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作者：陶程琳扬州大学

学位级别：硕士

沙门菌病是一种严重危害人类健康和养殖业发展的人畜共患病,其防治一般使用抗生素,由于抗生素的长期不合理使用,引起了细菌多重耐药性、药物残留、食品安全、环境菌群不平衡等问题。噬菌体是一类能够感染细菌、真菌、螺旋体等微生物的病... 详细信息

沙门菌病是一种严重危害人类健康和养殖业发展的人畜共患病,其防治一般使用抗生素,由于抗生素的长期不合理使用,引起了细菌多重耐药性、药物残留、食品安全、环境菌群不平衡等问题。噬菌体是一类能够感染细菌、真菌、螺旋体等微生物的病毒,其主要宿主为细菌,因此自发现便用于预防及治疗细菌感染。与传统抗生素相比,噬菌体具有分布广、易筛选、高度的宿主专一性、增殖能力强、安全性高、研发成本低等优势。随着多重耐药菌的广泛流行,噬菌体治疗细菌感染重新引起了人们的重视。本研究旨在筛选对不同血清型多重耐药沙门菌具有高效裂解性的广宿主谱噬菌体,并对其进行了生物学特性分析及全基因组测序分析,进一步克隆表达噬菌体溶菌酶分析抑菌活性,以及探究了噬菌体实验室的初步应用,为开发一种新型的抗菌剂奠定基础。1.广宿主谱沙门菌噬菌体的分离鉴定及生物学特性分析本研究通过对上海养殖场的粪水进行处理,从中分离出68株鸡白痢沙门菌噬菌体,并纯化出2株具有裂解多重耐药鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌的广宿主谱噬菌体,并对其中一株噬菌体命名为Salmonella phage SHWT1,简称SHWT1。通过进行对噬菌体SHWT1裂解谱分析、电镜分析、吸附能力测定,确定了噬菌体在短时间内吸附细菌的能力。然后进行了噬菌体最佳MOI、一步生长曲线的测定。通过测定pH稳定性、热稳定性、室温稳定性,了解噬菌体最佳储存条件。最后,通过进行噬菌体体外抑菌实验、对沙门菌生物被膜的抑制能力测定、噬菌体在实验室初步应用的探究,分析了噬菌体的安全性及体外体内的抑菌作用。结果显示,噬菌体SHWT1属于有尾噬菌体目(Caudovirales)长尾噬菌体科(Siphoviridae),对裂解沙门菌具有特异广谱性。噬菌体SHWT1的潜伏期为5 min,爆发量约为150 PFU/cell。噬菌体SHWT1在pH 3-12和温度4-65℃范围内保持稳定,其在鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌的最佳感染复数(MOI)分别为0.001、0.01、0.1和100,并对上述4种沙门菌的生长和沙门菌生物膜形成均有抑制作用。噬菌体SHWT1具有良好的安全性、良好的体内活性和抗菌治疗潜力,为噬菌体成为一种新型的抗菌剂提供参考。2.沙门菌噬菌体SHWT1的全基因组学测序及分析本研究对噬菌体SHWT1的全基因组进行测序及分析。首先用噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒提取噬菌体DNA,并在Illumina NovaSeq PE150平台上进行全基因组测序。然后用NCBI BLAST(http://***)软件对SHWT1全基因组序列进行比对分析,使用DNA Star对噬菌体DNA序列进行碱基组成比例、GC 含量等分析,使用 tRNAscan-SE(http://lowel ***//tRNAs can--SE/)软件识别基因组中tRNA,使用GeneMarkS(Version 4.17)软件对测序的基因组进行 ORF 预测。由 NCBI(National Center for Biotechnology Information)提供ORF Finder对ORF预测功能进行验证。最后利用抗生素抗性基因数据库(https://***/)和毒力因子数据库(http://***/VFs/***)检测噬菌体SHWT1基因组中是否存在抗生素抗性基因、噬菌体编码毒力基因。结果表明,噬菌体SHWT1核酸类型为双链DNA,基因组全长40629 bp,GC含量为49.83%,平均基因长度为678 bp,包含56个ORF,其中21个ORF具有注释功能,剩余为假定蛋白。这些功能的基因分别属于DNA复制/修饰模块、结构组分、组装模块、宿主裂解模块。噬菌体SHWT1中没有tRNA基因,未检测到毒素基因、毒力基因和抗生素抗性基因。重要的是,没有鉴定出假定整合酶基因,表明噬菌体SHWT1不能整合到宿主细菌基因组中,为此噬菌体SHWT1具有临床应用潜能。3.沙门菌噬菌体溶菌酶LysSHWT1的制备及抑菌活性分析为了分析溶菌酶LysSHWT1的抑菌效果,对其进行原核表达,然后使用His-tag蛋白纯化磁珠纯化蛋白,最后进行平板裂解试验、裂解谱分析及与膜通透剂EDTA联用抑菌试验。结果显示,溶菌酶重组蛋白LysSHWT1对鸡白痢沙门菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡伤寒沙门菌具有较好的裂解活性,裂菌圈直径分别为16 mm、13 mm、14 mm、13 mm,对照组无裂解圈。LysSHWT1对101株临床沙门菌株中的60种存在裂解作用,未发现能裂解除沙门菌外的其他菌株。进一步发现溶菌酶在EDTA的协同作用下展现更好的抑菌活

