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过劳诱导小鼠血管内皮屏障功能障碍

南方医科大学学报 2024年第9期44卷 1814-1820页

作者：廖阅马雪邓三春陈苏衡李玉兰兰州大学第一临床医学院甘肃兰州730000 兰州大学第一医院麻醉手术科甘肃兰州730000

目的研究过劳对小鼠血管内皮屏障功能的影响。方法将30只KM小鼠随机分为3组(n=10):对照(CON)组、过劳2周(W2)组、过劳4周(W4)组。W2组和W4组采用水中站立+束缚实验分别连续造模2周和4周,观察小鼠一般情况。造模结束后,每组选取4只小鼠... 详细信息

目的研究过劳对小鼠血管内皮屏障功能的影响。方法将30只KM小鼠随机分为3组(n=10):对照(CON)组、过劳2周(W2)组、过劳4周(W4)组。W2组和W4组采用水中站立+束缚实验分别连续造模2周和4周,观察小鼠一般情况。造模结束后,每组选取4只小鼠腹腔注射Evans蓝染料,检测血管通透性。另6只小鼠采取ELISA法检测血清IL-1β含量,获取动脉组织行切片观察,RT-qPCR法检测内皮细胞间紧密连接中occludin、claudin-5、ZO-1、JAM-A和黏附连接中VE-cadherin的mRNA表达水平;免疫荧光法检测内皮细胞间连接复合物中claudin-5、ZO-1、VE-cadherin和血管内皮糖萼中Syndecan-1的蛋白表达情况。结果与CON组相比,W2和W4组小鼠体质量增长缓慢,毛发脱落,活动减少。与CON组相比,W4组血管通透性明显增加。与CON组相比,W2和W4组血清IL-1β含量增加(P<0.05)。与CON组相比,W2组内皮细胞肿胀、脱落,内膜粗糙不规则,W4组出现内膜断裂现象。与CON组相比,W2组动脉组织中occludin、claudin-5、ZO-1、JAM-A的mRNA表达量增加,W4表达均降低(P<0.05);W2和W4组VE-cadherin的mRNA表达量下降(P<0.05)。与CON组相比,W4组claudin-5、ZO-1、VEcadherin和Syndecan-1蛋白表达减少(P<0.05)。结论过劳随时间的延长可对动脉内皮细胞间连接复合物以及内皮糖萼造成损伤,破坏其屏障功能,导致血管通透性增加。

关键词：过劳内皮屏障功能内皮细胞间连接复合物血管内皮糖萼

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过度劳累对大鼠动脉血管壁细胞外基质的影响

中国医学科学院学报 2022年第2期44卷 262-269页

作者：陈苏衡甘露庄苗张小晓郭鸿黄蓉蓉李玉兰兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探讨过度劳累(OW)对大鼠动脉血管壁细胞外基质的影响。方法清洁级SD大鼠18只,采用随机数字分组法分为3组(n=6):对照组无特殊处理;OW组每日强迫游泳2次,连续15 d;睡眠限制(SD)+OW组每日强迫游泳2次后放入水上平台限制睡眠,连续15 d。... 详细信息

目的探讨过度劳累(OW)对大鼠动脉血管壁细胞外基质的影响。方法清洁级SD大鼠18只,采用随机数字分组法分为3组(n=6):对照组无特殊处理;OW组每日强迫游泳2次,连续15 d;睡眠限制(SD)+OW组每日强迫游泳2次后放入水上平台限制睡眠,连续15 d。第16天深度麻醉大鼠,心脏取血后分离大鼠腹主动脉与颈总动脉,取部分腹主动脉进行胶原纤维Masson染色,颈总动脉行弹性纤维EVG染色,用Image J图像软件定量分析胶原纤维和弹性纤维含量,用免疫组织化学法进行Ⅰ型胶原(Col-1)蛋白定量,透射电镜检查血管基质超微结构;其余腹主动脉采用实时荧光定量PCR分析方法测定基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)及Col-1的mRNA表达。结果胶原纤维定量分析显示,与对照组相比,OW组与SD+OW组胶原纤维含量差异均无统计学意义(P均>0.05);弹性纤维定量分析显示,与对照组相比,OW组与SD+OW组弹性纤维含量均显著下降(P均0.05);透射电镜显示,与对照组相比,OW组血管壁出现轻微纤维断裂,SD+OW组血管壁纤维出现虫蛀样或海绵状纤维碎裂;实时荧光定量PCR分析结果显示,与对照组相比,OW组和SD+OW组MMP-1与MMP-2的mRNA表达均显著增加(P均0.05);3组MMP-9、TIMP-1的mRNA表达差异均无统计学意义(P均>0.05);OW组与SD+OW组Col-1的mRNA表达均显著低于对照组(P均0.05)。结论OW可降低动脉血管细胞外基质中Col-1与弹性纤维含量,破坏血管壁的弹性板层,增加MMP-1与MMP-2的表达,造成动脉血管损伤。

