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胃肠道肿瘤患者外周血Survivin-△ EX3 mRNA的表达变化及其意义

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中国普通外科杂志 2014年第10期23卷 1423-1426页

作者：张恩程冲霍斌亮王永恒陕西省人民医院肿瘤外科陕西西安710068

目的:探讨胃肠道肿瘤患者外周血Survivin剪接变体△EX3 mRNA的表达对该病的发生及发展和预后的价值。方法:选52例胃肠道肿瘤患者为观察组,35例健康体检人员为对照组。采用PCR技术对其外周血Survivin-△EX3 mRNA表达进行检测。结果:观察... 详细信息

目的:探讨胃肠道肿瘤患者外周血Survivin剪接变体△EX3 mRNA的表达对该病的发生及发展和预后的价值。方法:选52例胃肠道肿瘤患者为观察组,35例健康体检人员为对照组。采用PCR技术对其外周血Survivin-△EX3 mRNA表达进行检测。结果:观察组外周血组织中Survivin-△EX3 mRNA相对表达量明显高于对照组[(0.51±0.289)vs.(0.003±0.003),P=0.000];低分化者Survivin-△EX3 mRNA阳性率及Survivin-△EX3mRNA相对表达指数均高于中高分化者(χ2=12.5759,P=0.0004;U=13.0915,P=0.0000);I+II期与III+IV期比较,Survivin-△EX3 mRNA阳性率及Survivin-△EX3 mRNA相对表达指数后者明显比前者升高(χ2=7.0806,P=0.0078;U=13.2359,P=0.0000);淋巴结无转移者与有转移者Survivin-△EX3 mRNA阳性率及Survivin-△EX3 mRNA相对表达指数比较,后者明显高于前者(χ2=8.7970,P=0.0030;U=13.6479,P=0.0000)结论:Survivin-△EX3 mRNA阳性表达与胃肠道肿瘤具有关;其表达的高低在分化程度、临床病理分期和淋巴结转移方面均有意义。

关键词：胃肿瘤肠肿瘤 Survivin-△ EX3 mRNA PCR

siRNA抑制ADAR1的表达对混合培养的小鼠淋巴细胞周期和凋亡的影响

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第四军医大学学报 2008年第17期29卷 1561-1564页

作者：霍斌亮蔡磊马俊张福琴赵青川第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710033

目的:探讨RNA编辑酶ADAR1的表达受抑制后,小鼠淋巴细胞的细胞周期和细胞凋亡的变化.方法:用电转法将ADAR1特异性siRNA转入到处于混合培养的小鼠淋巴细胞中,培养48h,RT-PCR检测转染效率;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化;RT-PCR检验周... 详细信息

目的:探讨RNA编辑酶ADAR1的表达受抑制后,小鼠淋巴细胞的细胞周期和细胞凋亡的变化.方法:用电转法将ADAR1特异性siRNA转入到处于混合培养的小鼠淋巴细胞中,培养48h,RT-PCR检测转染效率;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化;RT-PCR检验周期蛋白D1(cyclin D1)基因和周期蛋白A1(cyclin A1)基因表达量的变化.结果:转染ADAR1特异性siRNA48h后,小鼠淋巴细胞G0/G1期细胞量增加,S期细胞量减少,G2/M细胞量保持恒定.另外,cyclinD1基因的表达量降低而cyclin A1基因表达保持恒定.结论:处于经典混合培养体系下的小鼠淋巴细胞,在其RNA编辑酶ADAR1受到特异siRNA抑制后,小鼠淋巴细胞的周期受到明显抑制,细胞凋亡增加.

关键词：小干扰RNA ADAR1 淋巴细胞细胞周期细胞凋亡小鼠

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胰岛素瘤的围手术期处理：附54例分析

中华肝胆外科杂志 2013年第1期19卷 73-74页

作者：李建辉王永恒颜谭霍斌亮李程赵翊吕毅陕西省人民医院肿瘤外科西安710068 西安交通大学第一附属医院肝胆外科

胰岛素瘤患者因反复低血糖发作对脑组织产生损害，常伴有神经精神系统的症状。本病常规影像学检查的阳性率较低，很容易误诊、误治。定性诊断后，围手术期的处理也与其他腹部外科手术不同，颇具特点。现将我们总结的54例胰岛素瘤的围手... 详细信息

胰岛素瘤患者因反复低血糖发作对脑组织产生损害，常伴有神经精神系统的症状。本病常规影像学检查的阳性率较低，很容易误诊、误治。定性诊断后，围手术期的处理也与其他腹部外科手术不同，颇具特点。现将我们总结的54例胰岛素瘤的围手术期处理体会报告如下。