关键词：沙门菌噬菌体特性基因组溶菌酶

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双组分系统CpxR影响禽致病性大肠杆菌的耐药性、抗血清杀菌能力及毒力

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畜牧兽医学报 2021年第4期52卷 1053-1060页

作者：易正飞张耀东王瑶朱红陶程琳 AFAYIBO Dossêh Jean Ap tre 李涛祁晶晶田明星丁铲于圣青王少辉中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 西南民族大学生命科学与技术学院成都610041 扬州大学兽医学院扬州225009

CpxR是细菌中Cpx双组分系统(two component system, TCS)的反应调控蛋白,通过调控靶基因的转录表达,在细菌细胞膜稳定及毒力方面发挥作用。本研究旨在探究TCS CpxR对禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli, APEC)基本生... 详细信息

CpxR是细菌中Cpx双组分系统(two component system, TCS)的反应调控蛋白,通过调控靶基因的转录表达,在细菌细胞膜稳定及毒力方面发挥作用。本研究旨在探究TCS CpxR对禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli, APEC)基本生物学特性、抗血清杀菌能力及致病性的影响。利用Red同源重组系统及互补质粒构建cpxR基因缺失株、互补株,然后比较分析野生株、基因缺失株与互补株的生长曲线、运动性、生物被膜形成能力、药物敏感性、抗血清杀菌能力、动物致病性的差异。结果显示:cpxR基因缺失株与野生株、互补株的生长速度和运动性能无明显差异,且缺失cpxR基因不影响APEC的生物被膜形成能力。然而,缺失CpxR导致APEC对阿米卡星和卡那霉素耐药性降低。血清杀菌试验结果显示,CpxR有助于APEC的抗血清杀菌能力。动物感染试验结果显示,野生株、cpxR基因缺失株和互补株对雏鸭的半数致死量(LD_(50))分别为7.50×10^(5)、7.50×10^(6)、1.33×10^(6) CFU,表明CpxR缺失显著降低APEC的毒力。综上表明,TCS CpxR在APEC耐药性、抗血清杀菌能力及毒力方面发挥作用,为阐明APEC的环境适应性、生存能力及致病机制提供参考。

关键词：禽致病性大肠杆菌 CpxR 耐药性抗血清杀菌毒力

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广西地区鸡胚中沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国动物传染病学报 2022年第3期30卷 64-70页

作者：信素华陶程琳张耀东王瑶李妍易正飞田明星李涛祁晶晶丁铲高崧王少辉于圣青中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 扬州大学兽医学院扬州225009

