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双酚A对稀有鮈鲫氧化应激及精巢组织细胞连接损伤的研究

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双酚A对稀有鮈鲫氧化应激及精巢组织细胞连接损伤的研究

作者：陶诗雨西北农林科技大学

学位级别：硕士

双酚A(bisphenol A,BPA)是一种广泛存在的类雌激素内分泌干扰物(EDCs),它是在生产和生活中应用最为广泛的一类塑料制品。由于其大量的使用和不易降解的特性,对人类的生存环境和健康造成了威胁从而引起了人们的广泛关注。氧化应激和免疫... 详细信息

双酚A(bisphenol A,BPA)是一种广泛存在的类雌激素内分泌干扰物(EDCs),它是在生产和生活中应用最为广泛的一类塑料制品。由于其大量的使用和不易降解的特性,对人类的生存环境和健康造成了威胁从而引起了人们的广泛关注。氧化应激和免疫应答是生态毒理学的重要研究内容。研究表明BPA暴露后能够诱导鱼类产生氧化应激和免疫应答反应,然而关于这两者间的作用机制还不是很清楚。为了探究BPA暴露后鱼体产生的氧化应激和免疫应答间的作用机制,本研究中将稀有鮈鲫幼鱼(3周龄)暴露于对照组和3个浓度(1、225和1000μg/L)的BPA组7天。利用了分光光度计法检测了对照组和处理组中HO和NO的含量并用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)的方法检测了iNOS基因、TLRs通路相关基因以及细胞因子相关基因的mRNA表达量。近年来,研究发现细胞因子可以影响雄性的生殖功能并可能损害精子发生过程,主要集中在细胞因子对血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)完整性的调控。在鱼类中也存在着类似哺乳动物BTB的结构,称其为支持细胞(Sertoli cells,SCs)屏障。然而,关于BPA暴露后鱼体内细胞因子的改变如何影响精巢功能的分子机制的研究还比较少。为了探究BPA暴露后细胞因子的改变对稀有鮈鲫精巢的损伤作用,本研究将稀有鮈鲫雄鱼(6月龄)暴露于15μg/L的BPA溶液7天、21天和35天后,通过组织切片和免疫组化方法分析其性腺组织学和SCs屏障的完整性。同时,采用qRT-PCR和Western blotting的方法检测了TNFα的mRNA水平和蛋白水平、SCs屏障相关蛋白(occludin和β-catenin)的mRNA和蛋白水平以及有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路基因p38 MAPK的mRNA水平的表达。本研究获得的主要结果如下:1、在1、225和1000μg/L BPA暴露7天后,发现幼鱼中HO浓度在三个处理组中均显著上升,呈浓度依赖性。NO的含量在225μg/L BPA组中显著升高而在1000μg/L的BPA组中显著降低了,iNOS基因的表达量仅在225μg/L BPA处理组显著升高。这个结果表明BPA暴露后诱导了稀有鮈鲫幼鱼体内氧化应激的产生。在225和1000μg/L BPA暴露组中IFNγ、CXCR3和CXCR5的mRNA表达均被显著抑制,说明BPA暴露后可能产生了免疫抑制效应并参与了T淋巴细胞的功能调节。TLR4、MyD88、TRAF6以及NF-κB的mRNA表达量在225和1000μg/L BPA组处理7天后均发生了显著降低,并且此通路相关的下游信号分子TNFα、IL-1β以及IL-8基因表达在不同浓度BPA暴露下均受到了显著抑制。这个结果表明在转录水平上TLRs信号通路可能参与了BPA诱导稀有鮈鲫幼鱼体内炎症反应的过程,并最终表现为免疫抑制的效应。2、15μg/L BPA暴露7天后雄鱼精巢中出现了血管充血、炎症细胞浸润的现象并检测到TNFα的蛋白水平显著增加了。这表明BPA短期暴露时鱼体对药物较为敏感,可以快速引起鱼体产生免疫应答并改变细胞因子的表达。occludin和β-catenin蛋白是构成SCs屏障的两种重要蛋白。BPA暴露7天和21天后显著降低了occludin和β-catenin的蛋白水平,并且免疫染色结果显示BPA暴露7天精巢中occludin蛋白出现散乱分布现象。这个结果表明BPA暴露破坏了SCs屏障连接蛋白的完整性。此外,BPA暴露7天后检测到SCs屏障的渗透性也发生了改变,生物素渗透进入了成熟的精子细胞中,精巢中布满了特异性染色。以上结果均说明BPA暴露后破坏了稀有鮈鲫精巢中SCs屏障的完整性。p38 MAPK在细胞因子调节BTB功能的过程中具有重要作用。p38 MAPK mRNA表达量在BPA暴露7天后显著降低了,而暴露35天后显著上升。这表明MAPK信号通路可能参与了BPA暴露后产生的TNFα对SCs屏障的损伤过程。综上所述,本研究通过检测组织形态学、关键基因的mRNA表达和蛋白水平,研究了BPA诱导下稀有鮈鲫体内氧化应激和对精巢的损伤作用,为后续BPA的研究工作垫定了基础。

