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sPLA2X降低棕榈酸脂毒性保护结肠细胞机制研究

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sPLA2X降低棕榈酸脂毒性保护结肠细胞机制研究

作者：陶琴琴南昌大学

学位级别：硕士

饮食中脂质是诱发炎性肠病(Inflammatory bowel diseases,IBD)的重要环境因素。脂质代谢产生脂毒性产物,可刺激机体产生促炎因子,破坏肠粘膜屏障,加重IBD的病程。s PLAX(基因pla2g10)是分泌型磷脂酶一员,对磷脂酰胆碱(PC)具有最高的催... 详细信息

饮食中脂质是诱发炎性肠病(Inflammatory bowel diseases,IBD)的重要环境因素。脂质代谢产生脂毒性产物,可刺激机体产生促炎因子,破坏肠粘膜屏障,加重IBD的病程。s PLAX(基因pla2g10)是分泌型磷脂酶一员,对磷脂酰胆碱(PC)具有最高的催化活性,可水解PC产生促炎介质(如溶血磷脂LPC、花生四烯酸AA)和抗炎介质(如ω3-PUFA),在炎症、哮喘和动脉粥样硬化等疾病中起着重要作用。实验室前期初步发现高脂饮食小鼠s PLAX上调,但其在高脂诱导的结肠上皮损伤中到底有何作用以及分子机制尚不明确。目的:通过动物模型研究高脂饮食对小鼠结肠的损伤,通过细胞模型研究棕榈酸(PA)对结肠细胞NCM460的影响。探讨s PLAX对PA诱导的结肠细胞炎症和细胞凋亡的生物学作用与分子机制。通过生物信息学分析和PA诱导前后脂质代谢物变化,分析s PLAX调控结肠细胞脂质代谢的作用。方法:1.将C57BL/6小鼠分为正常饮食组(NCD)和高脂饮食组(HFD),HFD组喂食60%的高脂饲料,NCD组喂食正常小鼠饲料,构建高脂模型24周。通过q-PCR和免疫荧光检测炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α、IL-23细胞粘附分子Ifng、巨噬细胞迁移抑制因子Cd74、趋化因子Cxcl13、脂肪酸代谢相关基因(Fabp2)和分泌型PLA(pla2g10,pla2g2a)的变化。2.将PA与正常结肠上皮NCM460孵育,构建体外高脂细胞模型。用不同浓度PA或溶剂处理NCM460,通过q-PCR检测炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α及pla2g10与pla2g2a表达变化。3.用PCR法从NCM460中克隆pla2g10基因,将pla2g10插入慢病毒载体PCDH-CMV-MCS-EF1-GFP-PURO,构建PCDH-pla2g10过表达载体。导入HEK-293T进行慢病毒包装,收集病毒液感染结肠上皮细胞NCM460。用嘌呤霉素筛选阳性细胞,通过Western Blot和q-PCR检测s PLAX表达水平。4.将细胞分为空载组(PCDH)和s PLAX过表达组(PCDH),用不同浓度的PA或溶剂处理空载组和s PLAX过表达组细胞24 h。q-PCR和Western Blot检测炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的m RNA和蛋白表达水平,通过丙二醛试剂盒检测MDA的变化。5.从GEO数据库下载炎症性肠病患者和健康对照组的基因表达数据,通过Spearman分析溃疡性结肠炎发炎患者、未发炎患者及健康对照组中IL-6、IL-1β、TNF-α与pla2g10相关性。6.将PCDH和PCDH细胞铺96孔板,待细胞贴壁后,分别用0、100、200、300、400、500、600、700、800μM的PA处理细胞24 h,通过CCK8试剂检测过表达s PLAX后结肠细胞对PA损伤的抵抗。7.将PCDH和PCDH细胞铺6孔板,分别用300、400μM PA或溶剂处理两组细胞24 h,通过7ADD-PE凋亡试剂盒进行染色,流式细胞法检测s PLAX过表达对PA诱导的NCM460凋亡的影响。通过Western Blot和q-PCR检测凋亡过程中cleaved-Caspase3、Bcl-2和Bax蛋白与基因表达情况。8.从GEO数据库下载炎症性肠病患者和健康对照组的基因表达数据,按pla2g10表达水平分为高表达组(PLA2G10)和低表达组(PLA2G10),通过GSEA分析溃疡性结肠炎患者中PLA2G10和PLA2G10中IL6-JAK-STAT3通路激活情况。用400μM PA处理PCDH和PCDH细胞24 h,通过Western Blot检测s PLAX过表达对PA处理后结肠细胞IL6-JAK-STAT3通路的影响。9.用脂质提取液提取上述两类细胞的脂质代谢物,使用氮吹仪吹干,通过超高效液相色谱联用质谱(UHPLC-MS)检测长链脂肪酸FA、溶血磷脂酰肌醇LPI、溶血卵磷脂LPC、二脂酰甘油DG等脂质代谢物变化。结果:1.在小鼠高脂模型中,与正常饮食小鼠结肠相比,高脂饮食小鼠结肠中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL23、细胞粘附分子Ifng,巨噬细胞迁移抑制因子Cd74和IFN-γ、TGF-β、Cxcl13表达都显著上升,而脂肪酸结合蛋白Fabp2表达显著下降,pla2g10在高脂饮食小鼠的结肠中显著上调。2.在细胞高脂模型中,高浓度PA诱导NCM460细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的m RNA表达水平上升,PA诱导后pla2g10表达显著升高。3.成功获得了重组PCDH-pla2g10载体,基因测序结果显示pla2g10序列正确。PCDH细胞的s PLAX蛋白和m RNA水平较空载组表达显著增加,表明s PLAX过表达NCM460细胞系构建成功。4.细胞实验表明,正常培养条件下过表达s PLAX对

