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用液相二次离子质谱技术探测Melittin与磷脂膜的相互作用

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中国科学（B辑） 1997年第5期27卷 445-451页

作者：武轶隋森芳清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室

利用液相二次离子质谱技术(LSIMS)结合特异性蛋白酶降解研究了膜结合Melittin的“抛锚”状态.结果显示,Melittin(蜂毒素)分子在磷脂膜上为平躺α-螺旋结构,其螺旋中含Lys_7,Lys_(21),Arg_(22)的一侧朝向磷脂膜的外部.这一发现对蜂毒素... 详细信息

利用液相二次离子质谱技术(LSIMS)结合特异性蛋白酶降解研究了膜结合Melittin的“抛锚”状态.结果显示,Melittin(蜂毒素)分子在磷脂膜上为平躺α-螺旋结构,其螺旋中含Lys_7,Lys_(21),Arg_(22)的一侧朝向磷脂膜的外部.这一发现对蜂毒素插膜机制的研究具有十分重要的意义.结果还表明,质谱技术与专一性蛋白水解酶的结合为膜插入机制的研究提供了一个崭新的、行之有效的方法.

关键词： Melittin 蛋白取向磷脂膜蜂毒素蛋白毒素蛋白

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生物三维电子显微学进入全新高速发展时期

生物物理学报 2007年第4期23卷 228-239,295页

作者：隋森芳清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084

生物三维电子显微学主要由三个部分组成——电子晶体学、单颗粒技术和电子断层成像术,其结构解析对象的尺度范围介于X射线晶体学与光学显微镜之间,适合从蛋白质分子结构到细胞和组织结构的解析。以冷冻电镜技术与三维重构技术为基础的... 详细信息

生物三维电子显微学主要由三个部分组成——电子晶体学、单颗粒技术和电子断层成像术,其结构解析对象的尺度范围介于X射线晶体学与光学显微镜之间,适合从蛋白质分子结构到细胞和组织结构的解析。以冷冻电镜技术与三维重构技术为基础的低温电子显微学代表了生物电子显微学的前沿。低温单颗粒技术对于高度对称的病毒颗粒的解析最近已达到3.8"分辨率,正在成为解析分子量很大的蛋白质复合体高分辨结构的有效技术手段。低温电子断层成像技术目前对于真核细胞样品的结构解析已达到约40#的分辨率,在今后5年有望达到20$。这样,把X射线晶体学、NMR以及电镜三维重构获得的蛋白质分子及复合体的高分辨率的结构,锚定到较低分辨率的电子断层成像图像中,从而在细胞水平上获得高精确的蛋白质空间定位和原子分辨率的蛋白质相互作用的结构信息。这将成为把分子水平的结构研究与细胞水平的生命活动衔接起来的可行途径。

关键词：三维电子显微学低温电子显微学电子晶体学单颗粒技术电子断层成像术

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亲和素在脂单层膜上的二维晶体研究

科学通报 1995年第2期40卷 168-171页

作者：覃宏隋森芳清华大学生物科学与技术系

生物大分子的二维晶体可以利用电子晶体学的方法进行结构分析.利用脂单层膜对蛋白进行二维结晶是一种比较新颖的方法.这一方法最早是由美国斯坦福大学Kornberg教授领导的实验室开创的.亲和素是一种从鸡蛋清中提取的糖蛋白.它和链霉亲和... 详细信息

生物大分子的二维晶体可以利用电子晶体学的方法进行结构分析.利用脂单层膜对蛋白进行二维结晶是一种比较新颖的方法.这一方法最早是由美国斯坦福大学Kornberg教授领导的实验室开创的.亲和素是一种从鸡蛋清中提取的糖蛋白.它和链霉亲和素在生物活性上有着惊人的相似性.两者都由4个等同亚基组成.

关键词：亲和素生物素蛋白质二维晶体脂单层膜

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电子显微镜观察SNARE核心复合体的结构

生物物理学报 2007年第3期23卷 151-156页

作者：谢鑫隋森芳清华大学生命科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京100084

作为神经突触中介导囊泡融合的核心蛋白,SNARE(soluble NSF attachment protein receptors)复合体由VAMP、syntaxin和SNAP25三种蛋白组成。而由其可溶性部分组成的SNARE核心复合体是发挥融合功能的关键部分。通过表达SNARE蛋白,应用分... 详细信息

作为神经突触中介导囊泡融合的核心蛋白,SNARE(soluble NSF attachment protein receptors)复合体由VAMP、syntaxin和SNAP25三种蛋白组成。而由其可溶性部分组成的SNARE核心复合体是发挥融合功能的关键部分。通过表达SNARE蛋白,应用分子筛和离子交换柱等纯化方法,重组得到了高纯度的SNARE核心复合体,并分析了其在水溶液中的稳定性。最后,采用负染电镜观察方法得到了该复合体的二维平均结构。在水溶液中,SNARE复合体核心部分为2.5 nm宽、12 nm长的棒状结构。

