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人热休克蛋白70基因在大肠杆菌中的表达及纯化

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中国医科大学学报 2005年第6期34卷 564-565,568页

作者：李航宇傅庆国孔凡民隋春阳翟振华孙宏治刘金钢郭仁宣中国医科大学附属第二医院普外科辽宁沈阳110004 中国医科大学附属第一医院普外科中国医科大学附属第一医院肿瘤科

目的:构建人热休克蛋白70(HSP 70)的原核表达载体,诱导其表达并纯化。方法:应用PCR技术从人胆管癌组织中扩增出HSP 70基因片段,经T-A克隆连接到末端经平滑处理后的pMD18-T S imp le质粒并测序。利用双酶切技术构建重组原核表达载体pGEX-... 详细信息

目的:构建人热休克蛋白70(HSP 70)的原核表达载体,诱导其表达并纯化。方法:应用PCR技术从人胆管癌组织中扩增出HSP 70基因片段,经T-A克隆连接到末端经平滑处理后的pMD18-T S imp le质粒并测序。利用双酶切技术构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-HSP 70,并转化大肠杆菌JM 109,经IPTG诱导后表达得到HSP70融合蛋白。应用G lutath ione-Sepharose 4B亲和层析柱提纯融合蛋白,用生物素化凝血酶分离并纯化目的蛋白,最后行W setern b lot鉴定。结果:PCR扩增结果与预计目的基因大小一致;序列分析与GeneBank中收录完全一致;重组表达载体pGEX-4T-1-HSP 70构建成功;W estern b lot结果显示目的蛋白可以与兔抗人的HSP 70单克隆抗体特异性结合。结论:HSP 70编码序列已经成功克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,并在大肠杆菌JM 109中获得表达。

关键词：热休克蛋白70 原核表达

胆囊结石形成与胆盐转运子BSEP、MRP2、NTCP关系的研究

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中华肝胆外科杂志 2006年第3期12卷 161-163页

作者：孔凡民隋春阳李航宇李昱骥胡勇郭仁宣郭克建田雨霖中国医科大学附属第一医院普外科沈阳市110001 沈阳市第八人民医院

目的探讨不同的胆盐转运子(BSEP、MRP2、NTCP)与胆囊结石形成的关系。方法胆囊结石病人的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和 Western blot 技术检测 BSEP、MRP2、NTCP mRNA 和蛋白的表达。结果... 详细信息

目的探讨不同的胆盐转运子(BSEP、MRP2、NTCP)与胆囊结石形成的关系。方法胆囊结石病人的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和 Western blot 技术检测 BSEP、MRP2、NTCP mRNA 和蛋白的表达。结果(1)胆囊结石病人的肝组织中的 BSEP、MRP2和 NTCP mRNA 的表达较正常肝组织减少,光密度平均值分别为0.47±0.18、1.12±0.39和0.56±0.31,而正常肝的组织中相应的光密度值分别为0.90±0.42、2.48±0.89和0.76±0.28。统计分析结果显示,BSEP、MRP2在两组间均存在显著性差异(P0.05)。(2)所有组织中 BSEP、MRP2蛋白均有表达,但胆囊结石病人的肝组织中 BSEP、MRP2蛋白的表达要显著低于正常的肝组织(P<0.01)。结论胆囊结石病人肝组织中 BSEP、MRP2的 mRNA 和蛋白的表达均下降,BSEP、MRP2的表达降低可能与胆囊结石的形成有关。NTCP 可能与结石的形成无关。

关键词：胆结石转运子

隐匿性胸腹裂孔疝致慢性胃扭转、腹内疝延误诊断1例

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中国误诊学杂志 2005年第12期5卷 2388-2388页

作者：李天山隋春阳赵连和沈阳医学院附属奉天医院普外科辽宁沈阳110024

1 病例报告女,62岁.因进食后反复呕吐伴上腹部不适1个月入院.1个月来症状逐渐加重,无呕血及黑便,无胸闷气短.入院前10 d曾于门诊就诊,胃镜检查提示胃扭转,并行胃镜下胃扭转复位治疗,症状无明显缓解.既往无胸腹及外伤手术史.查体:一般状... 详细信息

1 病例报告女,62岁.因进食后反复呕吐伴上腹部不适1个月入院.1个月来症状逐渐加重,无呕血及黑便,无胸闷气短.入院前10 d曾于门诊就诊,胃镜检查提示胃扭转,并行胃镜下胃扭转复位治疗,症状无明显缓解.既往无胸腹及外伤手术史.查体:一般状态可,双肺叩诊无浊音,听诊呼吸音清,腹形对称,全腹平坦,无胃肠型,上腹正中轻压痛,无肌紧张,无振水音,肠鸣音正常.