关键词：分泌型磷脂酶 sPLA2X 结肠炎棕榈酸脂毒性溃疡性结肠炎

血常规检验在贫血患者临床鉴别诊断中的意义研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第12期 147-149页

作者：陶琴琴浙江省湖州市吴兴区凤凰街道社区卫生服务中心检验科浙江湖州313000

探究血常规检验在贫血患者临床鉴别诊断中的应用意义。方法选择本院2021.05~2022.05期间临床收诊的贫血病人共计74名,设为研究对象并开展基本病情诊断。所有对象按贫血分类标准,将确诊缺铁性贫血症者设为常规组,共计37名;将确诊巨幼细... 详细信息

探究血常规检验在贫血患者临床鉴别诊断中的应用意义。方法选择本院2021.05~2022.05期间临床收诊的贫血病人共计74名,设为研究对象并开展基本病情诊断。所有对象按贫血分类标准,将确诊缺铁性贫血症者设为常规组,共计37名;将确诊巨幼细胞性贫血症者设为实验组,共计37名。同期选择至院接受健康体检者作为对照组,共计37名,三组均接受血常规检验,观察鉴别诊断表现。对比三组主要血液项目指数、血清维生素B12(VitB12)和铁蛋白(Ft)水平;两组临床检验准确率。结果相较常规组,实验组主要血液项目中RBC更低、剩余项目指数更高;相较对照组,常规组、实验组主要血液项目数值对比有差异,P0.05。结论贫血患者的临床鉴别诊断中血常规检验可精准分析各血常规项目指数,以此鉴别贫血表现,诊断准确具有应用意义。

关键词：缺铁性贫血巨幼细胞性贫血血常规检验鉴别诊断

慢性胃炎临床治疗中进行幽门螺杆菌检测的临床应用价值

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中国医药指南 2022年第36期20卷 91-93页

作者：陶琴琴盘锦市中心医院辽宁盘锦124000

目的分析在慢性胃炎临床治疗中开展幽门螺杆菌检测的价值,为临床后续治疗提供支持。方法此研究采取回顾性研究方式展开,随机取我院2019年2月至2020年1月内接诊的慢性胃炎患者63例设为观察组展开研究,同时选取该时段内无上消化道症状... 详细信息