为了解广西地区鸡胚中沙门菌的流行情况及耐药现状,本研究对广西某些鸡场送检的病死鸡胚进行沙门菌的分离鉴定。然后利用PCR方法鉴定沙门菌临床分离株的血清型及毒力因子,并检测其耐药性。结果显示,经选择性培养基和PCR鉴定分离到18株... 详细信息

为了解广西地区鸡胚中沙门菌的流行情况及耐药现状,本研究对广西某些鸡场送检的病死鸡胚进行沙门菌的分离鉴定。然后利用PCR方法鉴定沙门菌临床分离株的血清型及毒力因子,并检测其耐药性。结果显示,经选择性培养基和PCR鉴定分离到18株沙门菌,分离率为13.95%(18/129)。血清型鉴定显示:分离株均为鸡白痢沙门菌。毒力基因检测发现shdA基因的分布率只有22.22%,其余15个毒力基因的分布率均为100%。药敏试验结果显示,沙门菌分离株对卡那霉素、庆大霉素、氯霉素、美罗培南、亚胺培南均敏感;但对林可霉素、克林霉素、罗红霉素、红霉素、利福平的耐药率达100%,表明鸡白痢沙门菌的多重耐药现象严重。本研究提示鸡白痢可能是导致鸡胚死亡及孵化率低的原因,因此应严格进行鸡白痢的防控净化工作。

关键词：鸡胚鸡白痢沙门菌毒力基因耐药性

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常见耐药基因多重PCR方法的建立及用于禽致病性大肠杆菌耐药性监测

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畜牧兽医学报 2020年第12期51卷 3193-3198页

作者：张耀东朱红 AFAYIBO Dossêh Jean Ap tre 王瑶易正飞信素华陶程琳李涛祁晶晶田明星丁铲于圣青王少辉中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

本研究旨在建立β-内酰胺类、四环素类、氨基苷类、酰胺醇类、磺胺类抗菌药物耐药基因的多重PCR检测方法,用于耐药基因的快速检测。根据GenBank公布的上述5类抗菌药物的耐药基因序列,设计17对特异性引物。通过优化PCR体系和反应程序,建... 详细信息

本研究旨在建立β-内酰胺类、四环素类、氨基苷类、酰胺醇类、磺胺类抗菌药物耐药基因的多重PCR检测方法,用于耐药基因的快速检测。根据GenBank公布的上述5类抗菌药物的耐药基因序列,设计17对特异性引物。通过优化PCR体系和反应程序,建立4组耐药基因(cat+floR+tetB+tetC;dfrA 12+sul 2+sul 1+bla CTX-M+bal TEM-1;aac 3+aph 3+aadA 1+strB;tetA+cmlA+strA+sul 3)的多重PCR反应体系。然后,检测多重PCR方法的特异性和敏感性。利用建立的多重PCR方法检测42株禽致病性大肠杆菌的耐药基因,同时,检测其耐药性,比较分析耐药基因和耐药表型之间的相关性。结果显示,建立的4组多重PCR体系可有效扩增出17个耐药基因片段,测序结果表明特异性较好。敏感性结果表明,4组多重PCR体系的菌液敏感性分别为103、104、104和105 CFU。禽致病性大肠杆菌分离株的耐药基因多重PCR和单重PCR检测结果一致,其携带的耐药基因和耐药表型的符合率为92.86%。本研究建立的耐药基因多重PCR方法能简便、快速地检测常见的耐药基因,可用于耐药基因的传播、流行调查。

关键词：耐药基因多重PCR 检测

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沙门菌噬菌体溶菌酶LysSHWT1的制备及抑菌活性分析

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中国动物传染病学报 2021年第3期29卷 10-15页

作者：陶程琳姚澜王少辉张耀东王瑶朱红魏娟文 AFAYIBO Dosseh Jean Apotre 李涛祁晶晶田明星丁铲高崧于圣青扬州大学兽医学院扬州225009 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384

