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灯盏花COI1基因的克隆及表达分析

分子植物育种 2022年

作者：付鸿博向成刚陶宏征孟衡玲李河魏波张薇红河学院生物科学与农学学院中央民族大学民族医药教育部重点实验室

冠菌素不敏感蛋白(coronatine insensitive， COI)是茉莉酸的信号受体，茉莉酸在植物生长发育、抗逆性及次生代谢物合成中发挥着重要作用。为了研究COI1基因在灯盏花(Erigeron breviscapus)中的表达特性，本研究以灯盏花叶片为材料，利...

冠菌素不敏感蛋白(coronatine insensitive， COI)是茉莉酸的信号受体，茉莉酸在植物生长发育、抗逆性及次生代谢物合成中发挥着重要作用。为了研究COI1基因在灯盏花(Erigeron breviscapus)中的表达特性，本研究以灯盏花叶片为材料，利用PCR技术克隆得到EbCOI1基因，并对其表达模式进行分析。结果表明，EbCOI1基因全长1 707 bp，编码568个氨基酸。结构域分析发现，EbCOI1蛋白具有典型的F-box结构域和多个LRR结构域。系统进化分析发现，EbCOI1的氨基酸序列与小飞蓬(Erigeron canadensis) COI蛋白的相似度最高为94.19%。利用转录组数据和qPCR方法对EbCOI1基因的表达模式进行分析，发现不同授粉方式对EbCOI1基因的表达量具有影响；EbCOI1基因在花发育过程中的表达量表现出明显的差异，推测其参与花的发育过程；EbCOI1基因在不同组织中表达量差异显著，在叶中的表达量最高。本研究对研究COI基因功能具有一定的参考意义。

关键词：

番茄斑萎病毒侵染辣椒苗期的差异基因表达分析

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分子植物育种 2022年第4期20卷 1077-1086页

作者：贾志强高雪陶宏征刘雅婷李永忠云南农业大学植物保护学院昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 红河学院生命科学与技术学院蒙自661199 云南农业大学烟草学院昆明650201

为了研究番茄斑萎病毒与辣椒的互作机制,探究病毒侵染后mRNA表达谱,本研究选用‘萧新19’为试验材料,利用Illumina RNA-seq测序平台进行转录组测序,将所得高质量的序列(Clean reads)与CM334_Annuum.v.2.0参考基因组进行比对。结果显示,... 详细信息

为了研究番茄斑萎病毒与辣椒的互作机制,探究病毒侵染后mRNA表达谱,本研究选用‘萧新19’为试验材料,利用Illumina RNA-seq测序平台进行转录组测序,将所得高质量的序列(Clean reads)与CM334_Annuum.v.2.0参考基因组进行比对。结果显示,有74.09%~76.91%数据比对到唯一的基因组位点。采用FPKM法计算基因的表达量,并在此基础上以FDR≤0.05和|log_(2)FC|≥1为条件筛选出2组样本间差异表达基因。对差异基因进行Gene ontology(GO)和KEGG富集分析,通过排列前5的GO分析发现,主要分子功能有催化活性、结合等过程,差异表达基因显著富集到次生代谢物的生物合成、苯丙烷类生物合成、亚麻酸代谢等过程。从苯丙烷类合成途径和转录因子中挑选基因用RT-qPCR来验证转录组测序的真实性。通过研究发现,辣椒与番茄斑萎病毒互作是一个复杂的过程,它由多个交叉通路调节,包括苯丙烷类生物合成、类黄酮生物合成、新陈代谢过程等,这为后期深入研究辣椒与番茄斑萎病毒互作机理奠定基础。

关键词：辣椒番茄斑萎病毒转录组互作

辣椒CaWRKY30转录因子的克隆、亚细胞定位及番茄斑萎病毒侵染下的表达分析

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华北农学报 2022年第3期37卷 186-192页

作者：贾志强许云玉高雪陶宏征陈增敏刘雅婷李永忠云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201 红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661199 云南农业大学烟草学院云南昆明650201

为研究辣椒CaWRKY30转录因子与番茄斑萎病毒互作的响应机制,以辣椒湘研11为试验材料,通过RNA提取、RT-PCR、切胶纯化及克隆等试验获得CaWRKY30编码序列。生物信息学分析结果表明,CaWRKY30全长1122 bp,编码373个氨基酸,该基因编码的蛋白... 详细信息

