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骨髓间充质干细胞诱导分化成骨方法的研究与进展

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中国组织工程研究 2013年第6期17卷 1101-1106页

作者：雷栓虎岳海源汪静汪玉良兰州大学附属第二医院骨科甘肃省兰州市730000 甘肃省骨关节疾病重点实验室甘肃省兰州市730000

背景:骨髓间充质干细胞具有良好的成骨分化潜能,移植入体内后可分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、肝脏和神经等多种细胞。目的:综述大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化成骨最新方法进展。方法:分别以"骨髓间充质干细胞,成骨细胞,诱导分化"、"bone... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞具有良好的成骨分化潜能,移植入体内后可分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、肝脏和神经等多种细胞。目的:综述大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化成骨最新方法进展。方法:分别以"骨髓间充质干细胞,成骨细胞,诱导分化"、"bonemesenchymalstemcells,osteoblastcells,osteogenic differentiation"为检索词,应用计算机检索CHKD期刊全文数据库,PubMed数据库和万方数据库1995至2011年有关文章。纳入有关骨髓间充质干细胞的文献。排除内容重复和缺乏原创性文献。保留34篇文献做进一步分析。结果与结论:骨髓间充质干细胞在适当的生长因子诱导下可以快速地向成骨细胞分化和增殖。在体外诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化需要特定的诱导条件、优良的诱导剂以及合适的剂量。骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化受许多自身调控因素(控制基因表达的转录因子)和环境调控因素(分泌因素、细胞外基质,化学因素、细胞与细胞间的相互作用)的影响,这些调控因素并不是孤立存在的,而是相互联系、相互作用,共同调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。

关键词：干细胞干细胞综述骨髓间充质干细胞成骨细胞诱导分化调控综述文献省级基金

大鼠脊髓损伤后不同行为学评分方法的比较研究

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中国矫形外科杂志 2014年第13期22卷 1221-1225页

作者：吴卓赵敏王永红汪玉良雷栓虎黄良增兰州大学第二医院骨科兰州730030 兰州大学第二临床医学院兰州730000

[目的]探讨胸段脊髓损伤后神经功能评价的最佳方法。[方法]将20只SD成熟雌性大鼠随机分为脊髓损伤组、假手术组。脊髓损伤组采用T10脊髓离断法制作脊髓损伤模型,假手术组仅行椎板切除术。分别于术后1、3、5、7、14、21、28 d观察大鼠后... 详细信息

[目的]探讨胸段脊髓损伤后神经功能评价的最佳方法。[方法]将20只SD成熟雌性大鼠随机分为脊髓损伤组、假手术组。脊髓损伤组采用T10脊髓离断法制作脊髓损伤模型,假手术组仅行椎板切除术。分别于术后1、3、5、7、14、21、28 d观察大鼠后肢神经功能恢复的情况并记录结果。评价标准分别为:改良Tarlov评分和BBB评分。[结果]两组大鼠改良Tarlov评分和BBB评分值在伤后各时间点差异均非常显著(P﹤0.01);评分值标准化为百分制后,假手术组大鼠两种评分值之间的一致性较好,脊髓损伤组大鼠两种评分值之间的差异较大,伤后1、3、5、7d时差异非常显著(P﹤0.01)。[结论]两种不同行为学评分方法的评价结果均与损伤程度相关,其中BBB评分相关性较高,其对脊髓损伤模型运动功能评价具有明显优势,能准确、客观地反映大鼠胸段脊髓损伤后运动功能恢复的每一阶段,可作为今后研究的标准评分法。

关键词：脊髓损伤行为学评分

神经毡蛋白-1在创伤性颅脑损伤伴胫骨骨折愈合过程中的表达变化

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中南大学学报（医学版） 2017年第2期42卷 154-160页

作者：李争争赵军伟罗伟李康雷栓虎汪玉良兰州大学第二医院创伤骨科甘肃省骨关节疾病重点实验室兰州730030

目的:观察创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后神经毡蛋白-1(neuropilin-1,Nrp-1)及其受体脑信号蛋白3A(semaphorin 3A,Sema3A)、VEGF在胫骨骨折愈合中的表达变化,探讨Nrp-1在神经损伤后病理性骨痂形成中的作用机制。方法:雌... 详细信息