近年来抗生素的不合理使用导致细菌耐药性问题逐渐加剧,开发新型有效的抗菌制剂迫在眉睫。噬菌体及其溶菌酶具有特异性强、抗菌效力强、安全性高、筛选周期短、绿色安全及不易产生耐药等优势,可作为一种天然抗菌剂防控细菌病。为了分析... 详细信息

近年来抗生素的不合理使用导致细菌耐药性问题逐渐加剧,开发新型有效的抗菌制剂迫在眉睫。噬菌体及其溶菌酶具有特异性强、抗菌效力强、安全性高、筛选周期短、绿色安全及不易产生耐药等优势,可作为一种天然抗菌剂防控细菌病。为了分析广宿主谱沙门菌噬菌体SHWT1的溶菌酶抑菌活性,本文将沙门菌裂解性噬菌体SHWT1的溶菌酶lys基因克隆至表达载体pET28a(+),然后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,纯化后获得了大小19 kDa、浓度为2 mg/mL的高纯度融合蛋白LysSHWT1。平板裂解实验显示,溶菌酶重组蛋白LysSHWT1对鸡白痢沙门菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡伤寒沙门菌具有较好的裂解活性,裂菌圈直径分别为16、13、14、13 mm,对照组无裂解圈;裂菌谱结果显示,LysSHWT1对101株临床沙门菌株中的60株菌株存在裂解作用,未发现能裂解除沙门菌外的其他菌株;进一步研究发现,溶菌酶在EDTA的协同作用下可以展现更好的抑菌活性,使鸡白痢沙门菌SP01、鸡伤寒沙门菌SG02、鼠伤寒沙门菌SAT52、肠炎沙门菌SE12滴度显著下降(P<0.05)。本研究表明广宿主谱沙门菌噬菌体溶菌酶LysSHWT1可有效裂解沙门菌,在防控沙门菌感染方面具有潜在的应用价值。

关键词：沙门菌噬菌体溶菌酶抑菌活性

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鉴别大肠杆菌O_(8)/O_(9)血清型双重PCR方法的建立

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中国兽医科学 2021年第5期51卷 569-574页

作者：朱红李妍魏娟文张耀东王瑶陶程琳 AFAYIBO Dossêh Jean Apotre 李涛祁晶晶田明星丁铲于圣青王少辉中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为了建立一种能鉴定大肠杆菌O8、O9血清型的高效、快速的双重PCR方法,参考Gen Bank中大肠杆菌O8、O9血清型的O抗原合成基因簇序列筛选特异性靶标基因并设计合成2对PCR引物,通过优化反应条件,分析双重PCR方法的特异性、敏感性,通过检测... 详细信息

为了建立一种能鉴定大肠杆菌O8、O9血清型的高效、快速的双重PCR方法,参考Gen Bank中大肠杆菌O8、O9血清型的O抗原合成基因簇序列筛选特异性靶标基因并设计合成2对PCR引物,通过优化反应条件,分析双重PCR方法的特异性、敏感性,通过检测大肠杆菌临床分离株验证双重PCR的实用性。结果显示,所建立的双重PCR方法可有效鉴定O8、O9血清型大肠杆菌,对其他血清型大肠杆菌及菌株则无交叉反应,表明PCR方法的特异性好;O8和O9血清型的菌体最低检出限分别为1×10^(3)CFU/m L和1×10^(4)CFU/m L,其DNA最低检出限分别为10 pg/μL和500 pg/μL。临床分离菌株检测显示,双重PCR检测结果与传统血清凝集结果一致。结果表明,本研究建立的双重PCR方法可有效、特异、灵敏、快速鉴定大肠杆菌O8、O9血清型,为大肠杆菌O8、O9血清型检测及其流行病学调查提供了新的技术手段。

关键词：大肠杆菌 O8 O9 血清型双重PCR

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禽致病性大肠杆菌血清型、进化分群及毒力基因的分子流行病学调查

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中国兽医科学 2020年第9期50卷 1159-1166页