关键词：双酚A 稀有鮈鲫氧化应激细胞因子支持细胞屏障

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历史文献中的地表环境记录

兰台世界 2014年第35期 181-182页

作者：李蓓蓓陶诗雨南京信息工程大学语言文化学院

本文主要对在全球变化研究背景下,利用历史文献记录重建历史时期地表环境进行分析,探讨记录提取和定量化方法,以及研究结果分析和使用问题,为历史文献在多学科背景和国际研究需要下的深入利用提供参考。

关键词：古代日记气候重建

安康水库表层浮游藻类群落结构及其与环境因子的关系

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应用生态学报 2015年第7期26卷 2167-2176页

作者：袁聪陶诗雨张莹莹高建操杨彦平王在照西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

为了解安康水库表层水质与浮游藻类群落现状以及浮游藻类群落结构与环境因子之间的关系,于2012年1—12月对水库表层水进行每月一次的采样,分别对浮游藻类分布状况和理化因子进行分析。利用Shannon指数（H＇）和Pielou均匀度指数（J）分... 详细信息

为了解安康水库表层水质与浮游藻类群落现状以及浮游藻类群落结构与环境因子之间的关系,于2012年1—12月对水库表层水进行每月一次的采样,分别对浮游藻类分布状况和理化因子进行分析。利用Shannon指数（H＇）和Pielou均匀度指数（J）分析浮游藻类群落特征,根据理化指标和综合营养状态指数（TSI）评价水体营养状态。共检测到浮游藻类7门110属,丰度为0.11～2.08×104cells·L-1。藻类组成、污染指示种分布情况、多样性分析和TSI显示安康水库表层属于中污染水质,处于中营养状态。此外,高密度投饵水产养殖及生活污水直接排放入库对水质产生负面影响,支流岚河的水质状况也较差。典范对应分析（CCA）结果显示,测定的8个环境因子中,不同季节影响浮游藻类群落组成及分布的环境因子不同,且氮是影响浮游藻类组成的主要营养盐因子。理化指标分析显示,安康水库表层水大体满足II类水标准,水质良好。但部分采样点的总氮出现差于II类水标准的现象,表明安康水库水质有变差的趋势。

关键词：安康水库浮游藻类群落结构环境因子水质状况

科学教育的思考——气象科学视野下的古代神话教学

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黑龙江史志 2014年第19期 112-114页

作者：姜荣升陶诗雨南京信息工程大学语言文化学院江苏南京210044

气象与生活密切相关,气象灾害和气候变化已经成为社会经济生活的一个热点话题。目前气象科学的教学主要是以专业知识进行教学,在应用以及参与度上存在着不足,开展气象科学通识教育是目前急需解决的问题。开展通识教育的一个重要目的就在... 详细信息