关键词：过度劳累动脉血管壁血管重塑细胞外基质

不同程度的过劳对大鼠动脉血管平滑肌细胞的影响

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陆军军医大学学报 2022年第5期44卷 461-468页

作者：甘露陈苏衡庄苗张小晓郭鸿黄蓉蓉李玉兰兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的研究不同程度的过劳对大鼠动脉血管中层平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的影响。方法将清洁级SD大鼠分为对照组(CON)、过劳组(OW)及过劳+睡眠不足组(OW+SD)。OW组采用力竭游泳法建立过劳模型;OW+SD组在力竭游泳的基... 详细信息

目的研究不同程度的过劳对大鼠动脉血管中层平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的影响。方法将清洁级SD大鼠分为对照组(CON)、过劳组(OW)及过劳+睡眠不足组(OW+SD)。OW组采用力竭游泳法建立过劳模型;OW+SD组在力竭游泳的基础上加水中平台法限制睡眠时间。15 d后取出大鼠腹主动脉,行HE染色进行病理学观察并测量中膜厚度,透射电镜观察细胞内超微结构,用TUNEL法检测各组大鼠腹主动脉中层VSMC的凋亡率,用RT-qPCR法检测VSMC中Caspsae-3、Bax、Bcl-2和Ki67的mRNA表达水平,用免疫组化法检测血管中层凋亡蛋白Caspase-3的含量。结果(1)HE染色示:与CON组相比,OW组和OW+SD组大鼠血管壁VSMC排列紊乱,有"空泡"样细胞形成,血管中膜厚度较CON组明显增加(P0.05);(5)免疫组化结果显示:与CON组相比,OW组和OW+SD组血管中膜Caspase-3的蛋白含量明显增加(P<0.05)。结论过劳可引起大鼠动脉血管中层VSMC凋亡,诱发动脉血管壁中层VSMC异常增殖和修复,可形成动脉病变的早期病理基础;并且在实验时间内,睡眠未能改善过劳对血管平滑肌细胞的损伤。

关键词：过劳动脉血管壁血管平滑肌细胞凋亡增殖

沉默信息调节因子1在肠道疾病中的作用及药物干预研究现状

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中国临床药理学杂志 2022年第15期38卷 1831-1835页

作者：庄苗张小晓甘露陈苏衡李玉兰兰州大学第一临床医学院甘肃兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科甘肃兰州730000

沉默信息调节因子1(SIRT1)作为一种去乙酰化酶,可以脱去多种靶蛋白赖氨酸残基的乙酰基。近年来,越来越多的研究证实SIRT1在肠道疾病的发病机制中占有重要的地位。因此,SIRT1可能成为治疗肠道疾病的潜在靶点。本文综述了SIRT1对氧化应激... 详细信息

沉默信息调节因子1(SIRT1)作为一种去乙酰化酶,可以脱去多种靶蛋白赖氨酸残基的乙酰基。近年来,越来越多的研究证实SIRT1在肠道疾病的发病机制中占有重要的地位。因此,SIRT1可能成为治疗肠道疾病的潜在靶点。本文综述了SIRT1对氧化应激,炎症与细胞凋亡等生物效应的调控作用;归纳总结了SIRT1在脓毒症肠损伤,肠缺血再灌注损伤,放射性肠损伤,肠道炎症性疾病等疾病中的变化和作用,以及靶向SIRT1治疗肠道疾病的药物研究进展,旨在探讨肠道疾病新的防治策略。

关键词：沉默信息调节因子1 肠道疾病组蛋白去乙酰化酶

全凭静脉麻醉对心脏封堵术患者昼夜节律的影响

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中国医学科学院学报 2024年第4期46卷 539-545页