目的分析在慢性胃炎临床治疗中开展幽门螺杆菌检测的价值,为临床后续治疗提供支持。方法此研究采取回顾性研究方式展开,随机取我院2019年2月至2020年1月内接诊的慢性胃炎患者63例设为观察组展开研究,同时选取该时段内无上消化道症状的健康者60例设为对照组进行对比分析。总结分析两组研究对象的一般资料后,开展胃镜检查、病理检测、Hp检测,对比分析两组受检者各项检测结果。结果观察组患者阴性例数为2例,阴性率为3.17%,阳性例数为61例,阳性率为96.83%,对照组患者阴性例数为60例,阴性率为100%,阳性例数为0,阳性率为0,差异显著(P <0.05),观察组患者误诊率为3.17%,漏诊率为1.59%,检出准确率为95.24%,对照组患者误诊率为0%,漏诊率为0,检出准确率为100%,差异显著(P <0.05)。结论已经临床研究证实,幽门螺杆菌是引发慢性胃炎的主要致病因素,但慢性胃炎的发病,并非全都是幽门螺杆菌感染而导致的;因此在实际治疗过程中,需进一步明确患者不同发病原因,后选择针对性的治疗方案,从而提高临床疗效并改善预后。

关键词：慢性胃炎上消化道症状幽门螺杆菌检测临床应用价值

有机底物对活性污泥胞外聚合物吸附水中铜、锌的影响

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有机底物对活性污泥胞外聚合物吸附水中铜、锌的影响

作者：陶琴琴东华理工大学

学位级别：硕士

随着工业的发展和人口的增加，水体重金属污染越来越严重，这对生态环境和人体健康造成了严重危害。水体重金属污染处理方法很多，同传统重金属处理方法相比，生物吸附法具有明显的优势，尤其对低浓度重金属废水的处理效果非常好。活... 详细信息

随着工业的发展和人口的增加，水体重金属污染越来越严重，这对生态环境和人体健康造成了严重危害。水体重金属污染处理方法很多，同传统重金属处理方法相比，生物吸附法具有明显的优势，尤其对低浓度重金属废水的处理效果非常好。活性污泥胞外聚合物(EPS)是微生物细胞分泌的粘性物质，主要成分是多糖、蛋白质、核酸和脂类等，EPS中存在大量的羧基、羟基、硫酸根等阴离子基团，这些基团使EPS具有吸附重金属的性能。大量研究也表明，EPS对重金属具有良好的吸附效能。EPS是阻碍剩余污泥减容减量的关键性物质，从剩余污泥中提取EPS，将其用来处理重金属污染废水，便可在剩余污泥减容减量的同时控制重金属污染，达到以废治污的目的。本文首先以污水处理厂活性污泥III为菌种，用分别含有葡萄糖和蛋白胨的人工配置污水培养得到活性污泥I和II。本课题主要从以下两个方面入手，一方面以3种污泥为研究对象，考察了3种污泥的絮凝沉降性能、污泥形态、EPS热提取法最优提取条件、EPS成分、EPS所含官能团等;另一方面，利用最佳提取条件提取一定量的EPS I、EPS II、EPS III作为吸附剂，研究它们对Cu2+和Zn2+的吸附效果，重点考察了pH值、EPS投加量、温度、金属离子初始浓度、吸附时间以及共存离子等因素对吸附效能的影响，通过3种EPS吸附Cu2+和Zn2+的动力学和热力学特征，探索3种EPS对Cu2+和Zn2+的吸附机理。实验结果表明，3种活性污泥的SV都在15%-50%之间，SVI都在80-120mL/g之间，MLSS都在2000-3000mg/L之间，污泥的絮凝沉降性能良好，其中活性污泥I的絮凝沉降性能最差，活性污泥III的絮凝沉降性能最好;热提取法(80℃，35min)提取EPS的量最多，且微生物细胞破坏程度较小，为最佳提取条件;在一个培养周期内，3种活性污泥生成多糖、蛋白质、EPS总量的速度为：活性污泥I>活性污泥III>活性污泥II;3种EPS中多糖的含量几乎占了EPS总量的50%，蛋白质的含量却非常低，并且多糖含量顺序为：EPS I> EPS II> EPS III，蛋白质含量顺序为：EPSII> EPS III> EPS I;3种EPS中多糖/蛋白质分别为：21.3、4.8、6.4，C/N分别为：8.5、5.5、6.1;3种EPS的红外谱图非常相似，都含有羧基、羟基、蛋白质肽键等多种官能团，其中蛋白质和多糖所含官能团产生的特征峰比较强。3种EPS对Cu2+和Zn的吸附效果较好，在初始金属离子浓度为20mg/L条件下，最佳pH都为6，EPS最佳投加量分别约为350mg/L、300mg/L、350mg/L，最佳吸附温度都为25℃;3种EPS对Cu和Zn的吸附都有快速吸附-慢速吸附两个过程，且Cu比Zn先达到吸附平衡;3种EPS对Cu吸附的热力学过程可以用Freundlich方程描述，对Zn吸附的热力学过程用Langmuir方程拟合效果更好。3种EPS对Zn的吸附能力都大于Cu;两种金属与3种EPS之间存在多种作用方式;Cu和Zn在3种EPS上的吸附都符合假二级动力学模型，Cu和Zn与3种EPS之间以共价键或离子交换等化学形式结合。假二级动力学中EPS I对Cu、Zn的最大吸附量分别约为52mg/g和54mg/g;EPS II对Cu、Zn的最大吸附量分别约为40mg/g和48mg/g;EPS III对Cu、Zn的最大吸附量分别约为47mg/g和49mg/g;对比3种EPS吸附Cu、Zn前后的红外谱图，发现3种EPS吸附Cu、Zn的主要官能团基本一样，参与吸附作用的主要官能团是羟基、氨基、酰胺基团、羧基和醚基等。本文表明，活性污泥EPS吸附性能良好，有进一步深入研究的必要。研究有机底物对EPS吸附重金属的影响，探索EPS吸附重金属的机理，有助于剩余污泥的减容减量和EPS合理利用，意义重大。