关键词：围手术期处理胰岛素瘤反复低血糖发作常规影像学检查神经精神系统腹部外科手术定性诊断脑组织

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炎性乳腺癌1例

临床医学进展 2022年第10期12卷 9564-9568页

作者：刘茹艳霍斌亮西安医学院陕西西安陕西省人民医院陕西西安

目的:由于炎性乳腺癌发病罕见,且初始症状常为炎症表现,在诊疗过程中常常被误诊、漏诊,本文通过1例炎性乳腺癌新辅助化疗病例及文献复习,进一步提高对炎性乳腺癌的认识。方法:回顾性分析1例临床分期为T4dN1M0的炎性乳腺癌患者,新辅助化... 详细信息

目的:由于炎性乳腺癌发病罕见,且初始症状常为炎症表现,在诊疗过程中常常被误诊、漏诊,本文通过1例炎性乳腺癌新辅助化疗病例及文献复习,进一步提高对炎性乳腺癌的认识。方法:回顾性分析1例临床分期为T4dN1M0的炎性乳腺癌患者,新辅助化疗后行乳腺癌根治术,术后行放疗加内分泌治疗,观察其疗效,并回顾分析相关文献。结果:该炎性乳腺癌患者经新辅助化疗 + 手术、放疗 + 内分泌治疗,随诊至今患者暂无转移复发。

关键词：炎性乳腺癌新辅助放疗乳腺癌改良根治术

高表达CREB对食管腺癌细胞增殖、侵袭及NK细胞杀伤活性的影响

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中国医师杂志 2021年第11期23卷 1637-1642页

作者：李程梁刚霍斌亮陕西省人民医院肿瘤外科西安710068 陕西省核工业二一五医院普通外科西安712000

目的探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)对食管腺癌细胞增殖、侵袭及NK细胞杀伤活性的影响。方法选取2017年3月至2019年12月陕西省人民医院收治的23例食管腺癌患者,免疫组织化学法检测食管腺癌组织和癌旁正常组织中CREB的蛋白表达,体外培... 详细信息

目的探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)对食管腺癌细胞增殖、侵袭及NK细胞杀伤活性的影响。方法选取2017年3月至2019年12月陕西省人民医院收治的23例食管腺癌患者,免疫组织化学法检测食管腺癌组织和癌旁正常组织中CREB的蛋白表达,体外培养食管腺癌细胞TE-10,将转染si-NC的TE-10细胞设置为对照组,将转染si-CREB的TE-10细胞设置为si-CREB组。Western blot检测细胞中CREB、MHCⅠ类链相关蛋白A(MICA)与MHCⅠ类链相关蛋白B(MICB)的表达;流式细胞术检测MICA与MICB的表达;克隆形成实验与Transwell实验检测TE-10细胞的增殖及侵袭能力;乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞对TE-10细胞的杀伤活性。结果食管腺癌组织中CREB的表达高于癌旁正常组织(P<0.05);食管腺癌细胞TE-10中CREB的蛋白表达量高于人正常食管上皮细胞HEEC(P<0.05)。si-CREB组TE-10细胞增殖及侵袭能力显著低于对照组(P<0.05),MICA与MICB的蛋白表达量、NK细胞对TE-10细胞的杀伤率显著高于对照组(P<0.05)。结论CREB在食管腺癌组织及细胞中高表达。沉默CREB可抑制食管腺癌细胞增殖与侵袭,上调MICA与MICB表达,增强NK细胞对食管腺癌细胞的杀伤敏感性。

关键词：食管肿瘤腺癌 cAMP反应元件结合蛋白质杀伤细胞,天然 MHCⅠ类链相关蛋白A MHCⅠ类链相关蛋白B

重组人血管内皮抑素联合TCF方案治疗中晚期胃癌49例临床评价

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中国药业 2015年第23期24卷 68-70页

作者：张恩王永恒霍斌亮程冲陕西省人民医院肿瘤外科陕西西安710068

目的探讨重组人血管内皮抑素联合TCF方案治疗中晚期胃癌的临床疗效及安全性。方法选取医院2014年2月至2015年2月收治的98例中晚期胃癌患者,随机均分为对照组和研究组,各49例。对照组给予TCF方案治疗,研究组在对照组的基础上联合重组人... 详细信息

目的探讨重组人血管内皮抑素联合TCF方案治疗中晚期胃癌的临床疗效及安全性。方法选取医院2014年2月至2015年2月收治的98例中晚期胃癌患者,随机均分为对照组和研究组,各49例。对照组给予TCF方案治疗,研究组在对照组的基础上联合重组人血管内皮抑素治疗。结果研究组的有效率为61.22%,明显高于对照组的42.86%(P0.05)。两组患者治疗期间均未发生严重不良反应。研究组患者的生活质量明显优于对照组(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑素联合TCF方案治疗中晚期胃癌的临床疗效明显优于单独用药,且联合用药后并未增加药物毒性,对改善患者生活质量有积极的促进作用。