为研究辣椒CaWRKY30转录因子与番茄斑萎病毒互作的响应机制,以辣椒湘研11为试验材料,通过RNA提取、RT-PCR、切胶纯化及克隆等试验获得CaWRKY30编码序列。生物信息学分析结果表明,CaWRKY30全长1122 bp,编码373个氨基酸,该基因编码的蛋白含有1个WRKY保守结构域和1个C_(2)H_(2)结构域,属于典型的Ⅱ(e)亚家族成员。系统发育分析表明,与马铃薯StWRKY22氨基酸序列的亲缘关系最近。本氏烟叶片亚细胞定位试验发现,CaWRKY30在本氏烟幼苗中定位于细胞核和细胞膜,并且导致细胞膜加厚。实时荧光定量PCR分析结果表明,观察番茄斑萎病毒机械摩擦接种辣椒后的病毒积累量,发现病毒积累量在接种1~14 d逐渐上升,在接种后14 d处于最大值,接种14 d后病毒积累量逐渐下降;同时,CaWRKY30受番茄斑萎病毒接种后诱导,在接种病毒1~14 d CaWRKY30表达量上调,14 d达到峰值,14 d以后表达量逐渐下降。综上,获得了CaWKRY30转录因子基因序列,该转录因子定位于细胞核和细胞膜,并初步阐述了辣椒CaWRKY30转录因子在番茄斑萎病毒胁迫下的表达趋势。

关键词：辣椒 CaWRKY30基因克隆生物信息学番茄斑萎病毒表达分析

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高温胁迫对荞麦生理特征的影响

安徽农业科学 2008年第31期36卷 13519-13520页

作者：田学军陶宏征红河学院生命科学与技术学院云南蒙自661100

[目的]研究高温胁迫对荞麦生长发育的影响。[方法]以距茎尖第3节叶片为材料,用40℃和44℃水浴模拟高温胁迫2 h,22℃处理为对照。测定离体叶片电导率、MDA含量、抗坏血酸(AsA)含量以及幼苗下胚轴长度。[结果]荞麦离体叶片经40℃和44℃高... 详细信息

[目的]研究高温胁迫对荞麦生长发育的影响。[方法]以距茎尖第3节叶片为材料,用40℃和44℃水浴模拟高温胁迫2 h,22℃处理为对照。测定离体叶片电导率、MDA含量、抗坏血酸(AsA)含量以及幼苗下胚轴长度。[结果]荞麦离体叶片经40℃和44℃高温胁迫2 h后,电导率、MDA含量、抗坏血酸AsA含量均高于对照,且胁迫温度越高,差别越大。荞麦离体叶片高温胁迫2 h转移到22℃培养室内培养48 h,对照、40℃组和44℃组幼苗的下胚轴长度达到极显著差异,长度分别为(2.2±0.7)(、0.9±0.4)和(0.6±0.2)cm。[结论]高温胁迫对荞麦生理的不利影响主要表现为:细胞膜完整性受损,更多的膜脂被过氧化,根系的生长受到严重抑制。

关键词：荞麦高温胁迫电导率丙二醛抗坏血酸下胚轴

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植物对低温的光合响应

中国生物化学与分子生物学报 2012年第6期28卷 501-508页

作者：陶宏征赵昶灵李唯奇云南农业大学农学与生物技术学院昆明650201 中国科学院昆明植物研究所昆明650204 云南红河学院生物系云南蒙自661100

低温是影响植物生长和发育的主要环境因子之一.低温下,植物的许多生理生化过程受到影响,而其中光合作用是对低温最敏感的过程.光合作用是地球上最重要的生理生化过程,所以研究光合作用在低温下的响应机制具有重要意义.本文系统地总结了... 详细信息

低温是影响植物生长和发育的主要环境因子之一.低温下,植物的许多生理生化过程受到影响,而其中光合作用是对低温最敏感的过程.光合作用是地球上最重要的生理生化过程,所以研究光合作用在低温下的响应机制具有重要意义.本文系统地总结了当前国内外最新研究进展,综述了低温下植物的光合响应,主要内容包括影响低温下光合响应的因素、低温下光合响应的关键问题——能量平衡的调节,以及植物的低温光合响应信号通路,并展望了低温光合响应研究的新方向.

关键词：低温光合响应能量平衡信号通路

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豌豆根对热胁迫的生理响应

安徽农业科学 2009年第16期37卷 7412-7413页

作者：田学军罗晶陶宏征王惠媛红河学院生物系云南蒙自661100

[目的]探讨豌豆根部对热胁迫的生理响应,进而分析高温对豌豆生长发育影响的生理学基础。[方法]通过测定热驯（37℃）、热驯预处理再热胁迫（37~44℃）和直接热胁迫（44℃）的豌豆幼苗根的一些生理指标变化,探讨热胁迫对根生长、细胞膜... 详细信息