关键词：活性污泥胞外聚合物重金属吸附有机底物

股权结构对农村商业银行绩效的影响——以江苏省6家上市农商行为例

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股权结构对农村商业银行绩效的影响——以江苏省6家上市农商行为例

作者：陶琴琴江西师范大学

学位级别：硕士

农村商业银行作为农村金融体系中的重要组成部分,承担着支持“三农”发展的重要使命。目前A股共有6家上市农商行,全部集中在江苏地区。从全国范围来看,目前至少有26家农村商业银行在筹备上市事宜。此时,研究已上市银行的公司治理状况,... 详细信息

农村商业银行作为农村金融体系中的重要组成部分,承担着支持“三农”发展的重要使命。目前A股共有6家上市农商行,全部集中在江苏地区。从全国范围来看,目前至少有26家农村商业银行在筹备上市事宜。此时,研究已上市银行的公司治理状况,可以为刚刚上市和即将上市的商业银行提供有益的参考。基于此,本文从股权结构与农村商业银行绩效角度出发,选取江苏省6家上市农商行2010018年间的经营数据,从静态和动态两个角度分析了江苏省所有上市农商行股权结构对经营绩效的影响情况,研究了多个大股东、股权制衡度、独立董事占比、地方政府持股和管理层持股对经营绩效的影响。发现:(1)多个大股东的存在会抑制银行绩效。当其他大股东的数量越多,对绩效的负向作用越大,在一定程度上为利益协调假说提供了证据支持;(2)股权制衡度倾向于对银行绩效起抑制作用,较高的股权制衡度银行绩效较差。理论上说合适的股权制衡度既可以抑制大股东的“掏空动机”,又可以避免“过度监督”,有助于提升银行绩效。但这个数值过高或过低都不利于银行绩效;(3)银行的独立董事机制并不能对绩效产生显著的影响,监督作用不明显;(4)尽管政府可以降低信贷方面的信息不对称,但地方政府持股更多地表现出对以后绩效的抑制作用;(5)管理层持股的激励作用不明显,银行的绩效与内部管理层不存在显著的影响;最后,针对如何优化农商行股权结构简单提出了几点看法。

关键词：股权结构多个大股东股权制衡度银行绩效

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湿法冶金中胞外聚合物(EPS)的研究进展

湿法冶金 2011年第1期30卷 1-5页

作者：陶琴琴刘峙嵘东华理工大学化学生物与材料科学学院江西抚州344000

针对当前国内外关于胞外聚合物在湿法冶金中的研究状况,介绍了胞外聚合物的来源、组成、物化性质和提取方法,以及胞外聚合物在湿法冶金中的应用现状。胞外聚合物在湿法冶金过程中的作用形式主要是帮助矿物在水溶液中溶解、改变矿物表面... 详细信息

针对当前国内外关于胞外聚合物在湿法冶金中的研究状况,介绍了胞外聚合物的来源、组成、物化性质和提取方法,以及胞外聚合物在湿法冶金中的应用现状。胞外聚合物在湿法冶金过程中的作用形式主要是帮助矿物在水溶液中溶解、改变矿物表面化学性质和吸附冶金废水中的金属离子。