关键词：重组人血管内皮抑素化学治疗胃癌疗效

LINC01915介导miR-92a影响结直肠癌裸鼠肿瘤生长的实验研究

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检验医学与临床 2024年

作者：韩炜李程李文翰霍斌亮师文陕西省人民医院肿瘤外科西安交通大学第一附属医院消化内科

目的探讨基因间区长链非编码核糖核酸01915(LINC01915)过表达靶向抑制微小RNA-92a(mi R-92a)控制结直肠癌裸鼠肿瘤生长的作用与分子机制。方法取100只5周龄裸鼠经皮下接种人结直肠癌细胞HT29建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将建模成... 详细信息

目的探讨基因间区长链非编码核糖核酸01915(LINC01915)过表达靶向抑制微小RNA-92a(mi R-92a)控制结直肠癌裸鼠肿瘤生长的作用与分子机制。方法取100只5周龄裸鼠经皮下接种人结直肠癌细胞HT29建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将建模成功的裸鼠随机分为LINC01915上调组(转染pc DNA-LINC01915)、LINC01915下调组(转染si-LINC01915)、LINC01915上调对照组(转染pc DNA)、LINC01915下调对照组(转染si-NC)、mi R-92a上调组(转染mi R-92a mimic)、mi R-92a下调组(转染mi R-92a inhibitor)、mi R-92a上调对照组(转染mi R-92a mimic NC)、mi R-92a下调对照组(转染mi R-92a inhibitor NC)以及空白对照组(注射生理盐水)。观察记录裸鼠肿瘤体积并绘制肿瘤生长曲线;通过苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学改变;采用实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)及蛋白质免疫印迹法(WB)检测裸鼠肿瘤组织Kruppel样因子4(KLF4)、生存素(Survivin)、细胞增殖核抗原(Ki-67)及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)信使核糖核酸(m RNA)或蛋白表达;通过荧光素酶活性实验验证LINC01915和mi R-92a的靶向关系。结果重复测量方差分析结果显示,各组结直肠癌裸鼠肿瘤体积的时间效应、组间效应及组间-时间交互效应均有统计学意义(P<0.05)。多变量方差分析显示,转染第9、12、15天时:与空白对照组和LINC01915上调对照组相比,LINC01915上调组结直肠癌裸鼠肿瘤体积降低(P<0.05);与空白对照组和LINC01915下调对照组相比,LINC01915下调组结直肠癌裸鼠肿瘤体积均升高(P<0.05);与空白对照组和mi R-92a上调对照组相比,mi R-92a上调组结直肠癌裸鼠肿瘤体积均升高(P<0.05);与空白对照组和mi R-92a下调对照组相比,mi R-92a下调组结直肠癌裸鼠肿瘤体积均降低(P<0.05)。各对照组裸鼠肿瘤组织腺体排列紊乱并伴随炎症细胞浸润,有少量杯状细胞;LINC01915上调组和mi R-92a下调组裸鼠肿瘤组织腺体排列整齐,结构更加完整,可见少量杯状细胞及炎症细胞浸润;LINC01915下调组和mi R-92a上调组裸鼠肿瘤组织腺体排列较更加紊乱,杯状细胞几乎消失,可见大量炎症细胞浸润。与空白对照组和LINC01915上调对照组相比,LINC01915上调组结直肠癌裸鼠肿瘤组织KLF4、Caspase-3 m RNA及蛋白表达均升高(P<0.05),mi R-92a表达和Survivin、Ki-67 m RNA、蛋白表达均降低(P<0.05);与空白对照组和LINC01915下调对照组相比,LINC01915下调组结直肠癌裸鼠肿瘤组织KLF4、Caspase-3 m RNA及蛋白表达均降低(P<0.05),mi R-92a表达和Survivin、Ki-67 m RNA、蛋白表达均升高(P<0.05);与空白对照组和mi R-92a上调对照组相比,mi R-92a上调组结直肠癌裸鼠肿瘤组织KLF4、Caspase-3 m RNA及蛋白表达均降低(P<0.05),mi R-92a表达和Survivin、Ki-67 m RNA、蛋白表达均升高(P<0.05);与空白对照组和mi R-92a下调对照组相比,mi R-92a下调组结直肠癌裸鼠肿瘤组织KLF4、Caspase-3 m RNA及蛋白表达均升高(P<0.05),mi R-92a表达和Survivin、Ki-67 m RNA、蛋白表达均降低(P<0.05)。荧光素酶活性实验结果显示LINC01915可直接靶向调控mi R-92a。结论上调LINC01915可抑制结直肠癌裸鼠肿瘤生长,可能是通过靶向下调mi R-92a的表达,促进KLF4、Caspase-3表达,抑制Survivin、Ki-67表达发挥作用的。

