量标准并进行对比分析。由于各国文化,以及经济发展水平等各不相同,我... 详细信息

我国食品标准体系中微生物指标数量少,限量要求较宽松,缺少对食品加工过程中微生物的限量要求。本文收集了我国与欧盟、美国、澳大利亚以及日本的肉及肉制品微生物限量标准并进行对比分析。由于各国文化,以及经济发展水平等各不相同,我国与欧盟、美国等在肉及肉制品微生物限量要求差异明显。建议结合我国肉及肉制品生产实际及饮食需求,借鉴先进、科学的国际标准,完善我国肉及肉制品微生物限量标准。

关键词：肉及肉制品微生物限量要求比较研究

基于核酸等温扩增技术金黄色葡萄球菌检测的研究进展

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中国酿造 2023年第9期42卷 26-31页

作者：伊廷存胡梅霍胜楠孟静任意婕翟清燕孙潇慧山东省食品药品检验研究院国家市场监管重点实验室肉及肉制品监管技术山东济南250101

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作为一种食源性致病菌,是导致食品安全和公共卫生事件的主要病原体之一,开发快速准确的金黄色葡萄球菌检测技术是保障食品安全和提高食源性致病菌防控水平的关键措施。核酸等温扩增技术具有检测... 详细信息

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)作为一种食源性致病菌,是导致食品安全和公共卫生事件的主要病原体之一,开发快速准确的金黄色葡萄球菌检测技术是保障食品安全和提高食源性致病菌防控水平的关键措施。核酸等温扩增技术具有检测速度快、灵敏度高和设备简单等优点,在金黄色葡萄球菌检测方面具有很大的应用前景。基于此,该文简要介绍了核酸等温扩增技术的原理及优缺点,主要阐述了核酸等温扩增技术在金黄色葡萄球菌检测上的应用,并总结了目标产物检测技术,为金黄色葡萄球菌等温扩增快速检测技术的开发提供理论支持,为食品安全控制和食源性致病菌监控工作奠定基础。

关键词：金黄色葡萄球菌核酸等温扩增技术目标产物检测

阪崎克罗诺杆菌鉴定分型方法的比较及耐药特征分析

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食品安全质量检测学报 2023年第9期14卷 70-77页

作者：伊廷存程祥龙郑世超孟静胡梅霍胜楠山东省食品药品检验研究院济南250101 山东省特殊医学用途配方食品质量控制工程技术研究中心济南250101

目的开展乳粉原料中分离的阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii,***)鉴定分型比较研究及抗生素耐药基因特征分析。方法采用形态学观察、生理生化特征分析、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法、16S rDNA测序分析,和基于全基因组测... 详细信息

目的开展乳粉原料中分离的阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii,***)鉴定分型比较研究及抗生素耐药基因特征分析。方法采用形态学观察、生理生化特征分析、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法、16S rDNA测序分析,和基于全基因组测序技术的平均核苷酸一致性分析、多位点序列分型和基于全基因组的多位点序列分型技术,建立了对分离的2株***的鉴定分型方法,并对不同的方法进行比较,同时预测O-血清型和抗生素抗性基因。结果本研究中分离菌株16-26、31-3经形态学、生理生化反应、16S rDNA、质谱和平均核苷酸一致性分析,均鉴定为***,可信度均在95%以上;MLST预测16-26为ST新型、31-3为ST4型,O血清型均为gnd 3型、galF 2型,均含有9种抗性基因,2株***分离株的抗性基因呈现出多样性。结论通过对分离的***进行鉴定分型比较研究,建立了一种基于表型和分子分型的食源性致病菌鉴定分型方法,为食源性致病菌的有效防控提供了有力的技术支撑和监管依据。

关键词：阪崎克罗诺杆菌鉴定分型全基因组测序多位点序列分型