目的:观察创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后神经毡蛋白-1(neuropilin-1,Nrp-1)及其受体脑信号蛋白3A(semaphorin 3A,Sema3A)、VEGF在胫骨骨折愈合中的表达变化,探讨Nrp-1在神经损伤后病理性骨痂形成中的作用机制。方法:雌性Wistar大鼠192只,8~10周龄,体重220~250 g,随机分为对照组(C组)、胫骨骨折组(F组)、TBI组、TBI合并胫骨骨折组(TBI+F组),每组48只。每组术后3,5,7,14,21及28 d处死8只大鼠取材。对骨痂中的Nrp-1行免疫组织化学及Western印迹定位、定量检测,对Sema3A及VEGF行Western印迹定量检测。结果:免疫组织化学显示Nrp-1在TBI+F组骨外膜成骨区域及软骨内成骨区域的软骨细胞中的表达较F组增高,尤其在术后7,14和21d(均P<0.05);Nrp-1在F组新生骨小梁周围成骨细胞中的表达较TBI+F组高,尤其在术后14和21 d(均P<0.05);Western印迹检测表明:Nrp-1,Sema3A和VEGF在TBI+F组、F组骨折愈合过程中表达趋势相同,但在各时间点TBI+F组Nrp-1表达量高于F组,下降缓慢,尤其在术后14,21和28 d(均P<0.05),同时TBI+F组Sema3A/VEGF比率高于F组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:神经损伤后Nrp-1在骨折愈合过程中呈异常表达,可能通过促进软骨细胞分化与增殖、阻止神经纤维在软骨痂的长入、降低成骨细胞分化,参与神经损伤后病理性骨痂的形成。

关键词：神经损伤骨折愈合神经毡蛋白-1 软骨细胞神经纤维成骨细胞

累及棘突多发胸椎血管瘤:1例报告与文献综述

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中国矫形外科杂志 2023年第7期31卷 635-638页

作者：陈海伟雷栓虎汪玉良周建伟兰州大学第二医院骨科甘肃兰州730030

脊柱血管瘤(vertebral hemangioma,VHs)是一种常见的脊柱良性肿瘤,大多无症状。只有0.9%~1.2%的侵袭性VHs由于骨膨胀、皮质侵蚀、向椎管内延伸、血流障碍、硬膜外出血导致脊髓、神经根压迫而引起神经症状。此外,脊柱血管瘤也会导致严重... 详细信息

脊柱血管瘤(vertebral hemangioma,VHs)是一种常见的脊柱良性肿瘤,大多无症状。只有0.9%~1.2%的侵袭性VHs由于骨膨胀、皮质侵蚀、向椎管内延伸、血流障碍、硬膜外出血导致脊髓、神经根压迫而引起神经症状。此外,脊柱血管瘤也会导致严重的并发症,如脊柱病理性骨折。本文报告了1例累及棘突多发胸椎血管瘤,且伴有相邻节段的椎体病理性骨折,并回顾总结已发表累及棘突的脊柱血管瘤的文献回顾总结。

关键词：脊柱血管瘤棘突椎体病理性骨折手术治疗

微丝聚合剂重构大鼠脊髓星形胶质细胞骨架对水通道蛋白4与K+通道蛋白4.1基因表达的影响

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中国脊柱脊髓杂志 2014年第6期24卷 555-560页