[目的]探讨豌豆根部对热胁迫的生理响应,进而分析高温对豌豆生长发育影响的生理学基础。[方法]通过测定热驯（37℃）、热驯预处理再热胁迫（37~44℃）和直接热胁迫（44℃）的豌豆幼苗根的一些生理指标变化,探讨热胁迫对根生长、细胞膜损伤、膜脂过氧化物和抗氧化剂的影响。[结果]热胁迫（44℃）可抑制幼苗根生长,导致相对含水量（RWC）、细胞膜热稳定性（MTS）和抗坏血酸（AsA）含量下降,致使膜脂过氧化产物丙二醛（MDA）含量升高经37℃热驯预处理再44℃胁迫处理的幼苗的根长、MTS和AsA含量明显高于直接热胁迫处理的。[结论]热驯预处理能适当提高豌豆根对后继热胁迫的耐性。高温胁迫对豌豆根部造成的不利影响,将直接影响地上部分的生长发育,进而影响豌豆产量。

关键词：豌豆根热胁迫热驯

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不同试剂对灯盏花种子萌芽的影响

安徽农业科学 2008年第21期36卷 9118-9119页

作者：林丽飞刘春国陶宏征云南红河学院生物系云南蒙自661100 云南省建水县临安镇农技推广中心云南建水654300

[目的]采用培养皿发芽法,研究不同试剂对灯盏花种子萌芽的影响。[方法]用GA3、CuSO4、NaOH分别处理灯盏花种子15min,并以清水处理为对照。[结果]各种试剂对灯盏花种子萌芽均有明显的促进作用,其中赤霉素对灯盏花萌芽的促进效果最为显著... 详细信息

[目的]采用培养皿发芽法,研究不同试剂对灯盏花种子萌芽的影响。[方法]用GA3、CuSO4、NaOH分别处理灯盏花种子15min,并以清水处理为对照。[结果]各种试剂对灯盏花种子萌芽均有明显的促进作用,其中赤霉素对灯盏花萌芽的促进效果最为显著,发芽势、发芽率均有明显提高。[结论]在该试验中,1g/LGA3处理对促进灯盏花种子萌芽的效果最佳。

关键词：灯盏花种子发芽率

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布尼亚病毒非结构蛋白NSs与RNA沉默

中国生物化学与分子生物学报 2017年第7期33卷 656-661页

作者：陶宏征杨宝菊刘雅婷云南农业大学植物保护学院昆明650201 云南红河学院生命科学与技术学院生物系云南蒙自661199 云南农业大学农学与生物技术学院生物技术与生理生化系昆明650201

布尼亚病毒科含5个属,350多种病毒,寄主范围包括植物、动物和人类,主要通过节肢动物传播(仅有汉坦病毒属通过啮齿动物传播),其中大部分病毒危害严重,影响农业生产,威胁人类和动物健康,造成重大经济损失。NSs蛋白是布尼亚病毒S RNA编码... 详细信息

布尼亚病毒科含5个属,350多种病毒,寄主范围包括植物、动物和人类,主要通过节肢动物传播(仅有汉坦病毒属通过啮齿动物传播),其中大部分病毒危害严重,影响农业生产,威胁人类和动物健康,造成重大经济损失。NSs蛋白是布尼亚病毒S RNA编码的非结构蛋白质,可以抑制RNA沉默,在侵染介体和寄主的过程中起时发挥重要作用。在植物寄主中,NSs蛋白通过与病毒dsRNA结合、抑制dsRNA次生扩增、长距离传播等机制抑制RNA沉默;在动物、人类寄主以及传播介体中,多种证据表明,NSs蛋白也能抑制RNA沉默。RNA沉默是植物和节肢动物中主要的抗病毒机制之一,NSs蛋白抑制RNA沉默对于病毒成功侵染寄主或传播介体非常重要。本文就近年来NSs蛋白在抑制RNA沉默方面的研究做一综述。

关键词：布尼亚病毒科 RNA沉默 NSs蛋白

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稀土元素镧对水稻种子萌发及幼苗生长的影响

安徽农业科学 2009年第34期37卷 16788-16789,16813页

作者：罗冰陶宏征林丽飞周倩兰马艳云南红河学院云南蒙自661100

[目的]明确水稻种子萌发及幼苗生长期间硝酸镧溶液的最佳浓度和临界浓度。[方法]研究稀土元素镧对水稻萌发和幼苗生长的影响。[结果]20.0mg/L硝酸镧处理效果最佳。当浓度超过30.0mg/L时,种子萌发和幼苗生长受到抑制。[结论]稀土农用应... 详细信息

[目的]明确水稻种子萌发及幼苗生长期间硝酸镧溶液的最佳浓度和临界浓度。[方法]研究稀土元素镧对水稻萌发和幼苗生长的影响。[结果]20.0mg/L硝酸镧处理效果最佳。当浓度超过30.0mg/L时,种子萌发和幼苗生长受到抑制。[结论]稀土农用应该慎重,以确保农田生态系统的可持续利用。

关键词：水稻硝酸镧种子萌发幼苗生长