作者：顾芸菲鲍振星于恺华王玲程殿威陈苏衡李玉兰兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院心血管外科兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的评估全凭静脉麻醉对非体外循环心脏封堵手术患者昼夜节律的影响。方法择期静脉麻醉下心脏封堵术的患者30例,采用自身配对t检验比较麻醉前后生物钟基因时钟节律调节分子(CLOCK)、脑肌类芳烃受体核转位样蛋白1(BMAL1)、隐花色素生物钟... 详细信息

目的评估全凭静脉麻醉对非体外循环心脏封堵手术患者昼夜节律的影响。方法择期静脉麻醉下心脏封堵术的患者30例,采用自身配对t检验比较麻醉前后生物钟基因时钟节律调节分子(CLOCK)、脑肌类芳烃受体核转位样蛋白1(BMAL1)、隐花色素生物钟(CRY)1、周期昼夜节律生物钟(PER)2 mRNA的表达水平,慕尼黑时间类型问卷(MCTQ)和匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)的差异;多元逐步回归方法筛选术后1周睡眠时型和PSQI总分的影响因素。结果与术前比较,术后CLOCK mRNA表达水平明显增加[1.38±1.23比1.90±1.47;MD(95%CI):0.52(0.20~0.84),t=3.327,P=0.002];CRY1 mRNA表达水平明显下降[1.56±1.50比1.13±0.98;MD(95%CI):-0.43(-0.81~-0.05),t=-2.319,P=0.028];PER2 mRNA表达水平明显下降[0.82±0.63比0.50±0.31;MD(95%CI):-0.33(-0.53~-0.12),t=-3.202,P=0.003]。术后1周睡眠时型明显提前[3∶03±0∶59比2∶42±0∶37,MD(95%CI):-21(-40~-1),t=-2.172,P=0.038],睡眠潜伏期明显缩短[(67±64)min比(37±21)min;MD(95%CI):-30.33(-55.28~-5.39),t=-2.487,P=0.019],睡眠时长明显延长[(436±83)min比(499±83)min;MD(95%CI):62.80(26.93~98.67),t=3.581,P=0.001],睡眠效率明显增加[(87.59±10.35)%比(92.98±4.27)%;MD(95%CI):5.39(1.21~9.58),t=2.636,P=0.013],睡眠质量评分明显下降[1.13±0.78比0.80±0.71,MD(95%CI):-0.33(-0.62~-0.05),t=-2.408,P=0.023]。术后1周PSQI总分明显下降[6.60±3.17比4.03±2.58;MD(95%CI):-2.57(-3.87~-1.27),t=-4.039,P<0.001]。体重指数(BMI)(B=-227.460,SE=95.475,t=-2.382,P=0.025)、麻醉时长(B=-47.079,SE=18.506,t=-2.544,P=0.017)与PER2 mRNA表达量(B=2815.804,SE=1080.183,t=2.607,P=0.015)共同影响术后1周睡眠时型,麻醉用药量(B=0.067,SE=0.028,t=2.385,P=0.024)独立影响术后1周PSQI总分。结论全凭静脉麻醉可通过提前睡眠时型发挥改善睡眠习惯的作用。BMI、麻醉时长、PER2 mRNA表达量共同影响术后1周睡眠时型。麻醉用药量是术后1周PSQI总分的独立影响因素。

关键词：静脉麻醉昼夜节律睡眠生物钟心脏

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不同时间高氧对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞能量代谢的影响

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中国医学科学院学报 2023年第1期45卷 9-15页

作者：黄蓉蓉瞿珊珊郭鸿陈苏衡杨传奇张俊妹李玉兰兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探讨不同时间高浓度氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体能量代谢的影响。方法将大鼠RLE-6TN细胞分为对照组(21%O_(2)常规培养4 h)、高氧1、2、3、4 h组(95%O_(2)分别培养1、2、3、4 h)。采用荧光素酶化学发光法检测各组细胞的三磷酸腺苷(A... 详细信息