作者：杜文佳党跃修汪玉良雷栓虎黄良增汪静马靖琳安丽萍兰州大学第二医院骨科甘肃省骨关节病重点实验室甘肃省兰州市730030

目的:探讨不同浓度微丝聚合剂(Jasplakinolide,JSK)对大鼠脊髓星形胶质细胞水通道蛋白4(aquaporins-4,AQP4)和K+通道蛋白4.1(potassium ion channel protein-4.1,Kir4.1)基因表达的影响。方法:分离培养原代大鼠脊髓星形胶质细胞并鉴定,采用浓度为0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.40μg/ml的JSK干预细胞2h。噻唑蓝比色法(3-4,5-Dimethylthiazol-2-yl-25-diphenyltetrazolium brom,MTT)检测细胞的增殖情况,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的变化和Real-time PCR法检测AQP4和Kir4.1 mRNA表达的变化。结果:0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml浓度的JSK在干预细胞2h时与空白对照组相比对细胞的增殖无明显差异(P>0.05),各浓度间相比无统计学意义。激光共聚焦显微镜观察0.05μg/ml、0.10μg/ml和0.20μg/ml浓度的JSK可以使得微丝空间结构发生重构,而0.40μg/ml浓度则使细胞微丝发生破坏。Real-time PCR检测显示,0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml浓度的JSK均能显著降低AQP4和Kir4.1基因的表达,并与对照组相比有统计学意义(P<0.05),且0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml浓度间相比也有统计学意义。结论:0.05μg/ml、0.10μg/ml和0.20μg/ml浓度的JSK可使大鼠脊髓星形胶质细胞微丝发生重构且可以下调AQP4和Kir4.1基因的表达。

关键词：星形胶质细胞微丝增殖

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中国修复重建外科杂志 2019年第4期33卷 511-515页

作者：王诗尧许少策师政伟武建超雷栓虎汪玉良兰州大学第二医院骨科兰州730000 甘肃省骨关节疾病重点实验室兰州730000

目的总结骨重建过程中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)与核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)/骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)信号系统作用机制的研究进展,为进一步研究骨相关疾病的预防及治疗提供理论依据。方法广泛查阅国内外近年来骨重建过程中CGRP与RANK/RANKL/OPG信号系统相关文献,并加以分析总结。结果骨重建过程中,CGRP与RANK/RANKL/OPG信号系统发挥着重要调控作用。结论目前对于骨重建过程中CGRP与RANK/RANKL/OPG信号系统的作用机制研究仍不够深入,需进一步研究二者在骨重建过程中的具体作用方式、相互联系,明确作用机制,为临床上骨相关疾病的治疗带来新思路、新方法。

关键词：骨重建成骨细胞破骨细胞降钙素基因相关肽核因子κB受体活化因子核因子κB受体活化因子配体骨保护蛋白

中国人群PVP术后非手术椎体骨折的危险因素

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中国脊柱脊髓杂志 2018年第9期28卷 801-810页

作者：李康王诗尧许少策师政伟武建超雷栓虎岳海源汪玉良兰州大学第二医院骨科兰州市730030

目的 :系统评价中国人群椎体成形术(PVP)术后非手术椎体骨折的危险因素,为临床制定非手术椎体骨折的预防控制措施提供参考。方法:检索Pubmed数据库、Embase数据库、Cochrane Library数据库、中国知网数据库(CNKI)、维普数据库(VIP)、万... 详细信息

目的 :系统评价中国人群椎体成形术(PVP)术后非手术椎体骨折的危险因素,为临床制定非手术椎体骨折的预防控制措施提供参考。方法:检索Pubmed数据库、Embase数据库、Cochrane Library数据库、中国知网数据库(CNKI)、维普数据库(VIP)、万方数据库等,纳入1987年1月～2018年2月期间关于中国人群PVP术后非手术椎体骨折发生的危险因素的文献。纳入标准为公开发表且可提取有效数据的文献。排除标准为病理性骨折以及NOS文献质量评分0.05]、后凸畸形矫正度[WMD=1.92,95%CI=(-1.16,4.99),P>0.05]与PVP术后非手术椎体骨折的发生率无关。结论:术前多个椎体骨折、骨水泥漏入椎间盘、术后未抗骨质疏松治疗、高龄、高甲状旁腺素、女性、低骨密度是国人PVP术后非手术椎体骨折发生的危险因素。

关键词：压缩性骨折椎体成形术危险因素 Meta分析

蜂斗菜素诱导骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡及其机制

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西安交通大学学报（医学版） 2015年第3期36卷 395-399页