关键词：基因间区长链非编码核糖核酸结直肠癌微小核糖核酸-92a Kruppel样因子4 Caspase-3

仙茅苷介导PERK/ATF4/CHOP通路减轻UC大鼠肠黏膜病理改变的作用与机制探讨

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现代消化及介入诊疗 2024年第7期29卷 805-811页

作者：韩炜姜楠霍斌亮师文陕西省人民医院肿瘤外科 710068 西安交通大学第一附属医院消化内科 710061

目的观察仙茅苷治疗溃疡性结肠炎(UC)大鼠的作用,并探讨其对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)通路的调控作用。方法取61只SD大鼠以三硝基苯磺酸(TNBS)法诱导建立UC模型,按随机数字表分... 详细信息

目的观察仙茅苷治疗溃疡性结肠炎(UC)大鼠的作用,并探讨其对蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)通路的调控作用。方法取61只SD大鼠以三硝基苯磺酸(TNBS)法诱导建立UC模型,按随机数字表分为仙茅苷低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg仙茅苷溶于生理盐水),美沙拉嗪组(500 mg/kg美沙拉嗪溶于生理盐水)、PERK抑制剂组(GSK2606414 1.0 mg/kg溶于生理盐水)、模型组(生理盐水),另取10只健康SD大鼠记为正常组(生理盐水),生理盐水体积均为1 ml/100 g大鼠体质量,均灌胃每天1次,连续10 d。给药结束后次日,评价疾病活动指数(DAI);气相色谱法(GC)测定两组大鼠5 h尿液中乳果糖(L)与甘露醇(M)排泄率(L/M)比值;双抗体夹心法测定血清糖皮质激素浓度,酶联免疫法测定血清白介素-6(IL-6)、干扰素(IFN-γ)、白介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肠黏膜病理改变;实时-逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肠黏膜组织PERK、ATF4、CHOP、Bcl2关联X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫印迹法(WB)检测肠黏膜组织PERK、ATF4、CHOP、Bax、Bcl-2蛋白表达及磷酸化PERK(p-PERK)水平。结果肉眼和HE染色观察证实建模成功;与正常组比较,模型组L/M,DAI和肠黏膜病理评分,血清糖皮质激素浓度和血清IL-6、IFN-γ、IL-8和TNF-α水平,PERK、ATF4、CHOP、Bax mRNA与蛋白表达,p-PERK水平均升高(P0.05),其余每2组比较差异均有统计学意义(P<0.05);模型组结肠黏膜病理严重改变,仙茅苷低剂量组有所减轻,仙茅苷中剂量组、美沙拉嗪组和PERK抑制剂组均明显减轻,仙茅苷高剂量组显著减轻。结论仙茅苷可改善UC大鼠肠黏膜屏障功能、控制疾病活动度、减轻病理改变,推测与抑制PERK/ATF4/CHOP通路有关。

关键词：仙茅苷蛋白激酶R样内质网激酶活化转录因子4 增强子结合蛋白同源蛋白溃疡性结肠炎

siRNA干扰ADAR1表达对小鼠混合淋巴细胞培养的影响

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第四军医大学学报 2007年第5期28卷 414-417页

作者：蔡磊霍斌亮张巍张福琴赵青川第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710033

目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向混合淋巴细胞培养中所扮演的角色.方法:将化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA在Lipofectamine 2000介导下转染处于双向混合淋巴细胞培养试验中的小鼠淋巴细胞,观察转染组与未转染组细胞表型的变化... 详细信息

目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向混合淋巴细胞培养中所扮演的角色.方法:将化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA在Lipofectamine 2000介导下转染处于双向混合淋巴细胞培养试验中的小鼠淋巴细胞,观察转染组与未转染组细胞表型的变化;通过RT-PCR检测两组细胞中ADAR1 mRNA的变化;细胞计数和台盼蓝拒染法检测靶向ADAR1基因的siRNA对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价转染化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA后对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用.结果:在经典淋巴细胞混合培养试验中,转染靶向ADAR1基因的siRNA可以明显降低小鼠淋巴细胞内ADAR1的表达,同时ADAR1-siRNA对小鼠淋巴细胞的增殖有抑制作用.结论:在经典淋巴细胞混合培养试验中,化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA能有效抑制ADAR1基因在小鼠淋巴细胞中的表达,并对小鼠淋巴细胞增殖有抑制作用.

关键词：淋巴细胞培养试验,混合 RNA干扰 ADAR1基因 siRNA 排斥反应