作者：王瑶张耀东易正飞信素华陶程琳李妍李涛祁晶晶田明星丁铲于圣青张焕容王少辉西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

为了解禽致病性大肠杆菌(APEC)的分子流行特点,从华东等地区分离鉴定210株APEC菌株,然后检测其血清型、系统进化分群及毒力基因,并分析毒力因子与血清型、系统进化分群之间的关联性。血清型检测结果显示,O78、O1、O2为流行血清型。通过... 详细信息

为了解禽致病性大肠杆菌(APEC)的分子流行特点,从华东等地区分离鉴定210株APEC菌株,然后检测其血清型、系统进化分群及毒力基因,并分析毒力因子与血清型、系统进化分群之间的关联性。血清型检测结果显示,O78、O1、O2为流行血清型。通过系统进化分群分析发现A、B1、B2及D群比例分别为21.90%、20.00%、31.90%、21.90%。毒力基因检测结果显示,fimC、mat及ibeB基因检出率为90%以上,papC、neuC、vat、ibeA检出率低于22%,且所有分离株至少含有4个毒力基因。关联分析发现,毒力基因irp2、ibeA、neuC、vat及ETT2在特定血清型中的分布较高,而papC、tsh、irp2、neuC、vat及ibeA在B2进化分群较高。结果表明,华东等地区APEC携带多种毒力基因,毒力基因分布与特定血清型及系统进化分群具有关联性,为了解当地的APEC优势流行菌株及防控提供了参考。

关键词：禽致病性大肠杆菌血清型系统进化分群毒力基因

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噬菌体疗法预防细菌性感染的研究进展及发展方向

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中国兽医科学 2020年第9期50卷 1167-1175页

作者：陶程琳王少辉张耀东易正飞信素华王瑶李妍 AFAYIBO Dossêh Jean Apotre 朱红李涛祁晶晶田明星丁铲高崧于圣青扬州大学兽医学院江苏扬州225009 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

由于抗生素的不合理使用,引起了细菌多重耐药性、药物残留、食品安全、环境菌群不平衡等问题,严重威胁人类及动物的健康。因此,寻找新型抗菌药物及治疗方案已成为当前的研究重点。噬菌体是感染细菌、真菌等微生物的病毒,自发现伊始便用... 详细信息

由于抗生素的不合理使用,引起了细菌多重耐药性、药物残留、食品安全、环境菌群不平衡等问题,严重威胁人类及动物的健康。因此,寻找新型抗菌药物及治疗方案已成为当前的研究重点。噬菌体是感染细菌、真菌等微生物的病毒,自发现伊始便用于治疗细菌感染。与传统抗生素相比,噬菌体具有分布广、易筛选、高度的宿主专一性、增殖能力强、安全性高、研发成本低等优势。随着多重耐药菌的广泛流行,噬菌体治疗细菌感染重新引起了人们的重视。本文简述了噬菌体的生物学特性、噬菌体疗法在预防细菌感染的应用及噬菌体研究发展方向,以期为噬菌体疗法预防细菌性感染提供参考。

关键词：噬菌体细菌性感染噬菌体疗法裂解酶

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缅甸对外经济关系研究（1988-2009）

缅甸对外经济关系研究（1988-2009）

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作者：陶程云南大学

学位级别：硕士

1988年对于缅甸来说是特殊的一年,当年9月18日发生政变后,军政府上台,再加上1990年缅甸大选后军政府拒绝移交权力等原因,缅甸遭到了以美国为首西方国家的制裁,几乎成为国际政治和经济舞台上“孤儿”。这种情况至今已持续20多年。本文系... 详细信息