作者：岳海源任冬青王东萍雷栓虎齐进汪玉良兰州大学第二医院骨科甘肃省骨关节疾病重点实验室甘肃兰州730030 甘肃省人民医院麻醉科甘肃兰州730000 甘肃省人民医院血液科甘肃兰州730000

目的观察蜂斗菜素对骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用锥虫蓝拒染法检测蜂斗菜素对RPMI 8226细胞的增殖抑制作用,TUNEL法检测蜂斗菜素诱导的RPMIS226细胞凋亡,Hochest33258荧光染色法观察细胞核的变化,Western ... 详细信息

目的观察蜂斗菜素对骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用锥虫蓝拒染法检测蜂斗菜素对RPMI 8226细胞的增殖抑制作用,TUNEL法检测蜂斗菜素诱导的RPMIS226细胞凋亡,Hochest33258荧光染色法观察细胞核的变化,Western blot技术检测Caspase-3、8、9蛋白表达和MEK/ERK、p38MAPK蛋白磷酸化水平。结果蜂斗菜素作用24、48、72h后对骨髓瘤RPMI 8226细胞均有显著的增殖抑制作用(P均<0.01);蜂斗菜素呈时间和浓度依赖地诱导骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡(P<0.05,P<0.05),Caspase抑制剂预处理可明显抑制细胞凋亡;蜂斗菜素作用72h后,Caspase-3、8、9蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01,P<0.05),ERK1/2及MEK蛋白磷酸化水平显著下降(P<0.01,P<0.05),p38MAPK蛋白磷酸化水平显著上升(P<0.01)。结论蜂斗菜素能够抑制骨髓瘤RPMI 8226细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与Caspase-3、8、9蛋白激活,ERK/MEK及p38MAPK蛋白磷酸化改变有关。

关键词：蜂斗菜素骨髓瘤凋亡 Caspase ERK/MEK p38MAPK

细胞松弛素D对大鼠脊髓星形胶质细胞水通道蛋白和内向整流性钾通道4.1基因表达的影响

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中国康复理论与实践 2014年第7期20卷 616-620页

作者：杜文佳汪玉良党跃修雷栓虎黄良增汪静马靖琳安丽萍兰州大学第二医院骨科甘肃兰州市730030 甘肃省骨关节病重点实验室甘肃兰州市730030

目的探讨不同浓度细胞松弛素D(CytD)对大鼠脊髓星形胶质细胞骨架重构,水通道蛋白(AQP)1、AQP4及内向整流性钾通道4.1(Kir4.1)基因表达的影响。方法原代培养大鼠脊髓星形胶质细胞,加CytD 0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.40μg/ml... 详细信息

目的探讨不同浓度细胞松弛素D(CytD)对大鼠脊髓星形胶质细胞骨架重构,水通道蛋白(AQP)1、AQP4及内向整流性钾通道4.1(Kir4.1)基因表达的影响。方法原代培养大鼠脊髓星形胶质细胞,加CytD 0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml、0.40μg/ml、0.80μg/ml和1.00μg/ml共培养2 h、12 h和24 h。MTT法检测细胞增殖情况;鬼笔环肽联合Hoechst 33342套染后激光共聚焦显微镜下观察共培养2 h后细胞骨架重构情况;RT-PCR法检测共培养2 h时AQP1、AQP4和Kir4.1 mRNA表达水平。结果细胞生存率随CytD浓度升高和作用时间延长而减少。CytD使大鼠脊髓星形胶质细胞微丝发生解聚、弯曲,但极性未失。CytD 0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.20μg/ml和0.40μg/ml上调AQP1、AQP4和Kir4.1 mRNA表达。结论适当浓度CytD可以重建星形胶质细胞骨架,上调大鼠脊髓星形胶质细胞AQP1、AQP4和Kir4.1基因表达。

关键词：星形胶质细胞细胞松弛素细胞骨架水通道蛋白内向整流性钾通道脊髓大鼠