关键词：疝,腹/并发症胃扭转/诊断疝,腹/诊断胸部疾病/诊断误诊

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乳腺癌术后致卵巢囊肿

中国保健营养（下半月） 2013年第7期23卷 1925-1925页

作者：隋春阳李丹张升瑞李嘉沈阳医学院奉天医院普外二科

我国乳腺癌的发病率呈逐年上升的趋势,目前乳腺癌的治疗主要以手术、放化疗、内分泌治疗及靶向治疗为主。内分泌治疗已经成为乳腺癌手术后受体阳性(ERh和PR)的患者必不可少的治疗手段。目前有为数众多的患者正在口服三苯氧胺治疗。因此... 详细信息

我国乳腺癌的发病率呈逐年上升的趋势,目前乳腺癌的治疗主要以手术、放化疗、内分泌治疗及靶向治疗为主。内分泌治疗已经成为乳腺癌手术后受体阳性(ERh和PR)的患者必不可少的治疗手段。目前有为数众多的患者正在口服三苯氧胺治疗。因此,对于三苯氧胺的副作用及治疗方案有必要加以重视。本文就我院2009年7月——2012年5月口服TMX治疗的绝经前后乳腺癌妇女其卵巢囊肿发病情况作一分析。

关键词：乳腺癌口服三苯氧胺卵巢囊肿

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乳腺癌术后致卵巢囊肿

中国保健营养 2013年第7期 1925-1925页

作者：隋春阳李丹张升瑞李嘉沈阳医学院奉天医院普外二科

关键词：乳腺癌口服三苯氧胺卵巢囊肿

热休克蛋白70(HSP70)-肿瘤肽的纯化

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中国保健营养 2013年第8期 1667-1667页

作者：隋春阳李嘉张升瑞赵连和沈阳医学院奉天医院普外二科

目的本文主要探讨热休克蛋白70(HSP70)-肿瘤肽的纯化。方法肝癌患者行手术切除后的肝癌组织,经处理后-70℃冰箱保存。然后分别经过透析、蛋白质分子量鉴定、蛋白质性质鉴定、蛋白质浓度测定并及时观察记录。结果 10g肝癌组织经上述分离... 详细信息

目的本文主要探讨热休克蛋白70(HSP70)-肿瘤肽的纯化。方法肝癌患者行手术切除后的肝癌组织,经处理后-70℃冰箱保存。然后分别经过透析、蛋白质分子量鉴定、蛋白质性质鉴定、蛋白质浓度测定并及时观察记录。结果 10g肝癌组织经上述分离纯化过程最终获得HSP70-肽复合物总量为8mg。结论利用二步蛋白纯化法有益于HSP70-肽复合物对肿瘤作用机制和肿瘤疫苗安全性的进一步研究与推广。

关键词：热休克蛋白70(HSP70) 肿瘤肽纯化

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原发小肠肿瘤误诊15例分析

中国误诊学杂志 2006年第5期6卷 817-817页

作者：王守敏隋春阳赵连和沈阳医学院附属奉天医院普外科辽宁沈阳110024

现将我科1999～2004年原发小肠肿瘤误诊15例分析如下.1 临床资料

关键词：小肠肠肿瘤/诊断误诊

胆囊胆固醇结石与肝细胞胆管膜上转运子BSEP、MRP2和MDR3关系的研究

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中国普外基础与临床杂志 2006年第3期13卷 314-316页

作者：孔凡民隋春阳李航宇李昱骥孙宏治郭仁宣郭克建田雨霖中国医科大学附属第一医院普外科沈阳110001 沈阳医学院奉天医院普外科沈阳110024 中国医科大学附属第二医院普外科沈阳110004

目的探讨肝细胞胆管膜上转运子BSEP、MRP2和MDR3与胆囊胆固醇结石形成的关系。方法收集胆囊胆固醇结石患者的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例。应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术和Westernblot技术检测BSEP、MRP2及MDR3mRNA和蛋白... 详细信息

目的探讨肝细胞胆管膜上转运子BSEP、MRP2和MDR3与胆囊胆固醇结石形成的关系。方法收集胆囊胆固醇结石患者的肝组织标本20例,正常肝组织标本10例。应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术和Westernblot技术检测BSEP、MRP2及MDR3mRNA和蛋白的表达。结果胆囊胆固醇结石患者肝组织中BSEP、MRP2和MDR3的mRNA及蛋白表达均显著低于正常肝组织(P<0.01)。结论BSEP、MRP2和MDR3的表达降低可能与胆囊胆固醇结石的形成有关。

关键词：胆固醇结石转运子

热休克蛋白70(HSP70)-肿瘤肽的纯化

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中国保健营养（下半月） 2013年第8期23卷 1667-1667页

作者：隋春阳李嘉张升瑞赵连和沈阳医学院奉天医院普外二科

关键词：热休克蛋白70(HSP70) 肿瘤肽纯化