1988年对于缅甸来说是特殊的一年,当年9月18日发生政变后,军政府上台,再加上1990年缅甸大选后军政府拒绝移交权力等原因,缅甸遭到了以美国为首西方国家的制裁,几乎成为国际政治和经济舞台上“孤儿”。这种情况至今已持续20多年。本文系统阐述了缅甸1988-2008年间的对外经济发展整体水平、主要经济合作伙伴、制约因素以及缅甸对外经济关系对缅甸政治、经济和社会产生的影响和前景等。本文将从缅甸在对外经济方面取得的成就出发,分析在政治上处于被封锁的缅甸发展外国经济关系的效果,对缅甸内政外交产生了怎样的影响。本文将主要试图回答以下几个问题:1、缅甸的对外经济关系是如何发展起来的?2、1988年后缅甸的外国经济关系在缅甸国内扮演了怎样的角色?3、缅甸的外国经济关系对缅甸产生了怎样的影响? 本文在绪论部分简要阐明了文章的学术背景、选题意义。在回顾了国内外关于缅甸对外经济关系问题研究状况的基础上,指出目前针对缅甸对外经济关系的问题所做的研究多是从单纯的政治或经济角度来分析,在分析上缺乏把缅甸对外经济关系置于政治和经济互动的框架下进行研究分析的视角,这也是本文试图有所突破的地方。第一章对缅甸发展对外经济关系的背景进行了梳理,主要从国际和国内两个层面予以展开。在国际上,1988年正值冷战进入尾声的历史阶段,世界各国开始把主要精力集中到发展经济上来,世界经济一体化和区域经济一体化的进程不断加深。而且东盟经济一体化的进程加快。其次,以美国为首的西方国家对缅甸实行了长达20多年的经济制裁,给缅甸对外经济关系造成了巨大的阻碍。对于缅甸国内来说,奈温(Ne Win)实行的“缅甸式社会主义”道路已经山穷水尽,到1988年时缅甸的国内经济已经濒临崩溃,对外经济联系很少,缅甸面临极端严峻的经济形势。但新军人政权上台后颁布了一系列以市场为导向的经济改革措施,为缅甸对外经济关系的恢复和发展奠定了基础。第二章则详细阐述了缅甸对外经济关系在1988-2009这20余年的发展状况。文章从进出口贸易、外来投资以及对外援助三个方面用具体数据详细回顾了缅甸对外经济关系的发展,从量的角度衡量了缅甸对外经济关系的总体发展状况,为后文的分析作了铺垫。第三章从国别的角度分析了缅甸的对外经济关系,主要选择缅甸发展对外经济关系中的重要合作伙伴——中国和泰国进行具体分析,并对缅甸与美国、日本、欧洲等国家和地区的经济联系进行了简要的论述,分析缅甸是如何通过同最主要合作伙伴之间的经济联系来维系其对外经济关系的。第四章对缅甸对外经济关系发展的制约因素进行专门研究。主要包括内部和外部两个方面:在缅甸内部,缅甸新军人政权缺乏管理经济的经验,而且现在缅甸经济的统治化色彩依然很浓厚,军政府有可能会在政治利益和经济利益发生冲突时优先考虑政治利益,而采取破坏对外经济发展的政策。在外部,以美国为首的西方国家的经济制裁依然是缅甸发展对外经济关系最大的障碍。第五章对缅甸对外经济关系的作用进行了评估。论文认为,缅甸对外经济关系在20年的时间里虽然得到了比较大的发展,但对缅甸国内经济的影响程度有限。另外,缅甸对外经济关系为缅甸军政府提供了必要的资源,特别是在外交上密切了缅甸同周边国家的关系,提高了缅甸的国际地位,对维护缅甸政局稳定起到了一定的作用。第六章对全文的论述和观点做了总结,回答了开文时试图回答的各个问题,对缅甸对外经济关系的发展情况、效果和作用做了归纳总结,并对缅甸对外经济关系发展前景的影响因素做了归纳总结。

关键词：缅甸对外经济关系经济制裁

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广西现行桑树品种枝条总生物碱、多糖、总黄酮含量的研究

广西现行桑树品种枝条总生物碱、多糖、总黄酮含量的研究

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作者：陶程广西大学

学位级别：硕士

广西地处亚热带湿润季风气候的南部,是我国种桑养蚕最大的省区,桑园种植面积在20万公顷以上,桑树年冬夏两次采伐,年产桑枝条高达600万吨以上,这是一宗可利用的宝贵资源。据《中国药典》记载,桑枝有祛风湿、利关节、行水之功效,可以治疗... 详细信息