目的探讨不同时间高浓度氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体能量代谢的影响。方法将大鼠RLE-6TN细胞分为对照组(21%O_(2)常规培养4 h)、高氧1、2、3、4 h组(95%O_(2)分别培养1、2、3、4 h)。采用荧光素酶化学发光法检测各组细胞的三磷酸腺苷(ATP)含量,采用微量法检测线粒体呼吸链复合体V活性,荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位,实时荧光定量PCR法检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的核心亚基NADH脱氢酶亚基1(ND1)、细胞色素b(Cytb)、细胞色素C氧化酶亚基I(COXI)、ATP酶6(ATPase6)mRNA的表达水平。结果与对照组比较,高氧1、2、3、4 h组细胞线粒体呼吸链复合体核心亚基ND1(q=24.800,P<0.001;q=13.650,P<0.001;q=9.869,P<0.001;q=20.700,P<0.001)、COXI(q=16.750,P<0.001;q=10.120,P<0.001;q=8.476,P<0.001;q=14.060,P<0.001)及ATPase6 mRNA(q=22.770,P<0.001;q=15.540,P<0.001;q=12.870,P<0.001;q=18.160,P<0.001)表达水平均显著降低;且高氧1、4 h组细胞ATPase活性受到抑制(q=9.435,P<0.001;q=11.230,P<0.001),ATP含量降低(q=5.615,P=0.007;q=5.029,P=0.005);而高氧2、3 h组细胞ATPase活性(q=0.156,P=0.914;q=3.197,P=0.116)及ATP含量(q=0.859,P=0.557;q=1.273,P=0.652)差异无统计学意义。各组细胞线粒体膜电位之间差异无统计学意义(F=0.303,P=0.869)。结论短时间高氧会抑制呼吸链复合体核心亚基表达并降低ATPase活性,导致肺泡Ⅱ型上皮细胞能量代谢障碍。

关键词：高氧线粒体肺泡Ⅱ型上皮细胞能量代谢

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过度劳累对小鼠脾脏造血功能的影响

陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 427-433页

作者：邓三春陈苏衡于恺华郭鸿廖阅鲍振星李玉兰兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的探讨过度劳累(过劳)对小鼠脾脏造血功能的影响。方法C57BL/6J小鼠18只,按随机数字表法分为3组(n=6):对照(C)组、过劳15 d(W1)组、过劳30 d(W2)组。W1、W2组每日强迫水中站立8 h+束缚3 h,分别持续15、30 d,C组无特殊处理。观察测量... 详细信息

目的探讨过度劳累(过劳)对小鼠脾脏造血功能的影响。方法C57BL/6J小鼠18只,按随机数字表法分为3组(n=6):对照(C)组、过劳15 d(W1)组、过劳30 d(W2)组。W1、W2组每日强迫水中站立8 h+束缚3 h,分别持续15、30 d,C组无特殊处理。观察测量小鼠一般情况、进食量和体质量,造模结束后取血、处死小鼠,分离脾脏和心脏,测量脾脏指数;检测血常规;脾脏行HE染色;采用RT-qPCR法检测小鼠脾脏趋化因子CXC配体12(C-X-C motif chemokin ligand 12,CXCL12)、干细胞因子(stem cell factor,SCF)和心脏间隙连接蛋白45(connexin 45,Cx45)mRNA表达水平;采用ELISA检测脾脏CXCL12、SCF蛋白表达水平;免疫组化法行心脏Cx45蛋白定量。结果①一般情况:与C组相比,W1组、W2组小鼠毛发粗糙,活跃程度先增加后下降,扎堆、精神状态差;小鼠进食量:W1、W2组显著高于同时间C组;C组小鼠体质量随喂养时间增加而增加,W1、W2组体质量无明显增长;W2组小鼠脾脏指数显著下降(P<0.05);②血常规:与C组相比,W2组WBC、RBC数目、HGB浓度显著升高(P<0.05);W1组、W2组PLT数目显著升高(P<0.05);③脾脏HE染色:与C组相比,W2组小鼠脾脏红髓与白髓分界欠清,红髓区域增大;④RT-qPCR检测结果显示:W2组心脏组织Cx45 mRNA表达显著高于C组(P<0.05);脾脏组织SCF mRNA表达显著高于C组和W1组(P<0.05);⑤免疫组化检测结果显示:W1组和W2组小鼠心肌Cx45蛋白含量显著高于C组(P<0.05);⑥ELISA检测结果显示:W2组脾脏组织SCF蛋白表达显著高于C组和W1组(P<0.05),W1组较C组差异无统计学意义。结论过劳可破坏心肌细胞间的紧密连接,增强脾脏造血功能,使全血细胞数目过度增加,形成血液高凝状态,这可能是过劳死相关心血管疾病的诱发因素之一。

关键词：过度劳累髓外造血脾脏心肌梗死