气象与生活密切相关,气象灾害和气候变化已经成为社会经济生活的一个热点话题。目前气象科学的教学主要是以专业知识进行教学,在应用以及参与度上存在着不足,开展气象科学通识教育是目前急需解决的问题。开展通识教育的一个重要目的就在于,拓展人文视野,增进入文关怀。在中国古代流传着众多神话传说,从夸父逐日到后羿射日再到大禹治水等等,探寻其中的气候情况,不难发现其中蕴藏着的气象知识。从熟悉的古代神话和历史故事入手,以此渗透大气科学知识,以探究视角来分析探讨历史记载和气象原理,进行参与式的气象科学通识教育,并且有助于促进学生的人文发展。

关键词：通识教育古代神话历史气候

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巨峰葡萄采后贮藏保鲜技术研究进展

食品工业 2016年第11期37卷 240-243页

作者：陶诗雨李忠明李蓓蓓南京信息工程大学语言文化学院南京210044

巨峰葡萄虽果皮较厚,但肉软汁多且果穗松散的特性使其在贮运过程中会发生机械伤进而褐变甚至腐烂现象,因此应采取措施保持其新鲜度。总结了现有的物理、化学和生物巨峰葡萄的保鲜技术,阐述各类保鲜技术的技术原理、优缺点等,最后提出了... 详细信息

巨峰葡萄虽果皮较厚,但肉软汁多且果穗松散的特性使其在贮运过程中会发生机械伤进而褐变甚至腐烂现象,因此应采取措施保持其新鲜度。总结了现有的物理、化学和生物巨峰葡萄的保鲜技术,阐述各类保鲜技术的技术原理、优缺点等,最后提出了巨峰葡萄保鲜业的研究重点,以期为中国的葡萄产业发展提供理论指导。

关键词：巨峰葡萄保鲜展望

“双高”视野下高职院校学生干部队伍培养——以江苏经贸职业技术学院为例

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法制博览 2019年第36期 277-278页

作者：陶诗雨江苏经贸职业技术学院

"双高"背景下,高职学校跻身于新时代教育建设,积极发展自身特色专业学科以及综合实力,高职院校学生干部成长也迎来了新的机遇与挑战。笔者基于自身工作经验,把握住特色高水平高职学校和专业建设计划的契机,浅析学生干部培养举措。

关键词： “双高” 高职院校学生干部培养

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建安七子关键词及共现分析研究

安徽文学(下半月) 2015年第6期 5-7页

作者：鲁仪宋耀陶诗雨南京信息工程大学

以《中国知网》计源,运用共词分析方法对其74个关键词进行统计分析,从文献计量学的角度分析建安七子学科研究领域的发展态势,即"曹丕"和"建安文学"等可能是未来建安七子的研究重点。

关键词：建安七子关键词共现分析

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洁净燃料发动机阀座热处理工艺研究

热加工工艺 2020年第12期49卷 128-131,134页

作者：张智罗成肖紫圣徐胜良陶诗雨湖北汽车工业学院材料科学与工程学院湖北十堰442002

通过对高速钢粉末冶金气门阀座进行热处理试验,研究了淬火温度和回火温度对气门阀座组织与性能的影响。结果表明:随着淬火温度和回火温度的升高,气门阀座的硬度先增大后减小,耐磨性能先变好后变差。最终得到气门阀座的最优热处理工艺为1... 详细信息

通过对高速钢粉末冶金气门阀座进行热处理试验,研究了淬火温度和回火温度对气门阀座组织与性能的影响。结果表明:随着淬火温度和回火温度的升高,气门阀座的硬度先增大后减小,耐磨性能先变好后变差。最终得到气门阀座的最优热处理工艺为1220℃的淬火温度和550℃的回火温度,在此工艺下其硬度达到50.62 HRC,30 min磨损重量为0.0334 g。

关键词：高速钢粉末冶金气门阀座热处理工艺