广西地处亚热带湿润季风气候的南部,是我国种桑养蚕最大的省区,桑园种植面积在20万公顷以上,桑树年冬夏两次采伐,年产桑枝条高达600万吨以上,这是一宗可利用的宝贵资源。据《中国药典》记载,桑枝有祛风湿、利关节、行水之功效,可以治疗风寒湿痹、四肢拘挛、脚气浮肿之病症。现代药理学研究也表明,桑枝中含有多糖、黄酮、生物碱等物质,具有降血糖、降血压、抗癌等药理活性。有关桑树活性成分研究成为了近年来的桑树领域的研究热点。但是,关于桑树活性物质的研究仍大多针对桑叶来进行,而以桑枝为材料的研究则甚少,桑树作为蚕桑产业的物质基础,其主要是利用叶片,而桑枝条往往被作为产业废弃物。因此,本研究以广西主推桑树品种为材料,通过采用雷氏盐比色法、芴甲氧酰氯柱前衍生化反向-高效液相色谱紫外检测法、硫酸-蒽酮法、分光光度法分别测定23个桑树品种的夏伐、冬伐、不同月龄剪伐等方式下生长的枝条中总生物碱、DNJ、多糖、总黄酮的含量,以探究枝条中总生物碱、DNJ、多糖、总黄酮含量随品种、生长时间季节、采伐时期的动态变迁。并通过采用spss 23进行因子分析优选出高品质桑枝原料品种。研究结果如下:(1)夏伐桑枝的干物率和桑枝中总生物碱、DNJ、多糖、总黄酮含量的范围分别为:55.21%-69.64%、2.942-6.51 1mg/g、0.44-1.077mg/g、7.558-9.875mg/g、1.081-1.743mg/g。桑枝干物率和桑枝中总生物碱、DNJ、多糖含量最高的品种分别为:桂桑6号、桑特优2号、粤椹大10、强桑1号。桂桑6号和桑特优2号是广西主推的桑树品种,其他广西主推的桑树品种夏伐桑枝干物率和桑枝中总生物碱、DNJ、多糖含量均在较高水平。(2)冬伐桑枝的干物率和桑枝中总生物碱、DNJ、多糖、总黄酮含量的范围分别为:44.87%-65.33%、3.599-6.511mg/g、0.43-1.35mg/g、8.109-14.069mg/g、0.810-1.472mg/g。桑枝干物率和桑枝中总生物碱、DNJ、多糖含量最高的品种分别为:沙2×伦109、桑特优1号、桑特优1号、桂桑优62。桑特优1号和桂桑优62是广西主推的桑树品种,其他广西主推的桑树品种冬伐桑枝干物率和桑枝中总生物碱、DNJ、多糖、总黄酮含量均在较高水平。(3)依桑树生长时期、季节、枝条老嫩等因素,桑枝中干物率与总生物碱、DNJ、多糖的含量有如下趋势:生长3月龄及其以上的桑树枝条较1～2月龄的嫩枝要高;半年生枝条比1年生枝条高,下半年生长的枝条比上半年生长的枝条高。(4)通过对桑树各品种的枝条中总生物碱、DNJ含量的相关性分析,结果表明不论是夏伐枝条,还是冬伐桑枝,其DNJ含量与总生物碱含量有显著的正相关关系。(5)广西主推品种已有较大种植面积的桂桑优12、桂桑优62、桑特优2号、桑特优1号、桂桑5号、桂桑6号等桑树品种枝条中以上所测定的总生物碱、多糖、DNJ含量均在较高水平,是桑枝条利用难以多得的宝贵资源。

关键词：桑枝总生物碱 DNJ 多糖总黄酮干物率

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