关键词：湿法冶金胞外聚合物(EPS) 冶金废水应用

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单室微生物燃料电池产电与脱氮除磷的研究

环境科学学报 2016年第6期36卷 1955-1961页

作者：罗净净周少奇许明熠陶琴琴华南理工大学环境与能源学院广州510006 华南理工大学亚热带建筑科学国家重点实验室广州510641

实验针对空气阴极型单室微生物燃料电池(Microbial Fuel Cell,MFC),研究其产电性能及对实验室模拟废水中有机物、氮和磷元素的去除效果.结果表明,在外电阻为1000Ω的情况下,该电池最大输出电压可达371 m V,最大输出功率密度可达301.6 m ... 详细信息

实验针对空气阴极型单室微生物燃料电池(Microbial Fuel Cell,MFC),研究其产电性能及对实验室模拟废水中有机物、氮和磷元素的去除效果.结果表明,在外电阻为1000Ω的情况下,该电池最大输出电压可达371 m V,最大输出功率密度可达301.6 m W·m^(-2),最大电流密度可达2.4 A·m^(-2),内阻为200Ω.当入水氨氮浓度为4 mmol·L^(-1)时,该电池的产电效果最好,对污染物的去除效果也较好.研究还发现,电池最佳运行周期为72 h,阳极室出水最佳曝气时间为6 h,阳极室出水COD、TN和TP的降解率分别为93.3%、19.7%和44.8%.将阳极液曝气处理后,相对于阳极室入水其TN和TP的总去除率分别可达79.6%和95.2%.另外,通过扫描电镜观察到MFC的阳极液中大多为球形菌,阴极电极表面有针状的结晶形成,经能谱测试为鸟粪石结晶.

关键词：氮源除磷产电模拟废水

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延续性护理在伤口造口护理中的应用探讨

当代护士（上旬刊） 2019年第4期26卷 60-62页

作者：陶琴琴安徽省宣城市中心医院伤口造口门诊宣城242000

目的对延续性护理在伤口造口中的应用效果进行探讨。方法选取本院2016年4月～2017年7月收治的82例伤口造口患者为研究对象。随机分成观察组和对照组,每组各41例。对照组采用常规护理,观察组采用延续性护理。比较两组的护理效果。结果观... 详细信息

目的对延续性护理在伤口造口中的应用效果进行探讨。方法选取本院2016年4月～2017年7月收治的82例伤口造口患者为研究对象。随机分成观察组和对照组,每组各41例。对照组采用常规护理,观察组采用延续性护理。比较两组的护理效果。结果观察组的各项生活质量评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的并发症发生率(4.88%)显著低于对照组(21.95%)(χ~2=5.145,P=0.023)。结论临床对伤口造口患者应用延续性护理措施,可有效降低不良反应发生率,提高生活质量,延续性护理与常规护理方法相比,有推广价值。

关键词：延续性护理伤口造口生活质量

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肝硬化顽固性腹水86例治疗效果观察

中国医药指南 2018年第8期16卷 58-59页

作者：陶琴琴辽宁省盘锦市中心医院辽宁盘锦124000

目的观察在肝硬化顽固性腹水治疗中采用奥曲肽进行治疗的临床治疗效果。方法本研究选择我院收治的86例肝硬化顽固性腹水患者进行观察跟分析,选取时段为2014年5月至2016年5月,采用抽签分组方式进行平均分组,其中采用常规治疗方法的43例... 详细信息

目的观察在肝硬化顽固性腹水治疗中采用奥曲肽进行治疗的临床治疗效果。方法本研究选择我院收治的86例肝硬化顽固性腹水患者进行观察跟分析,选取时段为2014年5月至2016年5月,采用抽签分组方式进行平均分组,其中采用常规治疗方法的43例患者为对照组,而采用常规治疗与奥曲肽治疗的43例患者为实验组,将2组患者的临床治疗效果进行比较和分析。结果治疗后相较于对照组,实验组患者的治疗总有效率明显较高,24h尿量明显较多,腹围明显较小,各项比较差异均P<0.05,形成了统计学意义。结论在肝硬化顽固性腹水治疗中采用奥曲肽进行治疗临床效果确切,在临床上值得应用和推广。

关键词：肝硬化顽固性腹水治疗效果奥曲肽