关键词： SNARE核心复合体电子显微镜电镜

膜蛋白研究的里程碑——2003年诺贝尔化学奖

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科学通报 2004年第5期49卷 403-408页

作者：赵文龙隋森芳清华大学生物科学与技术系

2003年10月，诺贝尔化学奖颁给了两位生物学家，美国约翰霍普金斯大学(Johns Hopkins University)医学院的Peter Agre和洛克菲勒大学(Rockefeller University)休斯医学研究所(Howard Hughes Medical Institute)的Roderick Mackinnon，... 详细信息

关键词：膜蛋白 2003年诺贝尔化学奖水通道钾离子通道

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蜂毒素插膜过程构象变化的研究

科学通报 1994年第3期39卷 273-276页

作者：吴桦陈凯声隋森芳清华大学生物科学与技术系北京100084

蜂毒素(Melittin)是蜜蜂毒液中的一种多肽,由26个氨基酸组成,分子量2840.蜂毒素具有强烈的溶胞作用,据报道大约1μg/ml的蜂毒素即可引起红细胞溶血.此外蜂毒素还可以在膜上形成电压门控的离子通道,高浓度的蜂毒素可以引起脂双层的微团化... 详细信息

蜂毒素(Melittin)是蜜蜂毒液中的一种多肽,由26个氨基酸组成,分子量2840.蜂毒素具有强烈的溶胞作用,据报道大约1μg/ml的蜂毒素即可引起红细胞溶血.此外蜂毒素还可以在膜上形成电压门控的离子通道,高浓度的蜂毒素可以引起脂双层的微团化(Micellization)并导致膜融合.关于蜂毒素执行生理功能的机制目前尚无定论,已有的实验证据表明,蜂毒素与生物膜的作用是其发挥生物学功能的前提.

关键词：蜂毒素插膜分子构象多肽

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磷脂液相二次离子质谱分析中的分子离子簇

分析化学 1997年第2期25卷 139-143页

作者：武轶王敬尊隋森芳北京微量化学研究所!北京100091 清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室!北京100084

对3种极性头不同的磷脂DMPG、DMPC、DMPE的液相二次离子质谱分析中出现的分子离子簇现象进行了系统的研究。结果表明，虽然分子离子簇的形成与许多因素有关，如PH值、离子强度等，但起决定作用的是样品在底物中的浓度，浓度增大有利... 详细信息

对3种极性头不同的磷脂DMPG、DMPC、DMPE的液相二次离子质谱分析中出现的分子离子簇现象进行了系统的研究。结果表明，虽然分子离子簇的形成与许多因素有关，如PH值、离子强度等，但起决定作用的是样品在底物中的浓度，浓度增大有利于分子离子簇的形成。研究还发现，由不同种类磷脂分子形成的分子离子簇峰明显高于由同种磷脂分子所形成的分子离子簇峰，指出异种磷脂分子间的簇离子形成能力高于同种磷脂分子。此外还讨论了磷脂分子在离子源条件下的稳定性、裂解规律及相互作用等。结果表明，本实验所选用的磷脂分子在LSIMS条件下是稳定的，均能得到较强的分子离子峰，其主要碎片峰是磷酰键断裂而产生的碎片离子峰。

关键词：磷脂液相二次离子质谱分子离子簇

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电子显微学在结构生物学研究中的新进展

电子显微学报 2003年第5期22卷 449-456页

作者：王大能陈勇隋森芳 SkirballInstituteofBiomolecularMedicine NewYorkUniversitySchoolofMedicine 清华大学生物科学与技术系北京100084

电子显微学是结构生物学的重要分支,已经成为一种公认的研究生物大分子、超分子复合体及亚细胞结构的有力手段。本文先回顾了近期电子显微学在技术上的新进展,后概述了生物电子显微学的三个组成部分———电子晶体学,单颗粒技术,电子断... 详细信息

电子显微学是结构生物学的重要分支,已经成为一种公认的研究生物大分子、超分子复合体及亚细胞结构的有力手段。本文先回顾了近期电子显微学在技术上的新进展,后概述了生物电子显微学的三个组成部分———电子晶体学,单颗粒技术,电子断层成像术的基本原理,技术方法与研究现状。最后,对电子显微学与其他结构生物学研究手段的结合以及电子显微学的未来发展做了简单的展望。

关键词：结构生物学电子显微学电子晶体学单颗粒技术电子断层成像术